目的:探讨高氧环境对氧诱导视网膜病变(OIR)模型小鼠肾脏代谢物的影响，了解病理性视网膜血管新生和肾损伤之间的潜在机制。方法:采用随机数字表法将16只健康SPF级C57/B6J新生小鼠随机分为OIR组与正常对照组，每组8只。小鼠自出生后标准饲养至第7天(P7)，OIR组小鼠和母鼠置于(75±2)%的高氧箱中饲养至P12，然后正常饲养；正常对照组一直在正常环境下饲养。各组小鼠在饲养P17时采用二氧化碳安乐死，取视网膜组织铺片并行血管异凝集素(IB4)染色，观察视网膜血管形态、中央无灌注区及病理性新生血管情况；另取小鼠肾组织进行液相色谱－质谱分析，取其对应小鼠的全血进行抗凝处理，通过离心沉淀，获得不含细胞成分的血浆，对血浆进行靶向代谢组学分析。使用代谢组学数据处理软件Progenesis QI v2.3对质谱信息进行解析，用无监督的主成分分析及正交偏最小二乘法分析(OPLS-DA)来区分各组间代谢轮廓的总体差异，比较2个组间代谢物的倍数变化。以变量权重值>1且 P<0.05为条件筛选出差异代谢物。基于KEGG数据库对差异代谢物进行代谢通路富集分析。 结果:视网膜铺片IB4染色结果显示，P17时正常对照组小鼠视网膜血管分布均匀；OIR组小鼠视网膜周边血管迂曲、紊乱，中央可见大面积无灌注区域形成，在视网膜无灌注区和血管区交界处形成大量新生血管簇，呈强荧光染色。OIR组小鼠视网膜无灌注区相对面积为(25.16±3.50)%，明显大于正常对照组的(0.63±0.30)%，差异有统计学意义( t＝12.07， P<0.001)。OPLS-DA模型参数R2X cum、解释率R2Y cum、和预测率Q2 cum分别为0.578、0.978和0.857，表明OPLS-DA模型具有较好的预测能力。共筛选鉴定到26个主要的差异代谢物，其中上调表达17个，下调表达9个，包括甘油磷脂类化合物[PC 20∶4(5Z，8Z，11Z，14Z)/0∶0、PC 22∶6(4Z，7Z，10Z，13Z，16Z，19Z)/0∶0、PC 14∶1(9Z)/20∶2(11Z，14Z)、PE P-18∶0/20∶4(6E，8Z，11Z，14Z)(5OH[S])]、氨基酸类代谢物(精氨酸、鸟氨酸、哌可酸和羟基赖氨酸)、嘌呤类(鸟嘌呤、次黄嘌呤、羟嘌醇)和脂肪酸类(15-棕榈酸甲酯、2，6，8，12-Tetramethyl-2，4-tridecadien-1-ol)等。差异代谢物主要富集于ABC转运蛋白(L-精氨酸、牛磺酸、肌醇、腺苷、N-乙酰基-D-氨基葡萄糖、L-谷氨酰胺)、氨酰-tRNA生物合成(L-异亮氨酸、L-脯氨酸、L-精氨酸、L-组氨酸、L-谷氨酰胺)、精氨酸生物合成(L-精氨酸、L-鸟氨酸、L-谷氨酰胺)等代谢通路。血浆的靶向代谢组学结果显示，差异的氨基酸类代谢产物主要富集于氨酰-tRNA生物合成、精氨酸生物合成代谢以及ABC转运蛋白等代谢通路。 结论:OIR小鼠的ABC转运蛋白、氨酰-tRNA生物合成、精氨酸生物合成代谢通路可能参与了肾损伤及早产儿视网膜病变新生血管形成的病理变化过程。

目的:探讨急性创伤性颅脑损伤(TBI)后突触形成相关蛋白突触关联蛋白(Snap)25、神经突触素(Synapsin)1和线粒体功能异常相关蛋白单胺氧化酶B(Maob)、NADH脱氢酶(辅酶Q)Fe-S蛋白(Ndufs)2在大鼠海马组织中的表达及其意义。方法:采用大鼠可控性皮质打击伤(CCI)建立中度TBI模型，CCI后48 h(CCI组， n＝13)为急性期观察点；假手术组( n＝13)与CCI组处理步骤一致，仅不打击皮质。采用超高效液相色谱和同位素标记相对与绝对定量(iTRAQ)蛋白质质谱分析CCI组( n＝5)与假手术组( n＝5)海马组织之间的差异蛋白。