目的:筛选大鼠肠道和呼吸道共有差异菌群和差异代谢物，分析大鼠肠道菌群和代谢物的变化在大鼠尘肺病进展中可能的作用。方法:于2020年4月，将18只SD大鼠随机分为3组（对照组、煤矿粉尘组和二氧化硅组，每组各6只）。煤矿粉尘组和二氧化硅组大鼠采用非气管暴露法分别灌注1 ml 50 mg/ml煤矿井下粉尘悬浊液和二氧化硅悬浊液，对照组大鼠灌注同等剂量灭菌生理盐水。染尘24周后采集大鼠粪便、咽拭子和肺灌洗液。采用16SrDNA基因测序技术和UHPLC-QTOF-MS非靶向代谢组学技术检测各组大鼠粪便、咽拭子和肺灌洗液中菌群和代谢物，筛选肠道和呼吸道共有差异菌群和共有差异代谢物。并采用Spearman法对差异菌群和代谢物进行相关性分析。结果:与对照组比较，煤矿粉尘组门水平下共筛选到9种肠道和呼吸道共有差异菌群，属水平下共筛选到9种肠道和呼吸道共有差异菌属，主要为厚壁菌门、放线菌门、链球菌属、乳杆菌属；与对照组比较，二氧化硅组门水平下共筛选到9种共有差异菌群，属水平下共筛选到5种共有差异菌群，主要为变形菌门、放线菌门、异杆菌属、粘液杆菌属。与对照组比较，煤矿粉尘组共筛出7种共有差异代谢物，标桩菌素、芳樟醇氧化物和异亮氨酸-亮氨酸在肠道和呼吸道中均上调；二氧化硅组与对照组比较，共筛出19种共有差异代谢物，其中二乙醇胺、1-氨基环丙烷羧酸、异亮氨酸-亮氨酸、鞘氨醇、棕榈酸、二氢鞘氨醇、1，2-二油酰基-sn-甘油-3-磷脂酰胆碱、1-硬脂酰-2-油酸甘油酯磷酸化胆碱在肠道和呼吸道中均上调。结论:尘肺病大鼠肠道和呼吸道菌群存在移位现象，大鼠在尘肺病进展过程中存在脂质代谢失衡。

目的:分析老年急性心肌梗死患者的血浆代谢组学特征，探索其潜在的代谢标志物。方法:横断面研究，入选苏州大学附属第二医院急性心肌梗死老年患者30例(心肌梗死组)，于体检中心筛选30例符合纳入标准的老年人为对照组，利用UHPLC-QTOF/MS技术检测其血浆中代谢物，在京都基因与基因组(KEGG)数据库中搜索整理所有代谢物的信息。通过主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)对比两组样本代谢物的总体趋势，利用 Mann- Whitney U检验初步筛选差异代谢物。联合 Mann- Whitney U检验、互信息和随机森林模型进一步分析差异代谢物的重要性，运用靶向代谢组学检测重要差异代谢物在两组样本中的含量，对两组数据进行 t检验比较其差异。 结果:心肌梗死组和对照组患者中，高血压、高脂血症及糖尿病患病率比较，差异无统计学意义(均 P>0.05)，心肌梗死组患者血浆肌钙蛋白T(2.16±0.36)μg/L含量高于对照组(0.26±0.03)μg/L( t＝5.17， P<0.05)。两组样本的总体趋势在PCA得分图和OPLS-DA模型中得到明显区分，样本中有32个差异代谢物符合初步筛选标准。进一步分析得出重要差异代谢物包括儿茶酚和4种氨基酸组成的小肽段，其与分组关系密切，且预测分组准确性的能力强。靶向代谢组学检测结果显示，儿茶酚在心肌梗死组的浓度为(310.3±40.0)ng/L，对照组为(2 607.0±758.1)ng/L，两组比较差异有统计学意义( t＝5.34， P<0.01)。 结论:血浆儿茶酚具有成为老年急性心肌梗死患者代谢标志物的潜力，可能与该病的发生及预后密切相关。

