目的 探讨牛磺酸对典型挥发性有机化合物(VOCs)苯、甲苯、二甲苯与甲醛混合吸入暴露所致幼鼠肺功能损伤的拮抗作用.方法 将24只4周龄SPF级雌性SD大鼠随机分为4组,分别为空白对照组、模型(5 mg/m3苯+10 mg/m3甲苯+10 mg/m3二甲苯+5 mg/m3甲醛)组、低剂量牛磺酸干预(5 g/L牛磺酸+造模)组和高剂量牛磺酸干预(10 g/L牛磺酸+造模)组,每组6只.模型组与低、高剂量牛磺酸干预组采用口鼻式吸入方式进行造模,4 h/d,每周5 d,空白对照组吸入洁净空气;采用自由饮水方式给予牛磺酸,空白对照组与模型组正常饮水,持续28 d.测定大鼠的肺功能指标[包括呼吸频率(f)、潮气量(TV)、每分钟通气量(MV)、气道阻力(Penh)、呼吸暂停(PAU)、吸气流量峰值(PIF)、呼气流量峰值(PEF)、吸气时间(Ti)、呼气时间(Te)、50％通气量时的呼气流速(EF50)、弛缓时间(Tr)和呼吸抑制程度(Rinx)],血清炎性因子(IL-2、IL-6、IL-1β、TNF-α、NF-κB)和氧化应激指标(SOD、CAT、GSH、MDA、8-OHDG)水平,并进行肺组织病理学检查.结果 与空白对照组和高剂量牛磺酸干预组比较,模型组和低剂量牛磺酸干预组大鼠肺功能指标TV、MV、PIF、PEF和EF50均降低,差异有统计学意义(P＜0.05);且随着牛磺酸干预剂量的升高,大鼠肺功能指标TV、MV、PIF、PEF和EF50均呈上升趋势.各组f、Penh、PAU、Tr、Ti、Te、Rinx间比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).与空白对照组比较,模型组和低剂量牛磺酸干预组大鼠血清IL-2浓度升高,模型组和各剂量牛磺酸干预组大鼠血清IL-1β、NF-κB浓度也升高,差异均有统计学意义(P＜0.05);模型组和各剂量牛磺酸干预组大鼠血清IL-6、TNF-α浓度均无明显变化.与模型组比较,高剂量牛磺酸干预组大鼠血清IL-2浓度降低,各剂量牛磺酸干预组大鼠血清IL-1β浓度也降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).且随着牛磺酸干预剂量的升高,大鼠血清IL-2、IL-1β、NF-KB浓度均呈下降趋势.与空白对照组比较,模型组大鼠和各剂量牛磺酸干预组大鼠血清GSH水平均下降,而血清MDA水平均升高,模型组大鼠和低剂量牛磺酸干预组大鼠血清8-OHDG水平也均升高,差异均有统计学意义(P＜0.05);而模型组大鼠和各剂量牛磺酸干预组大鼠血清SOD、CAT水平均无明显改变.与模型组比较,各剂量牛磺酸干预组大鼠血清GSH均上升,而血清MDA浓度均下降,高剂量牛磺酸干预组大鼠血清8-OHDG水平也下降,差异均有统计学意义(P＜0.05).且随着牛磺酸干预剂量的升高,大鼠血清8-OHDG水平呈下降趋势,而GSH水平呈上升趋势.模型组大鼠的肺组织有明显的病理学改变,主要表现为肺泡间隔增厚和增生,并伴有炎细胞浸润,局部可见玻璃化和血管周围水肿,支气管上皮坏死、脱落.牛磺酸干预组大鼠肺泡形态接近正常,部分肺泡间隔增生较轻.结论 典型VOCs与甲醛混合吸入暴露对大鼠肺通气量、肺容积、呼吸肌力和呼吸抑制程度具有不良影响,高剂量牛磺酸明显的改善了肺功能,阻止了肺损伤进展,可能是由于有效减轻了氧化应激和炎症反应的程度.

