目的:基于空间转录组、单细胞转录组和RNA转录组测序数据探讨BICD1基因促进脑胶质瘤恶性进展的分子机制。方法:基于空间转录组公共数据集分析BICD1基因在正常脑组织(样本"248_C")和胶质母细胞瘤组织(样本"275_T")中的空间分布特征。采用R语言软件包分析中国脑胶质瘤基因组图谱(CGGA)数据库中单细胞测序数据(来源于14例患者的6 148个细胞)，明确BICD1基因在胶质瘤不同细胞类型中的表达差异。基于CGGA数据库中693例脑胶质瘤患者的RNA测序数据，采用京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析及基因本体论分析BICD1基因相关基因的生物学功能。结果:BICD1基因在正常脑组织中表达广泛，在胶质母细胞瘤组织中特异性地表达于肿瘤干细胞与肿瘤细胞的分界处。根据单细胞测序数据进行的细胞分群分析表明，BICD1基因主要在星形胶质细胞中高表达。在Neftel分型中，BICD1基因高表达细胞主要分布在星形胶质细胞样细胞群和神经前体样细胞群中。BICD1基因表达水平相关差异基因的KEGG通路富集分析显示，BICD1基因高表达与细胞衰老( P＝0.003)、癌症中的蛋白聚糖( P＝0.004)等癌症相关生物学功能的聚集相关，与肌动蛋白细胞骨架的调节( P＝0.010)等胞内运输过程的功能聚集相关；BICD1基因低表达与核糖体相关功能( P<0.001)及氧化磷酸化( P<0.001)等生物学过程的聚集相关。BICD1基因表达水平相关差异基因的生物学功能聚类分析显示，与BICD1基因表达水平相关性较强的生物学功能有细胞质翻译( P<0.001)、核糖体亚单位装配( P＝0.001)、染色体分离调控( P＝0.004)及染色体分离( P＝0.004)等。BICD1基因的表达水平与多泛素修饰依赖性蛋白结合( P＝0.046)、泛素－泛素连接酶活性( P＝0.033)、蛋白质解聚负调控( P＝0.010)、单泛素化蛋白质去泛素化( P＝0.026)、肌动蛋白丝加帽( P＝0.007)、肌动蛋白丝解聚( P＝0.013)等生物学过程相关。 结论:BICD1蛋白可能在脑胶质瘤前体肿瘤细胞中参与蛋白泛素化降解及细胞骨架相关的胞内运输，调控细胞衰老和细胞分裂等生物学过程，在这些细胞的恶性转变过程中起到关键作用。

目的:从蛋白质泛素/类泛素化修饰平衡角度探讨白藜芦醇抑制皮肤鳞状细胞癌新生血管形成的内在机制。方法:以人皮肤鳞状细胞癌A431细胞株为研究对象，分别给予培养基中加入50 μmol/L和100 μmol/L白藜芦醇处理对数生长期A431细胞作为实验组，以不加白藜芦醇培养基处理为对照组。按照上述实验分组，培养48 h采用3-（4，5-二甲基噻唑-2）-2，5-二苯基四氮唑溴盐（MTT）实验检测各组细胞增殖活性；采用血管模拟形成实验检测白藜芦醇处理12 h对A431细胞血管拟态形成能力的影响；采用Western印迹检测白藜芦醇处理48 h各组细胞泛素（ubiquitin）、小泛素相关修饰蛋白1（SUMO1）、缺氧诱导因子1α（HIF-1α）、血管内皮生长因子受体（VEGFR）相对表达水平。将24只8周龄BALB/c雄性去胸腺小鼠随机均分3组，于腹股沟皮下接种A431细胞，治疗组予1 mg/kg或2 mg/kg白藜芦醇腹腔注射给药，对照组注射相同体积的生理NaCl溶液，每3天注射1次，第21天处死小鼠，解剖肿瘤称重；采用免疫组化检测各组肿瘤组织中CD31的表达。多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD- t检验。 