探讨长链非编码RNA（LncRNA） PCBP1-AS1对口腔鳞癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其对微RNA-196a（miR-196a）的靶向调控作用。研究发现PCBP1-AS1在口腔鳞癌组织中低表达，而miR-196a表达上调；转染pcDNA-PCBP1-AS1或转染anti-miR-196a均可抑制细胞增殖、迁移及侵袭，并可诱导细胞周期停滞于G0-G1期；PCBP1-AS1可靶向调控miR-196a；miR-196a过表达可逆转PCBP1-AS1对细胞生物学行为的作用。PCBP1-AS1可通过下调miR-196a的表达从而抑制口腔鳞癌细胞增殖、迁移及侵袭。

目的:探讨miR-196a-5p、miR-105-5p在良、恶性肺结节患者血清中的表达水平差异及其在恶性肺结节中的诊断价值。方法:分析癌症基因组图谱(TCGA)数据库中肺腺癌、肺鳞状细胞癌癌组织以及癌旁组织miRNA表达水平，筛选癌组织与癌旁组织相比表达水平差异明显的miRNA作为目的miRNA。选取2019年6月至2020年7月在山东省潍坊市人民医院就诊的72例肺结节患者。使用qRT-PCR法检测肺结节患者血清中目的miRNA的表达水平，使用受试者工作特征(ROC)曲线比较目的miRNA与肿瘤标志物Cyfra21-1、NSE、CEA在恶性肺结节中的诊断价值。结果:经筛选确定的目的miRNA为miR-196a-5p、miR-105-5p。纳入良性肺结节组患者26例，恶性肺结节组患者46例。良、恶性结节组血清miR-196a-5p水平[ M( P25， P75)]分别为0.63(0.09，2.15)、1.93(0.93，4.97)，miR-105-5p水平分别为2.03(0.54，7.95)、10.65(5.94，18.39)。与良性肺结节组相比，恶性肺结节组血清miR-196a-5p、miR-105-5p水平升高，差异具有统计学意义( Z＝-3.083， P＝0.002； Z＝-4.092， P<0.001)。良、恶性结节组血清Cyfra21-1水平分别为2.48(1.84，3.78)、2.20(1.47，3.32)μg/L；NSE水平分别为15.58(12.45，18.95)、14.43(12.07，17.87)μg/L；CEA水平分别为1.16(0.55，2.11)、1.17(0.61，1.68)μg/L。良、恶性肺结节组血清Cyfra21-1、NSE、CEA水平差异均不具有统计学意义( Z＝-1.161， P＝0.246； Z＝-0.305， P＝0.761； Z＝-0.271， P＝0.786)。联合miR-196a-5p、miR-105-5p在诊断恶性肺结节中的曲线下面积(AUC)为0.762，敏感性为89.1%，特异性为61.5%，高于联合肿瘤标志物Cyfra21-1、NSE、CEA在诊断恶性肺结节中的价值(AUC为0.591，敏感性为58.7%，特异性为64.5%)。 结论:联合血清miR-196a-5p、miR-105-5p可辅助诊断恶性肺结节，具有较高的诊断价值。

