目的 研究核因子E2 相关因子2(nuclear E2-related factor 2,Nrf2)靶点及线粒体质量控制系统调控姜三七挥发油(essential oil from Stahlianthus involucratus rhizomes,EOSIR)对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)损伤的保护作用机制.方法 用氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)诱导HUVECs建立细胞损伤模型,siRNA转染沉默Nrf2 因子的表达,将培养好的细胞分为对照组、模型组、EOSIR组、转染组、转染阴性对照组,利用蛋白质印迹法(Western-blot)及定量即时聚合酶链锁反应(quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测Nrf2 及其下游因子的蛋白及mRNA的表达;Griess法检测一氧化氮含量;酶联免疫法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)分析人内皮素(endothelin 1,ET-1)、人前列环素(prostacyclin,PGI2)的含量;线粒体质量检测实验中将细胞分为空白组、ox-LDL诱导组、低剂量EOSIR组、中剂量EOSIR组、高剂量EOSIR组、阿司匹林阳性对照组,透射电镜观察HUVECs线粒体形态;Western-blot检测线粒体融合蛋白1(mitofusin 1,Mfn1)、线粒体融合蛋白2(mitofusin 1,Mfn2)、线粒体动力相关蛋白(dynamin-related protein 1,Drp1)、线粒体内膜融合蛋白(optic atro-phy 1,Opa1)、线粒体转录因子A(mitochondrial transcription factor A,TFAM)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(peroxisome proliferatoractivated receptorγcoactivator-1α,PGC-1α)及轻链3A/B蛋白(LC3A/B)、泛素结合蛋白(p62)表达.结果 EOSIR组的Nrf2 及其下游因子的表达水平、NO、PGI2 的含量较模型组均显著升高,ET-1 水平较模型组相比显著降低,转染沉默Nrf2 后,EOSIR对上述指标的改善作用被抑制;透射电镜观察线粒体形态,EOSIR干预组自噬小体数量较模型组明显减少,线粒体形态恢复正常,同时,EOSIR组显著改善了ox-LDL引起的线粒体相关蛋白表达的变化(P<0.05).结论 EOSIR可能通过激活Nrf2 靶点及调控线粒体质量控制系统发挥对ox-LDL诱导的内皮细胞损伤的保护作用,延缓动脉粥样硬化的进程.

目的:探讨花黄色素(SY)调控腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/沉默信息调节因子 1(SIRT1)/核转录因子-κB(NF-κB)对冠心病(CHD)大鼠心肌损伤的影响.方法:将 60只 SD大鼠随机分为正常对照组(NC组,生理盐水)、模型组(Model组,生理盐水)、SY组(100 mg/kg SY)、EX-527组(47 mg/kg EX-527)、SY+EX-527组(100 mg/kg SY+47 mg/kg EX-527),每组 12只,持续 4周给予相应药物.试剂盒检测血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平和心肌白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平;苏木素-伊红(HE)染色法进行心肌组织病理学观察;末端脱氧核苷酸转移酶介导的 dUTP缺口末端标记(TUNEL)法检测心肌细胞凋亡情况;蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测心肌组织 AMPK/SIRT1/NF-κB通路相关蛋白表达.结果:与 NC组相比,Model组大鼠心肌细胞数量少且排列杂乱,细胞核皱缩,TC、TG、LDL-C、氧化修饰低密度脂蛋白(ox-LDL)、IL-6、TNF-α水平、心肌细胞凋亡率及NF-κB蛋白水平明显上升(P<0.05),SOD、GSH-Px水平及磷酸化-AMPK(p-AMPK)/AMPK、SIRT1蛋白水平明显下降(P<0.05).与 Model组比较,SY组大鼠心肌细胞数量增多且排列整齐有序,TC、TG、LDL-C、ox-LDL、IL-6、TNF-α水平、心肌细胞凋亡率及 NF-κB 蛋白水平明显下降(P<0.05),SOD、GSH-Px水平及 p-AMPK/AMPK、SIRT1蛋白水平明显上升(P<0.05);而 EX-527 组以上指标呈现相反趋势.与 SY组相比,SY+EX-527组大鼠心肌损伤加重,TC、TG、LDL-C、ox-LDL、IL-6、TNF-α水平、心肌细胞凋亡率及 NF-κB蛋白水平明显上升(P<0.05),SOD、GSH-Px水平及 p-AMPK/AMPK、SIRT1蛋白水平明显下降(P<0.05).结论:SY可能通过调控 AMPK/SIRT1/NF-κB通路降低氧化应激,减轻炎症反应,对冠心病大鼠心肌损伤起到一定改善作用.