结果:对照组、50 μmol/L组、100 μmol/L组A431细胞增殖率差异有统计学意义（ F = 17.75， P = 0.017），50 μmol/L组、100 μmol/L组低于对照组（66.53% ± 5.09%、35.88% ± 4.28%比100%，LSD- t = 21.17、29.04， P = 0.011、0.004）；3组A431细胞血管管壁样细胞嵴的总长度差异有统计学意义（ F = 21.37， P = 0.004），50 μmol/L组、100 μmol/L组低于对照组[（102.73 ± 11.36）μm、（37.83 ± 4.19）μm比（185.26 ± 8.02）μm，均 P < 0.05]；3组细胞泛素、SUMO1、HIF-1α、VEGFR相对表达差异均有统计学意义，50 μmol/L组、100 μmol/L组泛素相对表达均高于对照组（2.09 ± 0.13、3.53 ± 0.16比0.68 ± 0.11，均 P < 0.05），SUMO1、HIF-1α、VEGFR的相对表达均低于对照组（SUMO1：1.87 ± 0.13、1.02 ± 0.11比3.10 ± 0.11，HIF-1α：0.81 ± 0.06、0.45 ± 0.06比0.97 ± 0.08，VEGFR：0.73 ± 0.09、0.39 ± 0.05比0.98 ± 0.07，均 P < 0.05）。动物试验中，对照组、1 mg/kg组、2 mg/kg组小鼠皮下肿瘤质量[（3.29 ± 0.57）g、（2.91 ± 0.49）g、（2.55 ± 0.52）g]、肿瘤组织CD31细胞阳性率（76.24% ± 5.51%、39.45% ± 5.48%、12.07% ± 3.54%）差异均有统计学意义（ F = 14.33、15.34， P = 0.019、0.021），1 mg/kg组、2 mg/kg组均低于对照组（均 P < 0.05）。 结论:白藜芦醇能够抑制肿瘤生长与肿瘤组织新生血管形成，可能与通过降低HIF-1α蛋白泛素/类泛素化修饰途径抑制皮肤鳞癌新生血管形成有关。

蛋白类泛素化修饰Neddylation是一种重要的蛋白质翻译后修饰。Neddylation修饰在结直肠癌中过度活化，并且与结直肠癌患者的预后不良密切相关。小分子抑制剂MLN4924通过阻断Neddylation修饰通路诱导结直肠癌细胞凋亡、自噬、DNA损伤及细胞衰老发挥抗肿瘤效应。此外，MLN4924还可作为化学增敏剂和放射增敏剂提高结直肠癌的治疗效果。本文对Neddylation修饰及MLN4924在结直肠癌中的作用机制作一综述。

目的:从蛋白质类泛素化修饰角度解析亚低温对神经干细胞（neural stem cells，NSCs）的保护机制，为新生儿缺氧缺血性脑病（hypoxic ischemic encephalopathy，HIE）的亚低温治疗提供科学依据。方法:原代分离培养小鼠NSCs，分为对照组、缺氧组、亚低温组、缺氧+亚低温组并予相应处理，Western Blot法检测小泛素相关修饰蛋白2/3（small ubiquitin-related modifier 2/3，SUMO2/3）、低氧诱导因子1 α（hypoxia inducible factor 1 α，HIF-1α）、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1 α（peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1 α，PGC-1α）和八聚体结合转录因子4（octamer-binding transcription factor 4，Oct4）的蛋白水平；比较NSCs克隆球直径变化，酶联免疫吸附法检测乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）含量，流式细胞术检测细胞凋亡率，免疫荧光法检测NSCs向神经元细胞分化情况。结果:与对照组相比，缺氧组NSCs中SUMO2/3、HIF-1α和PGC-1α的蛋白水平分别升高至1.33、2.26和2.40倍，亚低温组NSCs中SUMO2/3和PGC-1α的蛋白表达水平分别升高至1.52倍和6.36倍，差异均有统计学意义（ P<0.05）；与缺氧组相比，缺氧+亚低温组NSCs中SUMO2/3、HIF-1α、PGC-1α和Oct4的蛋白表达水平分别升高至1.44、1.40、3.30和1.59倍，差异均有统计学意义（ P<0.05）。