目的:探讨双唾液酸乳糖-N-四糖(DSLNT)对坏死性小肠结肠炎(NEC)新生大鼠肠道内容物低分子量代谢谱的影响，探索其对新生儿肠道的保护作用方式。方法:新生SD大鼠按随机数表法随机分为对照组、NEC组和NEC+DSLNT组，大鼠均采用特殊配方奶人工喂养，NEC组和NEC+DSLNT组以3次/d的频率进行缺氧(950 mL/L氮气，10 min)/冷刺激(4 ℃，10 min)、连续3 d诱导新生大鼠NEC模型，NEC+DSLNT组在特殊配方奶中添加300 μmol/L DSLNT。造模72 h时处死所有存活大鼠，采集回结肠部位肠内容物进行基于超高效液相色谱-组合型四级杆Orbitrap质谱仪(UHPLC-QE-MS)的非靶向代谢组检测，末端回肠行苏木精-伊红染色。代谢组数据用SIMCA 14.1软件进行多元变量统计分析。以正交偏最小二乘分析(OPLS-DA)模型的变量投影重要度(VIP)值>1和 t检验中 P<0.05筛选两两比较的组间差异代谢物。 结果:DSLNT降低NEC发生率和NEC大鼠回肠组织病理学评分[3.0(2.0，3.0)分比1.0(1.0，2.0)分， P<0.01]，并可有效抑制炎症浸润。基于UHPLC-QE-MS代谢组检测结果建立的OPLS-DA模型能较好地对NEC组和对照组、NEC+DSLNT组和NEC组实现分离。NEC组和对照组之间有64个差异代谢物(OPLS-DA模型的VIP值>1且 P<0.05)，包括二十二碳六烯酸(+288.0%， P＝0.028)、黄嘌呤(+372.1%， P＝0.007)、L-精氨酸(+233.1%， P＝0.027)、L-亮氨酸(+232.7%， P＝0.015)、N-乙酰神经氨酸(-41.6%， P＝0.014)等，这些代谢物可映射到34条不同的代谢通路，其中精氨酸生物合成、精氨酸和脯氨酸代谢等6条代谢通路为NEC主要扰动的代谢通路。NEC+DSLNT组与NEC组之间存在15种差异代谢物，包括D-甘露糖(-73.5%， P＝0.032)、黄嘌呤(-63.4%， P＝0.008)、亚油酸(+137.9%， P＝0.047)、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(+278.2%， P＝0.005)等，这些差异代谢物可映射到7条代谢通路，其中亚油酸代谢为DSLNT主要影响的差异代谢通路。两种比对策略中重合的差异代谢物数量为8个，其在NEC中的变化趋势在DSLNT给药组中均出现显著逆转。 结论:DSLNT能显著缓解缺氧/冷刺激造成的新生大鼠NEC病理损伤，该保护作用与其改善NEC造成的肠内容物代谢谱偏移、调节亚油酸代谢通路有关。DSLNT的早期预防性补充对维护新生儿肠道稳态、预防NEC病理进程具有重要意义。

目的:采用代谢组学揭示射血分数保留的心力衰竭（HFpEF）与射血分数降低的心力衰竭（HFrEF）小鼠心肌代谢特征的异同。方法:将实验小鼠分为对照组、HFpEF组、假手术组以及HFrEF组共4组，每组10只。采用高脂饮食与Nω-硝基-L-精氨酸甲基脂（L-NAME）干预构建“two-hit”HFpEF小鼠模型，主动脉弓缩窄术（TAC）构建HFrEF小鼠模型。采用非靶向代谢组学（UHPLC-QE-MS）检测HFpEF与HFrEF小鼠心肌组织中差异代谢物的表达情况。以变量投影重要度>1， P<0.05为标准对这两种小鼠中的差异代谢物进行筛选与分类。KEGG功能富集与通路影响分析展示在这两种小鼠中发生了显著变化的代谢通路。 结果:HFpEF小鼠中共有109个差异代谢物，HFrEF小鼠中共有270个差异代谢物。与对照组相比，HFpEF小鼠心肌组织中甘油磷脂的改变最为显著，而HFrEF小鼠中则以羧酸及其衍生物的占比最多。KEGG富集与通路影响分析显示HFpEF小鼠中的差异代谢物主要富集在不饱和脂肪酸的生物合成、醚脂代谢、氨基糖与核苷糖代谢、甘油磷脂代谢、花生四烯酸代谢以及精氨酸与脯氨酸代谢等通路上，而HFrEF小鼠中的差异代谢物则主要富集在精氨酸与脯氨酸代谢、甘氨酸和丝苏氨酸代谢、泛酸盐和CoA的生物合成、甘油磷脂代谢、烟酸盐和烟酰胺代谢以及花生四烯酸代谢等通路上。结论:HFpEF小鼠与HFrEF小鼠相比具有显著不同的心肌代谢物表达谱。此外，不饱和脂肪酸的生物合成、花生四烯酸代谢、甘油磷脂代谢以及精氨酸和脯氨酸代谢在HFpEF与HFrEF小鼠中都出现了显著改变，提示这些代谢通路可能在这两类心力衰竭的疾病进展中都发挥着重要作用。

