目的:探讨长链非编码RNA（lncRNA）OIP5-AS1、微小RNA（miR）-363-3p与急性心肌梗死（AMI）患者心血管事件发生的相关性。方法:回顾性选取2020年1月至2021年12月恩施土家族苗族自治州中心医院收治的130例AMI患者，治疗后通过门诊或电话形式对AMI患者进行为期1年的随访，记录是否出现心血管事件，将发生心血管事件的患者纳入发生心血管事件组（55例），反之纳入未发生心血管事件组（75例）；另选择同期60例健康体检者作为健康对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测三组血清lncRNA OIP5-AS1、miR-363-3p表达水平；采用Pearson检验分析lncRNA OIP5-AS1、miR-363-3p表达水平的相关性；采用受试者工作特征（ROC）曲线分析血清lncRNA OIP5-AS1、miR-363-3p表达水平对AMI患者心血管事件发生的预测价值；采用Logistic回归分析影响AMI患者心血管事件发生的危险因素。结果:发生心血管事件组和未发生心血管事件组血清lncRNA OIP5-AS1表达水平低于健康对照组（0.41 ± 0.09、0.62 ± 0.15比1.00 ± 0.23），而发生心血管事件组血清lncRNA OIP5-AS1表达水平低于未发生心血管事件组，差异均有统计学意义（ P<0.05）。发生心血管事件组和未发生心血管事件组血清miR-363-3p表达水平高于健康对照组（2.33 ± 0.58、1.78 ± 0.45比1.02 ± 0.28），而发生心血管事件组血清miR-363-3p表达水平高于未发生心血管事件组，差异均有统计学意义（ P<0.05）。Pearson检验结果显示，AMI患者血清miR-363-3p表达水平与lncRNA OIP5-AS1表达水平呈负相关（ r = - 0.476， P<0.05）。ROC曲线分析结果显示，血清lncRNA OIP5-AS1、miR-363-3p表达水平联合预测AMI患者发生心血管事件的曲线下面积（AUC）为0.921（95% CI 0.861 ~ 0.961），灵敏度为92.73%，特异度为81.33%，均高于单一指标检测。Logistic回归分析结果显示，lncRNA OIP5-AS1、miR-363-3p、左室射血分数均是影响AMI患者发生心血管事件的独立危险因素（ P<0.05）。 结论:AMI患者血清lncRNA OIP5-AS1表达降低，miR-363-3p表达升高，两者表达水平与心血管事件发生密切相关，可作为预测AMI患者发生心血管事件的血清学指标。

目的:探究miR-363-5p对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的影响及可能机制。方法:采用实时荧光定量PCR（RT-PCR）检测人正常鼻咽上皮细胞NP-69和鼻咽癌细胞5-8F内的miR-363-5p的表达水平；检测过表达miR-363-5p后，5-8F细胞的增殖能力、凋亡水平以及Bax、Caspase3、BRD4蛋白的表达水平。结果:相对于NP-69细胞，5-8F细胞中的miR-363-5p的表达水平（0.71±0.45）显著降低（ t=2.68， P < 0.05）；过表达miR-363-5p后，5-8F细胞的增殖能力显著降低（ F=22.68， P < 0.05），凋亡细胞［（24.45±5.38）%］显著高于对照组［（18.23±2.41）%］（ t=4.13， P < 0.05），Bax（1.35±0.24）、Caspase3蛋白（1.44±0.34）水平显著高于对照组［（1.00±0.08）、（1.00±0.23）］（ t=3.12、5.12， P < 0.05），而BRD4蛋白的表达水平（0.42±0.24）显著低于对照组（1.00±0.37）（ t=2.98， P < 0.05）。 结论:miR-363-5p能够抑制鼻咽癌细胞的增殖，并且可促进细胞的凋亡。miR-363-5p的肿瘤负性调节作用可能是通过抑制BRD4蛋白的表达发挥的。

