目的:探究黄芪总黄酮(TFA)对柯萨奇B3病毒(CVB3)诱导的病毒性心肌炎(VMC)小鼠模型Toll样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)信号通路和细胞凋亡的影响.方法:将40只小鼠随机分为对照组、VMC组、VMC+低剂量TFA组、VMC+高剂量TFA组,每组10只.VMC组、VMC+低剂量TFA组、VMC+高剂量TFA组经CVB3诱导建立VMC小鼠模型,VMC+低剂量TFA组、VMC+高剂量TFA组分别以15、30mg/kgTFA灌胃,VMC组、对照组以等量生理盐水灌胃.CVB3感染后第11天超声检查小鼠心脏功能,处死小鼠后采用苏木精-伊红(HE)染色和脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)染色观察心肌形态学变化和凋亡情况,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测心肌组织匀浆液中白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测心肌组织中TLR4、NF-κB p65(p65)、磷酸化NF-κB p65(p-p65)、切割后半胱氨酸蛋白酶-3(Cleaved-Caspase-3)、切割后半胱氨酸蛋白酶-9(Cleaved-Caspase-9)表达.结果:与对照组比较,VMC组小鼠CVB3 mRNA、左室收缩末期内径(LVESD)、心肌细胞凋亡率、心肌组织中 IL-6、IL-1β、TNF-α、TLR4、p-p65/p65、Cleaved-Caspase-3 和 Cleaved-Caspase-9相对表达量明显升高,左室射血分数(LVEF)明显降低,差异均有统计学意义(P＜0.05);与VMC组比较,VMC+低剂量TFA组和VMC+高剂量 TFA 组 CVB3 mRNA、LVESD、心肌细胞凋亡率、心肌组织中 IL-6、IL-1β、TNF-α、TLR4、p-p65/p65、Cleaved-Caspase-3和Cleaved-Caspase-9相对表达量明显降低,LVEF明显升高,差异均有统计学意义(P＜0.05);MC+高剂量TFA组CVB3 mRNA、IL-6、TNF-α水平,细胞凋亡率,TLR4、p-p65/p65和Cleaved-Caspase-9相对表达量明显低于VMC+低剂量TFA组,LVEF明显高于MC+低剂量TFA组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:TFA可减轻CVB3诱导的VMC小鼠心肌病理损伤,减少心肌炎症反应和细胞凋亡,其作用机制与TLR4/NF-κB信号通路、Cleaved-Caspase-3和Cleaved-Caspase-9表达的抑制有关.

幽门螺杆菌是一种感染人类胃的革兰氏阴性病原体，是世界上最常见的细菌感染。幽门螺杆菌的长期、持续感染可导致患者发展为消化性溃疡、胃腺癌、胃粘膜相关淋巴组织淋巴瘤。Toll样受体(Toll-like receptors，TLRs)是抵御微生物入侵的第一道防线，在多种感染性疾病的发生发展中起重要作用。TLR9是机体免疫应答中发挥关键作用的I型整合跨膜蛋白，在树突状细胞、B细胞、巨噬细胞和上皮细胞中均有表达，它能够通过低甲基化的DNA和糖骨架等结构识别DNA，并介导一系列免疫应答反应。尽管近年来对TLR9的激活机制进行了广泛的研究，但其在幽门螺杆菌感染导致的相关性疾病中的确切作用仍不明确。文章从TLR9在固有免疫中的功能及其信号通路、TLR9在幽门螺杆菌感染中的作用机制、TLR9与胃粘膜相关淋巴组织淋巴瘤这三个方面阐述TLR9在在幽门螺杆菌相关性疾病中的作用机制。