采用生物信息学方法分析差异蛋白的细胞组分、生物进程和分子功能，并进行经典通路富集分析及疾病功能富集分析。采用透射电子显微镜观察两组海马组织神经元核和线粒体的超微结构变化。采用蛋白质免疫印迹法(WB)检测Snap25、Synapsin1、Maob以及Ndufs2蛋白的表达。 结果:蛋白质质谱数据结果显示，与假手术组相比，CCI组上调的差异蛋白共55种(差异倍数≥1.50)，下调的差异蛋白共110种(差异倍数≤0.65)。生物信息学分析结果显示，富集的经典通路包括突触形成信号通路[－ log10( P值)＝7.29]和线粒体功能障碍信号通路[－ log10( P值)＝4.06]等；突触形成信号通路中富集了Snap25和Synapsin1等蛋白；线粒体功能障碍信号通路中富集了Maob和Ndufs2等蛋白。透射电子显微镜观察发现，CCI组出现神经元核固缩、线粒体嵴断裂。WB检测结果显示，与假手术组( n＝5)比较，CCI组( n＝5)Snap25(分别为0.594±0.025、1.000±0.141， t＝4.92)、Synapsin1(分别为0.597±0.077、1.000±0.100， t＝5.56)、Maob(分别为0.528±0.042、1.000±0.160， t＝4.94)以及Ndufs2(分别为0.549±0.057、1.000±0.131， t＝5.45)蛋白的相对表达量均下降，差异均具有统计学意义(均 P<0.01)。 结论:突触形成相关蛋白Snap25、Synapsin1和线粒体功能异常相关蛋白Maob、Ndufs2在急性TBI大鼠海马组织中的表达下降，可能参与TBI的发病机制。

目的:分析脊柱结核(STB)患者血清代谢特征，筛选潜在诊断生物标志物。方法:收集2020年1月至2022年1月于宁夏医科大学总医院骨科确诊的25例STB患者作为实验组，25例健康体检者作为对照组。应用超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱技术检测两组血清中的代谢物，结合两独立样本 t检验等单变量统计分析方法和主成分分析、偏最小二乘判别分析等多元统计分析筛选STB患者血清中主要的差异代谢物，并进行受试者工作特征曲线分析评估其诊断效能。 结果:共检测到4 755种代谢物，实验组血清中差异表达的代谢物共有570种，其中343种上调，227种下调。生物信息分析结果显示，差异代谢物主要富集在不饱和脂肪酸的生物合成、卟啉代谢、组氨酸代谢、β-丙氨酸代谢、泛酸和辅酶A的生物合成等通路。磷脂酰胆碱(O-13：0/O-1：0)、溶血磷脂酰乙醇胺[(18∶1(11Z)/0∶0)]、Palmitoleoyl-ethanolamine在实验组的含量均低于对照组(493.170比123.463， t＝－6.390， P<0.01；239.196比14.708， t＝－11.019， P<0.01；83.096比12.273， t＝－4.030， P<0.01)，差异有统计学意义；在诊断STB时，曲线下面积分别为0.997、0.995、0.981。 结论:实验组和对照组代谢差异有统计学意义，磷脂酰胆碱(O-13：0/O-1：0)、溶血磷脂酰乙醇胺[(18∶1(11Z)/0∶0)]、Palmitoleoyl-ethanolamine对STB具有良好的诊断效能。