目的:旨在探讨小核仁RNA宿主基因4（SNHG4）在胃癌组织中的表达、预后价值及可能作用机制。方法:运用UALCAN数据库分析SNHG4在胃癌中的表达情况；Kaplan-Meier Plotter数据库分析SNHG4与胃癌预后的关系；StarBase、Targetscan、microT-CDS数据库及Cytoscape软件构建SNHG4-miRNA-mRNA调控网络；DAVID数据库对SNHG4相关miRNA的靶基因进行生物学功能及通路分析。结果:SNHG4在胃癌组织中的表达明显高于正常组织（ P=8.882E-16）。生存分析发现SNHG4高表达的胃癌患者总体生存时间少于低表达组（ P=8.900E-05）。通过RNA调控网络的构建，发现在胃癌中hsa-let-7a-5p（ P=1.02E-03）、hsa-miR-152-3p（ P=4.51E-06）、hsa-miR-204-5p（ P=6.68E-04）和hsa-miR-363-3p（ P=8.06E-03）可作为SNHG4的结合位点。SNHG4作用于这4种miRNA进一步调控250个靶基因。对靶基因的GO注释及KEGG富集分析，发现这些靶基因在蛋白质磷酸化的调节、转录负调控、RNA聚合酶II启动子的转录等生物过程中发挥作用，且通过阻断或激活Wnt等信号通路参与胃癌的发生及发展。 结论:SNHG4可作为胃癌潜在的诊断性肿瘤标志物，判断胃癌预后情况，通过构建SNHG4-miRNA-mRNA调控网络，从分子水平研究胃癌的发病机制，为实验研究及临床研究提供明确方向。

目的:探究HNF1A-AS1对IL-6诱导的血管瘤内皮细胞(hemangioendothelial cells，HemEC)增殖、迁移和侵袭的影响及可能机制。方法:用RT-qPCR法检测35例血管瘤患者的瘤组织及瘤旁正常皮肤组织中HNF1A-AS1、miR-363-3p和IL-6的mRNA表达水平，分析瘤组织中HNF1A-AS1和miR-363-3p表达的相关性。体外分离培养HemEC，用双荧光素酶报告基因实验验证HNF1A-AS1与miR-363-3p的调控关系。将IL-6分别作用于转染si-NC、si-HNF1A-AS1、si-HNF1A-AS1与anti-miR-NC、si-HNF1A-AS1与anti-miR-363-3p的HemEC后，用CCK-8法和克隆形成实验检测各组细胞的增殖，用Transwell法检测各组细胞的迁移和侵袭，Western印迹法检测各组细胞中Ki67、MMP-2和MMP-9蛋白的表达水平。结果:与正常皮肤组织比较，血管瘤组织中IL-6 mRNA表达水平明显升高，且增生期IL-6 mRNA表达水平低于消退期( P<0.05)。与瘤旁正常皮肤组织相比，血管瘤组织中HNF1A-AS1的表达升高( P<0.05)，miR-363-3p的表达降低( P<0.05)，且二者的表达呈负相关( r＝-0.758， P<0.05)。HNF1A-AS1在HemEC细胞中靶向负调控miR-363-3p的表达。IL-6可促进HemEC中HNF1A-AS1的表达、细胞OD值、克隆形成数、迁移和侵袭数及Ki67、MMP-2和MMP-9的蛋白表达( P<0.05)，而降低miR-363-3p表达( P<0.05)。下调si-HNF1A-AS1降低了IL-6诱导的HemEC细胞OD值、克隆形成数、迁移和侵袭数及Ki67、MMP-2和MMP-9的蛋白表达( P<0.05)。下调miR-363-3p降低了下调si-HNF1A-AS1对IL-6诱导的HemEC细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用( P<0.05)。 结论:HNF1A-AS1在血管瘤组织中表达升高，下调其表达通过靶向上调miR-363-3p抑制IL-6诱导的血管瘤内皮细胞增殖、迁移和侵袭。

目的 探讨非小细胞肺癌组织中微小RNA-363-3p(miR-363-3p)、性别决定区Y框蛋白4(SOX4)表达及对上皮间质转化(EMT)进程的影响.方法 收集行手术切除的84例非小细胞肺癌患者的癌及其癌旁组织.采用实时荧光定量聚合酶链反应检测癌及癌旁组织miR-363-3p、SOX4 mRNA表达,免疫组化SP法检测癌及癌旁组织中E-cadherin、Vimentin表达.比较不同病理特征患者癌组织中miR-363-3p、SOX4 mRNA表达,采用Spearman秩相关分析癌组织miR-363-3p、SOX4 mRNA表达与E-cadherin、Vimentin相关性.使用相对超危险度比(RERI)、归因比(AP)、交互作用指数(SI)分析miR-363-3p、SOX4参与EMT进程的交互作用.结果 癌组织中miR-363-3p表达低于癌旁组织,SOX4 mRNA表达高于癌旁组织(P均＜0.05);癌组织中miR-363-3p、SOX4 mRNA表达与性别、年龄、吸烟史、肿瘤最大径无关(P均＞0.05),与分化程度、TNM分期有关(P均＜0.05);癌组织E-cadherin阳性表达率低于癌旁组织,Vimentin阳性表达率高于癌旁组织(P均＜0.05);癌组织miR-363-3p与E-cadherin表达呈正相关(r=0.491,P＜0.05),与Vimentin表达呈负相关(r=-0.506,P＜0.05);癌组织SOX4 mRNA与E-cadherin表达呈负相关(r=-0.527,P＜0.05),与Vimentin表达呈正相关(r=0.463,P＜0.05).癌组织miR-363-3p、SOX4对EMT进程存在负向交互作用(RERI=29.639,AP=70.91,SI=3.656).结论 非小细胞肺癌组织中miR-363-3p、SOX4异常表达与EMT有关,且二者对EMT进程存在负向交互作用.

