Background::Myocardial infarction occurs due to insufficient (ischemia) blood supply to heart for long time; plasmacytoma variant translocation 1 (PVT1) is a long non-coding RNAs (lncRNAs) involved in the pathogenesis of various diseases, including heart disease; However, few studies have explored its role. The present study evaluated the effects of lncRNA PVT1 on hypoxic rat H9c2 cells.Methods::Hypoxic injury was examined by measuring cell viability and apoptosis by using cell counting kit-8 activity and flow cytometry assays. Gene expressions after hypoxia were estimated by quantitative real time polymerase chain reaction and the signaling pathway were explored by Western blot analysis. RNA immunoprecipitation and luciferase reporter assays were applied to examine the interactions among genes. Data were analyzed using t-test with one-way or two-way analysis of variance. Results::The lncRNA PVT1 is up-regulated in hypoxia-stressed H9c2 cells and knockdown of PVT1 mitigates hypoxia-induced injury in H9c2 cells. PVT1 acts as a sponge for miR-135a-5p and knockdown of PVT1 attenuated the increased hypoxia-induced injury by up-regulating miR-135a-5p. Forkhead box O1 ( FOXO1) was identified as a target of miR-135a-5p, and the expression was negatively regulated by miR-135a-5p. The exploration of the underlying mechanism demonstrated that knockdown of FOXO1 reversed PVT1/miR-135a-5p mediated hypoxia-induced injury in H9c2 cells. Conclusions::PVT1 plays a crucial role in hypoxia-injured H9c2 cells through sponging miR-135a-5p and then positively regulating FOXO1.

目的:观察微小RNA(miRNA，miR)-135a沉默对急性肾损伤大鼠肾功能保护作用并探讨其分子机制。方法:将2018年6月到2019年12月购自河南实验动物中心的60只SD大鼠按照随机数字表法分为对照组、模型组和miR-135a组。miR-135a组通过腹腔注射沉默miR-35a的腺相关病毒1×10 11 vg/只；对照组和模型组通过腹腔注射对照miRNA腺相关病毒1×10 11 vg/只。3组大鼠接种15 d后，模型组和miR-35a组连续15 d注射庆大霉素50 mg/kg建立急性肾损伤模型；对照组连续15 d注射等体积生理盐水。建模成功48 h后处死小鼠，采用自动生化仪分析大鼠血肌酐和血尿氮水平；采用苏木精-伊红(HE)染色分析肾脏病理学变化；采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析趋化因子2(CCL2)和趋化因子3(CCL3) mRNA表达水平；采用酶联免疫吸附试验(ELISA)分析3组大鼠外周血炎性因子水平；采用蛋白质印迹法(Western blot)分析miR-135a靶蛋白叉头蛋白转录因子O1(FoxO1)表达水平。计量资料比较采用单因素方差分析。 结果:miR-135a组大鼠肾组织病理评分[(5.19±1.38)分]显著低于模型组[(8.09±3.09)分]，差异有统计学意义( t＝3.193， P<0.05)。miR-135a组大鼠造模48 h后血肌酐和尿素氮水平[(73.76±9.43)、(12.60±4.01) mmol/L]显著低于模型组[(130.37±10.54)、(29.43±5.12) mmol/L]，差异有统计学意义( t＝2.941、3.019， P<0.05)。miR-135a组大鼠肾组织CCL2和CCL3 mRNA表达水平(1.59±0.12、1.73±0.19)显著低于模型组(3.42±0.38、2.51±0.29)，差异有统计学意义( t＝2.012、2.240， P<0.05)。miR-135a组大鼠血清白细胞介素(IL)-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平[(165.76±14.36)、(196.250±15.65) pg/ml]显著低于模型组[(252.32±21.44)、(318.02±27.36) pg/ml]，差异有统计学意义( t＝3.212、3.937， P<0.05)。miR-135a组大鼠肾组织FoxO1蛋白表达水平(0.29±0.09)显著高于模型组(0.12±0.07)，差异有统计学意义( t＝2.719， P<0.05)。 结论:miR-135a沉默通过上调FoxO1蛋白表达水平，降低急性肾损伤大鼠炎症水平，保护大鼠肾功能。