目的 分析脂蛋白相关磷脂酶A2(Lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PLA2)、可溶性凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(soluble lectin-like oxidized low-density lipoprotein receptor-1,sLOX-1)、氧化修饰低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)水平与高血压脑出血(hypertensive intracerebral hemorrhage,HICH)患者预后的相关性.方法 回顾性分析66例HICH病例资料,患者术后均持续随访1个月,使用格拉斯哥预后评分(Glasgow outcome sacle,GOS)评估患者预后,GOS 1～3分为预后不良(n=32),GOS 4～5分为预后良好(n=34).比较两组基线资料、Lp-PLA2、sLOX-1、ox-LDL水平和美国国立卫生研究院卒中量表(National Institute of Health stroke scale,NIHSS)评分.采用Pearson相关性分析法分析HICH患者Lp-PLA2、sLOX-1、ox-LDL水平与NIHSS评分的相关性.使用受试者工作特征曲线(Receiver operator characteristic curv,ROC)分析Lp-PLA2、sLOX-1、ox-LDL水平评估HICH患者预后的价值.结果 两组HICH患者性别、年龄、发病至入院时间、高血压病程,差异无统计学意义(P>0.05),但预后不良组HICH患者出血量、Lp-PLA2、sLOX-1、ox-LDL水平与NIHSS评分均高于预后良好组(均P<0.05).Pearson相关性分析结果显示:HICH患者Lp-PLA2、sLOX-1、ox-LDL水平与NIHSS评分均呈正相关(P<0.05).ROC分析结果显示:Lp-PLA2、sLOX-1、ox-LDL水平在评估HICH患者预后的最佳临界值分别为157.75μg/L、362.50ng/L、54.15μg/dL,曲线下面积分别为0.793、0.900、0.793(P<0.05),敏感度分别为75.00%、87.50%、78.13%,特异度分别为82.35%、82.35%、76.47%.结论 预后不良组HICH患者Lp-PLA2、sLOX-1、ox-LDL水平呈高表达,Lp-PLA2、sLOX-1、ox-LDL水平越高,神经损伤越严重,且Lp-PLA2、sLOX-1、ox-LDL水平在评估HICH患者预后中具有一定价值.

目的:探讨脂蛋白α[Lp(α)]和循环氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)在主动脉瓣钙化性疾病(CAVD)中的水平及临床意义。方法:选取2018年8月至2023年12月新乡医学院第一附属医院的55例CAVD患者(CAVD组)和41例无瓣膜病变患者(对照组)作为研究对象，通过双源CT检查将CAVD组分为3组：轻度钙化组、中度钙化组和重度钙化组。比较并分析治疗前CAVD组和对照组血清Lp(α)和ox-LDL水平；比较并分析轻度钙化组、中度钙化组和重度钙化组血清Lp(α)和ox-LDL水平；比较并分析治疗前后CAVD组患者血清Lp(α)和ox-LDL水平。采用Pearson相关分析血清Lp(α)和ox-LDL水平与Agatston积分的关系。结果:CAVD组患者的Lp(α)和ox-LDL水平[409.20±134.55) mg/L、(49.44±16.02) ng/ml]明显高于对照组[(173.94±71.09) mg/L、(14.40±7.32) ng/ml， t＝10.08、12.89， P<0.05]。重度钙化组患者的Lp(α)和ox-LDL水平[566.81±47.19) mg/L、(68.31±7.05) ng/ml]明显高于中度钙化组[(410.57±76.29) mg/L、(50.07±6.96) ng/ml]和轻度钙化组[(259.08±54.99) mg/L、(30.88±6.37) ng/ml， t＝7.05、7.72、16.67、15.54， P<0.05]。Pearson相关分析结果显示，CAVD患者血清Lp(α)和ox-LDL水平与Agatston积分呈正相关( r＝0.73、0.75， P<0.05)。CAVD患者治疗后的Lp(α)和ox-LDL水平[273.51±93.99) mg/L、(31.66±8.70) ng/ml]明显低于治疗前[(409.20±134.55) mg/L、(49.44±16.02) ng/ml， t＝6.08、7.17， P<0.05]。 结论:Lp(α)和ox-LDL参与CAVD的发展，其水平变化与疾病的严重程度密切相关，是早期诊断和监测评估主动脉瓣钙化性疾病的良好预测因子。