目的:探讨产前补充牛磺酸对宫内生长受限(IUGR)幼鼠感觉运动能力及海马区突触素表达水平的影响。方法:采用妊娠期全程饥饿法建立IUGR鼠模型。孕鼠随机分为正常对照组、IUGR组、IUGR+牛磺酸组。2周龄幼鼠行悬吊实验和平衡木实验，测试其感觉运动能力，2周测试结束后采用免疫组织化学法和Western blot法检测海马区突触素表达，并将幼鼠感觉运动能力与海马区突触素表达量行相关性分析。结果:28 d IUGR组幼鼠悬吊实验时间、平衡木实验分数均较正常对照组下降[(14.62±3.46) s比(25.38±5.92) s， P<0.001；(9.08±1.38)分比(12.08±1.16)分， P<0.001]；IUGR+牛磺酸组悬吊实验时间[(22.77±5.16) s]、平衡木实验分数[(11.08±1.38)分]均高于IUGR组(均 P<0.05)，但与正常对照组比较差异无统计学意义( P>0.05)。IUGR组海马区突触素平均吸光度值、蛋白表达均小于正常对照组[(53.96±2.37)%比(61.68±3.07)%， P<0.001；1.82±0.23比2.23±0.17， P<0.001)]；IUGR+牛磺酸组的平均吸光值[(60.27±2.59)%]、蛋白表达(2.07±0.17)均较IUGR组升高(均 P<0.05)，但与正常对照组比较差异无统计学意义( P>0.05)。海马区突触素表达与悬吊实验、平衡木实验均呈正相关(均 P<0.05)。 结论:产前补充牛磺酸可通过促进IUGR幼鼠海马区突触素表达，提高幼鼠感觉运动能力。

目的:探索萝卜硫素治疗孤独症谱系障碍（autism spectrum disorder，ASD）的分子机制以及与疗效相关的代谢组学标志物并构建疗效预测模型。方法:纳入2016年8月至2019年5月就诊于中南大学湘雅二医院和广州市惠爱医院的ASD患儿40例。采用随机数字表法将患儿分为萝卜硫素治疗组（ n=26）和安慰剂组（ n=14）。采用OSU孤独症评定量表-DSM-Ⅳ（OSU Autism Rating Scale-DSM-Ⅳ，OARS-4）评估ASD患儿在基线、治疗第4、8和12周的临床症状变化，利用广义线性混合模型比较OARS-4得分在组别和时间上的差异。采集ASD患儿治疗前后的血浆样本，利用超高效液相色谱-高分辨质谱法进行非靶向代谢组学的检测，使用方差分析-成分分析筛选差异代谢物，并进行代谢通路分析。通过Spearman相关分析分析与萝卜硫素治疗疗效显著相关的差异代谢物，最后使用Fisher判别分析筛选疗效预测指标。 结果:经12周治疗后，萝卜硫素组临床症状改善显著优于安慰剂组（ F=14.11， P<0.001）。2组间共201种代谢物存在差异，主要富集于甘油磷脂代谢和初级胆汁酸生物合成通路。Spearman相关分析显示，牛磺酸、磷脂酰丝氨酸和溶血磷脂酰丝氨酸与ASD患儿症状变化呈正相关（ r=0.643、0.401、0.414， P<0.05或0.001），而溶血磷脂酰乙醇胺、鞘磷脂类和甘油三酯类代谢物与症状变化呈负相关（ r=-0.481~-0.392，均 P<0.05），其中鞘磷脂（d35∶1）和牛磺酸进入了Fisher判别分析模型，总疗效预测的正确率为84.6%（22/26）。 结论:萝卜硫素改善ASD相关临床症状的分子机制可能与细胞膜磷脂代谢有关，鞘磷脂（d35∶1）和牛磺酸可能成为预测萝卜硫素治疗ASD疗效的指标。

目的:探讨长链非编码RNA（lncRNA）牛磺酸上调基因1（TUG1）通过调控自噬对宫颈癌细胞放射敏感性的影响及作用机制。方法:构建放射抵抗的宫颈癌细胞株HeLa/IR和SiHa/IR。用细胞克隆形成实验评估HeLa/IR和SiHa/IR细胞的放射敏感性；实时反转录PCR（RT-qPCR）检测各组细胞中lncRNA TUG1的表达；蛋白质印迹法（Western blot）检测各组细胞中自噬蛋白Beclin1、微管相关蛋白轻链3（LC3）Ⅱ/LC3Ⅰ、p62的表达。将NC-siRNA、TUG1-siRNA、TUG1-siRNA+雷帕霉素（自噬激活剂）转染至HeLa/IR和SiHa/IR细胞，分别命名为NC-siRNA组、TUG1-siRNA组、TUG1-siRNA+雷帕霉素组。用RT-qPCR检测lncRNA TUG1的转染效率；Western blot检测沉默lncRNA TUG1对自噬蛋白表达的影响；流式细胞术分别检测沉默lncRNA TUG1对HeLa/IR和SiHa/IR细胞增殖能力和凋亡的影响。采用 t检验分析两组之间的差异，单因素方差分析进行多组间的比较。 