目的:探讨消化性溃疡合并幽门螺杆菌（ Hp）感染患者血清微小RNA（miR）-155和miR-135b-5p表达水平及其临床意义。 方法:采用前瞻性研究的方法，连续选取济宁医学院附属医院2021年7月至2023年2月消化性溃疡患者263例。其中，经 14C呼气试验确定为 Hp感染146例（ Hp感染组），未合并 Hp感染117例（非 Hp感染组）；免疫印迹法确定Ⅰ型 Hp感染110例，Ⅱ型 Hp感染36例。采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测血清miR-155和miR-135b-5p表达水平，放射免疫法检测血清胃泌素水平，酶联免疫吸附法检测血清胃蛋白酶原（PG）Ⅰ和PG Ⅱ水平；记录患者基本临床资料。采用多因素Logistic回归分析影响消化性溃疡患者发生 Hp感染的独立危险因素；采用受试者工作特征（ROC）曲线分析血清miR-155和miR-135b-5p对消化性溃疡患者发生 Hp感染的诊断价值。 结果:Hp感染组胃泌素、PG Ⅰ、PG Ⅱ、溃疡出血率和复发比例明显高于非 Hp感染组[（108.47 ± 15.35）ng/L比（79.63 ± 10.58）ng/L、（295.41 ± 37.26）pg/L比（236.75 ± 29.17）pg/L、（44.08 ± 8.52）pg/L比（39.29 ± 6.74）pg/L、25.34%（37/146）比15.38%（18/117）和21.92%（32/146）比11.97%（14/117）]，差异有统计学意义（ P<0.01或<0.05）。 Hp感染组血清miR-155和miR-135b-5p明显高于非 Hp感染组（1.94 ± 0.63比0.95 ± 0.29和1.86 ± 0.57比1.03 ± 0.31），差异有统计学意义（ P<0.01）。Ⅰ型 Hp感染患者血清miR-155和miR-135b-5p明显高于Ⅱ型 Hp感染患者（2.05 ± 0.66比1.60 ± 0.54和1.97 ± 0.61比1.52 ± 0.45），差异有统计学意义（ P<0.01）。多因素Logistic回归分析结果显示，血清miR-155、miR-135b-5p、胃泌素、PG Ⅰ是影响消化性溃疡患者发生 Hp感染的独立危险因素（ OR = 1.443、1.436、1.452和1.438，95% CI 1.165～1.787、1.146～1.799、1.187～1.777和1.150～1.798， P<0.01）。ROC曲线分析结果显示，血清miR-155和miR-135b-5p联合诊断消化性溃疡患者发生 Hp感染的曲线下面积明显大于血清miR-155和miR-135b-5p单独诊断（0.907比0.839和0.836， Z = 2.57和2.81， P = 0.010和0.005）。 结论:消化性溃疡合并 Hp感染患者血清miR-155和miR-135b-5p水平较高，两者联合检测对消化性溃疡患者发生 Hp感染具有较高的诊断价值。

目的:探讨环状RNA小脑变性相关蛋白1反义转录物(circCDR1as)对人肺动脉平滑肌细胞(HPASMC)增殖、迁移和侵袭的影响及其机制。方法:体外培养HPASMC，缺氧诱导后干扰circCDR1as表达、抑制或过表达微小RNA-135a-5p(miR-135a-5p)以及过表达Janus激酶2(JAK2)。实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测细胞中circCDR1as、miR-135a-5p表达；蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞中JAK2、信号转导和转录激活因子3(STAT3)蛋白表达。组间差异比较采用 t检验。 结果:缺氧组circCDR1as表达水平和磷酸化JAK2(p-JAK2)/JAK2、磷酸化STAT3(p-STAT3)/STAT3比值高于常氧组(1.98±0.07比1.01±0.05、0.62±0.06比0.18±0.04、0.56±0.05比0.15±0.03)，miR-135a-5p表达水平低于常氧组(0.52±0.05比1.00±0.04)，差异有统计学意义( t＝27.620、14.946、17.223、18.362， P<0.05)。si-circCDR1as组circCDR1as表达水平、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3比值和细胞活力、迁移细胞数、侵袭细胞数低于si-NC组(0.41±0.05比1.02±0.06、0.41±0.05比0.61±0.05、0.38±0.03比0.54±0.04、0.42±0.04比0.73±0.06、75.64±17.95比145.38±26.42、68.96±16.82比121.05±24.80)，miR-135a-5p表达水平高于si-NC组(1.73±0.06比1.03±0.05)，差异有统计学意义( t＝19.131、6.928、7.838、10.530、5.348、4.258、21.954， P<0.05)。 结论:circCDR1as通过靶向抑制miR-135a-5p表达激活JAK2/STAT3信号通路，促进缺氧诱导的HPASMC增殖、迁移和侵袭。