目的:探讨尼莫地平联合神经节苷脂治疗脑出血的疗效及对血清抵抗素、氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）表达的影响。方法:选择2018年2月至2020年2月山东省淄博市中心医院收治的100例脑出血患者，按随机数字表法分为单一治疗组与联合治疗组，每组50例。单一治疗组在常规治疗的基础上给予尼莫地平治疗，联合治疗组在常规治疗的基础上给予尼莫地平联合神经节苷脂治疗。治疗2周后评价两组的疗效，比较两组治疗前后神经功能缺损量表（NIHSS）评分、日常生活能力（ADL）评分、血清炎性反应因子、抵抗素及ox-LDL水平。结果:联合治疗组治疗总有效率高于单一治疗组[90.0%（45/50）比74.0%（37/50）]，差异有统计学意义（ P<0.05）。两组治疗后NIHSS评分均下降，ADL评分均上升，且联合治疗组治疗后NIHSS评分低于单一治疗组[（9.41 ± 1.27）分比（12.10 ± 1.65）分]，ADL评分高于单一治疗组[（67.82 ± 9.04）分比（59.10 ± 8.75）分]，差异均有统计学意义（ P<0.05）。两组治疗后血清超敏C-反应蛋白、白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α、抵抗素及ox-LDL水平均明显下降，且联合治疗组治疗后上述指标均低于单一治疗组[（4.81 ± 1.03）mg/L比（6.10 ± 1.73）mg/L、（40.96 ± 9.21）μg/L比（56.74 ± 8.93）μg/L、（33.20 ± 7.96）μg/L比（44.76 ± 8.43）μg/L、（0.29 ± 0.09）μg/L比（0.45 ± 0.13）μg/L、（336.25 ± 69.74）mg/L比（372.18 ± 68.52）mg/L]，差异均有统计学意义（ P<0.05）。两组不良反应发生情况比较差异无统计学意义（ P>0.05）。 结论:尼莫地平联合神经节苷脂治疗脑出血疗效明确，能有效抑制炎性反应指标，降低血清抵抗素、ox-LDL水平，促进神经功能缺损恢复，提高患者生活能力。

目的:探讨阿司匹林（aspirin，ASP）对高脂血症诱导的足细胞内质网应激的影响及可能机制。方法:培养足细胞分为4组：对照组、ASP（100 μg/ml）组、ox-LDL（100 μg/ml）组和ASP+ox-LDL组，在6 h、12 h、24 h、48 h以实时定量PCR法检测蛋白激酶R样内质网激酶（protein kinase R-1ike endoplasmic reticulum kinase，PERK）、真核细胞起始因子2α（eukaryotic translation initiation factor 2α，eIF2α）、活化转录因子4（activating transcription factor-4，ATF4)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白（CAAT/enhancer binding protein homologous protein，CHOP）的表达；在24 h时以Western印迹法检测磷酸化（p）-PERK、p-eIF2α的表达；在12 h时以Western印迹法检测ATF4的表达。结果:在足细胞培养24 h时，ox-LDL组和ASP+ox-LDL组PERK、eIF2α的表达水平达高峰，在12 h时，该两组ATF4、CHOP的表达水平达高峰。在足细胞培养6 h、12 h、24 h、48 h时，与对照组比较，ox-LDL组PERK、eIF2α、ATF4、CHOP的表达水平明显较高（均 P<0.05）；与ox-LDL组比较，ASP+ox-LDL组上述各指标表达明显较低（均 P<0.05）。在足细胞培养24 h时，与对照组比较，ox-LDL组p-PERK、p-eIF2α的表达水平明显较高（均 P<0.05）；与ox-LDL组比较，ASP+ox-LDL组p-PERK、p-eIF2α的表达水平明显较低（均 P<0.05）。在足细胞分组培养12 h时，各组ATF4蛋白水平的表达与mRNA表达相似。ASP组与对照组间上述各项指标表达差异无统计学意义。 结论:高脂血症可能通过诱导PERK和eIF2α的磷酸化、激活ATF4转录及诱导CHOP高表达，引起足细胞内质网应激，而阿司匹林可能部分阻断了PERK通路，进而可能对足细胞具有保护作用。