结果:与HeLa、SiHa细胞比较，HeLa/IR、SiHa/IR细胞的存活分数显著升高，细胞中lncRNA TUG1的表达均显著升高，自噬蛋白Beclin1和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达均明显升高，p62蛋白表达明显降低，差异均有统计学意义（ P<0.05）。与NC-siRNA组比较，TUG1-siRNA组HeLa/IR、SiHa/IR细胞中lncRNA TUG1的表达、细胞活力明显降低，细胞凋亡率明显升高，Beclin1和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达明显降低，p62蛋白表达明显升高，差异均有统计学意义（ P<0.05）。与TUG1-siRNA组比较，TUG1-siRNA+雷帕霉素组HeLa/IR细胞中Beclin1和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达均明显升高，p62蛋白表达明显降低，细胞活力明显降低，细胞凋亡率明显升高，差异均有统计学意义（ P<0.05）。 结论:沉默lncRNA TUG1可通过调节自噬增强宫颈癌细胞的放射敏感性。

目的:探讨高氧环境对氧诱导视网膜病变(OIR)模型小鼠肾脏代谢物的影响，了解病理性视网膜血管新生和肾损伤之间的潜在机制。方法:采用随机数字表法将16只健康SPF级C57/B6J新生小鼠随机分为OIR组与正常对照组，每组8只。小鼠自出生后标准饲养至第7天(P7)，OIR组小鼠和母鼠置于(75±2)%的高氧箱中饲养至P12，然后正常饲养；正常对照组一直在正常环境下饲养。各组小鼠在饲养P17时采用二氧化碳安乐死，取视网膜组织铺片并行血管异凝集素(IB4)染色，观察视网膜血管形态、中央无灌注区及病理性新生血管情况；另取小鼠肾组织进行液相色谱－质谱分析，取其对应小鼠的全血进行抗凝处理，通过离心沉淀，获得不含细胞成分的血浆，对血浆进行靶向代谢组学分析。使用代谢组学数据处理软件Progenesis QI v2.3对质谱信息进行解析，用无监督的主成分分析及正交偏最小二乘法分析(OPLS-DA)来区分各组间代谢轮廓的总体差异，比较2个组间代谢物的倍数变化。以变量权重值>1且 P<0.05为条件筛选出差异代谢物。基于KEGG数据库对差异代谢物进行代谢通路富集分析。 结果:视网膜铺片IB4染色结果显示，P17时正常对照组小鼠视网膜血管分布均匀；OIR组小鼠视网膜周边血管迂曲、紊乱，中央可见大面积无灌注区域形成，在视网膜无灌注区和血管区交界处形成大量新生血管簇，呈强荧光染色。OIR组小鼠视网膜无灌注区相对面积为(25.16±3.50)%，明显大于正常对照组的(0.63±0.30)%，差异有统计学意义( t＝12.07， P<0.001)。OPLS-DA模型参数R2X cum、解释率R2Y cum、和预测率Q2 cum分别为0.578、0.978和0.857，表明OPLS-DA模型具有较好的预测能力。共筛选鉴定到26个主要的差异代谢物，其中上调表达17个，下调表达9个，包括甘油磷脂类化合物[PC 20∶4(5Z，8Z，11Z，14Z)/0∶0、PC 22∶6(4Z，7Z，10Z，13Z，16Z，19Z)/0∶0、PC 14∶1(9Z)/20∶2(11Z，14Z)、PE P-18∶0/20∶4(6E，8Z，11Z，14Z)(5OH[S])]、氨基酸类代谢物(精氨酸、鸟氨酸、哌可酸和羟基赖氨酸)、嘌呤类(鸟嘌呤、次黄嘌呤、羟嘌醇)和脂肪酸类(15-棕榈酸甲酯、2，6，8，12-Tetramethyl-2，4-tridecadien-1-ol)等。差异代谢物主要富集于ABC转运蛋白(L-精氨酸、牛磺酸、肌醇、腺苷、N-乙酰基-D-氨基葡萄糖、L-谷氨酰胺)、氨酰-tRNA生物合成(L-异亮氨酸、L-脯氨酸、L-精氨酸、L-组氨酸、L-谷氨酰胺)、精氨酸生物合成(L-精氨酸、L-鸟氨酸、L-谷氨酰胺)等代谢通路。血浆的靶向代谢组学结果显示，差异的氨基酸类代谢产物主要富集于氨酰-tRNA生物合成、精氨酸生物合成代谢以及ABC转运蛋白等代谢通路。 结论:OIR小鼠的ABC转运蛋白、氨酰-tRNA生物合成、精氨酸生物合成代谢通路可能参与了肾损伤及早产儿视网膜病变新生血管形成的病理变化过程。