目的 探讨肉碱(L-carn itine)和乙酰肉碱(acetyl-carnitine,ACar 2∶0)对食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)的诊断价值.方法 收集2022年4月至2022年10月在广西医科大学附属肿瘤医院收治的31例ESCC患者以及同期就诊的30名健康志愿者的血清样本.采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱(UHPLC-QTOF-MS/MS)技术靶向分析血清中肉碱和乙酰肉碱的代谢变化,采用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线评价诊断效能.结果 与健康对照者相比,ESCC患者血清中的肉碱水平差异无统计学意义(P=0.149),两种乙酰肉碱同分异构体(ACar 2∶0同分异构体1和ACar 2∶0同分异构体2)的水平升高(均P＜0.001).多因素分析结果显示,ACar 2∶0同分异构体1含量高于0.0163 μmol/L(OR=19.456,95％CI:1.971～192.104,P=0.011)和 ACar 2∶0 同分异构体2含量高于0.0148 μmol/L(OR=7.720,95％CI:1.047～56.915,P=0.045)是 ESCC 发生的危险因素,而肉碱(OR=1.310,95％CI:0.051～33.951,P=0.871)则与ESCC发生无明显关系.ACar 2∶0同分异构体1诊断ESCC的ROC曲线下面积(area under curve,AUC)及敏感度和特异度分别为0.957、0.900、0.862,ACar 2∶0同分异构体2诊断ESCC的AUC及敏感度和特异度分别为0.901、0.867、0.821,两者联合诊断ESCC的AUC及敏感度和特异度分别为0.952、0.867、0.889.结论 ESCC血清中乙酰肉碱水平升高,且其在诊断ESCC中具有良好的效能,可能是潜在的诊断标志物.

目的 构建黄精炮制品多糖的酶水解产物指纹图谱,结合化学计量学方法评价不同蒸晒次数黄精炮制品多糖的差异.方法 采用糖苷酶水解,结合高效薄层色谱(high thin-layer chromatography,HPTLC)、亲水作用色谱-高效液相色谱-蒸发光检测器(hydrophilic interaction liquid chromatography-high performance liquid chromatography-evaporative light scattering detector,HILIC-HPLC-ELSD)和超高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱(ultra high pressure liquid chromatography-quadrupole time of flight tandem mass spectrometry,UHPLC-QTOF/MS)对相应的酶解产物进行高效分离和检测.由此产生的自下而上的指纹图谱反映了黄精炮制品多糖的变化,通过相似度和偏最小二乘-判别分析(partial least squares-discriminant analysis,PLS-DA)对指纹图谱进行综合评价.结果HPTLC分析发现,果糖随着蒸晒次数的增加逐渐降低,结合色谱分析发现,六蒸六晒和十二蒸十二晒为黄精炮制过程中的转折点.同时根据酶水解中寡糖的变化,利用相似度和PLS-DA对不同蒸晒次数的黄精炮制品进行了清晰的聚类.结合UHPLC-QTOF/MS分析表明,不同蒸晒次数黄精炮制品中含有蔗糖、蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖、蔗果六糖、蔗果七糖及蔗果八糖.结论 基于酶解法分析不同蒸晒次数样品的质量动态变化,结合所建立的多元指纹图谱,进一步阐释了不同蒸晒次数黄精炮制品的科学内涵.

目的 利用超高效液相色谱—电喷雾离子化—四极杆飞行时间质谱(ultra-high-performance liquid chroma-tography-electrospray ionization-quadrupole time-of-flight mass spectrometry,UHPLC-ESI-QTOF/MS)结合 UNIFI构建靶向筛查策略分析复方苦参注射液(Compound Kushen Injection,CKI)的生物碱类成分及血中移行成分.方法 首先,采用ESI-QTOF/MS的全信息串联质谱技术采集经UHPLC分离的CKI样品及其空白样品、CKI给药后的大鼠血浆样品及空白血浆样品的信息;然后,建立CKI生物碱化学成分数据库,与MSE数据一同导入UNIFI进行靶向筛查;依据母离子、碎片离子的精确质量对筛查出的化合物进行识别;最后,使用MassLynx 4.1工作站对UNIFI输出的结果进行核实.结果 本实验共分离、鉴定了 20种CKI生物碱,其中17种生物碱能在大鼠血浆中被检出.结论 该方法能够快速分析CKI生物碱类成分及其血中移行成分,可为CKI的质量控制及药效物质研究提供参考.

