目的:探讨一氧化氮（NO）对屏障功能破坏的小鼠表皮增生的影响。方法:将15只SKH1无毛小鼠按随机数字表法分为正常对照组（3只）、S-亚硝基-N-乙酰青霉胺（SNAP）处理组（4只）、屏障破坏组（4只）、屏障破坏+SNAP处理组（4只）；将15只C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组、屏障破坏组、屏障破坏+硝普钠（SNP）处理组，每组5只。正常对照组小鼠背部涂抹丙二醇-乙醇混合溶剂；SNAP处理组仅涂抹SNAP溶液；屏障破坏组采用胶带反复粘贴背部皮肤并涂抹丙二醇-乙醇混合溶剂，每天2次；屏障破坏+SNAP或SNP处理组小鼠经胶带处理后涂抹10 mmol/L SNAP或SNP溶液。各组均连续处理4 d，第5天处死小鼠并取皮肤组织，制作石蜡切片，苏木精-伊红（HE）染色，检测表皮厚度，增殖细胞核抗原（PCNA）染色检测表皮增殖细胞。多组间比较采用双因素方差分析和单因素方差分析，两组间多重比较采用LSD- t检验。 结果:SNAP处理组SKH1小鼠表皮厚度及PCNA阳性细胞数与正常对照组相比差异均无统计学意义（ t值分别为0.33、1.25， P值分别为0.748、0.246）。与正常对照组相比，屏障破坏组SKH1和C57BL/6J小鼠表皮厚度均明显增加，PCNA阳性细胞数均明显增多（均 P < 0.01）。屏障破坏组SKH1小鼠表皮厚度为（50.4 ± 5.4）μm，PCNA阳性细胞数为（87.3 ± 3.8）个/mm，而C57BL/6J小鼠分别为（45.9 ± 3.7）μm和（232.0 ± 19.3）个/mm，与之相比，屏障破坏+SNAP处理组SKH1小鼠及C57BL/6J小鼠表皮均显著增厚[（127.5 ± 12.0）μm，（78.1 ± 7.6）μm，均 P < 0.001]，且PCNA阳性细胞数均明显增多[（120.0 ± 5.0）个/mm，（285.0 ± 15.0）个/mm，均 P < 0.01]。 结论:局部NO供体处理不影响正常表皮增生，但在表皮屏障功能破坏状态下，NO供体促进表皮增生，提示皮肤状态影响局部NO供体对表皮增生的作用。

先天性心脏病合并肺动脉高压是临床上棘手的心血管疾病之一，其发病机制尚不完全清楚。硫化氢是继一氧化氮和一氧化碳之后的第三种气体信号分子，能在哺乳动物体内合成。越来越多的研究表明，硫化氢可以通过舒张血管、抗凋亡、抗氧化应激、抗炎及促进血管生成等作用调节肺血管重塑，从而对先天性心脏病合并肺动脉高压患儿具有保护作用。近年来，这一领域的研究热点已经转移到了新型硫化氢供体的开发上。该文主要阐述硫化氢在先天性心脏病合并肺动脉高压中的调节机制，并介绍硫化氢供体治疗的进展。