Background::As one of the early discovered long non-coding RNAs (lncRNA), taurine upregulation gene 1 ( TUG1) has been widely expressed in a variety of tumors. Moreover, it promotes cell proliferation, differentiation, apoptosis, and migration. However, our understanding of its importance in the pathogenesis of cataracts remains limited. This study aimed to explore the mechanism by which lncRNA TUG1 mediates lens epithelial cell apoptosis in age-related cataracts (ARC) by regulating the microRNAs (miR-29b)/second mitochondria-derived activator of caspases axis, and to identify more non-surgical strategies for cataract treatment. Methods::The messenger RNA expression levels of TUG1, miR-29b, and Smac were detected using quantitative real-time polymerase chain reaction in vivo and in vitro. The expression of the Smac protein was analyzed by Western blotting and immunofluorescence. Flow cytometry and cell counting kit-8 assays were used to detect the cell apoptosis and proliferation rates, respectively. The targeted regulatory relationship between lncRNA TUG1, miR-29b, and Smac was verified by viral vector construction, co-transfection, nuclear and cytoplasmic separation, luciferase reporter assays, and RNA immunoprecipitation. Results::TUG1 and Smac were expressed at high levels in ARC and HLE-B3 cells treated with 200 μmol/L H 2O 2, whereas miR-29b expression was decreased. In vitro cell experiments confirmed that down-regulation of TUG1 could inhibit the apoptosis of lens epithelial cells. Mechanistically, Smac expression was negatively regulated by miR-29b. TUG1 competitively inhibited miR-29b expression and caused greater release of Smac. In addition, miR-29b partially reversed the effects of TUG1 on human lens epithelial cell line cells. Conclusions::lncRNA TUG1 increases Smac expression and promotes apoptosis of lens epithelial cells in ARC by competitively inhibiting miR-29b. This mechanism is the cytological basis for ARC formation. Based on these results, the lncRNA TUG1/miR29b/Smac axis may be a new molecular pathway that regulates ARC development.