目的:探讨Toll样受体9（TLR9）信号通路激活对肾小管细胞转录组的影响。方法:提取并培养小鼠原代肾小管上皮细胞，在细胞融合度达80%时分为两组，分别加入10 μL磷酸盐缓冲液（PBS，PBS对照组）和终浓度为5 μmol/L的TLR9激活剂胞嘧啶-鸟嘌呤寡脱氧核苷酸（CpG-ODN，CpG-ODN处理组）。提取细胞RNA后在Illumina平台进行测序，使用差异基因分析软件DEGseq分析两组细胞中基因的差异表达情况，通过Goatools和KOBAS在线软件分析差异基因所参与的信号通路，应用Homer软件预测转录因子。结果:与PBS对照组相比，CpG-ODN处理后有584个显著的差异表达基因，其中102个基因表达上调，482个表达下调。差异表达基因富集最显著的基因本体（GO）为β-干扰素响应、病毒响应或防御等炎症反应相关条目；京都基因与基因组百科全书数据库（KEGG）信号通路富集结果显示，富集系数最显著的信号通路包括2'-5'-寡腺苷酸合成酶活性、核糖核酸酶活性的调节、病毒生命周期的负调控、β-干扰素响应和对原生动物的防御反应等。转录因子预测结果显示，干扰素调节因子3（IRF3）是差异基因启动子序列上富集最显著的转录因子；IRF3是TLR9下游表达差异最显著的转录因子，转录因子21（TCF21）、锌指蛋白135（ZNF135）和阳性调节域4（PRDM4）等转录因子可能是TLR9信号通路的新候选靶标。结论:CpG-ODN激活TLR9信号通路，原代肾小管上皮细胞能直接响应CpG-ODN的刺激并发生转录组学变化，为进一步探究TLR9信号通路在脓毒症相关性急性肾损伤中的分子机制研究提供了基础。

目的:筛选并分析唾液酸结合Ig样凝集素15(Siglec-15)在胃癌细胞中的候选靶基因及其下游信号通路并进行患者预后相关性分析。方法:构建干扰Siglec-15基因的最佳慢病毒转染至人胃腺癌AGS细胞株获得沉默组(AGS-shSiglec-15)，以及空载体慢病毒转染获得的AGS细胞对照组(AGS-NC)，各取三个样本进行转录组测序。根据测序数据筛选差异表达基因，通过GO分析、京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析和GESA分析进行基因的功能注释和信号通路的鉴定。构建蛋白与蛋白相互作用网络图(PPI)，进行可视化分析并获取关键互作蛋白，并对靶蛋白进行生存期分析。结果:共鉴定出符合筛选标准的255个差异表达蛋白编码基因，包括119个上调基因和136个下调基因。经GO、KEGG和GSEA分析表明，差异表达基因(DEGs)主要参与甲型流感、Toll样受体信号传导途径、钙信号传导途径、NOD样受体信号传导途径、病毒蛋白与细胞因子和细胞因子受体的相互作用等进程。同时筛选出10个Siglec-15相关基因的靶蛋白，其中钙黏蛋白23(CDH23)[ HR＝1.31(1.05~1.63)， P<0.05]、蛋白网络成分协调蛋白(USH1C)[ HR＝1.25(1.05~1.48)， P<0.05]、干扰素调节因子7(IRF7)[ HR＝1.7(1.41~2.05)， P<0.001]、MX2[ HR＝1.63(1.33~2.00)， P<0.01]、干扰素调节因子9(IRF9)[ HR＝1.30(1.09~1.54)， P<0.01]高表达的胃癌患者总生存率(OS)较差。而RSAD2(RSAD2)[ HR＝0.78(0.61~1.00)， P<0.05]、CC基序趋化因子配体5(CCL5)[ HR＝0.66(0.55~0.78)， P<0.01]、CXC趋化因子配体(CXCL8)[ HR＝0.65(0.53~0.79)， P<0.01]、XIAP相关因子1(XAF1)[ HR＝0.77(0.65~0.92)， P<0.01]、干扰素调节因子6(IRF6)[ HR＝0.51(0.41~0.63)， P<0.01]高表达的患者具有较好的OS。 结论:沉默Siglec-15基因在胃癌细胞中有明显差异表达基因并参与多种生物学进程和信号通路调节，可能作为胃癌的潜在新免疫检查点标志物及治疗靶点。