目的:筛选肝癌干细胞来源外泌体中差异表达的miRNA并分析其对肝癌细胞恶性生物学特征的影响。方法:采用miRNA表达谱芯片分析肝癌干细胞来源外泌体中差异表达的miRNA并鉴定miRNA对肝癌干细胞恶性表型的作用。采用不同浓度(0、150、300 μmol/L)多柔比星处理细胞，采用实时定量PCR(qRT-PCR)检测miR-196a表达水平的变化；分别采用肝癌干细胞来源外泌体(Exo-NC组)、转染miR-196a抑制剂处理后的外泌体(Exo-Inhibitor组)培养肝癌细胞，检测肝癌细胞的凋亡情况以及caspase3/7的活性。按照随机数字表法将裸鼠分为Do-PBS组、Do-Exo-Inhibitor组、Do-Exo-NC组，每组各5只，采用裸鼠移植瘤实验分析miR-196a对肝癌细胞裸鼠移植瘤模型的作用。结果:本研究分离纯化了CD133 ＋ Huh7干细胞培养上清中的外泌体，发现miR-7162-3p、miR-1910-5p、miR-3613-3p、miR-196a、miR-155-5p表达上调，miR-1246和miR-3613-5p表达下调。外泌体中miR-7162-3p、miR-196a和miR-155-5p对肝癌干细胞的自我更新能力具有重要影响；miR-1910-5p、miR-196a和miR-155-5p对肝癌干细胞的侵袭能力具有重要影响，其中miR-196a的抑制效果最显著。在反应24 h时，多柔比星浓度在0、150、300 μmol/L时miR-196a的表达量分别为0.96±0.05、1.23±0.05和2.33±0.03，差异具有统计学意义( F＝996.90， P<0.001)；48 h时，多柔比星浓度在0、150、300 μmol/L时miR-196a的表达量分别为1.02±0.07、2.35±0.05和2.89±0.55，差异具有统计学意义( F＝303.00， P<0.001)。Exo-NC组肝癌细胞在多柔比星浓度为0和300 μmol/L时的细胞凋亡率分别为9.37%±0.19%和11.64%±0.27%，Exo-Inhibitor组分别为18.80%±1.91%和22.79%±1.57%，差异均具有统计学意义( t＝4.41， P＝0.048； t＝4.96， P＝0.038)。未使用多柔比星处理时，Exo-NC组在24 h和48 h的caspase3/7比值分别为0.94±0.08和0.97±0.09，Exo-Inhibitor组分别为1.56±0.01和1.58±0.01，差异均具有统计学意义( t＝11.41， P＝0.008； t＝6.07， P＝0.026)。使用300 μmol/L多柔比星处理细胞后，Exo-NC组在24 h和48 h的caspase3/7比值分别为0.95±0.07、1.36±0.08，Exo-Inhibitor组分别为2.84±0.08、3.20±0.14，差异均具有统计学意义( t＝24.20， P＝0.002； t＝15.78， P＝0.004)。Do-PBS组、Do-Exo-Inhibitor组和Do-Exo-NC组3组裸鼠的移植瘤体积依次增大，分别为(1 051.86±89.90)mm 3、(1 310.91±86.66)mm 3和(2 185.14±352.34)mm 3，差异具有统计学意义( F＝30.28， P<0.001)；3组移植瘤重量依次增加，分别为(0.36±0.10)g、(0.39±0.12)g和(0.76±0.16)g，差异具有统计学意义( F＝11.81， P＝0.002)；转染miR-196a抑制剂后裸鼠移植瘤肿瘤内miR-196a的表达显著降低，3组表达量分别为1.05±0.16、0.38±0.08和2.17±0.26，差异具有统计学意义( F＝48.93， P<0.001)。 结论:肝癌干细胞分泌的外泌体可通过其中的miR-196a增强肝癌细胞对多柔比星的耐药性。

目的:探讨基于倾向评分匹配的腹腔镜经自然腔道取标本手术(NOSES)对直肠癌的病理学影响。方法:通过倾向评分匹配的研究方式，纳入承德医学院附属医院从2017年2月至2019年10月收治的89例直肠癌患者作为研究对象。根据手术方式的差异分作研究组44例及对照组45例。对照组开展经辅助切口取标本手术治疗，研究组则采用NOSES治疗。分析两组围术期指标水平，术后并发症发生情况，复发、远处转移以及无病生存率，手术前后环氧合酶-2(COX-2)、前列腺素E2(PGE2)、β-连环蛋白(β-catenin)及微小RNA(miR)-21、miR-196a及miR-23a表达水平等方面的差异，计量资料比较采用 t检验，计数资料开展 χ2检验。 结果:两组术后感染[2.27%(1/44)比4.44%(2/45)]、肠梗阻[2.27%(1/44)比0(0/45)]、吻合口瘘[2.27%(1/44)比4.44%(2/45)]以及切口疝[0(0/44)比2.22%(1/45)]发生率对比均不明显( χ2＝0.322、1.034、0.322、0.989， P>0.05)。两组复发率[4.55%(2/44)比6.67%(3/45)]、远处转移率[4.55%(2/44)比2.22%(1/45)]以及无病生存率[93.18%(41/44)比88.89%(40/45)]对比均不明显( χ2＝0.189、0.369、0.501， P>0.05)。两组治疗后COX-2[(27.60±1.23) ng/ml比(44.12±2.37) ng/ml]、[(28.11±1.34) ng/ml比(44.20±2.51) ng/ml]、PGE2[(31.25±1.73) pg/ml比(42.15±2.37) pg/ml]、[(31.36±1.80) pg/ml比(42.35±2.40) pg/ml]以及β-catenin[(41.56±2.73) ng/ml比(61.78±3.81) ng/ml]、[(42.33±2.76) ng/ml比(62.34±3.85) ng/ml]表达水平均低于同组治疗前( t＝41.039、24.641、28.616、37.935、24.574、28.336， P<0.05)。两组治疗后表达水平均低于同组治疗前[miR-21(1.03±0.18比4.13±0.56、2.54±0.23比4.09±0.42、miR-196a(1.02±0.25比1.71±0.25、1.27±0.18比1.69±0.31)及miR-23a(0.94±0.25比2.54±0.46)、(1.21±0.17比2.49±0.47)， t＝34.958、12.946、20.272、21.714、7.860、17.180， P<0.05]，且研究组低于对照组(1.03±0.18比2.54±0.23、1.02±0.25比1.27±0.18、0.94±0.25比1.21±0.17， t＝34.439、5.423、5.970， P<0.05)。 结论:NOSES治疗直肠癌的中长期疗效和传统腹腔镜手术相当，但患者术后恢复较快。