缺氧组、亚低温组、缺氧+亚低温组细胞克隆球直径明显小于对照组，缺氧+亚低温组细胞克隆球直径明显小于缺氧组，差异均有统计学意义（ P<0.05）。亚低温组与对照组LDH水平比较差异无统计学意义（ P>0.05），缺氧+亚低温组LDH水平明显低于缺氧组（ P<0.05）。亚低温组细胞死亡率与对照组比较差异无统计学意义（ P>0.05），缺氧+亚低温组细胞死亡率明显低于缺氧组（ P<0.05）。与对照组相比，缺氧组和亚低温组巢蛋白表达水平均有所升高，但神经元特异性烯醇化酶（neuron-specific enolase，NSE）水平明显下降（ P<0.05）；与缺氧组和亚低温组相比，缺氧+亚低温组巢蛋白表达水平进一步增强，同时NSE表达水平进一步下降（ P<0.05）。 结论:亚低温可能通过强化蛋白质的SUMO化修饰方式增加NSCs对缺氧的耐受，进一步为亚低温治疗HIE提供了理论依据。

泛素和小泛素样修饰物（SUMO）以共价键形式连接到特定的蛋白底物上，进行泛素化修饰或SUMO化修饰，通过调控蛋白质的稳定性、活性、定位或相互作用来影响多种细胞活动，其中包括DNA损伤修复、细胞周期、细胞凋亡和免疫应答等。当细胞受到DNA损伤时，泛素化修饰和SUMO化修饰能够调控相关蛋白质的功能和相互作用，参与到DNA损伤修复和信号传导的过程中。这些修饰作用对于维持基因组的完整性至关重要。近年来，研究发现泛素化修饰和SUMO化修饰在DNA损伤修复中都发挥着重要作用。笔者对这些作用机制进行综述，为深入了解电离辐射诱导的DNA损伤修复机制提供参考。

目的:探讨泛素化连接酶E3蛋白（Cullin3，CUL3）对三阴性乳腺癌（TNBC）细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及其作用机制。方法:基于生物信息学方法获取TNBC组织中CUL3基因和蛋白的表达数据，评估CUL3在TNBC患者肿瘤组织（ n=160）中和正常乳腺组织（NC）（ n=572）中的表达及其与临床预后的关系。通过CCK8细胞增殖实验、划痕实验、Transwell实验检测过表达CUL3对TNBC细胞体外增殖、迁移及侵袭能力的影响；通过免疫共沉淀（IP）联合质谱分析筛选出可能与CUL3相互作用的蛋白质，确定CUL3调控的底物蛋白为谷胱甘肽S-转移酶P1（GSTP1）；通过划痕实验、Transwell实验检测过表达GSTP1对TNBC细胞迁移及侵袭能力的影响，探索过表达CUL3是否可以逆转GSTP1对细胞迁移及侵袭能力的影响；通过Western 印迹和IP检测CUL3对GSTP1蛋白泛素化修饰的影响，验证CUL3调控GSTP1表达影响TNBC迁移和侵袭的分子机制。 结果:CUL3在TNBC中表达量显著增高（ P<0.000 1），CUL3高表达与TNBC患者预后不良相关，高表达CUL3的TNBC患者总生存期（OS）、无病生存期（RFS）均更短（OS， P=0.018；RFS， P=0.008）；过表达CUL3可显著增加TNBC细胞增殖（231细胞组 F=11.97， P=0.002；468细胞组 F=51.92， P<0.001）、迁移［231细胞系和468细胞系过表达组穿膜细胞数分别为（74.7±4.0）、（128.0±6.1）个，而空白对照（NC）组分别为（21.0±2.7）、（70.0±6.6）个，231和468细胞组 t分别为-19.24和-11.23， P均<0.001］和侵袭能力（231细胞系和468细胞系过表达组48 h细胞增殖率分别为56.6%±4.4%、51.6%±3.7%，而NC组分别为40.5%±2.9%、32.9%±4.8%，231细胞组 t=-5.26， P=0.006 3；468细胞组 t=-5.38， P=0.005 