目的:评价番茄红素预处理对大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤时Toll样受体(TLRs)/NF-κB信号通路的影响。方法:体外培养大鼠H9C2心肌细胞，以8×10 4个/ml的密度接种于培养皿中，采用随机数字表法分为3组( n＝30)：对照组(C组)、缺氧复氧组(H/R组)和番茄红素预处理组(LP组)。H/R组、LP组心肌细胞缺氧6 h后复氧制备缺氧复氧损伤模型；LP组于造模前12 h时加入浓度为20 μmol/L番茄红素进行预处理。采用CCK-8法测定心肌细胞活力；采用流式细胞术(Annexin V/PI双染法)检测心肌细胞凋亡率；采用微板法检测细胞培养液LDH、细胞SOD、MDA及ROS的水平；采用Western blot法检测TLR2、TLR3和NF-κB的表达水平。 结果:与C组相比，H/R组和LP组细胞活力和SOD水平降低，细胞凋亡率、LDH、MDA和ROS水平升高，TLR2、TLR3和NF-κB表达上调( P<0.05)；与H/R组相比，LP组细胞活力和SOD水平升高，细胞凋亡率、LDH、MDA和ROS水平降低，TLR2、TLR3和NF-κB表达下调( P<0.05)。 结论:番茄红素预处理减轻大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的机制可能与抑制TLRs/NF-κB信号通路激活，抑制氧化应激反应有关。

目的:应用网络药理学分析方法，从整体水平观察牛黄－靶点－角膜炎的复杂网络关系，探讨牛黄治疗角膜炎的分子作用机制。方法:首先通过DisGeNET在线数据库收集角膜炎相关的基因，构建角膜炎相关蛋白质的互作网络，然后经中药系统药理学分析(TCMSP)平台、中国科学院化学数据库查询，结合文献报道，收集牛黄中分离鉴定的组成成分，导出各成分SMILES结构式信息，利用在线软件SwissTargetPrediction预测作用靶点，进而构建牛黄活性成分－预测靶点网络图，最后将角膜炎相关蛋白质的互作网络与牛黄活性成分－预测靶点网络进行合并，得到牛黄活性成分－潜在靶点网络，系统分析牛黄治疗角膜炎的潜在作用靶点及其在信号通路中的作用，构建成分－靶点－通路网络图，分析牛黄治疗角膜炎的作用机制。结果:共搜索到39个已分离鉴定的牛黄组成成分，角膜炎相关靶点65个，牛黄治疗角膜炎的潜在靶点28个；28个潜在靶点中包含7个直接作用靶点，即肿瘤坏死因子、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1、Toll样受体9、C-X-C基序趋化因子配体8、白细胞介素(IL)6、丝裂原活化蛋白激酶8和神经营养受体酪氨酸激酶1。28个潜在靶点可被注释入12项生物过程、18项细胞组分、13个分子功能，经京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析，共纳入10条KEGG信号通路，主要涉及人巨细胞病毒感染、阿米巴病、抗叶酸耐受性、PI3K-Akt信号通路、类风湿性关节炎、凋亡、细胞因子－细胞因子受体相互作用、疟疾、非酒精性脂肪肝、IL-17信号通路。结论:牛黄可能通过抗炎、抗菌、抗病毒、免疫调节和炎症调控等作用发挥对角膜炎的辅助治疗作用。