目的:探讨环指蛋白152(RNF152)在结肠炎相关结肠癌(CAC)发生发展过程中的作用及其作用机制。方法:联合应用氧化偶氮甲烷(AOM)和葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导C57BL/6小鼠，建立CAC发生发展4个阶段(分别为正常上皮组织、炎症恢复期、轻度不典型增生、腺癌)的小鼠模型。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测不同阶段小鼠结肠组织中RNF152 mRNA的表达。利用人结直肠癌RKO细胞建立稳定高表达RNF152的细胞系。采用流式细胞术检测RNF152高表达对细胞凋亡的影响，Western blot法检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bcl-XL的表达。使用NO自由基供体DETA NONOate处理细胞，比较RNF152高表达对NO诱导细胞凋亡的影响。结果:AOM和DSS联合使用能有效地模拟人类CAC的病程，AD3组小鼠成瘤率为100%。CAC小鼠模型的结肠全基因组表达谱芯片显示，RNF152 mRNA的表达水平随着结肠癌的发生发展逐步降低。RT-qPCR检测结果显示，腺癌组结肠组织中RNF152 mRNA的表达水平为1.23±0.18，高于对照组结肠组织(0.52±0.08, P<0.01)。RNF152稳定高表达的RKO-RNF152细胞中，sub-G1期细胞比例[(3.6±0.4)%]高于RKO-PCDB细胞[(1.8±0.1)%, P<0.01]，Bcl-XL和Bcl-2的蛋白表达水平明显下调。DETA NONOate处理后，RKO-RNF152细胞的凋亡比例为(31.2±3.1)%，高于RKO-PCDB细胞[(14.2±2.1)%, P<0.001]。 结论:RNF152的表达降低与CAC的发生发展有关，可能通过抑制细胞凋亡促进了CAC的发生发展。

目的:探讨一氧化氮（NO）在外源性硫化氢（H 2S）抑制大鼠结肠动力中的作用。 方法:免疫组化检测H 2S合成酶胱硫醚-γ-裂解酶（CSE）和胱硫醚-β-合成酶（CBS）在成年Wistar大鼠近端结肠的分布；制备近端结肠纵行肌（LM）和环形肌条（CM），通过恒温浴槽实验观察NO相关工具药干预后外源性H 2S供体硫氢化钠（NaHS）对LM和CM收缩活动的影响；通过膜片钳实验检测不同浓度NaHS对平滑肌细胞L型钙通道电流（I Ca，L）的影响。 结果:H 2S合成酶CBS和CSE在近端结肠肌间神经丛、黏膜层及环纵平滑肌细胞均表达。河豚毒素孵育肌条后NaHS以浓度依赖的方式抑制LM和CM自发性收缩活动，LM最大抑制的半数有效浓度（IC 50）为917.6 μmol/L（95% CI：776.3~1 085 μmol/L， n=6），CM的IC 50为730.4 μmol/L（95% CI：592.2~900.8 μmol/L， n=6）。NO供体硝普钠（SNP）预处理肌条后加入NaHS（3×10 -4~6×10 -4mol/L），LM及CM收缩幅度呈现双向变化，其中低浓度NaHS使LM收缩幅度从（0.679±0.181）g增加至（0.840±0.400）g（ n=8， P<0.01），使CM收缩幅度从（0.378±0.140）g增加至（1.176.±0.056）g（ n=8， P<0.01）。sGC抑制剂可溶性鸟苷酸环化酶抑制剂（sGC）ODQ孵育组NaHS的IC 50高于对照组（ P<0.05），而NO合成酶抑制剂L-NNA、NO前体L-精氨酸、环磷酸鸟苷（cGMP）竞争性拮抗剂PET-cGMP预处理肌条前后NaHS的IC 50差异无统计学意义（ P>0.05）。NaHS（100 μmol/L）使L型钙通道峰电流密度增加[（-4.29±0.29）比（-3.77±0.27）pA/pF， P<0.01]；而NaHS（300 μmol/L）使峰电流降低至（-2.96±0.34）pA/pF（ P<0.05），并使电流-电压曲线右移。 结论:外源性H 2S对大鼠结肠动力可能具有双重调节作用，其中对结肠平滑肌的抑制作用不依赖NO；L型钙通道在H 2S对结肠动力的双重调节作用中发挥重要作用。