目的 基于超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱串联质谱(UHPLC-QE-MS)分析苍附导痰汤对多囊卵巢综合征大鼠血清中内源性标志物的影响,并结合网络药理学研究其发挥药效的作用通路.方法 将40只大鼠随机分为正常组、模型组、达英-35组和苍附导痰组,每组10只.采用来曲唑法诱导多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠模型,造模成功后,达英-35组给予达英-35灌胃,苍附导痰组给予苍附导痰汤灌胃,每天1次,连续28 d.ELISA法检测大鼠血清促卵泡生长激素(FSH)、促黄体生成素(LH)、睾酮(T)、雌二醇(E2)含量差异水平;苏木精-伊红(HE)染色法观察大鼠卵巢组织病理形态学变化;采用UHPLC-QE-MS分析各组大鼠血清样品,基于主成分分析法(PCA)及正交偏最小二乘判别分析法(OPLS-DA)筛选出相关差异代谢物,并依据MetaboAnalyst数据库查询相关代谢通路.采用网络药理学探究苍附导痰汤治疗多囊卵巢综合征的关键靶点,使用KEGG数据库富集分析作用通路,并借助MetScape插件构建"代谢物-反应-酶-基因"网络.结果 与正常组相比,模型组大鼠血清中FSH含量明显上升(P＜0.05),LH、T、E2含量显著上升(P＜0.01);与模型组相比,达英-35组大鼠血清中LH、T、E2含量显著降低(P＜0.01),苍附导痰组大鼠血清中T明显降低(P＜0.05),LH、E2含量显著降低(P＜0.01).与模型组比较,达英-35组和苍附导痰组大鼠卵巢组织形态明显改善;代谢组学筛选15个苍附导痰汤治疗多囊卵巢综合征的差异代谢物,涉及类固醇激素生物合成、甘油磷脂代谢、精氨酸和脯氨酸代谢等途径.网络药理学分析显示苍附导痰汤治疗多囊卵巢综合征的核心靶点为AKT1、ESR1、EGFR等,KEGG富集显示涉及内分泌抵抗、类固醇合成、雌激素信号通路等;采用MetScape插件构建"代谢物-反应-酶-基因"网络,发现6个关键靶点CYP1B1、CYP19A1、AKR1C1、AKR1C3、HSD17B1、HSD17B2,以及涉及类固醇激素生物合成通路.结论 苍附导痰汤对多囊卵巢综合征大鼠显示出潜在的治疗作用,这可能与其对类固醇激素合成代谢路径的调节作用有关,治疗的内源性标志物包括17a-羟基孕烯醇酮、孕酮、皮质酮,这些指标有助于监测治疗效果.

目的 探究中药毛稔对伤口的愈合的治疗效果并探讨其潜在的作用机制.方法 采取药物水煎法获取中药毛稔原液,按50倍、100倍、200倍、400 倍稀释后作用于体外培养的人角质形成细胞HaCaT,研究分为对照(CON)组、实验(M50,M100,M200,M400)组,CCK8法检测细胞活力,划痕模型检验伤口愈合效果;液相色谱-质谱联用分析毛稔的代谢产物并构建药物-疾病-靶点相互作用网络预测中药毛稔干预伤口愈合的机制.结果 与CON组相比,M50、M100、M200、M400组HaCaT细胞相对增殖率[(112.59±2.04)%、(119.04±2.15)%、(128.40±1.10)%、(133.72±2.83)%]增加(P<0.05).M400组划痕愈合率在12 h和24 h[(86.93±4.90)%、(95.13±3.70)%]高于CON组[(36.29±2.97)%、(85.01±2.10)%],差异具有统计学意义(P<0.05).非靶向代谢组学筛选中药毛稔有效活性成分539个,活性成分作用靶点与伤口愈合相交靶点592个.富集分析结果显示,交集靶点主要参与2 655个生物过程,富集于92个细胞组分,主要涉及164个分子功能,并涉及180条信号通路.结论 中药毛稔能够促进 HaCaT 细胞增殖和划痕损伤后愈合,可能通过亚麻酸甘油酯、白桦脂醇、L-色氨酸、桑黄素等活性成分作用于 TNF、SRC、TP53 等靶点达到治疗创伤的作用,其潜在机制可能与 PI3K-Akt 等信号通路有关,有望成为治疗创伤的有效药物.