目的 基于生物信息学方法筛选调控Rab23表达以及影响头颈部鳞状细胞癌预后相关的MicroiRNA(miRNA)并验证,为进一步探讨头颈部鳞状细胞癌的发生和侵袭作用机制提供新的研究思路和方法.方法 依据miRWalk数据库筛选调控Rab23表达的潜在miRNA,根据TCGA公共数据库和miRWalk数据库筛选影响头颈部鳞状细胞癌生存期的差异表达miRNA,双重筛选交集后确定调控Rab23表达及影响头颈部鳞状细胞癌预后相关的miRNA分子,再通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)、蛋白免疫印迹和双荧光素酶实验进行结果验证.结果 筛选出250个差异表达miRNA,其中8个是潜在调控Rab23表达的miRNA.hsa-miR-363-3p是既能调控Rab23表达,又可显著影响头颈部鳞状细胞癌预后的miRNA.RT-qPCR、蛋白免疫印迹实验证实hsa-miR-363-3p与Rab23在肿瘤细胞和转染细胞模型中呈负调控;双荧光素酶实验验证hsa-miR-363-3p能够靶向作用于Rab23基因.结论 hsa-miR-363-3p参与靶向调控Rab23表达,可能参与了头颈部鳞状细胞癌的侵袭和转移的作用机制.

目的 观察多囊卵巢综合征(PCOS)不孕患者血清miR-363-3p表达变化,探讨其与促排卵治疗后临床妊娠的关系.方法 2019年1月-2021年12月南阳市第一人民医院诊治PCOS不孕患者115例为PCOS组,同期无PCOS男方因素不孕患者60例为对照组.采用实时荧光定量PCR法检测2组入院次日血清miR-363-3p相对表达量;比较2组年龄、体质量指数、血压、空腹血糖、空腹胰岛素、胰岛素抵抗指数、性激素、抗米勒管激素、血脂等临床资料;采用Pearson相关法分析PCOS患者miR-363-3p相对表达量与空腹胰岛素、胰岛素抵抗指数、性激素、抗米勒管激素、血脂等的相关性.115例PCOS患者均给予规范化促排卵治疗3个周期,67例临床妊娠者为妊娠组,48例受孕失败者为未妊娠组,比较妊娠组与未妊娠组年龄、体质量指数、血压、空腹血糖、空腹胰岛素、胰岛素抵抗指数、性激素、抗米勒管激素、血脂、miR-363-3p相对表达量等临床资料;多因素logistic回归分析PCOS不孕患者促排卵治疗后临床妊娠失败的影响因素.结果 (1)PCOS组胰岛素抵抗指数(2.86±0.58)、空腹胰岛素[(25.63±2.51)mu/L]、促黄体生成素[(14.20±3.49)u/L]、卵泡刺激素[(8.32±1.47)u/L]、睾酮[(0.75±0.21)μg/L]、催乳素[(14.85±2.69)μg/L]、孕酮[(1.21±0.41)nmol/L]和抗米勒管激素[(9.54±2.46)μg/L]水平均高于对照组[1.92±0.41、(12.40±1.24)mu/L、(5.63±0.74)u/L、(5.74±1.05)u/L、(0.42±0.14)μg/L、(10.32±3.51)μg/L、(0.75±0.36)nmol/L、(3.68±1.58)μg/L](P＜0.05),雌二醇[(106.41±26.47)pmol/L]水平和 miR-363-3p 相对表达量(0.46±0.09)均低于对照组[(163.58±32.51)pmol/L、1.00±0.18](P＜0.05),年龄、体质量指数、血压、空腹血糖、总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平与对照组比较差异均无统计学意义(P＞0.05)o PCOS不孕患者miR-363-3p相对表达量与空腹胰岛素(r=-0.753,P＜0.001)、胰岛素抵抗指数(r=-0.742,P＜0.001)、促黄体生成素(r=-0.635,P＜0.001)、卵泡刺激素(r=-0.596,P＜0.001)、睾酮(r=-0.658,P＜0.001)、催乳素(r=-0.584,P＜0.001)、孕酮(r=-0.695,P＜0.001)、抗米勒管激素(r=-0.684,P＜0.001)水平均呈负相关,与雌二醇(r=0.748,P＜0.001)水平呈正相关,与年龄、体质量指数、血压、空腹血糖、总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平均无相关性.(2)妊娠组体质量指数[(22.01±1.57)kg/m2]、空腹胰岛素[(24.01±1.87)mu/L]、胰岛素抵抗指数(2.30±0.36)、促黄体生成素[(12.04±3.41)u/L]、卵泡刺激素[(7.41±1.24)u/L]、睾酮[(0.59±0.15)μg/L]和抗米勒管激素[(12.15±1.65)μg/L]水平均低于未妊娠组[(26.30±2.01)kg/m2、(27.32±1.65)mu/L、2.94±0.45、(17.62±3.21)u/L、(9.63±1.02)u/L、(0.83±0.34)μg/L、(7.69±1.85)μg/L](P＜0.05),雌二醇[(114.63±15.64)pmol/L]水平及miR-363-3p相对表达量(0.64±0.12)均高于未妊娠组[(101.32±18.42)pmol/L、0.25±0.05](P＜0.05),年龄、血压、空腹血糖、催乳素、孕酮、总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平与未妊娠组比较差异均无统计学意义(P＞0.05).胰岛素抵抗指数(OR=3.823,95％CI:1.845～6.418,P＜0.001)、促黄体生成素(OR=5.778,95％CI:1.458～9.326,P＜0.001)、睾酮(OR=2.617,95％CI:1.067～4.815,P=0.014)、催乳素(OR=4.669,95％CI:1.362～6.251,P＜0.001)、miR-363-3p(OR=4.600,95％CI:2.521～8.325,P＜0.001)是 PCOS 不孕患者促排卵治疗后临床妊娠失败的影响因素.结论 PCOS不孕患者血清miR-363-3p相对表达量降低,与性激素水平异常和糖代谢紊乱有关,miR-363-3p低表达的PCOS不孕患者促排卵治疗后临床妊娠失败的概率较高.

