目的:基于VEGFA/TNF/IL-6 通路探讨灵泽片对良性前列腺增生大鼠的干预机制.方法:将 30只SPF级SD大鼠随机等分为空白对照组、模型对照组、灵泽片低剂量组、灵泽片中剂量组、灵泽片高剂量组.除空白对照组外,余各组大鼠采用非去势丙酸睾酮诱导法建立前列腺增生大鼠模型.造模结束后,空白对照组及模型对照组选用生理盐水,灵泽片低、中、高剂量组分别选用相应药物,连续灌胃给药28 d.灌胃结束后处死大鼠,取前列腺组织,观察各组大鼠前列腺指数、组织结构及VEGFA/TNF/IL-6 信号通路相关蛋白的变化.结果:与空白对照组比较,模型对照组大鼠前列腺组织增生明显;前列腺指数明显上升(0.84±0.01,P<0.05),组织学观察形态可见前列腺上皮组织厚度扩大和管腔区浸润现象,VEGFA(0.60±0.02,P<0.05)、TNF(0.76±0.02,P<0.05)、IL-6(0.64±0.02,P<0.05)蛋白表达水平显著上升,差异具有统计学意义.与模型对照组比较,灵泽片低剂量组(0.76±0.02,P<0.05)、中剂量组(0.58±0.02,P<0.05)、高剂量组(0.52±0.01,P<0.05)大鼠前列腺指数均有所下降,差异有统计学意义;组织形态可见显著改善,WB结果显示灵泽片干预各组的VEGFA蛋白(低剂量组:0.45±0.01,中剂量组:0.35±0.01,高剂量组:0.31±0.02,各组P均<0.05)、TNF蛋白(低剂量组:0.45±0.01,中剂量组:0.33±0.01,高剂量组:0.27±0.01,各组P均<0.01)、IL-6 蛋白(低剂量组:0.44±0.01,中剂量组:0.36±0.01,高剂量组:0.30±0.01,各组P均<0.01)表达水平均有所下降,差异有统计学意义,且改善情况与灵泽片剂量呈正比.结论:灵泽片可能通过负向调控VEGFA/TNF/IL-6 信号通路,下调VEGFA/TNF/IL-6 蛋白表达水平,调控细胞增殖与凋亡,调节炎症反应,从而发挥对BPH的治疗作用.

目的:探讨miR-497在碱烧伤诱导的角膜新生血管(CNV)形成过程中的作用及其机制。方法:选用健康清洁级6~8周龄野生型(WT)C57BL/6小鼠42只以及成功鉴定为CRISPR/Cas9介导的miR-497敲除(KO)和过表达转基因(TG)小鼠各42只，分别作为WT组、KO组和TG组。构建角膜碱烧伤模型，分别于造模后第3、7、14、21天行裂隙灯显微镜检查并进行角膜上皮损伤评分和角膜基质混浊评分，测量CNV面积；采用组织病理染色法观察角膜结构变化和炎症细胞的表达；采用免疫组织化学染色法检测角膜组织中CD31的表达；采用荧光素酶报告基因检测miR-497与信号转导及转录激活蛋白3(STAT3)之间的靶向结合关系；采用实时荧光定量PCR法检测各时间点小鼠角膜组织中miR-497以及血管内皮生长因子A(VEGFA)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、IL-1β、单核细胞趋化蛋白(MCP)-1 mRNA的相对表达量变化；采用Western blot法检测各组造模后14 d角膜组织中STAT3、p-STAT3蛋白的表达。结果:小鼠角膜碱烧伤后出现角膜损伤和炎症细胞浸润，同时出现CNV。角膜上皮损伤评分、角膜基质混浊评分和CNV面积呈现先升高后降低的趋势，并在造模后第14天时达峰值。各组造模后不同时间点角膜上皮损伤评分、角膜基质混浊评分、CNV面积和CD31阳性细胞数总体比较差异均有统计学意义( F分组＝49.19、34.56、44.56、77.56，均 P<0.01； F时间＝51.62、65.62、71.32、46.12，均 P<0.01)；其中KO组各时间点角膜上皮损伤评分、角膜基质混浊评分、CNV面积和CD31阳性细胞数均高于WT组和TG组，TG组各指标均低于WT组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。在野生型STAT3共转染细胞中，miR-497组荧光素酶活性明显低于miR-阴性对照组和正常对照组，差异有统计学意义(均 P<0.05)；在突变型STAT3转染细胞中，各组间荧光素酶活性比较，差异无统计学意义( F＝0.69， P＝0.56)。WT组、KO组、TG组造模后14 d角膜组织中miR-497的相对表达量分别为0.68±0.11、0.41±0.06、1.05±0.14，均明显低于造模前的1.00±0.04、0.56±0.07、1.34±0.11，差异均有统计学意义(均 P<0.01)。造模后第14天，KO组STAT3及p-STAT3蛋白相对表达量均明显高于WT组和TG组，TG组各蛋白相对表达量低于WT组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。各组造模后各时间点VEGFA、TNF-α、IL-6、IL-1β和MCP-1 mRNA相对表达量均明显高于造模前，KO组各mRNA相对表达量明显高于同时间点WT组和TG组，TG组各mRNA相对表达量明显低于同时间点WT组，差异均有统计学意义(均 P<0.01)。 结论:MiR-497可抑制碱烧伤诱导的角膜炎症反应及CNV形成，其可能通过靶向STAT3抑制炎症信号通路的激活。