目的:探讨Linc00339对三阴乳腺癌发生发展的作用及其相关分子机制。方法:采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测人乳腺正常上皮细胞和乳腺癌细胞中Linc00339的表达水平；采用质粒转染试验在MDA-MB-231细胞中过表达Linc00339；采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测MDA-MB-231细胞的活性；采用黏附试验、Transwell试验分别检测MDA-MB-231细胞的黏附、侵袭和迁移能力；采用Western blot检测MDA-MB-231细胞中APC、Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达水平；采用qRT-PCR法检测MDA-MB-231细胞中miRNA-135a、miRNA-135b及miRNA-138的表达水平；将体外转染成功的MDA-MB-231细胞接种于裸鼠体内建立荷瘤裸鼠模型，观察和测量肿瘤块的体积和重量，采用Western blot检测裸鼠瘤体组织中APC、Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达水平，采用qRT-PCR法检测裸鼠瘤体组织中miRNA-135a、miRNA-135b及miRNA-138的表达水平。结果:与乳腺正常上皮细胞组(Hs578Bst)相比，乳腺癌细胞组(MCF-7、MDA-MB-468、MDA-MB-231)的Linc00339表达水平均显著上调，以三阴乳腺癌MDA-MB-231细胞尤为显著；转染实验结果表明与pcDNA3.1组相比，Linc00339转染显著上调Linc00339表达水平并可显著增加MDA-MB-231细胞的活力；Linc00339过表达能够显著增加MDA-MB-231细胞的增殖、黏附、迁移和侵袭能力，增加荷瘤裸鼠肿瘤块的体积和重量；Western blot结果均表明体内外Linc00339过表达能够下调APC蛋白的表达和上调Wnt/β-catenin信号蛋白的表达，同时qRT-PCR结果表明Linc00339过表达能够上调miRNA-135b表达水平，而对miRNA-135a和miRNA-138无影响。结论:Linc00339可能通过miR-135b/APC介导的Wnt/β-catenin信号通路促进三阴乳腺癌的发生和发展。

目的：:研究microRNA-135a/b（miR-135a/b）对葡萄膜黑色素瘤（UM）细胞迁移能力的调控作用及其机制。方法：:实验研究。采用定量RT-PCR检测UM标本和癌旁组织中miR-135a/b的表达水平。将miRNA模拟物转染入UM细胞（M23和SP6.5）过表达miR-135a/b，转染无义序列作为对照组（NC）。利用小RNA干扰技术和慢病毒过表达载体感染技术分别下调和上调细胞中SIRT1蛋白表达水平，分别以无义小干扰RNA（siNC）和插入无义序列的慢病毒载体（Lv-NC）作为阴性对照。采用划痕实验和Transwell实验检测细胞的迁移能力。双萤光素酶报告实验用于鉴定miR-135a/b的靶基因。Western blot检测SIRT1蛋白的表达水平。采用独立样本 t检验进行数据分析。 结果：:定量RT-PCR结果显示miR-135a/b在UM组织较癌旁组织的表达水平明显下调（miR-135a： t=6.38， P=0.003；miR-135b： t=23.26， P<0.001）。划痕实验和Transwell实验结果显示，与NC组相比，miR-135a/b过表达M23和SP6.5细胞迁移距离减小（miR-135a： t=36.01、8.98，均 P<0.01；miR-135b： t=27.53、10.51，均 P<0.01）且迁移细胞数量减少（miR-135a： t=7.04、7.02，均 P<0.01；miR-135b： t=5.01、7.32，均 P<0.01）。双萤光素酶实验证实，miR-135a/b能够明显抑制SIRT1野生组萤光素酶的荧光值（miR-135a： t=2.88， P=0.028；miR-135b： t=4.99， P=0.003）；Western blot结果表明，与NC组相比，过表达miR-135a/b的M23和SP6.5细胞中SIRT1的蛋白水平下调（miR-135a： t=9.93、4.13，均 P<0.01；miR-135b： t=4.66、6.20，均 P<0.01）。siSIRT1转染后划痕实验和Transwell实验结果显示，与siRNC组相比，M23和SP6.5细胞中下调SIRT1蛋白水平后细胞的迁移距离减小（siSIRT1-I： t=13.88、11.78，均 P<0.01；siSIRT1-II： t=31.20、6.27，均 P<0.01）且迁移细胞数量减少（siSIRT1-I： t=7.57、4.66，均 P<0.01；siSIRT1-II： t=5.58、3.25，均 P<0.05）。M23和SP6.5细胞中上调SIRT1蛋白水平同时过表达miR-135a/b，Transwell实验结果显示，细胞的迁移数量较仅过表达miR-135a/b升高（miR-135a+Lv-SIRT1： t=4.10、2.75，均 P<0.05；miR-135b+Lv-SIRT1： t=2.99、2.49，均 P<0.05）。 结论：:miR-135a/b在UM中明显下调且通过靶向结合SIRT1 mRNA 3'非翻译区抑制UM细胞的迁移，提示miR-135a/b-SIRT1信号轴在UM发展中发挥重要作用。

