目的 检测不同临床分期膀胱尿路上皮癌组织中神经前体细胞表达发育下调的蛋白8(NEDD8)、保守类素化相关蛋白同源蛋白3(DCNL3)和泛素结合酶E2M(UBE2M)的表达水平,并观察DCNL3对骨架蛋白Cullin1和Cullin3拟素化修饰的调控作用,探讨DCNL3介导拟素化通路在膀胱尿路上皮癌中的表达及临床意义.方法 选用郑州大学第一附属医院2020年3月至2023年5月行手术切除并经病理证实的膀胱尿路上皮癌标本59例,每例标本均选用癌组织中心及其远端正常黏膜对照.采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学技术检测切除标本中的NEDD8,DCNL3和UBE2M的表达;使用过表达/沉默DCNL3基因及蛋白质印迹法(Western blot)检测膀胱癌细胞株T24中骨架蛋白Cullin1和Cullin3的拟素化水平.组间比较采用两独立样本t检验.患者临床病理特征的分析采用x2检验.结果 DCNL3、UBE2M和NEDD8在膀胱尿路上皮癌组织中的表达明显高于正常黏膜(0.613±0.167比0.985±0.205、1.223±0.558比1.874±0.245、1.639±0.212 比 2.187±0.335,t=1.933、2.142、2.025,P＜0.05),差异有统计学意义;其在肌层浸润性尿路上皮癌中的表达高于非肌层浸润性(0.738±0.188比1.245±0.155、1.566±0.385 比 2.532±0.466、1.933±0.485 比 2.748±0.515,t=2.106、2.767、2.367,P＜0.05),差异有统计学意义,与临床分期明显相关.高表达DCNL3能够促进底物蛋白Cullin1[(78.55±6.34)％比(35.15±5.32)％,t=26.22,P＜0.05]和 Cullin3[(66.82±5.66)％比(22.52±4.66)％,t=22.05,P＜0.05]的拟素化水平.结论 DCNL3表达水平与膀胱尿路上皮癌临床分期明显相关,并可能通过调控底物骨架蛋白Cullin1和Cullin3拟素化水平,促进膀胱癌进展.

Neddylation修饰通路在肺癌中过度活化，可通过激活其底物CRL泛素连接酶活性诱导CRL抑癌蛋白底物降解，从而促进肺癌的发生发展。Neddylation修饰通路的小分子抑制剂MLN4924可以诱导肺癌细胞发生细胞周期阻滞、细胞凋亡和衰老，发挥抗肺癌作用。此外，通过靶向Neddylation修饰通路关键酶及其底物Cullin家族蛋白也可以抑制肺癌发生发展。

蛋白类泛素化修饰Neddylation是一种重要的蛋白质翻译后修饰。Neddylation修饰在结直肠癌中过度活化，并且与结直肠癌患者的预后不良密切相关。小分子抑制剂MLN4924通过阻断Neddylation修饰通路诱导结直肠癌细胞凋亡、自噬、DNA损伤及细胞衰老发挥抗肿瘤效应。此外，MLN4924还可作为化学增敏剂和放射增敏剂提高结直肠癌的治疗效果。本文对Neddylation修饰及MLN4924在结直肠癌中的作用机制作一综述。

目的:探讨miR-152对雪旺细胞(Schwann cells，SCs)迁移作用的影响。方法:构建大鼠坐骨神经损伤模型，分别于损伤后1、4、7、14 d采用qRT-PCR检测miR-152和CAND1基因在损伤神经中的表达情况；Western blot和qRT-PCR检测miR-152和CAND1在SCs中的表达；Transwell法测定SCs迁移能力；以荧光素酶报告基因和RNA免疫沉淀法(RNA binding protein immunoprecipitation，RIP)证实miR-152与CAND1的相关性。结果:损伤神经近端和远端神经组织中miR-152水平显著升高，miR-152的过度表达促进了SCs迁移，而miR-152抑制剂转染的SCs则明显抑制了细胞迁移。结果提示CAND1是miR-152的靶基因，此外miR-152对CAND1的表达具有负调控作用，CAND1表达上调阻断了miR-152介导的促进SCs迁移作用。结论:周围神经损伤后，miR-152可以通过抑制CAND1的表达促进SCs迁移作用。

蛋白质类泛素化修饰Neddylation是重要的新型蛋白质翻译后修饰方式，可广泛调控细胞周期、细胞生长和发育代谢等生物学过程。近年来研究发现，Neddylation修饰小分子抑制剂MLN4924具有显著的抗肿瘤效果，可通过诱导细胞周期阻滞、衰老和凋亡，以及抑制血管生成等方式抑制肿瘤生长。文章针对Neddylation修饰通路抑制剂MLN4924诱导细胞程序性死亡的相关机制研究进行综述。