目的:探讨全基因组测序筛选非小细胞肺癌(NSCLC)敏感甲基化位点的肺癌早期预警体系的构建。方法:本研究选择2014年3月至2016年11月在江南大学附属医院肿瘤科接受NSCLC手术切除的患者。实验分为两组：正常组织、非小细胞肺癌组织，通过实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测NSCLC细胞中切除修复交叉互补基因1(ERCC1)、β-微管蛋白Ⅲ(TUBB3)和核糖核苷还原酶调节因子1(RRM1) mRNA的表达；通过全基因组测序检测NSCLC细胞甲基化在基因上分布，使用测序数据进行胞嘧啶(C)-磷酸(p)-鸟嘌呤(G)甲基化图谱分析(CpG甲基化分析)，组蛋白修饰数据分析组蛋白修饰和DNA甲基化之间的关系，通过蛋白质免疫检测正常组织和非小细胞肺癌组织中组蛋白甲基化蛋和甲基化相关酶的表达。 t检验(或Wilcoxon秩和检验)和 χ2检验(或Fisher精确检验)分别用于分析连续和分类变量。Pearson(或Spearman)的秩相关系数用于分析两个连续变量之间的相关性。使用R软件(版本3.1.1)进行统计分析。 结果:与对照细胞比较，NSCLC细胞中ERCC1[(0.78±0.14)比(0.12±0.04)， χ2＝6.370， P<0.05]、TUBB3[(0.48±0.11)比(0.08±0.02)， χ2＝1.240， P<0.05]和RRM1 mRNA[(0.52±0.07)比(0.05±0.01)， χ2＝5.360， P<0.05]的表达下调表达；NSCLC组甲基化水平在转录起始位点升高，在基因间区降低( χ2＝3.140， P<0.05)；NSCLC组发现9个CpG的甲基化敏感位点(RUNX3、MIR196A1、HOXA11、OTP、GATA4、PTPRU、SLC15A3、ZIC1和TFAP2B)；NSCLC组与对照组比较，组蛋白乙酰化(H3K9ac[(43.57±8.84)比(10.64±4.35)， χ2＝8.730， P<0.05]和H3K27ac[ (40.52±8.64)比(9.67±3.58)， χ2＝5.470， P<0.05])和组蛋白甲基化(H2az[(42.56±9.74)比(12.47±6.05)， χ2＝7.420， P<0.05]，H3K4me1[(37.47±6.42)比(15.46±7.34)， χ2＝5.380， P<0.05]，H3K4me2[(50.37±10.24)比(9.47±6.54)， χ2＝9.270， P<0.05]，H3K4me3[(52.37±6.49)比(10.58±5.88)， χ2＝1.690， P<0.05]和H3K79me2[(34.55±6.42)比(11.23±6.94)， χ2＝3.450， P<0.05])降低；NSCLC组DNMT1(1.88±0.24)比(0.12±0.01)， χ2＝5.430， P<0.05]、DNMT3a(1.75±0.36)比(0.49±0.11)， χ2＝7.890， P<0.05]、DNMT3b(0.88±0.14)比(0.13±0.05)， χ2＝1.360， P<0.05]、H3K4me3(2.53±0.35)比(0.35±0.08)， χ2＝5.440， P<0.05]和H3K9me2(0.55±0.07)比(0.05±0.01)， χ2＝3.270， P<0.05]下调表达( P<0.05)。 结论:组蛋白修饰和DNA甲基化密切相关，组蛋白甲基化和甲基化相关酶的表达也受到影响，甲基化敏感位点可以作为早期检测NSCLC的生物标志物。