目的:探讨miRNA-146a（miR-146a）、miRNA-196a2（miR-196a2）和miRNA-499（miR-499）单核苷酸多态性与肝细胞癌遗传易感性的关系。方法:采用病例对照研究设计。选取扬州大学附属医院2015年4月至2019年3月收治的肝细胞癌患者175例（肝细胞癌组）及同时期门诊体检的302名健康体检者（对照组）。应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性法检测两组外周血中miR-146a、miR-196a2和miR-499基因分型的分布情况，采用logistic回归模型分析3个miRNA的基因型、肝炎病毒感染者基因型与肝细胞癌遗传易感性的关系，采用Spearman相关分析法研究miR-146a基因多态性与人口学因素及临床特征间的关系。结果:肝细胞癌组miR-146a单核苷酸多态性位点CC、CG、GG基因型分别为52例（29.7%）、86例（49.1%）、37例（21.1%），对照组分别为137名（45.4%）、135名（44.7%）、30名（9.9%），两组间基因型分布差异有统计学意义（ χ2=17.23， P<0.05）；两组间miR-196a2和miR-499各基因型分布差异均无统计学意义（ χ2=0.51， P=0.776； χ2=0.05， P=0.976）。单因素logistic回归分析显示，miR-146a基因型共显性模型中，与CC基因型相比，CG基因型（ OR=1.96，95% CI 1.13~3.41， P=0.017）和GG基因型（ OR=3.30，95% CI 1.85~5.89， P<0.01）发生肝细胞癌的风险升高；在显性模型中，与CC基因型相比，CG+GG基因型发生肝细胞癌的风险升高（ OR=1.97，95% CI 1.33~2.93， P=0.001）；在隐性模型中，与CG+GG基因型相比，GG基因型发生肝细胞癌的风险升高（ OR=2.43，95% CI 1.44~4.11， P=0.001）。单因素logistic回归分析显示，在miR-196a2和miR-499基因型共显性、显性及隐性模型中，各基因型间肝细胞癌发生风险差异均无统计学意义（均 P>0.05）。在乙型肝炎病毒（HBV）阳性的肝细胞癌患者中，miR-146a的CG和GG基因型发生肝细胞癌的风险分别是CC基因型的2.02倍（95% CI 1.06~5.07）和3.12倍（95% CI 1.66~10.07），CG+GG基因型是CC基因型的1.91倍（95% CI 1.85~3.38），GG基因型是CG+GG型的1.54倍（95% CI 1.15~6.08）；在丙型肝炎病毒（HCV）感染或无HBV和HCV感染的肝细胞癌患者中，未发现miR-146a基因多态性增加肝细胞癌发生的风险。Spearman相关分析显示，miR-146a多态性与患者年龄、性别、吸烟、饮酒、肿瘤家族史、丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶均无相关性（均 P>0.05）。 结论:miR-146a的GG和CG基因型增加肝细胞癌尤其HBV感染患者的遗传易感性；miR-196a2和miR-499单核苷酸多态性未增加肝细胞癌的发生风险。