目的:通过网络药理学及实验验证探讨天水涤肠汤治疗溃疡性结肠炎的潜在机制。方法:通过TCMSP筛选天水涤肠汤组方药物的有效成分及作用靶点，通过OMIM、GeneCard、TTD数据库筛选溃疡性结肠炎相关靶点，将天水涤肠汤有效成分靶点与溃疡性结肠炎潜在靶点取交集，采用STRING数据库构建PPI网络，筛选核心靶点；采用Cytoscape 3.8.0软件构建“中药-疾病-有效成分-靶点”网络；利用Metascape数据库进行GO功能和KEGG通路富集分析。将48只小鼠按随机数字表法分为对照组、模型组、美沙拉嗪组（0.3 g/kg）及天水涤肠汤低、中、高剂量组（7.5、15、30 g/kg），每组8只。除对照组外，其余各组小鼠构建溃疡性结肠炎模型，相应药物干预7 d后，进行小鼠疾病活动指数（DAI）评分，采用HE染色观察结肠病理学改变，采用PCR和Western blot法检测结肠组织IL-6、信号转导及转录激活因子3（STAT3）mRNA及蛋白表达情况。结果:获得天水涤肠汤组方药物活性成分127个，溃疡性结肠炎靶点560个；天水涤肠汤与溃疡性结肠炎交集靶点89个，核心靶点包括IL6、TNF、IL1B、AKT1、TP53、VEGFA、JUN、PTGS2、CXCL8、CCL2、STAT3、MMP9等；主要涉及氧化应激应答、脂多糖的代谢、细菌源性应答、信号转导等生物过程，主要通过癌症途径、IL17、TNF、MAPK等信号通路发挥治疗溃疡性结肠炎的作用。实验结果显示，天水涤肠汤中、高剂量组DAI评分降低（ P<0.05），结肠组织IL-6、STAT3蛋白表达降低（ P<0.05），天水涤肠汤各剂量组结肠组织IL-6、STAT3 mRNA水平降低（ P<0.05）。 结论:天水涤肠汤可能通过多成分-多靶点-信号通路对溃疡性结肠炎发挥一定的治疗作用，其机制与调节IL-6/STAT3信号通路、抑制肠黏膜炎症反应相关。

目的:基于网络药理学探讨固肠止泻丸治疗溃疡性结肠炎的分子机制。方法:检索TCMSP数据库得到固肠止泻丸中各药物的有效成分及靶基因；检索在线人类孟德尔遗传数据库(OMIM)、DisGeNET数据库获得溃疡性结肠炎的基因，将药物基因与疾病基因取交集得到核心基因；采用STRING数据库构建基因功能关联网络，采用DAVID数据库对核心基因进行GO富集分析和通路富集分析，并采用OmicShare平台绘制气泡图，Cytoscape软件绘制"靶点-GO-通路"网络。结果:共获得固肠止泻丸有效成分77种，靶点211个；获得溃疡性结肠炎914个基因；将药物基因与疾病基因取交集共得到72个核心基因，拓扑分析显示，核心靶点为IL6、IL1B、MAPK1、VEGFA、MMP9等；共得到12个富集的生物过程聚类，联系靶点较多的生物过程有RNA聚合酶Ⅱ启动子转录的正调控、以DNA为模板的转录正调节；通路富集分析共获得14个富集的通路聚类，其中与炎症密切相关并且联系靶点较多的通路有TNF信号通路和PI3K/Akt信号通路。结论:本研究通过数据库分析得到了固肠止泻丸干预溃疡性结肠炎的作用靶点及作用通路，为明确其作用机制提供参考。