目的:探讨长链非编码RNA PVT1（lncRNA PVT1）在胃癌（GC）组织中的表达及临床意义。方法:首先通过实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测196例GC组织中lncRNA PVT1表达，采用 χ2检验分析其与临床病理特征间关系。利用 t检验分析26例GC组织中微小RNA（miR）-30a-3p表达；然后对具有随访资料的182例GC患者，进行生存分析和Cox回归分析。 结果:RT-qPCR检测结果显示：癌组织中lncRNA PVT1的表达水平显著高于癌旁组织（0.33±0.15比0.28±0.13， t＝3.746， P<0.01）。lncRNA PVT1表达水平与GC肿瘤大小（ χ2＝8.610， P<0.01）、癌组织分化程度（ χ2＝4.927， P<0.05）、浸润深度（ χ2＝5.940， P<0.05）、pTNM分期（ χ2＝4.675， P<0.05）及淋巴结转移（ χ2＝4.712， P<0.05）呈现显著相关性。而GC组织中miR-30a-3p的表达水平显著低于癌旁组织（0.210±0.156比0.302±0.177， t＝2.378， P<0.05）。生存分析显示：lncRNA PVT1高表达组患者总生存期（OS）明显短于低表达组[风险比（ HR）＝1.746，95%可信区间（ CI）：1.154～2.642， P<0.01]。 结论:lncRNA PVT1在GC组织中存在表达上调，miR-30a-3p在GC组织中表达下调，lncRNA PVT1的表达水平与GC患者的临床病理特征明显相关，并且与GC患者的预后明显相关。

目的:探讨微RNA（miRNA）单核苷酸多态性与慢性自发性荨麻疹（CSU）的风险关联。方法:采用病例对照研究，收集2019年1-6月在济宁医学院附属医院皮肤科诊治的98例CSU患者及同期148例健康对照，均为山东籍汉族，采集静脉血后提取基因组DNA，针对miRNA多态性位点rs2431697（miR-146a）、rs57095329（miRNA-146a）、rs3746444（miRNA-499）、rs11614913（miRNA-196a2）和rs895819（miRNA-27a）行多重PCR扩增反应和单碱基延伸反应，进行单核苷酸多态性（SNP）位点分型。采用 χ2检验分析组间等位基因、基因型及遗传模型分布差异，非条件Logistic回归分析基因SNP与疾病发生风险的关系。 结果:所有样本SNP均成功分型。miRNA-196a2 SNP位点rs11614913等位基因为T/C，病例组等位基因T频数110（56.1%），对照组131（44.3%），两组T/C频率分布差异有统计学意义（ χ2 = 6.64， P = 0.010），该位点等位基因T可能是CSU发生的危险因素（ OR = 1.61，95% CI：1.12 ~ 2.32）。病例组rs11614913基因型CC、CT、TT频数分别为16（16.3%）、54（55.1%）、28（28.6%），对照组为48（32.4%）、69（46.6%）、31（20.9%），两组基因型分布差异有统计学意义（ χ2 = 8.16， P = 0.017）；两组显性遗传模型（TT+CT与CC）分布差异亦有统计学意义（ χ2=7.95， P = 0.005），显性遗传模型可能增加了CSU发病风险（ OR=2.46，95% CI：1.30 ~ 4.65）。 结论:我国山东汉族人群miRNA-196a2 SNP与CSU风险可能存在关联，rs11614913可能会增加CSU发病风险。

目的:探讨miRNA-146a（miR-146a）、miRNA-196a2（miR-196a2）和miRNA-499（miR-499）单核苷酸多态性与肝细胞癌遗传易感性的关系。方法:采用病例对照研究设计。选取扬州大学附属医院2015年4月至2019年3月收治的肝细胞癌患者175例（肝细胞癌组）及同时期门诊体检的302名健康体检者（对照组）。应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性法检测两组外周血中miR-146a、miR-196a2和miR-499基因分型的分布情况，采用logistic回归模型分析3个miRNA的基因型、肝炎病毒感染者基因型与肝细胞癌遗传易感性的关系，采用Spearman相关分析法研究miR-146a基因多态性与人口学因素及临床特征间的关系。结果:肝细胞癌组miR-146a单核苷酸多态性位点CC、CG、GG基因型分别为52例（29.7%）、86例（49.1%）、37例（21.1%），对照组分别为137名（45.4%）、135名（44.7%）、30名（9.9%），两组间基因型分布差异有统计学意义（ χ2=17.23， P<0.05）；两组间miR-196a2和miR-499各基因型分布差异均无统计学意义（ χ2=0.51， P=0.776； χ2=0.05， P=0.976）。单因素logistic回归分析显示，miR-146a基因型共显性模型中，与CC基因型相比，CG基因型（ OR=1.96，95% CI 1.13~3.41， P=0.017）和GG基因型（ OR=3.30，95% CI 1.85~5.89， P<0.01）发生肝细胞癌的风险升高；在显性模型中，与CC基因型相比，CG+GG基因型发生肝细胞癌的风险升高（ OR=1.97，95% CI 1.33~2.93， P=0.001）；在隐性模型中，与CG+GG基因型相比，GG基因型发生肝细胞癌的风险升高（ OR=2.43，95% CI 1.44~4.11， P=0.001）。单因素logistic回归分析显示，在miR-196a2和miR-499基因型共显性、显性及隐性模型中，各基因型间肝细胞癌发生风险差异均无统计学意义（均 P>0.05）。在乙型肝炎病毒（HBV）阳性的肝细胞癌患者中，miR-146a的CG和GG基因型发生肝细胞癌的风险分别是CC基因型的2.02倍（95% CI 1.06~5.07）和3.12倍（95% CI 1.66~10.07），CG+GG基因型是CC基因型的1.91倍（95% CI 1.85~3.38），GG基因型是CG+GG型的1.54倍（95% CI 1.15~6.08）；在丙型肝炎病毒（HCV）感染或无HBV和HCV感染的肝细胞癌患者中，未发现miR-146a基因多态性增加肝细胞癌发生的风险。Spearman相关分析显示，miR-146a多态性与患者年龄、性别、吸烟、饮酒、肿瘤家族史、丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶均无相关性（均 P>0.05）。 结论:miR-146a的GG和CG基因型增加肝细胞癌尤其HBV感染患者的遗传易感性；miR-196a2和miR-499单核苷酸多态性未增加肝细胞癌的发生风险。