目的:探究七氟醚后处理（sevoflurane postconditioning, SpostC）是否通过调控缺氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1α, HIF-1α）/B细胞淋巴瘤2/腺病毒E1B相互作用蛋白3（B cell lymphoma 2/adenovirus E1B protein-interacting protein 3, BNIP3）通路，进而减轻小鼠心肌缺血再灌注损伤（myocardial ischemia reperfusion injury, MIRI）的分子机制。方法:将40只小鼠按随机数字表法分为4组（每组10只）：假手术组（Sham组）、心肌缺血再灌注组（I/R组）、七氟醚后处理+I/R组（SpostC组）和七氟醚后处理+HIF-1α抑制剂（2ME2）+I/R组（SpostC+2ME2组）。Sham组只穿线不结扎冠状动脉左前降支（left anterior descending coronary artery, LAD）。I/R组结扎LAD 30 min，再灌注120 min。SpostC组和SpostC+2ME2组在复灌即刻吸入1 MAC七氟醚15 min，然后再灌105 min。SpostC+2ME2组在LAD结扎前腹腔注射2ME2，剂量为15 mg/kg。采用心脏超声检测心脏功能，记录舒张期左心室前壁厚度（left ventricular end-diastolic anterior wall thickness, LVAWd）、收缩期左心室前壁厚度（left ventricular end-systolic anterior wall thickness, LVAWs）、射血分数（ejection fraction, EF）、左心室缩短分数（fractional shortening, FS）、舒张期左心室后壁厚度（left ventricular end-diastolic posterior wall thickness, LVPWd）、收缩期左心室后壁厚度（left ventricular end-systolic posterior wall thickness, LVPWs）、舒张期左心室内径（left ventricular internal dimension at end-diastolic, LVIDd）和收缩期左心室内径（left ventricular internal dimension at end-systolic, LVIDs）；H-E染色观察心肌组织结构；TTC+伊文蓝染色法测定心肌梗死面积；ELISA法检测血清肌型肌酸激酶（creatine kinase M-type, CKM）、肌钙蛋白T型2（troponin T-type 2, TNNT2）、肌酸激酶同工酶（creatine kinase-MB, CK-MB）和乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase, LDH）的表达水平；透射电镜观察线粒体超微结构改变情况；Western blot法检测心肌组织中HIF-1α、BNIP3、微管相关蛋白轻链3-Ⅱ（microtubule-associated protein light chain 3 Ⅱ, LC3-Ⅱ）、自噬相关蛋白（Beclin1）、Toll样受体9（toll-like receptor 9, TLR9）和IL-6的蛋白水平；TUNEL染色法检测心肌细胞的凋亡情况。结果:与Sham组比较，I/R组小鼠LVAWd、LVAWs、EF、FS、LVPWd和LVPWs明显降低（ P<0.05），LVIDd和LVIDs明显升高（ P<0.05），心肌组织损伤及线粒体损伤较重，心肌梗死面积较大，心肌细胞凋亡率较高，血清LDH、CKM、CK-MB和TNNT2的表达水平升高（ P<0.05），HIF-1α、LC3-Ⅱ、BNIP3、Beclin1、TLR9和IL-6蛋白水平升高（ P<0.05）。与I/R组比较，SpostC组小鼠LVAWd、LVAWs、EF、FS、LVPWd和LVPWs明显升高（ P<0.05），LVIDd和LVIDs明显降低（ P<0.05），心肌组织损伤及线粒体损伤减轻，心肌梗死面积减小，心肌细胞凋亡率降低，血清LDH、CKM、CK-MB和TNNT2的表达水平明显降低（ P<0.05），HIF-1α、LC3-Ⅱ、BNIP3、Beclin1和TLR9的蛋白水平明显升高（ P<0.05），IL-6蛋白水平明显降低（ P<0.05）。与SpostC组比较，SpostC+2ME2组小鼠LVAWd、LVAWs、EF、FS、LVPWd和LVPWs明显降低（ P<0.05），LVIDd和LVIDs明显升高（ P<0.05），心肌组织损伤及线粒体损伤加重，心肌梗死面积增大，心肌细胞凋亡率升高，血清LDH、CKM、CK-MB和TNNT2的表达水平明显升高（ P<0.05），HIF-1α、LC3-Ⅱ、BNIP3、Beclin1和TLR9的蛋白水平明显降低（ P<0.05），IL-6蛋白水平明显升高（ P<0.05）。 结论:SpostC可通过上调HIF-1α/BNIP3通路激活线粒体自噬，减轻炎症反应，抑制心肌细胞凋亡，从而改善小鼠MIRI。

肠缺血再灌注(I/R)损伤是指肠缺血一定时间后再恢复血供所引起的损伤。肠组织缺血可由失血性休克、绞窄性肠梗阻和急性肠系膜缺血等引发，当肠组织再灌注后虽然血氧水平恢复，但活性氧(ROS)的大量产生，直接促进中性粒细胞浸润缺血肠组织并加重组织损伤，这是造成肠I/R损伤患者肠坏死和高死亡率的主要原因 [1]。肠I/R损伤主要有两个阶段：首先是肠组织发生缺血，此时有氧代谢障碍，ATP合成减少，而无氧代谢生成大量乳酸，细胞内电解质紊乱，线粒体功能障碍，导致细胞死亡，上皮细胞屏障功能破坏，血管通透性增加 [2,3]。由于长时间缺血，肠组织恢复血流后，富含氧气的血液进入肠组织，产生大量氧自由基、细菌易位、炎症反应，最终导致细胞死亡、组织损伤、器官衰竭 [4]。肠I/R损伤的发生会破坏肠壁的屏障功能 [5]，一旦引起肠壁屏障破坏超过其代偿能力，肠道菌群和毒素可进入血液循环，导致全身炎症反应综合征(SIRS) [6]，甚至导致多器官功能衰竭(MODS)和死亡 [7]。人体肠组织富含线粒体，它参与了能量的产生、免疫应答、细胞代谢、死亡等一系列过程。当细胞受到损伤或应激时，线粒体释放许多损伤相关的分子模式(DAMPs)，线粒体DNA(mtDNA)是其中之一 [8]。mtDNA可通过Toll样受体9(TLR9)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体和环磷酸鸟苷-腺苷酸合成酶(cGAS)-干扰素基因刺激因子(STING)信号通路激活先天免疫反应并诱导炎症，使肠道屏障功能受损，参与肠I/R损伤 [8]。本文主要综述了mtDNA释放在肠I/R损伤中的作用，为其防治提供理论参考。