目的:利用高通量、高灵敏和快速的UHPLC-QTOF/MS技术开展博落回花中的微量生物碱类成分的定性研究,阐明博落回花中生物碱类化学成分的类别和种类,为博落回植物的安全性提供科学依据.方法:采用UHPLC-QTOF/MS技术,借助数据挖掘方法发现和识别出博落回花中的微量生物碱类化学成分,对其高分辨一级和二级质谱数据进行解析,并与数据库进行比对,完成对微量生物碱类化学成分的结构推测和确认.结果:从博落回花中共鉴定了22个生物碱类化合物,主要化学成分为普洛托品类生物碱(原阿片碱、别隐品碱)和四氢原小檗碱类生物碱(N-甲基刺罂粟碱、N-甲基四氢小檗碱).结论:该研究结果为博落回植物的更全面、客观的品质评价和安全性评价提供了充分的科学依据.

目的 建立UHPLC/QTOF法下连翘提取物HPLC指纹图谱.方法 采用液相-四级杆串联高分辨飞行时间质谱(UHPLC/QTOF)法进行成分鉴定,连翘提取物分析采用Zorbax SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)流动相乙腈-0.1％甲酸溶液梯度洗脱;柱温为30℃;体积流量1.0 mL/min;检测波长280 nm.结果 14批样品指纹图谱中有20个共有峰,相似度均大于0.95.并鉴定出9个峰,分别为连翘酯苷E、suspensaside C、咖啡酸、连翘酯苷、芦丁、异连翘酯苷A、连翘酯苷、连翘酚、连翘苷.结论 该方法稳定、准确、重现性好,同时提供的信息较多,可用于连翘提取物的整体质量控制,对终产品痰热清注射液的质量控制具有重要意义.

采用UHPLC-QTOF-MS技术分析大鼠灌胃给予止咳宝片后的血浆生物样本.首先,在正、负离子模式下分别全扫描,通过信息依赖采集触发子离子的采集,每一循环采集8个最强峰的二级质谱图.采集时进行,实时多重质量亏损和动态背景扣除.其次,应用Metabolite Pilot 2.0软件对止咳宝片君药罂粟壳,配伍药物甘草中主要化学成分为目标建立分析模型,分析各成分的保留时间、精确分子质量、二级质谱信息,对代谢产物进行解析.鉴定5个阿片类生物碱、甘草苷和甘草酸,及其相关代谢产物31个.5种阿片类生物碱、甘草苷和甘草酸在大鼠体内的代谢途径包括葡萄糖醛酸化、硫酸化、脱甲基化、脱氨基甲基后羧基化、水解等.本文从定性角度对复方中药制剂中主要活性成分的体内代谢开展研究,并与已有单一化学药物代谢途径比较,为进一步阐明止咳宝片或含罂粟壳、甘草类复方中药制剂体内代谢过程提供基础.

目的 基于UHPLC-QTOF-MS/MS法分析玳玳花中的化学成分.方法 玳玳花粉末甲醇溶液的分析采用Shim-Pack XRC18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7 μm);流动相0.1％甲酸水-乙腈,梯度洗脱;体积流量0.25 mL/min;进样量2μL;柱温40℃;质谱采用电喷雾(ESI)离子源,在负离子模式下采集数据,通过保留时间、精确分子离子峰和二级质谱裂解碎片,对玳玳花进行成分鉴定.结果 共鉴定了58个化合物,包括29个黄酮类、15个酚酸类、4个香豆素、1个木脂素类、1个脂肪酸、2个萜类及6个其他类.结论 该方法准确稳定,重复性好,可用于玳玳花的质量控制.

目的:通过超高效液相色谱—飞行时间质谱联用(UHPLC-QTOF/MS)的非靶向代谢组学方法探索中国冠心病患者群体血浆小分子代谢特点及其与疾病发生发展的关系.方法:对150例严重冠状动脉狭窄(狭窄≥80％)的冠心病患者(冠心病组)和年龄与性别1:1匹配的150例冠状动脉造影正常(狭窄≤20％)者(对照组)进行血浆代谢组学分析.结果:冠心病组伴有的传统危险因素比例明显高于对照组(P均<0.05).经过多元线性回归分析及Bonferroni校正后,从105种两组间差异显著的代谢物中筛选出棕榈酸、亚油酸、脂酰肉毒碱(14:1)、石胆酸、磷脂酰甘油(20:3/2:0)等5种差异最为显著的血浆代谢物.校正危险因素后,Logistic回归模型分析结果显示,这5种代谢物与冠心病发病风险呈显著正相关(OR=2.791～7.237).结论:借助非靶向代谢组学方法获得了中国冠心病患者群体的代谢指纹图谱,发现了105种与冠心病相关的代谢物,其中包括两种新的与冠心病病理生理过程强关联的潜在生物标志物石胆酸和磷脂酰甘油(20:3/2:0).