目的:探讨血清单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、高迁移率蛋白B1（HMGB1）、脂联素（APN）和氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）水平对急性脑梗死（ACI）患者预后不良的预测价值。方法:选取山东国欣颐养集团淄博医院2018年10月至2020年12月收治的165例ACI患者作为观察组，另选同期体检健康者147例作为正常对照组，检测两组血清MCP-1、HMGB1、APN和ox-LDL水平；观察组出院后随访3个月，采用改良Rankin量表评分将其分为预后良好组和预后不良组，比较两组血清MCP-1、HMGB1、APN、ox-LDL水平，采用Logistic多元回归和受试者工作特征（ROC）曲线分析ACI患者预后不良的影响因素和血清MCP-1、HMGB1、APN和ox-LDL水平对ACI患者预后不良的预测价值。结果:观察组血清MCP-1、HMGB1和ox-LDL水平高于正常对照组[（322.61 ± 65.27）ng/L比（163.18 ± 15.12）ng/L、（6.61 ± 3.54）μg/L比（2.90 ± 0.41）μg/L、（481.11 ± 177.67）mg/L比（247.47 ± 27.13）mg/L]，血清APN水平低于正常对照组[（10.63 ± 3.80）μg/L比（17.65 ± 2.87）μg/L]，差异均有统计学意义（ P<0.05）。随访3个月后ACI患者预后不良发生率为35.15%（58/165）；预后不良组血清MCP-1、HMGB1和ox-LDL水平高于预后良好组[（372.15 ± 71.33）ng/L比（295.76 ± 42.23）ng/L、（9.74 ± 3.96）μg/L比（4.91 ± 1.62）μg/L、（631.03 ± 196.84）mg/L比（399.85 ± 95.07）mg/L]，血清APN水平低于预后良好组[（7.62 ± 2.83）μg/L比（12.27 ± 3.22）μg/L]，差异均有统计学意义（ P<0.05）。Logistic多元回归分析结果表明，年龄、高血压、高脂血症、梗死体积、神经功能缺损评分、发病至治疗时间与MCP-1、HMGB1、APN和ox-LDL水平均是ACI患者预后不良的影响因素（ P<0.05）。血清MCP-1、HMGB1、APN和ox-LDL水平联合预测ACI患者预后不良的灵敏度和曲线下面积分别为98.28%和0.954，均显著高于单一指标评价（ P<0.05）。 结论:血清MCP-1、HMGB1、APN和ox-LDL水平与ACI患者预后关系密切，且以上指标均对患者预后不良具有一定的预测价值，四项指标联合预测效能更高。

目的:探讨氧化型低密度脂蛋白（Ox-LDL）对RA患者成纤维样滑膜细胞（FLS）增殖及炎性因子mRNA表达的影响。方法:采用组织块贴壁法分离培养RA-FLS，4~6代细胞用于后续实验。不同浓度的人Ox-LDL刺激RA-FLS 24 h，MTS实验检测细胞增殖情况，实时（RT）-PCR法检测炎性因子IL-6、TGF-β、IL-8、TNF-α及清道夫受体CD36、结合磷脂酰丝氨酸和氧化脂蛋白的清道夫受体（SR-PSOX）mRNA表达水平。siRNA特异性敲减SR-PSOX，RT-PCR法检测敲减效果，同时验证SR-PSOX基因敲减后各相关基因的表达。统计学分析采用 t检验， F检验。 结果:不同浓度Ox-LDL（10、25、50 μg/ml）可明显促进RA-FLS的增殖，其吸光度（ A）值（490 nm）分别为：（1.04±0.15）、（1.05±0.14）、（1.00±0.10），均高于对照组（0.81±0.04），差异有统计学意义（ F=4.737， P<0.01）。在炎性因子mRNA表达方面，与对照组相比较，50 μg/ml和100 μg/ml Ox-LDL可显著促进IL-6 mRNA的表达（ F=14.709， P<0.01）；不同浓度Ox-LDL均可抑制RA-FLS中TGF-β mRNA的表达（ F=299.074， P<0.01），而对IL-8、TNF-α mRNA的表达无明显影响。进一步的机制探讨发现Ox-LDL可促进RA-FLS高表达SR-PSOX（ F=68.636， P<0.01），并抑制CD36的表达（ F=18.085， P<0.01）。siRNA特异性敲减SR-PSOX，可显著抑制Ox-LDL刺激RA-FLS表达IL-6 mRNA（ t=3.875， P<0.01），而对TGF-β mRNA表达水平无显著影响（ t=-0.193， P>0.05）。 结论:Ox-LDL可显著促进RA-FLS的增殖，同时Ox-LDL可能通过上调SR-PSOX的表达促进了IL-6 mRNA的表达，提示Ox-LDL可能参与了RA的滑膜增生及炎症持续过程。