目的:研究外源性一氧化氮(NO)对鼻咽癌5-8F放疗抵抗细胞株(5-8FRs)放射效应的影响，为寻找合适的鼻咽癌放射增敏剂提供实验依据。方法:体外培养5-8FRs细胞株，使用不同浓度NO供体药物硝普钠(SNP)干预5-8FRs细胞，CCK-8法检测细胞增殖抑制率筛选出一个对5-8FRs细胞增殖无明显影响的IC 01 SNP浓度(细胞增殖抑制率为1%的SNP浓度)；使用1、2、4、6 Gy和8 Gy放射线干预5-8FRs细胞，确定IC 15放射剂量(细胞增殖抑制率为15%的放射剂量)。用IC 01SNP浓度、IC 15放射剂量放疗单独干预及二者联合干预5-8FRs细胞，高倍镜下观察细胞形态学变化，CCK-8法检测各分组细胞增殖抑制率，流式细胞仪检测细胞凋亡情况，硝酸还原法检测细胞上清液中NO浓度。 结果:⑴SNP以浓度依赖方式、放射线以剂量依赖方式抑制5-8FRs细胞的增殖，其中SNP IC 01为(513.89±14.69)μmol/L(SNP组)；放射剂量IC 15为(3.96±0.33)Gy(放疗组)；⑵联合组(SNP＋放疗)与单独SNP组和放疗组相比，5-8FRs细胞形态学差异显著，漂浮细胞显著增多，贴壁细胞数量逐渐减少并失去原有形态；⑶IC 01的SNP浓度对5-8FRs细胞增殖无明显影响，然而联合组较单独放疗组细胞抑制率显著提高( t＝7.708， P<0.01)；并且联合组中NO浓度显著高于单组放疗组[(310.03±5.76)μmol/L vs (77.34±2.60)μmol/L， P<0.05]；⑷5-8FRs自发凋亡率为(1.35±0.06)%，SNP组凋亡率为(2.22±0.37)%，SNP组细胞凋亡无明显变化，放疗组凋亡率为(15.37±0.65)%，联合组为(50.27±2.24)%，联合组较放疗组促凋亡能力显著增强( t＝-21.459， P＝0.001)。 结论:合适浓度的外源性NO可在对细胞本身不产生明显毒性的情况下可显著增加5-8FRs细胞株放射敏感性。

目的:研究慢性酒精摄入对小脑分子层感觉信息传递的影响，揭示慢性酒精中毒对小脑皮质感觉信息传递与信息整合影响的机制。方法:50只6～8周龄健康雄性ICR小鼠按照随机数字表法分为生理盐水组(对照组)和酒精摄入组(酒精组)，每组25只，酒精组每日腹腔注射体积分数为20%酒精，对照组则注射同等剂量的生理盐水，所有小鼠每天腹腔注射一次，连续注射28 d。通过电生理技术运用膜片钳放大器及数据采集软件记录感觉刺激诱发酒精组及对照组小鼠小脑分子层场电位变化。采用Clampfit 10.3软件对电生理数据进行记录分析，采用SPSS 22.0软件对数据进行统计分析，使用配对 t检验和单因素方差分析比较用药前后的差异。 结果:给予吹风刺激后，酒精组小鼠的P1振幅较对照组显著增高[(121.3±3.5)%，(97.2±2.7)% ； t＝26.08， P<0.05)，P1曲线下面积较对照组明显增大[(127.1±4.2)% ，(102.2±3.5)%； t＝22.95， P<0.05]。酒精组N1的平均振幅与对照组比较差异无统计学意义( P>0.05)。小鼠脑表面灌流一氧化氮合酶抑制剂L-NNA后，吹风刺激诱发的酒精组小鼠P1振幅(76.2±4.8)%较给药前(103.5±3.6)%显著降低( t＝22.60， P<0.05)，但洗脱后(101.5±4.6)%与给药前相比差异无统计学意义( t＝1.70， P>0.05)，P1曲线下面积(72.4±5.6)%较给药前(102.7±2.6)%显著降低( t＝24.58， P<0.05)，洗脱后(100.6±3.5)%与给药前差异无统计学意义( t＝1.81， P>0.05)。小鼠脑表面灌流一氧化氮合酶抑制剂L-NNA后，对照组小鼠的P1振幅(104.3±1.6)%与给药后(102.2±5.6)%( t＝1.84， P>0.05)及洗脱后(102.5±4.5)%( t＝1.92， P>0.05)比较，均差异无统计学意义；P1曲线下面积(103.5±2.6)%较给药后(102.5±4.6)%( t＝0.99， P>0.05)及洗脱后(101.9±3.7)%( t＝1.81， P>0.05)差异无统计学意义。对照组小鼠脑表面灌流一氧化氮供体SNAP后，吹风刺激诱发分子层场电位P1振幅(128.2±3.4)%较给药前(103.5±2.6)%显著增加( t＝28.89， P<0.05)，洗脱后(105.4±4.2)%较给药前差异无统计学意义( t＝1.93， P>0.05)，P1曲线下面积(125.4±4.4)%较给药前(104.3±4.6)%显著增加( t＝16.60， P<0.05)，而给药前与洗脱后(103.5±4.2)%差异无统计学意义( t＝0.65， P>0.05)。 结论:慢性酒精摄入显著增强抑制性反应，抑制性成分的增强源于NO信号通路的激活。