目的 探讨microRNA-363-5p(miR-363-5p)靶向血小板反应蛋白-3(THBS3)对心肌肥大的调节作用.方法 体外人心肌细胞(AC16)经血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)处理复制心肌肥大体外模型,随后鬼笔环肽染色观察细胞骨架,Western blotting检测心肌肥大体外模型中胚胎期基因的蛋白表达,以确认模型复制的有效性.实时荧光定量聚合酶链反应检测心肌肥大体外模型中miR-363-5p表达.Western blotting检测肥大心肌细胞中转染miR-363-5p mimics和miR-363-5p inhibitor后,肥大相关表型的变化.双荧光素酶报告基因实验验证miR-363-5p与THBS3的3'-UTR结合作用.设计挽救实验,同时过表达THBS3与miR-363-5p,以评估THBS3是否介导miR-363-5p对心肌肥大的调控.结果 AngⅡ组细胞面积较对照组大(P＜0.05),心房钠尿肽(ANP)、B型钠尿肽(BNP)、肌球蛋白β重链(β-MHC)及miR-363-5p较对照组高(P＜0.05).miR-363-5p mimics组miR-363-5p相对表达量较mimics-NC 组高(P＜0.05),miR-363-5p inhibitor组相对表达量较inhibitor-NC 组低(P＜0.05);miR-363-5p mimics组 ANP、BNP、β-MHC相对表达量较mimics-NC 组低(P＜0.05),miR-363-5p inhibitor组相对表达量较inhibitor-NC组高(P＜0.05).miR-363-5p mimics组细胞面积较mimics-NC组小(P＜0.05),miR-363-5p inhibitor组较inhibitor-NC 组大(P＜0.05).miR-363-5p mimics+THBS3-WT 组 THBS3-WT 荧光素酶活性较mimics-NC+THBS3-WT 组低.mimics-NC+THBS3-MUT组与miR-363-5p mimics+THBS3-MUT组THBS3-MUT荧光素酶活性比较,差异无统计学意义(P＞0.05).miR-363-5p mimics组THBS3 mRNA和蛋白相对表达量较mimics-NC组低(P＜0.05).THBS3-OE组THBS3 mRNA和蛋白相对表达量较对照组、OE-NC组高(P＜0.05).THBS3-OE+miR-363-5p mimics组细胞面积较OE-NC+miR-363-5p mimics组大(P＜0.05).THBS3-OE+miR-363-5p mimics组ANP、BNP及β-MHC相对表达量较OE-NC+miR-363-5p mimics组高(P＜0.05).结论 过表达miR-363-5p可抑制AngⅡ对AC16细胞的促肥大作用,其机制与减少THBS3表达有关.