目的:建立一种测定兔眼组织中加替沙星浓度的方法，并比较加替沙星眼用凝胶兔眼单次和多次点眼后在眼组织及血浆中的药代动力学特征。方法:取94只健康新西兰兔。任意选取10只新西兰兔不给予任何药物用于空白组织获取，将剩余84只按照随机数字表法随机分成单次给药组36只和多次给药组48只，雌雄各半，均取左眼为实验眼。单次给药组左眼给予1滴加替沙星眼用凝胶，分别于点眼后0.5、1、3、5、7、10 h收集泪液后进行心脏取血并处死，分别取房水、结膜、角膜、巩膜、虹膜－睫状体、晶状体、玻璃体、视网膜和脉络膜；多次给药组左眼每次给予1滴加替沙星眼用凝胶，每天3次，分别于连续给药第4和第6天首次给药后0.5 h，第7天首次给药后0.5、1、3、5、7、10 h进行心脏取血和眼组织收集。采用甲醇沉淀蛋白法预处理各样本，采用高效液相色谱串联质谱法测定并计算实验兔血浆及眼组织中加替沙星的达峰浓度(C max)、达峰时间(T max)、曲线下面积(AUC)等药代动力学参数，流动相采用甲醇-0.1%乙酸水溶液(体积比＝70∶30)，采用正离子多反应检测模式，以环丙沙星为内标物，并参照《中国药典》(2020年版)9012生物样品定量分析方法验证指导原则对方法的选择性、标准曲线和定量下限、准确度和精密度、提取回收率和基质效应、稳定性进行验证。结合加替沙星对眼部常见感染菌的最小抑菌浓度(MIC 90)，计算各组织和血浆C max/MIC 90和AUC/MIC 90值。 结果:加替沙星在各眼组织和血浆中线性关系良好；角膜组织中的日间准确度为－1.5%～6.0%，日间精密度≤15%；角膜组织中的提取回收率为92.0%～94.8%，经内标归一化计算得到的低、中、高浓度的基质效应精密度均不大于3.3%，单次给药后加替沙星在眼前节和后节组织均有较高的药物浓度分布，AUC 0－t从高到低分别为泪液、角膜、结膜、虹膜－睫状体、巩膜、房水、脉络膜、视网膜、晶状体和玻璃体，C max分别为94.90 μg/g、7.34 μg/g、3.65 μg/g、1.81 μg/g、1.75 μg/g、1.31 μg/ml、0.86 μg/g、0.53 μg/g、0.13 μg/g、0.07 μg/ml，除晶状体、脉络膜和玻璃体液中的T max为0.5 h，其余各组织T max均为1 h。多次给药第4、6、7天的0.5 h各眼部组组织中加替沙星浓度比较，差异无统计学意义( P>0.05)，且角膜、结膜和巩膜中AUC 0－t约为单次给药的2.04、2.12和2.32倍。单、多次给药后进入体循环的加替沙星浓度均低于25.00 ng/ml。对于金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌，加替沙星眼用凝胶连续用药后在眼前节结膜、角膜、巩膜、虹膜－睫状体、房水和脉络膜中的药代动力学/药效学均可满足C max/MIC 90≥10且AUC/MIC 90≥30。 结论:成功构建快速灵敏的眼组织加替沙星浓度测量方法。加替沙星眼用凝胶以每天3次点眼连续用药3 d后眼组织可达到稳态浓度，且比单次给药在眼组织浓度升高。局部使用加替沙星眼用凝胶可实现眼部结膜、角膜、巩膜、虹膜－睫状体常见感染细菌的有效治疗。

目的:观察质量分数1%阿托品对豚鼠形觉剥夺性近视(FDM)进展的防控作用及其潜在的生物学机制。方法:选取屈光状态正常的3周龄三色豚鼠69只，采用随机数字表法将其随机分为正常对照组19只、FDM模型组19只、FDM+阿托品组19只和阿托品组12只。采用半透明乳胶气球遮盖右眼的方法建立FDM模型，正常对照组不进行实验干预；FDM模型组单纯遮盖右眼4周；FDM+阿托品组遮盖右眼4周，同时每日使用1%阿托品凝胶点眼1次；阿托品组每日使用1%阿托品凝胶点眼1次，共4周。分别于实验前、实验2周和实验4周时采用带状光检影镜进行屈光度测定，采用眼科A型超声仪测量眼轴长度。实验4周时采集完整眼球制作石蜡切片，光学显微镜下观察巩膜组织形态学变化；采集后极部巩膜组织，透射电子显微镜下观察巩膜组织超微结构变化；采用相对和绝对定量同位素标记(iTRAQ)联合液相色谱－串联质谱(LC-MS/MS)技术进行巩膜组织蛋白质质谱检测。