目的:探讨一氧化氮(NO)供体和聚多巴胺复合纳米体系的制备方法以及其对肝癌细胞的抑制作用。方法:采用化学合成法制备聚多巴胺(PDA)负载一氧化氮供体S-亚硝基半胱胺衍生物(SNO)得到纳米载药复合体系SNO@PDA，通过磁共振成像和质谱分析进行化学结构鉴定，通过动态光散射技术和透射电镜检测其粒径和形貌表征，分别通过电子温度计和Griess试剂盒检测光热稳定性以及NO的释放。最后通过噻唑蓝(MTT)实验检测纳米载药复合体系对肝癌细胞株Huh7的生长抑制作用。两组间均数比较用 t检验，多组间均数比较用单因素方差分析。 结果:磁共振成像和质谱分析确认成功合成SNO，动态光散射技术测定SNO@PDA的粒径在190 nm左右，透射电镜显示为球形颗粒，形态均一，且在生理条件下可稳定存在。SNO@PDA的载药率为19.4%，包封率为71.4%。当浓度为35 mg/L时，近红外(Near-infrared，NIR)照射后温度可升高12 ℃左右。重复4个开/关循环后升温幅度没有变化。3个循环后NO的释放率达到86%。MTT法测定细胞存活率，当浓度为60 mg/L时，SNO@PDA+NIR组的细胞存活率为(37.2±2.2)%，低于SNO+NIR组(60.1±7.2)%，差异有统计学意义( t＝6.500， P<0.01)；低于空白材料PDA组(73.9±0.5)%，差异有统计学意义( t＝5.900， P<0.01)；低于PDA+NIR组(57.9±7.1)%，差异有统计学意义( t＝6.400， P<0.01)。 结论:SNO@PDA可以发挥化疗-光热疗法的组合优势，有效抑制肝癌细胞的增殖。

目的:在乙型肝炎病毒(HBV)阳性肝癌鸡胚移植模型中,探讨一氧化氮供体JS-K对肿瘤细胞生长的影响.方法:将HBV阳性肝癌细胞HepG2.2.15接种于9日龄受精鸡胚中,按照处理方式不同分为5组:阴性对照组,JS-K低、中、高剂量组(1、5、10 μg/个),索拉非尼(Sora)组(400μg/个),每组各3只.2 d后按分组给药,给药采用直接滴加于移植瘤上的方式,1次/d,连续8 d.实验结束后取出鸡胚移植瘤,观察各组移植瘤大小,拍照并称重,采用HE染色法观察各组JS-K对肿瘤细胞的影响;采用免疫印迹法检测肿瘤组织中迁移相关蛋白Vimentin及N-Cadherin的表达情况.结果:与对照组相比,不同剂量JS-K作用后,鸡胚移植瘤体积均明显减小,其中JS-K高剂量组肿瘤体积最小(P＜0.05);HE染色可见JS-K作用后瘤细胞数量明显减少;JS-K低剂量组鸡胚移植瘤波形蛋白Vimentin表达水平高于其他组,N-cadherin表达水平低于其他组(P＜0.05).结论:JS-K对HBV阳性肝癌鸡胚移植瘤具有抑瘤作用,该效应可能与抑制鸡胚移植瘤细胞迁移有关.