目的:基于氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导的血管平滑肌细胞（VSMCs）氧化应激损伤模型，探讨高压氧（HBO）缓解动脉粥样硬化（AS）的分子机制。方法:利用ox-LDL处理VSMCs以构建VSMCs氧化应激损伤模型。采用CCK-8法检测VSMCs的增殖能力，Annexin V-FITC细胞染色联合流式细胞术检测VSMCs的凋亡水平，Western blotting实验检测VSMCs中凋亡相关蛋白以及PI3K/Akt/mTOR相关蛋白的表达水平。结果:ox-LDL可显著抑制VSMCs的增殖能力并促进其凋亡（ P<0.05），而HBO处理可逆转ox-LDL对VSMCs的损伤（ P<0.05）。此外，HBO处理可显著激活PI3K/Akt/mTOR信号通路（ P<0.05），同时下调细胞程序性凋亡相关蛋白C-caspase-3和Bax的表达水平，上调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平（ P<0.05）。 结论:HBO可通过激活PI3K/Akt/mTOR通路保护氧化应激损伤的VSMCs，从而达到缓解AS的目的。

目的:通过观察脂多糖(LPS)诱导的Toll样受体4(TLR4)对载脂蛋白E基因敲除(ApoE -/-)小鼠动脉粥样硬化斑块内质网应激通路蛋白表达水平的影响，探讨内质网应激对小鼠动脉粥样硬化斑块稳定性的影响。 方法:2015年10月至2016年2月选择ApoE -/-小鼠24只，高脂喂养10周后数字抽签随机分为对照组、LPS组、TLR4的特异性抑制剂TAK(TAK组)，各8只。干预10周后取眼球血检测总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)。处死小鼠留取颈动脉和主动脉标本。免疫组化法检测颈动脉斑块巨噬细胞(MOMA-2)、平滑肌肌动蛋白(α-actin)、TLR4、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNFα)及κ基因结合核因子(NFκB)的表达。免疫印迹法检测PKR样真核起始因子2α激酶(PERK)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、糖调节蛋白78(GRP78)的水平。 结果:LPS组小鼠与对照组和TAK组小鼠比较，TC(25.0±2.3)mmol/L比(20.2±1.6)mmol/L、(20.8±2.6)mmol/L、TG(1.3±0.1)mmol/L比(1.3±0.1)mmol/L、(1.0±0.1)mmol/L、ox-LDL(17.4±1.3)mmol/L比(15.8±1.6)mmol/L、(12.1±1.1)mmol/L水平升高( P<0.05)；斑块形态学及病理学比较，LPS组小鼠动脉粥样硬化斑块范围大，巨噬细胞含量增多( P<0.05)，平滑肌细胞含量减少( P<0.05)，斑块TLR4、IL-1β、IL-6、TNFα及NFκB的表达水平较其他两组增加( P<0.05)；PERK、CHOP、GRP78的表达水平增加( P<0.05)。与对照组比较，TAK组PERK、CHOP、GRP78的表达水平减少( P<0.05)。LPS组TLR4，质网应激通路蛋白PERK、CHOP、GRP78的表达水平增加。 结论:LPS诱导的TLR4可上调内质网应激通路蛋白的表达，且引起内质网应激下游炎性细胞因子分泌增加，加重脂质代谢紊乱，增加动脉硬化斑块的不稳定性。