结果:正常对照组、FDM模型组、FDM+阿托品组和阿托品组实验眼不同时间点屈光度总体比较，差异均有统计学意义( F分组＝138.892， P<0.001； F时间＝167.270， P<0.001)，其中FDM模型组实验2周和4周、FDM+阿托品组实验4周较正常对照组屈光度向近视化方向发展，实验2周和4周FDM+阿托品组较FDM模型组屈光度向远视化方向发展，屈光度比较差异均有统计学意义(均 P<0.001)。正常对照组、FDM模型组、FDM+阿托品组和阿托品组实验眼不同时间点眼轴长度总体比较差异均有统计学意义( F分组＝32.346， P<0.001； F时间＝353.797， P<0.001)，其中FDM模型组实验2周和4周、FDM+阿托品组实验4周眼轴长度均长于相应时间点正常对照组，FDM+阿托品组实验2周和4周眼轴长度均短于相应时间点FDM模型组，差异均有统计学意义(均 P<0.01)。FDM模型组豚鼠后极部巩膜胶原纤维排列疏松且紊乱，FDM+阿托品组后极部巩膜胶原纤维排列较规则。正常对照组、FDM模型组、FDM+阿托品组和阿托品组后极部巩膜厚度值分别为(141.74±16.98)、(101.46±9.15)、(112.74±6.24)和(134.30±18.19)μm，总体比较差异有统计学意义( F＝6.709， P＝0.005)，其中FDM模型组后极部巩膜厚度明显小于正常对照组和FDM+阿托品组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。正常对照组、FDM+阿托品组和阿托品组后极部巩膜胶原纤维直径从内到外逐渐增大，FDM模型组后极部巩膜组织内、中、外层纤维直径均较正常对照组减小。巩膜组织蛋白质组学分析发现，FDM模型组与正常对照组以及FDM+阿托品组与FDM模型组间差异倍数均在1.30倍及以上的蛋白85个，其中阿托品干预上调蛋白38个，下调蛋白47个。GO富集分析发现，生物过程主要涉及生物调节、细胞过程、定位及代谢过程等，分子功能主要涉及结合、催化活性、分子功能调控、分子活性及转运活性等，细胞成分主要涉及细胞解剖实体、细胞内物质及含蛋白的复合体。 结论:阿托品可增加FDM模型豚鼠巩膜胶原纤维直径，改善胶原纤维排列，抑制巩膜变薄，其控制近视进展的机制可能与巩膜细胞间紧密连接、细胞骨架和细胞外基质重塑密切相关。

目的:分析纯母乳喂养婴儿不同排便频次与乳汁中3种功能性低聚糖水平的关系，为合理母乳喂养和研发添加母乳低聚糖的相关食品提供参考依据。方法:根据0~6月龄纯母乳喂养婴儿排便频次不同分为A组、B组和C组，即3天以内(含3天)排便1次或排便每日少于3次(含3次)者为A组；排便每天多于3次者为B组；4天以上或需辅助才排便者为C组。同时收集3组纯母乳喂养婴儿母亲的乳汁，采用手挤奶方法收集婴儿母亲的成熟乳，收集后立即存置于－80 ℃冰箱内，待用超高效液相色谱串联质谱仪检测功能性低聚糖的含量。结果:成熟母乳中母乳低聚糖α1-3、β1-4、α1-3半乳四糖(四糖)在A组(5.863 μg/ml)、B组(6.112 μg/ml)和C组(3.522 μg/ml)间比较差异有统计学意义( H＝13.519， P＝0.001)，B组中的含量最高，C组中最低；α1-3、β1-4半乳三糖(三糖)在三组间比较差异无统计学意义( H＝5.408， P＝0.067)。成熟乳汁中母乳低聚糖2′-岩藻糖半乳糖(2′-FL)在A组(0.046±0.296)g/L、B组(0.079±0.046)g/L和C组(0.051±0.028)g/L间比较差异有统计学意义( H＝10.393， P＝0.006)，B组母乳中的2′-FL含量高于A组和C组。 结论:成熟乳汁中母乳低聚糖α1-3、β1-4、α1-3半乳四糖(四糖)和2′-岩藻糖半乳糖含量高与0~6月龄婴儿排便频次增多有关；母乳低聚糖α1-3、β1-4、α1-3半乳四糖(四糖)含量低与0~6月龄婴儿排便频次减少有关。