目的:采用超高效液相色谱-高分辨串联质谱（UPLC-HRMS/MS）技术结合网络药理学、分子对接方法，探讨芍甘附子汤入血成分治疗类风湿关节炎可能的药效物质基础和作用机制。方法:利用UPLC-HRMS/MS技术分析芍甘附子汤的入血成分；通过PubChem数据库和SwissTargetPrediction数据库预测芍甘附子汤入血成分的作用靶点；通过DrugBank数据库、Therapeutic Target Database（TTD）数据库和GeneCards数据库筛选类风湿关节炎相关靶点，通过韦恩图获得共同靶点；通过STRING数据库构建PPI网络，筛选得到关键靶点和关键成分；通过DAVID 6.8数据库进行GO功能和KEGG通路富集分析；通过Cytoscape 3.2.1软件构建“入血成分-靶点-通路”网络；利用AutoDock软件将网络中预测到的关键成分与关键靶点进行分子对接验证。结果:得到芍甘附子汤入血成分26个及相关作用靶点526个，类风湿关节炎相关靶点478个，共同靶点111个；筛选出桔皮素、山柰酚、甘草次酸、甘草素、皂皮酸、光果甘草内酯等关键成分，作用于TNF、IL6、VEGFA、PTGS2、JUN、PPARG等关键靶点，主要参与炎症反应、类固醇代谢过程、细胞外区域、细胞质、RNA聚合酶Ⅱ转录因子活性、类固醇结合等生物过程，主要调控类固醇激素生物合成、PI3K-Akt信号通路、细胞凋亡、IL-17信号通路、类风湿关节炎等信号通路。分子对接结果显示，关键成分与关键靶点均有较好的结合活性。结论:芍甘附子汤可通过桔皮素、山柰酚、甘草次酸等成分作用于TNF、IL6、VEGFA、PTGS2、JUN、PPARG等靶点，调节PI3K-Akt等信号通路，抑制细胞增殖并促进其凋亡，减轻炎症反应，从而治疗类风湿关节炎。

目的:利用网络药理学方法和分子对接技术研究阳和汤治疗慢性骨髓炎的活性成分和潜在作用机制。方法:采用TCMSP、BATMAN-TCM数据库和相关文献筛选阳和汤组方药物活性成分和作用靶点，采用GeneCards、OMIM、DisGeNET、PharmGKB等数据库预测慢性骨髓炎的相关靶点。采用Cytoscape 3.8.0软件及STRING数据库构建“中药-活性成分-潜在靶点”网络、PPI网络，采用拓扑学参数筛选网络中核心成分及hub基因。采用MCODE插件对PPI网络进行蛋白模块聚类分析。采用KOBAS数据库对交集靶点进行GO功能和KEGG通路富集分析。采用AutoDock tool平台进行分子对接，验证主要活性成分与关键靶点的结合活性。结果:获得阳和汤活性成分120个，作用靶点402个；慢性骨髓炎靶点1 464个，阳和汤和慢性骨髓炎交集靶点103个，与交集靶点相关的活性成分110个，包括槲皮素、山柰酚等类黄酮化合物和β-谷甾醇、豆甾醇等植物甾醇；筛选出TNF、IL6、AKT1等9个hub基因，得到4个关键蛋白模块，涉及免疫炎症反应调控、血管微循环调节、骨的发育与形成、物质合成代谢等生理过程。通过富集分析得到193条信号通路，1 552条GO条目。分子对接结果显示，阳和汤活性成分与关键靶点最低结合能均小于-5 kcal/mol，具有较好结合活性。结论:阳和汤治疗慢性骨髓炎与多种成分、靶点、信号通路协同调控有关，主要通过TNF信号通路、IL-17信号通路、Toll样受体等通路调控TNF、IL6、CXCL8、VEGFA、AKT1等靶点，参与慢性骨髓炎局部的炎症反应、微循环、骨细胞代谢并干预致病菌的免疫逃逸机制。