8）；GSTP1在TNBC表达中降低，上调GSTP1可抑制TNBC细胞迁移［231细胞系和468细胞系过表达组穿膜细胞数分别为（16.3±6.5）、（33.0±6.2）个，而NC组分别为（34.3±2.5）、（77.3±5.0）个，231细胞组 t=5.44， P=0.006；468细胞组 t=7.20， P=0.002］和侵袭（231细胞系和468细胞系过表达组48 h细胞增殖率分别为49.6%±1.7%、36.2%±1.4%，而NC组分别为59.4%±4.7%、53.0%±1.7%，231细胞组 t=3.42， P=0.027；468细胞组 t=13.18， P<0.001），而上调CUL3可逆转GSTP1对细胞迁移［231细胞系和468细胞系过表达组穿膜细胞数分别为（37.0±1.0）、（67.0±5.3）个，231细胞组 t=-3.97， P=0.017；468细胞组 t=-6.12， P=0.004］、侵袭（231细胞系和468细胞系过表达组48 h细胞增殖率分别为71.9%±3.6%、59.4%±2.1%，231和468细胞组 t值分别为-9.61和-16.01， P均<0.001）的抑制作用；CUL3通过增加GSTP1泛素化修饰，促进泛素-蛋白酶体系统降解GSTP1蛋白，从而降低GSTP1蛋白的稳定性。 结论:过表达CUL3通过促进GSTP1泛素化降解诱导细胞迁移和侵袭，从而促进TNBC发生发展。

蛋白质类泛素化修饰Neddylation是重要的新型蛋白质翻译后修饰方式，可广泛调控细胞周期、细胞生长和发育代谢等生物学过程。近年来研究发现，Neddylation修饰小分子抑制剂MLN4924具有显著的抗肿瘤效果，可通过诱导细胞周期阻滞、衰老和凋亡，以及抑制血管生成等方式抑制肿瘤生长。文章针对Neddylation修饰通路抑制剂MLN4924诱导细胞程序性死亡的相关机制研究进行综述。

目的:探讨内皮细胞和血管组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）的小泛素样修饰在糖尿病加速动脉粥样硬化中的作用。方法:2014年9月至2017年1月选取14周龄雄性健康Sprague-Dawley大鼠（SD大鼠）32只，按随机数字表法分为对照假手术组、对照动脉损伤组、糖尿病动脉损伤组和泛素结合酶9（UBC9）转染组，每组8只。制备1型糖尿病大鼠模型，各组均有1只大鼠造模失败被排除。采用超声仪检测损伤侧颈总侧动脉和健侧颈总动脉收缩期和舒张期内径、动脉内膜厚度，计算标化颈总动脉舒张期直径（sCADD）；采用HE染色和免疫组织化学染色检测内膜增殖情况，在中膜面积相当的情况下计算内膜面积与中膜面积比值。人脐静脉内皮细胞（HUVEC）在高糖中培养24 h后采用实时反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测白细胞介素（IL）-8和IL-1β mRNA表达水平，蛋白质印迹法检测动脉组织UBC9的表达水平，小泛素样修饰试剂盒检测PPARγ小泛素样修饰水平。体外培养HUVEC，检测在不同浓度和不同时间的高糖刺激下PPARγ小泛素样修饰水平。在体内和体外利用慢病毒过表达UBC9，再检测PPARγ小泛素样修饰水平。结果:对照假手术组、对照动脉损伤组和糖尿病动脉损伤组颈总动脉损伤8周后动脉内膜厚度、内膜增殖面积和内膜面积与中膜面积比值逐渐增加[（0.026 ± 0.018）、（0.084 ± 0.007）和（0.264 ± 0.022） mm，（0.18 ± 0.09） × 10 6、（0.32 ± 0.06） × 10 6和（1.64 ± 0.22） × 10 6 μm 2，0.345 ± 0.073、0.570 ± 0.080和2.710 ± 0.220]，sCADD逐渐降低（0.903 ± 0.084、0.800 ± 0.071和0.330 ± 0.036），差异有统计学意义（ F =10.40、9.40、8.20和8.60， P<0.05）。