目的:通过脂质组学方法联合机器学习(ML)多种算法，探索人外周血辐射敏感脂质代谢物分类模型。方法:收集2023年3—9月北京市某综合医院准备接受骨髓移植的25例白血病放射治疗病例，照射前和照射后外周血样本97份，其中对照组24份，为照射前血液样本；辐射组73份，为4、8、12 Gy照射剂量下的24、25和24份血液样本。采用基于超高效液相色谱－串联质谱(UPLC-MS/MS)平台的靶向脂质组学方法，分析辐射组与对照组差异脂质。线性回归筛选0～12 Gy的剂量范围内辐射剂量响应脂质。采用5种机器学习方法构建训练集辐射分类模型，验证集进行模型的验证和评价。结果:与对照组相比，辐射组敏感的脂质代谢物中62个脂质浓度变化差异有统计学意义( t＝－4.91～4.74, P<0.05)，包括鞘磷脂(SM)、胆固醇酯(CE)、神经酰胺(Cer)、磷脂酰肌醇(PI)、己糖神经酰胺(HexCer)、溶血磷脂酰胆碱(LysoPC)、醚磷脂酰胆碱(PCO)、磷脂酰乙醇胺(PE)、溶血磷脂酰乙醇胺(LysoPE)这9大类。在0～12 Gy的剂量范围内，筛选出20种具有良好剂量反应的脂质代谢物，包括11个SM，7个CE，1个Cer和1个PI。决策树(DT)、支持向量机(SVM)、轻量梯度增强机(Light GBM)、随机森林(RF)、K最邻近(KNN)这5种机器学习训练模型拟合均较好(F1＝0.69～1.00)，灵敏度较高。通过评价验证指标，辐射分类判定效果最好的模型为随机森林(灵敏度1.00、准确率0.72、F1值0.80)。 结论:通过靶向脂质组学分析，发现人类样本中辐射响应的脂质代谢物和辐射剂量响应的脂质。机器学习方法中的RF模型可以为探索人类辐射脂质代谢物模型提供新的思路。

目的:探讨肠道菌群代谢产物氧化三甲胺(TMAO)对糖尿病急性缺血性卒中患者早期神经功能恶化(END)发生的影响。方法:采用横断面研究的方法，连续收集2019年10月至2020年11月南京医科大学附属无锡人民医院神经内科收治的108例糖尿病急性缺血性卒中患者。将发病5 d内出现原有神经功能缺损症状加重、美国国立卫生研究卒中量表(NIHSS)评分增加≥2分，且头颅影像学评估排除颅内出血和出血转化定义为END，根据是否出现END，将患者分为END组(36例)与无END组(72例)。采用稳定同位素稀释液相色谱/质谱联用法测定血浆TMAO水平。结果:108例患者中，36例(33.3%)诊断为END，END组血浆TMAO水平高于无END组( Z＝－3.500， P<0.001)，TMAO预测END的ROC曲线下面积为0.707(95% CI：0.603~0.811， P<0.001)。根据TMAO水平三分位分组，低、中、高三组患者END的发生率分别为22.2%、19.4%、58.3%，三组之间差异有统计学意义( χ2＝14.979， P＝0.001)；单因素分析显示，血浆TMAO水平与END的发生明显相关( OR＝1.160，95% CI：1.050~1.282， P＝0.004)，多因素Logistic回归分析显示TMAO与END的发生依旧显著相关( OR＝1.145，95% CI：1.033~1.269， P＝0.010)。 结论:糖尿病急性缺血性卒中患者血浆TMAO水平与END的发生密切相关，TMAO水平越高，END发生的风险越大。