目的:探究过量氟暴露对小鼠睾丸微小RNA（microRNA，miRNA）表达谱的影响，并探讨氟的生殖毒性机制。方法:24只8周龄C57BL/6J雄性小鼠，体重为（23 ± 1）g，按体重采用随机数字表法分为对照组[0 mg/L氟化钠（NaF）]和氟暴露组（50 mg/L NaF），每组12只，处理90 d后麻醉处死小鼠，采集精子检测其数量、活率、畸形率，并对睾丸组织进行HE染色；提取小鼠睾丸组织RNA，利用高通量测序技术检测氟对小鼠睾丸miRNA表达谱的影响，并进行差异表达miRNA筛选及其靶基因预测，同时进行功能注释和通路富集分析；利用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）验证差异表达miRNA的表达量。结果:与对照组[精子数量：（11.30 ± 2.52）× 10 6/ml、活率：（90.07 ± 4.34）%、畸形率：（15.49 ± 3.25）%]相比，氟暴露组小鼠精子数量[（9.01 ± 2.25）× 10 6/ml]和活率[（84.34 ± 4.21）%]均下降（ P = 0.041、0.003），而畸形率[（22.36 ± 6.51）%]上升（ P = 0.003）；且HE染色显示，氟暴露组小鼠睾丸间质间距增大，生精小管管腔内精子数量减少，细胞排列紊乱。通过测序，发现氟暴露组小鼠睾丸中存在34个差异表达miRNA；经qRT-PCR验证，与对照组相比，氟暴露组小鼠睾丸mmu-miR-29b-1-5p（ P < 0.001）、mmu-miR-196a-5p（ P = 0.002）和mmu-miR-196b-5p（ P = 0.031）的表达量均显著上升；而mmu-let-7a-2-3p（ P < 0.001）和mmu-miR-466n-3p（ P = 0.018）的表达量均明显下降，与测序结果一致。通过对差异表达miRNA靶基因的KEGG富集，发现氟暴露可改变小鼠睾丸中轴突导向（axon guidance）信号通路、嗅觉传导（olfactory transduction）通路、神经活动配体-受体相互作用（neuroactive ligand-receptor interaction）通路和溶酶体（lysosome）信号通路等。 结论:氟暴露可能通过改变睾丸中miRNA的表达谱，以及通过介导转录后调节的信号通路进而诱导睾丸损伤。睾丸miRNA可能是氟生殖毒性的潜在生物标志物，可为氟中毒机制的探究提供新思路和观点。

微小核糖核酸(miRNAs)是一类广泛存在的内源性单链非编码小RNA，在组织与体液中均稳定表达，通过与信使RNA(mRNA)序列互补来降解靶mRNA，阻断蛋白编码基因的表达，在转录后调控和不同的生物学过程中发挥着关键作用。近年来越来越多的研究表明，miRNAs与肿瘤的发生、发展密切相关。其中，微小核糖核酸-196(miR-196)作为miRNAs家族中的成员之一，在非小细胞肺癌患者的血清、组织及细胞中异常表达，参与非小细胞肺癌的发生、发展，在肿瘤细胞的增殖、侵袭及转移等多种生物学过程中起着重要的调控作用，为非小细胞肺癌的早期筛查提供诊断依据。本文就miR-196在非小细胞肺癌发生、发展及诊断中的研究进展进行综述。