目的 基于超高效液相色谱-质谱、网络药理学及分子对接技术,探索加味过敏煎治疗特应性皮炎(AD)的作用机制.方法 使用超高效液相色谱-质谱方法对加味过敏煎冻干粉及含药血清进行分析,获取加味过敏煎入血成分.SwissTargetPrediction数据库获取加味过敏煎入血成分的靶点,通过检索GeneCards、DisGeNET及OMIM数据库得到AD疾病靶点.Cytoscape 3.9.1软件构建"成分-靶点"及蛋白质互作网络.DAVID数据库对交集靶点进行基因本体(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析.AutoDock软件对排名前5的活性成分与核心靶点进行分子对接验证.结果 共获得57个加味过敏煎入血成分,检索到807个入血成分靶点,2067个AD靶点,287个交集靶点,筛选出31个核心靶点.KEGG分析主要富集在TNF、JAK-STAT、FcεRI等信号通路.分子对接显示,加味过敏煎活性成分可与核心靶点自发结合.结论 加味过敏煎治疗AD的主要活性成分可能为3-甲基丁酸苯甲酯、肠内酯、荜茇酰胺、镰叶芹二醇、诺米林等,这些活性成分通过作用于STAT3、SRC、PIK3R1、AKT1、MAPK1等靶点和TNF、JAK-STAT、FcεRI信号通路发挥对AD的干预作用.

目的 基于网络药理学和动物实验探讨肉苁蓉苯乙醇苷(CPhGs)对糖尿病肾病(DKD)的作用.方法 UHPLC-QE-MS法分析CPhGs化学成分,TCMSP、Swiss Target Prediction数据库筛选核心成分,OMIM、GeneCards数据库获取DKD相关靶点,获得共同靶标后使用STRING网站构建蛋白互作网络,DAVID数据库进行GO、KEGG通路分析,Cytoscape软件构建"CPhGs核心成分-靶点-通路"网络.随机选取 10 只大鼠作为正常组,其余大鼠用高糖高脂饲料喂养及单次腹腔注射STZ建立DKD模型,分为模型组、达格列净(1 mg/kg)组和CPhGs高、中、低剂量(500、250、125 mg/kg)组,每组10 只,药物干预6 周,观察一般情况,每周称定体质量并检测血糖;末次给药后收集24h尿液,检测 24h尿蛋白总量(24-UTP);腹主动脉取血并处死,分离血清,检测尿素氮(BUN)、尿酸(UA)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)水平,HE染色及Masson染色观察肾组织病理变化,ELISA 法检测血清 IL-1β、IL-6、TNF-α 水平,Western blot 法检测肾组织 JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3、SOCS3 蛋白表达.结果 UHPLC-QE-MS技术共检测得到 699 种成分,经筛选后获得CPhGs核心成分 16 种,相关靶点 323 个,CPhGs与DKD共有靶点 99 个,关键靶点为STAT3、SRC、EGFR等.KEGG通路分析筛选了 151 条信号通路,显示IL-17 信号通路、PI3K/Akt信号通路、TNF信号通路等可能在CPhGs治疗DKD的过程中发挥关键作用.CPhGs能增加DKD大鼠体质量(P<0.01),减少饮水量(P<0.01),调节糖脂代谢,降低 24-UTP、BUN水平(P<0.01),改善肾脏组织病理损伤,降低肾组织p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3 蛋白表达(P<0.01),提高SOCS3蛋白表达(P<0.01).结论 CPhGs通过多成分、多靶点、多途径干预DKD,可能通过抑制 DKD大鼠肾脏 JAK2/STAT3 信号通路来发挥作用.

目的 基于超高液相色谱-四极杆静电场轨道阱质谱法(ultra-high performance liquid chromatography-qua-drupole electrostatic field orbital trap mass spectrometry,UHPLC-QE-MS)研究达原饮对模型小鼠的干预及肺组织代谢物的影响,以探究达原饮治疗呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)寒湿郁肺证的作用机制.方法 采用寒湿刺激加RSV滴鼻感染的方法建立RSV寒湿郁肺证小鼠模型,综合小鼠活动状态、肺指数和肺组织病理,结合肺组织中白介素-6(Interleukin-6,IL-6)和白介素-1 β(Interleukin-1β,IL-1 β)炎症因子的含量,初步评价达原饮对RSV寒湿郁肺证小鼠的治疗效果.利用UHPLC-QE-MS技术检测正常组、模型组、达原饮中剂量组小鼠肺组织代谢物,以正交偏最小二判别分析进行多元统计分析模式识别,以P＜0.05且VIP值＞1为条件筛选差异代谢物,并借助MetaboAnalyst 5.0数据库富集代谢通路.结果 达原饮可以显著改善RSV寒湿郁肺证小鼠的一般状态,降低肺指数,改善肺组织病理,并降低肺组织中IL-6、IL-1β的含量.代谢组学结果显示,与达原饮调控相关的差异代谢物共有35个,主要涉及嘌呤代谢、花生四烯酸、甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢等代谢通路.结论 从代谢组学角度分析了达原饮治疗RSV寒湿郁肺证的作用机制,为达原饮抗病毒研究及临床应用奠定了基础.