目的:探讨微小RNA(miR)-135a对骨肉瘤干细胞(OSCs)迁移、侵袭和自我更新的影响。方法:微球体筛选移植瘤原代细胞的OSCs(P-OSCs)和Saos-2的OSCs(S-OSCs)。实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测分化群(CD)CD133、CD44、CD24和BMI1的转录水平，蛋白质印迹法(Western blot)检测CD133、CD44、CD24、BMI1和B细胞淋巴瘤2(bcl-2)的蛋白水平。构建miR-135a过表达的P-OSCs或S-OSCs为miR-135a组，相应的阴性病毒转染P-OSCs或S-OSCs为对照组(NC)。划痕、Transwell和球体形成实验分别检测细胞的迁移、侵袭和自我更新能力。采用GraphPad Prism 8.4.2进行分析。结果:miR-135a组P-OSCs和S-OSCs的伤口愈合率[(46.33±11.25)%比(73.46±2.24)%和(31.25±2.61)%比(47.20±1.94)%， t＝3.346、8.489，均 P<0.05]、穿膜细胞数[(287.00±34.29)个比(401.33±14.66)个和(255.67±17.02)个比(574.67±31.58)个， t＝4.336、12.570，均 P<0.05]、成球率[(1.89±0.44)%比(3.72±0.21)%和(1.57±0.17)%比(2.65±0.05)%， t＝5.360、6.789，均 P<0.01]和球体直径均低于NC组[(97.21±8.89) μm比(184.91±15.32) μm和(90.68±7.02) μm比(163.75±14.14) μm， t＝7.003、6.546，均 P<0.01]。CD44和bcl-2蛋白在骨肉瘤组织中表达高于骨组织(分别为0.87±0.11比0.46±0.08和1.96±0.69比0.41±0.13， t＝4.286、3.126，均 P<0.05)，细胞中的表达趋势与组织一致。miR-135a组P-OSCs和S-OSCs中CD44(0.68±0.02比1.02±0.06和0.29±0.01比1.03±0.01， t＝9.311、90.630)和bcl-2(0.46±0.01比0.95±0.01和0.41±0.02比0.84±0.01， t＝60.010、33.310)的蛋白表达量低于NC组，均 P<0.01。 结论:miR-135能够通过抑制CD44和bcl-2抑制OSCs的迁移、侵袭和自我更新。

目的:探讨微小RNA-135a(miR-135a)对骨肉瘤(OS)细胞增殖、迁移和凋亡的影响及可能的机制。方法:构建miR-135a过表达和空载病毒的Saos-2细胞分别为miR-135a UP组(实验组)，Control组(对照组)。采用实时定量反转录聚合酶连锁反应(qRT-PCR)检测c-Myc信使核糖核酸(mRNA)的改变，采用蛋白免疫印迹(Western blot)技术检测c-Myc蛋白及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/雷帕霉素靶蛋白(mTOR)(PAM)通路蛋白的改变。细胞集落形成和细胞计数试剂盒(CCK-8)实验检测细胞增殖能力，划痕和Transwell实验分别检测迁移和侵袭能力，细胞流式技术检测抗凋亡能力，两组比较采用 t检验。 结果:miR-135a表达量实验组高于对照组(59.006±5.034比1.008±0.151， t＝23.031， P<0.01)，c-Myc与PAM通路蛋白表达量实验组低于对照组，细胞增殖能力实验组低于对照组(CCK-8法：1.311±0.048比2.029±0.046， t＝24.301， P<0.01；集落形成：0.210±0.034比1.000±0.016， t＝36.715， P<0.01)，迁移能力实验组低于对照组(0.539±0.097比1.000±0.037， t＝7.694， P<0.01)，侵袭能力实验组低于对照组[(77.333±28.885)/视野比(701.000±77.149)/视野， t＝13.113， P<0.01]，凋亡率实验组高于对照组(87.267±2.616比36.933±5.460， t＝14.399， P<0.01)。 结论:miR-135a通过调控c-Myc及PAM通路抑制OS细胞的增殖、迁移、侵袭及抗凋亡能力。

Systemic sclerosis (SSc) is characterized by immune dysfunction, vasculopathy, chronic fibrosis of skin and internal organs with complex etiology. With the rapid development and the application in biomedicine of epigenetics, accumulating evidence has shown that epigenetics plays an important role in the pathogenesis of SSc. Environmental factors via epigenetics are needed to trigger and maintain for the disease in the subjects with genetic predisposition to SSc. The role of epigenetics in the pathogenesis of SSc includes hypermethylation of the promoter region of nitric oxide synthase and bone morphogenetic protein receptors II, up-regulation of histone deacetylases 4 and 5 expression, and down-regulation of miR-193b and miR-152 in endothelial cells inducing vascular dysfunction; DNA hypermethylation and hypoacetylation of histone H3 and H4 in Friend leukemia virus integration 1 and Kruppel-like factor 5 genes, and the abnormal expression of miR-29, miR-129-5p and miR-135b in fibroblasts causing excessive fibrosis; DNA hypomethylation in the promoter regions of CD11a and CD70 genes in CD4+T cells resulting in immune dysfunction. Studies on the role of epigenetics in SSc are of great significance for better understanding the pathogenic machanism of SSc, which is helpful to find new molecular targets for treating SSc, and consequently, improve the prognosis of SSc.