高糖培养HUVEC 24 h后，糖浓度10、20和40 mmol/L时IL-8 mRNA分别为1.00 ± 0.11、3.57 ± 0.22和4.07 ± 0.40，IL-1β mRNA分别为1.00 ± 0.07、3.32 ± 0.29和5.13 ± 0.19，差异有统计学意义（ F = 73.05和205.80， P<0.05）。糖尿病动脉损伤组动脉组织PPARγ小泛素样修饰水平和UBC9表达水平明显低于对照动脉损伤组（0.46 ± 0.25比1.00 ± 0.21和0.45 ± 0.02比1.00 ± 0.07），差异有统计学意义（ P<0.05）；两组PPARγ表达水平比较差异无统计学意义（0.94 ± 0.07比1.00 ± 0.04， P>0.05）。糖浓度10、20和40 mmol/L时UBC9表达水平和PPARγ小泛素样修饰水平逐渐降低（0.99 ± 0.05、0.80 ± 0.06和0.62 ± 0.05，1.00 ± 0.05、0.57 ± 0.13和0.55 ± 0.08），差异有统计学意义（ F = 21.02和14.31， P<0.05），PPARγ表达水平比较差异无统计学意义（1.00 ± 0.03、0.90 ± 0.04和0.91 ± 0.05， F = 3.11， P>0.05）。对HUVEC进行0、6、12、24、48 h的20 mmol/L高糖刺激后，UBC9表达水平和PPARγ小泛素样修饰水平逐渐下调（1.00 ± 0.09、0.75 ± 0.05、0.70 ± 0.08、0.38 ± 0.04和0.35 ± 0.03，1.00 ± 0.03、0.86 ± 0.01、0.59 ± 0.01、0.51 ± 0.11和0.35 ± 0.08），差异有统计学意义（ F = 36.06和33.13， P<0.05），但PPARγ表达水平比较差异无统计学意义（1.00 ± 0.03、1.14 ± 0.02、1.18 ± 0.17、0.98 ± 0.01和1.04 ± 0.05， F = 1.90， P>0.05）。在糖尿病大鼠动脉中过表达UBC9后，组织学分析结果显示，对照动脉损伤组、糖尿病动脉损伤组和UBC9转染组UBC9相对表达水平分别为1.53 ± 0.18、1.00 ± 0.22和3.62 ± 0.35，三组比较差异有统计学意义（ F = 5.64， P<0.05）。超声检测结果显示，对照动脉损伤组、糖尿病动脉损伤组和UBC9转染组颈动脉内膜厚度逐渐增厚[（0.077 ± 0.015）、（0.216 ± 0.007）和（0.125 ± 0.014） mm]，差异有统计学意义（ F = 27.18， P<0.05）。组织学分析结果显示，对照动脉损伤组、糖尿病动脉损伤组和UBC9转染组颈动脉损伤后内膜增殖面积分别为（0.335 ± 0.066） × 10 6、（1.053 ± 0.103） × 10 6和（0.544 ± 0.040） × 10 6 μm 2，内膜面积与中膜面积比值分别为0.630 ± 0.063、2.030 ± 0.052和0.930 ± 0.100，三组比较差异均有统计学意义（ F = 13.58和53.96， P<0.05）。 结论:高血糖下调HUVEC和大鼠动脉组织UBC9表达水平及抑制PPARγ小泛素样修饰的作用，揭示高血糖下调的UBC9和PPARγ小泛素样修饰水平是糖尿病加速动脉粥样硬化的重要机制。

目的:总结1例泛素样修饰剂活化酶5( UBA5)基因突变导致发育性癫痫性脑病(DEE)患儿的临床特征及基因突变特点，并进行文献复习。 方法:回顾性分析2020年3月就诊于徐州医科大学附属徐州儿童医院神经内科的1例DEE患儿的临床特点及基因检测结果。以"癫痫性脑病""发育性脑病""Eephalopathy""Developmental encephalopathy""UBA5"为关键词，对PubMed、中国知网及万方等国内外数据库从建库至2020年6月相关文献进行检索，并对国内外报道的 UBA5基因突变所致DEE确诊病例进行汇总分析。 