目的:探讨血液灌流联合血液滤过对脓毒症患者Toll样受体4（TLR4）/核因子-κB（NF-κB）信号通路相关因子水平的影响。方法:回顾性选取2020年2月至2023年2月在菏泽市立医院治疗的150例脓毒症患者为研究对象，根据治疗方案的不同分为对照组和观察组，各75例。两组均予以脓毒症标准治疗，于此基础上，对照组予以血液滤过治疗，观察组予以血液灌流联合血液滤过治疗。比较两组治疗前、治疗后72 h TLR4/NF-κB信号通路相关mRNA表达（TLR4 mRNA、NF-κB mRNA）及相关炎性因子、血管内皮功能相关指标、肝肾功能指标水平，并比较两组28 d病死率。结果:相较于治疗前，两组治疗后72 h TLR4 mRNA及NF-κB mRNA明显下降，观察组低于对照组（0.34 ± 0.12比0.63 ± 0.16、0.30 ± 0.10比0.59 ± 0.12），差异均有统计学意义（ P<0.05）。相较于治疗前，两组治疗后72 h肿瘤坏死因子-α、白细胞介素（IL）-6、IL-12及C反应蛋白水平均下降，观察组低于对照组[（43.42 ± 7.82）ng/L比（56.37 ± 9.41）ng/L、（28.47 ± 6.03）ng/L比（39.41 ± 7.02）ng/L、（52.31 ± 5.42）ng/L比（70.84 ± 7.08）ng/L、（23.82 ± 7.06）mg/L比（38.41 ± 6.83）mg/L]，差异有统计学意义（ P<0.05）。相较于治疗前，两组治疗后72 h晚期糖基化终产物、可溶性细胞间黏附因子-1、同型半胱氨酸、丙氨酸氨基转氨酶、天冬氨酸氨基转移酶、血尿素氮及血肌酐明显下降，观察组低于对照组[（172.37 ± 73.63） mg/L比（249.41 ± 80.26） mg/L、（404.26 ± 68.42） ng/L比（459.36 ± 70.19） ng/L、（20.27 ± 4.53） μmol/L比（28.96 ± 5.02） μmol/L、（62.41 ± 10.69） U/L比（78.52 ± 13.41） U/L、（51.47 ± 12.35） U/L比（64.17 ± 15.83）U/L、（3.82 ± 0.79） mmol/L比（5.57 ± 1.16） mmol/L、（125.16 ± 23.96） μmol/L比（163.24 ± 30.12） μmol/L]，差异均有统计学意义（ P<0.05）。观察组28 d病死率低于对照组[12.00%（9/75）比25.33%（19/75）]，差异有统计学意义（ χ2 = 4.39， P<0.05）。 结论:血液灌流联合血液滤过治疗脓毒症可有效缓解病情程度，减轻肝肾功能损伤，对TLR4/NF-κB信号通路相关mRNA表达及相关炎性因子均有一定作用。

SLE是一种可累及全身多个系统的慢性自身免疫病，其发病机制目前仍尚不明确。肽/组氨酸转运蛋白SLCl5A4是一种定位于溶酶体上的转运蛋白，能将组氨酸、寡肽等从溶酶体内转运至细胞质中。研究发现肽/组氨酸转运蛋白SLCl5A4参与了SLE的发生，并且与Toll样受体7/9（TLR7/9）介导的Ⅰ型干扰素信号通路有关。本文对近年来有关肽/组氨酸转运蛋白SLCl5A4在SLE中可能的作用机制进行综述，旨在为探索肽/组氨酸转运蛋白SLCl5A4在SLE中的作用提供新的思路。