目的:基于网络药理学方法验证丹皮－赤芍药对治疗脓毒症的作用机制。方法:在TCMSP、OMIM、GeneCards等数据库中检索丹皮－赤芍、脓毒症对应靶点，用Cytoscape 3.8.2软件构建"中药材－活性成分－靶点－疾病"分析图，DAVID数据库进行基因本体(GO)与京都基因与基因组百科全书(KEGG)功能富集分析，微生信云平台绘制气泡图。结果:丹皮－赤芍药对共有36个有效成分，主要为槲皮素、山奈酚、黄芩苷、β－谷甾醇、豆甾醇、芍药苷等。与脓毒症潜在共有关键靶点96个，其中度值>4.9者为前列腺素G/H合酶2(PTGS2)、转录因子p65(RELA)、磷酸肌醇3激酶(PIK3CG)、细胞凋亡调节因子(BAX)、细胞凋亡调节因子(BCL2)、半胱天冬酶－3(CASP3)。蛋白相互作用(PPI)网络分析结果共有10个重要靶标蛋白，包括RAC－α丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT1)、白介素－6(IL－6)、肿瘤坏死因子(TNF)、白介素－1β(IL－1β)、血管内皮生长因子A(VEGFA)、细胞肿瘤抗原p53(TP53)、基质金属蛋白酶－9(MMP9)、CASP3、PTGS2、人超敏C－C趋化因子2(CCL2)。富集分析提示主要信号通路包括脂质与动脉粥样硬化通路、AGE－RAGE信号通路、癌症通路、肿瘤坏死因子信号通路、HIF－1信号通路、IL－17信号通路等。结论:丹皮－赤芍药对可能通过活性成分槲皮素、山奈酚、芍药苷等，作用于PTGS2、RELA、PIK3CG、BAX、BCL2、CASP3等靶蛋白，通过TNF相关信号通路、HIF－1信号通路、IL－17信号通路等产生对脓毒症的干预效应；但尚需进一步实验验证。

目的:基于药食同源理论，通过网络药理学探讨饮久舒治疗非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）的分子机制，并进行实验验证。方法:通过TCMSP筛选饮久舒药物活性成分和靶点。利用Cytoscape 3.7.2构建饮久舒“中药-成分-靶点”网络。利用TTD、GeneCards、DisGeNET等数据库获取NAFLD的潜在靶点，利用Venn图进行靶点映射获取饮久舒与NAFLD的交集靶点。在STRING数据库获取交集靶点的高置信度交互作用关系，筛选饮久舒治疗NAFLD的核心靶点。利用DAVID数据库对交集靶点进行GO功能富集分析及KEGG通路富集分析。通过动物实验进行验证，将48只大鼠按随机数字表法分为空白组、模型组、西药组及饮久舒高、中、低剂量组，每组8只。除空白组外，其余各组大鼠以高脂饲料喂养制备NAFLD模型，各组给予相应药物进行干预，定期称量大鼠体重，采用ELISA法检测大鼠血清GPT、GOT、TC、TG、IL-6、TNF-α、髓过氧化物酶（MPO）水平，计算肝指数，采用HE染色观察肝细胞脂肪变性程度，采用Western blot法检测CAT、NOS3、SOD、PI3K、p-Akt、Akt蛋白表达。结果:获得NAFLD相关靶点8 418个，饮久舒组方药物活性成分118个，作用于NAFLD的靶点共137个，核心靶点包括IL-6、TNF、VEGFA、TP53、JUN、CAT、NOS3、SOD等。KEGG通路富集通路筛选出20条相关信号通路，其中PI3K/Akt通路、钙离子通路、cAMP通路、TNF通路可能在治疗NAFLD中发挥关键作用。饮久舒与NAFLD的炎症反应、氧化应激、血管生成、自噬及细胞增殖、分化、代谢、凋亡等密切相关，或可通过促进细胞凋亡、抑制细胞增殖及迁移等方面治疗NAFLD。动物实验结果显示，饮久舒可降低NAFLD大鼠体重、肝湿重、肝指数，降低血清GPT、GOT、TG、TC及IL-6、TNF-α、MPO水平，上调肝组织CAT、NOS3、SOD表达，并激活PI3K/Akt通路关键蛋白。结论:饮久舒可通过抑制炎症介质释放，改善肝细胞脂代谢紊乱，修复氧化应激损伤，促进肝功能恢复等途径，发挥治疗NAFLD的作用。