结果:患儿，女，7个月23 d，自4个月开始出现癫痫性痉挛发作，经促皮质素(ACTH)及多种抗癫痫药物未能控制；患儿全面发育落后，身材矮小，小头畸形，面部表情少，易激惹，竖头不稳，不能追视，不能逗笑，四肢肌张力低；全外显子组测序显示患儿 UBA5基因存在一处点突变和基因拷贝数变异(CNV)缺失，其中点突变系父源性c.722A>C(p.E241A)，位于第8号外显子区域，CNV缺失系母源性5-11号外显子区域，构成复合杂合突变。共检索出国外文献5篇(18例患儿)，国内文献0篇，对国外的18例确诊病例和本例汇总分析显示，19例均在婴儿早期出现难治性癫痫发作，发作形式多为癫痫性痉挛发作(63.2%，12/19例)，其次为肌阵挛(31.6%，6/19例)。患儿出生史均无异常，后出现不同程度的发育障碍，主要为小头畸形(94.7%，18/19例)、视觉缺陷(89.5%，17/19例)、身材矮小(94.7%，18/19例)、智力落后(89.5%，17/19例)、运动障碍(84.2%，16/19例)和肌张力低下(100.0%)等，其中大多数(68.4%，13/19例)已死亡。脑电图可呈现正常或者高峰节律紊乱等，其中1例出现暴发抑制。头颅磁共振成像(MRI)主要为不同程度的髓鞘化延迟(47.4%，9/19例)、脑萎缩(52.6%，10/19例)和胼胝体发育不良(26.3%，5/19例)等。 结论:UBA5基因突变累及的患儿常在婴儿早期出现难治性癫痫发作，发作类型主要为癫痫性痉挛发作；此外还呈现严重的精神运动发育迟滞、小头畸形和肌张力障碍等，预后极差，致死率高；头颅MRI提示不同程度的髓鞘发育不良、脑萎缩和胼胝体发育不良等；对具有以上临床表现的病例，应考虑行基因检测明确诊断。

目的:分析幼年特发性炎症性肌病(JIIM)患儿肌炎特异性抗体(MSAs)及肌炎相关性抗体(MAAs)与临床亚型的相关性，探讨MSAs在JIIM中的意义。方法:回顾性分析2017年1月至2019年10月在南京医科大学附属儿童医院风湿免疫科住院的JIIM患儿53例，采用欧蒙免疫印迹法检测血清16项肌炎抗体(MSAs和MAAs)的阳性率，分析肌炎抗体与JIIM患儿临床表现、并发症、治疗及预后的相关性。其中MSAs包括抗染色体-解旋酶-DNA结合蛋白(Mi-2)α抗体、抗Mi-2β抗体、抗转录中介因子(TIF)1-γ抗体、抗黑色素瘤分化相关基因5(MDA5)抗体、抗核基质蛋白2(NXP2)抗体、抗小泛素样修饰物活化酶抗体、抗信号识别颗粒抗体和抗合成酶(ARS)抗体。结果:53例JIIM患儿肌炎抗体(MSAs和MAAs)阳性率为69.8%(37/53例)，MSAs阳性率为66.0%(35/53例)，最常见MSAs为抗NXP2抗体(10例)，其次为抗TIF1-γ抗体(9例)、抗MDA5抗体(7例)、抗ARS抗体(7例)。抗NXP2抗体阳性患儿以中度肌肉损害(7例)和中度皮肤损害(7例)为主，抗TIF1-γ抗体阳性患儿5例出现持续性皮疹，抗MDA5抗体阳性患儿有严重皮疹(2例)和肺间质病变(5例)。与抗NXP2抗体阴性患儿比较，抗NXP2抗体阳性患儿的天冬氨酸转氨酶(AST)及肌酸激酶(CK)水平明显升高，抗TIF1-γ抗体、抗MDA5抗体和抗ARS抗体阳性患儿的CK水平均明显降低，抗MDA5抗体阳性患儿的血清铁蛋白水平明显升高，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。抗NXP2抗体与皮疹( r＝0.360， P＝0.008)和吞咽困难( r＝0.504， P<0.001)呈正相关。抗MDA5抗体( r＝0.497， P<0.001)和抗ARS抗体( r＝0.621， P<0.001)与肺间质病变呈正相关。抗TIF1-γ抗体( r＝-0.542， P<0.001)和抗MDA5抗体( r＝-0.446， P<0.001)与CK水平呈负相关。 结论:MSAs在JIIM患儿中阳性率较高，部分MSAs与JIIM特征性临床表型相关。MSAs可为JIIM患儿的临床亚类分型和疗效针对性评价提供指导。