[目的]运用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱串联质谱(UHPLC-QE-MS)技术分析橘荔散结丸醇提物的化学成分,并探讨其对子宫肌瘤细胞增殖的抑制作用及机制.[方法](1)以UHPLC-QE-MS技术分析橘荔散结丸醇提物化学成分.(2)培养原代人子宫肌瘤细胞.采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)测定不同浓度橘荔散结丸醇提物处理不同时间后的细胞增殖抑制率,并筛选后续实验中其2个高、低浓度.实验分为空白对照组,二甲基亚砜(DMSO)组,米非司酮组及橘荔散结丸醇提物高、低浓度组,分别给予相应处理后,采用流式细胞术检测细胞周期,Western Blot或定量聚合酶链反应(qPCR)法分别检测细胞Wnt/糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路关键蛋白Wnt 5b、GSK-3β、p-GSK-3β、β-catenin、表皮生长因子受体(EGFR)和基质金属蛋白酶2(MMP2)的蛋白、mRNA表达水平.[结果]鉴别橘荔散结丸醇提物主要化学成分91个,橘荔散结丸醇提物冻干粉与中成药橘荔散结片主要化学成分共有22个.橘荔散结丸醇提物各浓度组细胞增殖抑制率均大于空白对照组(P<0.05);橘荔散结丸醇提物高、低浓度组及米非司酮组G0/G1期细胞数均大于空白对照组,而G2/M期细胞数小于空白对照组(P<0.05);橘荔散结丸醇提物高、低浓度组及米非司酮组Wnt 5b、β-catenin、EGFR、MMP2蛋白、mRNA表达水平均低于与空白对照组(均P<0.05),而GSK-3β蛋白及mRNA表达水平与空白对照组无显著性差异(P>0.05).[结论]UHPLC-QE-MS技术分离橘荔散结丸醇提物化学成分众多,主要成分具有氧化应激调节作用;橘荔散结丸醇提物可有效抑制子宫肌瘤细胞增殖,其分子机制与抑制Wnt/GSK-3β/β-catenin信号通路关键蛋白表达,进而干预子宫肌瘤细胞微环境氧化应激反应有关.

目的 分析北苍术与朝鲜苍术干预后,脾虚大鼠血浆生物标志物及代谢通路的差异,从非靶向代谢组学的角度讨论两者的健脾机制.方法 将SD大鼠采用饮食不节、疲劳过度加苦寒泻下的复合因素法,造成脾虚症模型.测定胃肠道和免疫学指标的水平;采用超高效液相色谱串联Q Exac-tive 质谱仪(UHPLC-QE-MS)技术,联合主成分分析(PCA)与正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)方法,寻找脾虚大鼠血浆中生物标志物;利用Pathway数据库归纳代谢通路.结果 经北苍术与朝鲜苍术给药后,脾虚大鼠血浆中各指标均有不同程度回调.代谢组学分析表明,北苍术与朝鲜苍术分别回调了70个和82个血浆差异代谢物,北苍术主要调节"甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢"与"硫胺素代谢"2个代谢通路,朝鲜苍术主要调节"甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢"、"硫胺素代谢"、"嘧啶代谢"、"丁酸代谢"与"核黄素代谢"5个代谢通路.结论 北苍术与朝鲜苍术对脾虚大鼠均具有一定的调节作用,其作用机制可能与调节"甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢"、"硫胺素代谢"等代谢通路有关.

目的 基于GC-TOF-MS和UHPLC-QE-MS分析中药苏合香的化学成分.方法 挥发性成分分析采用Agilent DB-5MS毛细管色谱柱(30 m×250 μm×0.25μm);程序升温,进样口温度280 ℃;柱流速1.0mL·min-1;进样量1 μL;分流比15∶1;通过标准谱库检索并结合文献对主要色谱峰进行鉴定.可溶性成分分析采用Waters ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8 μm);流动相为5.0 mmol·L-1乙酸铵-5.0 mmol·L-1乙酸和乙腈;梯度洗脱;NCE模式下碰撞能量;电喷雾离子源正负离子模式下对色谱流出物进行质谱检测,利用对照品、二级质谱信息及文献对各主要色谱峰进行归属.结果 苏合香提取物中共鉴定出25个挥发性成分和32个可溶性成分.结论 该方法准确稳定,重复性好,可用于苏合香的成分分析.