目的 研究有吸烟史的口腔白斑病(oral leukoplakia,OLK)患者病损组织microRNA(miRNA)的异常表达,并对差异miRNAs进行癌变相关生物信息学分析.方法 利用人miRNA OneArray?v5.1微阵列芯片检测吸烟组(n=6)和非吸烟组(n=4)OLK石蜡标本间差异表达的miRNA,并运用生物信息学方法从中筛选出与OLK癌变密切相关的目标miRNA,随后对目标miRNA的靶基因进行基因本体数据库(gene ontology,GO)富集分析和KEGG通路分析以预测其可能的作用机制.结果 吸烟组与非吸烟组OLK组织中共检出174个差异表达的miRNAs(P<0.05),其中,39个miRNAs在吸烟组表达上调(log2(FC)≥0.585),135个miRNAs表达下调(log2(FC)≤-0.585).运用生物信息学方法从中筛选出8个与OLK癌变密切相关的目标miRNAs,包括:hsa-miR-6857-5p、hsa-miR-6745、hsa-miR-15a-5p、hsa-miR-363-5p、hsa-miR-6867-3p、hsa-miR-95-3p、hsa-miR-3607-5p、hsa-miR-9500.对上述目标miRNAs的靶基因行GO富集分析,结果显示大部分基因参与调控细胞增殖、凋亡、刺激反应等生物学活动.KEGG通路分析发现上述基因高度相关的作用通路为癌信号通路、PI3K-Akt及FoxO信号通路.结论 吸烟可通过改变OLK组织miRNA表达水平进而改变特定基因功能促进白斑癌变进程.

目的 探讨视神经脊髓炎谱系疾病(NMOSD)患者外周血金属蛋白酶抑制剂1(TIMP1)mRNA及血浆TIMP1蛋白、基质金属蛋白酶9(MMP9)及miR-363-5p的表达变化及其与血脑屏障(BBB)破坏的关系.方法 选取2019年9月至2021年11月河北医科大学第二医院收治的NMOSD患者30例,另选择健康体检者作为健康对照组10例.采用ELISA方法检测血浆TIMP1、MMP9的水平.采用qPCR法检测外周血单个核细胞(PBMC)TIMP1 mRNA和血浆miR-363-5p水平.根据脑脊液/血白蛋白商(Qalb)将NMOSD患者分为BBB正常组与BBB破坏组,分别比较NMOSD组与正常对照组以及BBB正常组与BBB破坏组TIMP1、MMP9及miR-363-5p表达差异,采用相关性分析评估其与BBB破坏的关系.采用双萤光素酶报告基因检测技术验证miR-363-5p与TIMP1靶向结合关系.通过慢病毒载体感染JURKA T细胞并分为4组:未转染miR-363-5p模拟物的正常对照组,转染miR-363-5p模拟物组,未转染miR-363-5p抑制剂的正常对照组,转染miR-363-5p抑制剂组.采用qPCR检测JURKA T细胞TIMP1 mRNA及MMP9 mRNA的表达,采用 Western-blot技术检测JURKAT细胞TIMP1、MMP9蛋白表达的水平.结果 (1)NMOSD组患者PBMC TIMP1 mRNA、血浆miR-363-5p、血浆TIMP1和MMP9蛋白水平高于健康对照组(P＜0.01或P＜0.05).NMOSD组和健康对照组MMP9/TIMP1比值比较差异无统计学意义(P＞0.05).(2)NMOSD患者BBB破坏组MMP9/TIMP1比值高于BBB 正常组(P＜0.05).NMOSD 患者 MMP9/TIMP1 比值与 Qalb 呈中等正相关(r=0.505,P＜0.01).NMOSD患者血浆miR-363-5p与PBMC TIMP1 mRNA相对表达水平无相关性(r=-0.33,P＞0.05),与血浆TIMP1蛋白表达水平呈中等负相关(r=-0.5157,P＜0.01).miR-363-5p可与TIMP1 3,UTR区结合,在JURKA T细胞中,转染miR-363-5p模拟物后TIMP1 mRNA和蛋白质表达水平下降(P＜0.01,P＜0.05).结论 NMOSD患者PBMC TIMP1 mRNA 以及血浆 TIMP1 蛋白、MMP9 蛋白、miR-363-5p 表达升高;miR-363-5p 可负调控 JURKA T细胞TIMP1的表达;血浆MMP9/TIMP1比值升高可能在NMOSD患者BBB的破坏中发挥作用.