目的：:检测血管活性肠肽受体2（ Vipr2）敲除小鼠多巴胺（DA）等神经递质含量和视网膜电生理，明确 Vipr2敲除对视网膜功能的影响。 方法：:实验研究。利用RT-PCR检测血管活性肠肽（ Vip）、 Vipr2在4周龄雄性C57BL/6J小鼠眼球组织中的表达水平。通过CRISPR-Cas9基因编辑技术构建 Vipr2敲除（ Vipr2-KO）小鼠，然后在4周龄时检测 Vipr2-KO和 Vipr2野生型（ Vipr2-WT）小鼠视网膜中DA等神经递质含量及视网膜电生理功能。 Vipr2-KO小鼠与 Vipr2-WT小鼠DA等神经递质含量比较采用独立样本 t检验，而2种小鼠视网膜电生理数据比较采用双因素重复测量方差分析。 结果：:Vip和 Vipr2 mRNA在小鼠视网膜、脉络膜+视网膜色素细胞、角膜和巩膜中均有表达；在虹膜和晶状体中 Vipr2呈低表达，未检测到 Vip表达。与 Vipr2-WT小鼠相比， Vipr2-KO小鼠表现为近视（ t=2.51， P=0.017），视网膜DA、3, 4-二羟基苯乙酸（DOPAC）、高香草酸（HVA）含量均明显升高（ t=3.42， P=0.001； t=2.15， P=0.037； t=3.27， P=0.002），DOPAC/DA比值无变化；而玻璃体液中DA、DOPAC、DOPAC/DA、HVA、去甲肾上腺素含量差异均无统计学意义。视网膜和玻璃体液中天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、牛磺酸和γ氨基丁酸含量在 Vipr2-KO小鼠与 Vipr2-WT小鼠之间差异均无统计学意义。在暗适应不同光刺激强度下（-3.699、-2.201、-0.699、0.301、0.799 log cd·s/m 2）， Vipr2-KO小鼠相比 Vipr2-WT小鼠，b波振幅明显增加（ F=8.65， P=0.015）。 结论：:Vipr2敲除可引起4周龄小鼠屈光向近视发展，影响视网膜中DA、DOPAC、HVA合成代谢，并引起视网膜电生理功能异常。提示 Vipr2敲除可能通过影响视网膜功能参与近视形成，但具体作用机制有待进一步研究。

目的:分析正常背景及桥本甲状腺炎(Hashimoto′s thyroiditis，HT)背景下甲状腺乳头状癌(papillary thyroid cancer, PTC)代谢机制的异同，探索HT与PTC的关系。方法:本研究纳入样本匹配自天津医科大学总医院2018年1月至2019年1月期间实行甲状腺切除术，病理结果证实为伴有HT背景下PTC组织及其癌旁组织样本31例(HT组)，正常背景下PTC组织及癌旁组织样本30例(NC组)。应用超高效液相色谱混合四级杆飞行时间质谱(ultra-high performance liquid chromatography combined with mixed four-stage poles time-of-flight mass spectrometry, UPLC-Q-TOF-MS)技术对样本进行数据采集，比较2组间代谢产物的异同，筛选不同背景下PTC的代谢机制异同，通过Metabo-Analyst 5.0进行代谢通路分析，探索相关代谢通路。结果:HT组和NC组筛选出7种相同的差异代谢物，包括精氨酸、谷氨酸、半胱氨酸、柠檬酸、苹果酸、尿嘧啶和牛磺酸，结合这7种生物标志物的受试者工作特征(receiver operating characteristic, ROC)曲线分析对PTC具有良好的鉴别性(HT组及NC组ROC曲线下面积值分别为0.867和0.973)；2组共同的代谢通路为牛磺酸和次牛磺酸代谢，精氨酸生物合成，丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢，精氨酸和脯氨酸代谢，以及谷氨酰胺和谷氨酸代谢。HT组特异的通路为氨酰基tRNA生物合成，甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢。结论:正常背景或HT背景在甲状腺癌中的代谢谱中有重要的异同。HT背景下PTC特异的通路为氨酰tRNA的生物合成及甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸的代谢。