目的:基于网络药理学、分子对接与体内实验探究舒尔经胶囊治疗原发性痛经的作用机制。方法:运用TCMSP筛选舒尔经胶囊的有效成分及靶点，通过GeneCards、DrungBank数据库检索原发性痛经靶点蛋白，并通过微生信在线平台获取药物和疾病的交集靶点。利用Cytoscape 3.9.1软件构建舒尔经胶囊治疗原发性痛经的成分-靶点网络，通过STRING数据库构建药物-疾病PPI网络，利用DAVID数据库进行GO功能及KEGG通路富集分析。取药物关键活性成分和疾病核心靶点进行分子对接。将大鼠按随机数字表法分为对照组，模型组，舒尔经胶囊低、中、高剂量组（0.15、0.21、0.42 g/kg），布洛芬组（20 mg/kg），每组10只。通过皮下注射苯甲酸雌二醇建立原发性痛经动物模型，并给予相关药物干预。观察大鼠扭体反应次数、子宫收缩抑制率和子宫指数，采用ELISA法检测大鼠血清TNF-α、IL-6、IL-1水平及子宫组织前列腺素G合成酶2（PTGS2）、血管内皮生长因子A（VEGFA）水平。结果:得到舒尔经胶囊药物有效成分188个，舒尔经胶囊治疗原发性痛经靶点共51个，其中TNF、IL-6、AKT1、TP53等可能是其关键靶点。共获得519条GO生物过程和119条相关信号通路，其中雌激素、IL-17、HIF-1等信号通路与原发性痛经密切相关。分子对接结果良好，其中豆甾醇与TP53结合能力较强。实验结果表明，与模型组比较，舒尔经胶囊低、中、高剂量组子宫指数与扭体次数降低（ P<0.05），子宫收缩抑制率升高（ P<0.05）；舒尔经胶囊中、高剂量组血清TNF-α、IL-6、IL-1水平降低（ P<0.05），子宫组织中PTGS2、VEGFA水平降低（ P<0.05）。 结论:舒尔经胶囊具有抗炎、改善缺氧等作用，可能与抑制血清中TNF-α、IL-6、IL-1炎症因子及子宫组织中PTGS2、VEGFA蛋白表达有关。

目的 观察蕲艾(Artemisia argyi Levl.et Van.var.argyi cv.Qiai)挥发油对感染性皮肤创口愈合的作用并探索其机制.方法 将 30 只雄性昆明小鼠随机分为 5 组:空白对照组、膜剂基质组、阳性对照组(3 mL·kg-1 莫匹罗星软膏)、低剂量膜剂组(每贴含 7.3 mg蕲艾挥发油)和高剂量膜剂组(每贴含 57.6 mg蕲艾挥发油).小鼠麻醉后在背部剪一直径 10 mm的全层皮肤圆形伤口,止血后在创口处涂抹 100 μL金黄色葡萄球菌菌液(1.5×108 CFU·mL-1),各组采取前述方式处理伤口,每日换药并观察皮肤创面愈合情况.术后12 d处死小鼠取创面皮肤做HE和Masson染色,观察病理学特征;利用qPCR和Western blot检测创口皮肤组织愈合相关因子Col1a1、Col3a1、Fn1、VEGFA及炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA和PI3K/Akt信号通路蛋白的表达.在小鼠胚胎成纤维细胞NIH-3T3 利用PI3K抑制剂PI-103 探究蕲艾挥发油对PI3K/Akt信号通路活性的潜在影响.结果 动物实验表明,与空白对照组相比,低剂量和高剂量膜剂组的相对创口面积显著降低;创口组织的炎性细胞浸润减少,胶原纤维表达增加;qPCR显示,与空白对照组相比,低剂量和高剂量膜剂组的VEGFA、Col3a1 和Col1a1 mRNA的表达显著上升,炎症因子IL-1β和TNF-α mRNA表达降低;Western blot结果表明,与空白对照组相比,低剂量和高剂量给药组的p-PI3K/PI3K及p-Akt/Akt比值均显著上升并呈现剂量依赖性.细胞实验结果也证实,蕲艾挥发油对NIH-3T3 细胞的PI3K/Akt信号通路存在调控作用.结论 蕲艾挥发油可促进创口愈合,其机制可能与激活PI3K/Akt信号通路,抑制炎症因子表达及促进胶原表达有关.