神经前体细胞表达发育下调蛋白-8（NEDD8）是类泛素家族的重要成员之一，通过与底物共价结合（又称neddylation修饰），在维持细胞稳态及调节细胞周期、信号转导、转录翻译、DNA修复、肿瘤生成等方面发挥重要的作用。近年研究发现NEDD8及相关酶的功能紊乱在肝脏疾病中普遍存在，广泛参与肝炎、肝纤维化以及肝癌细胞的增殖、侵袭、凋亡与自噬等生物学过程。现重点就NEDD8在肝脏疾病中的研究进展进行综述。

目的:探讨MLN4924抑制乳腺癌细胞增殖的作用及其机制。方法:以人乳腺癌细胞MCF-7为模型细胞，采用细胞毒性和细胞的克隆形成实验探讨MLN4924对MCF-7细胞增殖的抑制作用。细胞实验分组：对照组，MLN4924浓度分别为0.1、0.3和1.0 μmol/L的实验组。动物实验分组：对照组，给MLN4924药物2.5、5.0及10.0 mg/kg的实验组。通过蛋白质印迹法(Western blot)和免疫荧光考察MLN4924对neddylation修饰的抑制作用、细胞凋亡和DNA损伤。采用GraphPad Prism 8进行统计学分析，通过 t检验评价两组数据之间的差异。 结果:MLN4924显著抑制MCF-7细胞的增殖能力，实验组的细胞集落数量显著少于对照组，可有效抑制cullin-1蛋白的neddylation修饰，实验组NEDD8的表达显著低于对照组(相对灰度值0.42±0.16比1.13±0.22， t＝8.03， P<0.01)，差异有统计学意义，诱导细胞DNA损伤，实验组γ-H2AX的表达显著高于对照组(相对灰度值0.16±0.03比0.04±0.01， t＝9.15， P<0.01)，差异有统计学意义，显著上调cleaved Caspase-3的表达，诱导肿瘤细胞凋亡，在体内可有效抑制MCF-7裸鼠移植瘤的增殖，并表现出较低的不良反应。 结论:靶向neddylation能显著抑制乳腺癌细胞的增殖。

类泛素化Neddylation修饰是一种新型蛋白质翻译后修饰方式，其在消化系统肿瘤中过度活化，是潜在的抗肿瘤分子靶标。靶向Neddylation修饰通路通过诱导消化系统肿瘤细胞发生细胞周期阻滞、细胞凋亡、细胞衰老和自噬，以及增强消化系统肿瘤细胞对放疗和化疗的敏感性，继而发挥抗肿瘤作用。靶向Neddylation修饰通路及通路抑制剂MLN4924可作用于抗消化系统肿瘤的潜在靶点。

目的 探究PKM2 拟素化(neddylation)修饰对肺动脉高压大鼠右心室纤维化的影响.方法 将SD大鼠随机分为对照组、模型组和MLN4924 组,HE染色法检测肺动脉,Masson染色检测右心室纤维化程度.提取大鼠原代心脏成纤维细胞,免疫荧光法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达,使用si-NC、si-PKM2、pcDNA3.1-PKM2 转染原代心脏成纤维细胞后,蛋白质免疫印迹法检测PKM2 及纤维化相关Ⅰ型胶原蛋白(Collagen Ⅰ)、Ⅲ型胶原蛋白(Collagen Ⅲ)、基质金属蛋白酶 2(MMP2)、基质金属蛋白酶 9(MMP9)等蛋白水平.蛋白质免疫共沉淀法检测PKM2 neddylation修饰.实时荧光定量PCR法检测大鼠心脏组织中PKM2 的mRNA表达水平.蛋白质免疫印迹法检测PKM2 蛋白质降解时间.结果 HE染色结果显示,模型组肺小动脉(纤维层)和内膜(内转运蛋白)之间的距离显著加宽,中间层的厚度增加,Masson染色显示,与对照组相比,模型组显示更多的胶原沉积,纤维化更严重的.模型组的PKM2 蛋白表达水平高于对照组,而mRNA水平无显著性差异.PKM2 在大鼠肺动脉高压模型中右心室组织存在neddylation修饰.在心脏成纤维细胞中敲低Nedd8 或用MLN4924 抑制neddylation修饰可下调PKM2 及纤维化相关蛋白Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ、MMP2、MMP9 等蛋白水平,促进 PKM2 蛋白质降解速率[(3.03±0.23)～(11.97±0.66)h,t =-12.82,P<0.001,过表达Nedd8 则提高PKM2 蛋白表达.MLN4924 组大鼠右心室纤维化程度及α-SMA蛋白表达水平低于模型组.结论 在肺动脉高压大鼠模型中,neddylation修饰增强了PKM2 的蛋白质稳定性进而促进右心室纤维化过程.

NEDD8是与泛素最相似的类泛素修饰蛋白,其参与翻译后可逆性修饰的过程被称为Neddyla-tion,即NEDD化.近年来,继泛素化在生物细胞中的作用被不断探索后,NEDD化在细胞中的作用也被越来越多的人所研究.本文主要就NEDD化在信号转导以及转录因子调控等方面的作用作一综述.