目的:探索辅酶Q10(coenzyme Q10, CoQ10)对高脂膳食诱导的小鼠肥胖、脂质紊乱及胆汁酸代谢的影响。方法:8周龄C57BL/6J小鼠根据体重按照随机区组法随机分为对照组(普通饲料)、高脂膳食组(45%高脂饲料)和CoQ10干预组(45%高脂饲料＋100 mg·kg －1·d －1 CoQ10)。收集各组小鼠体重、摄食量数据；试剂盒检测血清总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、丙氨酸转氨酶和天冬氨酸转氨酶水平；超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)检测小鼠血清、肝脏和结肠中17种胆汁酸的含量，Western印迹检测肝脏中胆固醇12α-羟化酶(cholesterol 12α-hydroxylase, CYP8B1)和氧固醇7α-羟化酶(oxysterol 7α-hydroxylase, CYP7B1)蛋白的表达。 结果:CoQ10显著降低了高脂膳食小鼠的体重并改善其脂质代谢紊乱。与对照组相比，高脂膳食组小鼠血清总胆汁酸水平降低( P<0.05)；与高脂膳食组相比，CoQ10干预升高了小鼠血清和结肠中的总胆汁酸水平( P＝0.021, P＝0.014)，并提高了小鼠肝脏、结肠和血清中脱氧胆酸和熊脱氧胆酸的水平( P<0.05)。CoQ10干预组小鼠结肠和血清脱氧胆酸水平均与小鼠体重呈负相关( P＝0.024, P＝0.019)，结肠脱氧胆酸和总胆固醇水平也呈负相关( P＝0.006)。CoQ10上调了高脂膳食小鼠肝脏中CYP8B1和CYP7B1蛋白的表达。 结论:CoQ10能够调节高脂膳食小鼠的胆汁酸代谢并减轻其肥胖及脂质代谢紊乱。

目的:探讨内源性大麻素(endocannabinoid，eCB)及其代谢酶与孤独症谱系障碍(autism spectrum disorder，ASD)的关联，为ASD的病因及发病机制研究提供理论依据。方法:采用病例对照的研究方法，收集2017年6月至2018年12月在哈尔滨医科大学儿童发育行为研究中心就诊和在省孤独症定点康复机构接受康复训练的58名ASD儿童作为ASD组。按照性别、年龄1∶1匹配的原则，在黑龙江省抽取58名正常发育儿童作为对照组。采集两组儿童空腹静脉血，采用液相色谱-质谱联用技术(LC-MS/MS)和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测其外周血中内源性大麻素花生四烯酸乙醇胺(AEA)、花生四烯酸甘油(2-AG)、十六酰胺乙醇(PEA)、油酰乙醇胺(OEA)及其代谢酶花生四烯酸磷脂酰乙醇胺特异性磷脂酶D(NAPE-PLD)、酰胺水解酶(FAAH)、单酰基甘油脂酶(MAGL)和二酰基甘油脂酶(DAGL)的mRNA表达水平，采用Pearson相关分析eCB与ASD儿童症状严重程度之间的相关性。结果:ASD儿童的AEA、OEA和PEA的水平[(10.10±2.60) nmol/L，(24.30±5.60)nmol/L，(15.92±2.28)nmol/L]均低于对照组儿童[(13.46±3.04 )nmol/L，(27.85±6.89)nmol/L，(17.87±2.67)nmol/L， t＝－6.612，－3.089，－4.579，均 P<0.01]；ASD儿童FAAH和DAGL mRNA的表达水平显著高于对照组，且差异有统计学意义( t＝2.423，3.840， P<0.05)，而NAPE-PLD和MAGL mRNA水平在两组间差异无统计学意义( t＝0.024，0.885，均 P>0.05)；ASD组PEA水平与儿童孤独症行为量表(ABC)总分呈负相关( r＝－0.288， P<0.05)。 结论:ASD儿童体内的eCB及其代谢酶可能存在代谢异常，且eCB水平与ASD的严重程度存在关联性。