目的:探讨口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma，OSCC）的代谢紊乱特征，并发现和鉴定OSCC的生物标志物，为其早期诊断提供新思路。方法:本研究共纳入2019年8月至2020年1月就诊于郑州大学第一附属医院口腔颌面外科的76例OSCC患者和体检科的70名健康受试者，按照随机数表法按2∶1的比例将所有受试者分为测试组和验证组，测试组共96例受试者，其中OSCC患者51例，健康受试者45名；验证组共50例受试者，其中OSCC患者25例，健康受试者25名。收集所有受试者的血液样本及临床资料，基于超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱技术建立血清样本非靶向代谢组学分析方法，进一步结合主成分分析、偏正交最小二乘法判别分析和 t检验分析发现并鉴定测试组中OSCC患者和健康受试者之间的差异代谢物，并对得到的差异代谢物进行代谢通路分析。二元Logistic回归分析和受试者工作特征曲线分析用以进一步筛选和确定OSCC的生物标志物，构建OSCC诊断模型，用验证组检验诊断模型的诊断效能。 结果:对比分析测试组中OSCC患者和健康受试者的血清样本后得到21种内源性差异代谢物，代谢通路分析提示OSCC患者存在脂质代谢和氨基酸代谢紊乱（ P<0.05）。本研究构建了由溶血磷脂酰胆碱（lysophosphatidylcholine，LysoPC）（16∶0/0∶0）、LysoPC［18∶1（9Z）/0∶0］、牛磺酸和D-谷氨酸组成的诊断模型（曲线下面积为0.998，95% CI为0.994~0.999， P<0.05）。 结论:OSCC患者体内发生了明显的脂质和氨基酸代谢紊乱，代谢组学手段是建立OSCC诊断模型的有效方法。

目的:观察甲状腺乳头状癌(PTC)细胞中长链非编码RNA(lncRNA)牛磺酸上调基因(TUG1)靶向作用于微小RNA(microRNA，miR)-145/锌指E-盒结合同源异形盒-1 (ZEB1)对细胞侵袭能力的影响。方法:实验标本选自2018年4月至2019年12月间河北医科大学第二医院甲状腺乳腺外科收集的甲状腺乳头状癌及癌旁标本共30例，采用实时荧光定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction，PCR)的方法观察乳头状甲状腺癌及其癌旁组织中lncRNA TUG1及miR-145的表达水平；将lncRNA TUG1 shRNA和miR-145 mimics分别转染到甲状腺乳头状癌TPC-1细胞中，利用Transwell细胞侵袭实验观察lncRNA TUG1和miR-145对甲状腺癌细胞侵袭能力的影响。应用生物信息学及双荧光素酶报告基因分析lncRNA TUG1和miR-145的关系及miR-145的靶基因。同时，利用蛋白质印迹法(Western blot)实验检测lncRNA TUG1和miR-145对靶蛋白表达水平的影响。两组间统计学差异通过双尾 t检验进行分析。 结果:实时荧光定量PCR实验结果显示，lncRNA TUG1在甲状腺乳头状癌组织中的表达水平(4.43±0.07)高于癌旁组织(1.13±0.06)，差异有统计学意义( t＝3.124， P<0.05)，miR-145的表达水平(0.39±0.08)低于癌旁组织(1.08±0.04)，差异有统计学意义( t＝2.937， P<0.05)；甲状腺乳头状癌TPC-1细胞中转染lncRNA TUG1 shRNA组及miR-145 mimics组侵袭细胞数[(292.4±48.2)、(234.2±42.4)个]低于各自对照组侵袭细胞数[(452.9±50.8)、(439.4±39.8)个]，差异有统计学意义( t＝3.205， P<0.05； t＝3.186， P<0.05)；生物信息学及双荧光素酶报告基因分析结果显示，lncRNA TUG1可以与miR-145互补结合，ZEB1是miR-145的靶基因；lncRNA TUG1 shRNA组细胞ZEB1蛋白表达水平(0.33±0.12)低于lncRNA对照组细胞中ZEB1蛋白表达水平(1.17±0.12)，差异有统计学意义( t＝3.320， P<0.05)，miR-145 mimics转染组细胞蛋白表达水平(0.46±0.11)低于miRNA对照组细胞中ZEB1蛋白表达水平(1.05±0.12)，差异有统计学意义( t＝3.450， P<0.05)。 结论:lncRNA TUG1能够靶向作用于miR-145/ZEB1调控甲状腺癌细胞的侵袭能力。