目的 利用高速荧光摄影技术,探究一氧化氮(NO)对成年斑马鱼骨骼肌细胞钙瞬态的调控作用.方法 利用成年斑马鱼分离提取其游离骨骼肌细胞,将细胞以Fluo-4,AM荧光探针孵育后,使用高速荧光摄像机记录单个电刺激后斑马鱼游离骨骼肌细胞内钙瞬态的荧光变化,并定量计算细胞内钙瞬态相关的生物物理学参数.实验分组为对照组、S-亚硝基-N-乙酰基-DL-青霉胺(SNAP)组和N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)组,使用NO供体SNAP和非特异性一氧化氮合酶(NOS)抑制剂L-NAME探究NO对成年斑马鱼骨骼肌细胞钙瞬态的调控作用.实验再分组为对照组、N-乙基马来酰亚胺(NEM)组、1H-[1,2,4]恶草灵并[4,3-A]喹喔啉-1-酮(ODQ)组、SNAP组和SNAP+ODQ组,使用sGC-cGMP-PKG通路抑制剂ODQ和S-亚硝基化抑制剂NEM探究NO对成年斑马鱼骨骼肌细胞钙瞬态的调控机制.结果 高速荧光摄影技术可以完整记录成年斑马鱼骨骼肌细胞内的钙瞬态荧光变化,并计算出细胞内钙瞬态相关的生物物理学参数.与对照组比较,SNAP组骨骼肌细胞钙瞬态明显降低,而L-NAME组骨骼肌细胞钙瞬态较对照组明显增强.ODQ组骨骼肌细胞钙瞬态明显强于对照组,而NEM组与对照组比较各钙瞬态相关参数差异无统计学意义(P＞0.0 5).SNAP+ODQ组骨骼肌细胞钙瞬态也明显强于SNAP组.结论 NO能够通过sGC-cGMP-PKG途径负向调控成年斑马鱼骨骼肌细胞内的钙瞬态过程.

目的 评价超声辅助微泡溶栓联合声动力疗法的中空复合纳米粒子的生物安全性及体外溶栓效果,评估其治疗静脉血栓栓塞症的潜在应用价值.方法 制备氮掺杂石墨烯量子点(NGQD)和一氧化氮供体N,N'-二仲丁基-N,N'-二亚硝基-1,4-苯二胺(BNN6),BNN6负载于NGQD上,将二者复合体载入利用盐模板法制备的中空介孔二氧化硅(HMSN)中,形成纳米溶栓体系BNM;通过电镜和纳米粒度仪观察BNM的形貌、尺寸等特征;通过细胞毒性实验、活—死细胞染色及溶血实验评价纳米溶栓体系BNM的生物安全性;通过体外溶栓和纤维蛋白凝块降解评价纳米材料的体外溶栓效果.结果 与对照组相比,不同浓度的BNM对HUVECs和RAW264.7细胞的活性无影响,中低浓度BNM的溶血率未超过纳米材料溶血安全限,3个浓度的BNM对红细胞和血小板的形貌未产生明显影响,不引起血小板活化;与对照组相比,超声辅助BNM组的溶栓率随BNM浓度增加而提高,纤维蛋白网络出现空洞,荧光面积比降低.结论 本研究制备的纳米溶栓系统具有很好的生物相容性和血液安全性,可以响应超声进行溶栓,表现出优良的溶栓性能,为临床应用提供了新策略.