目的:运用网络药理学和分子对接技术分析七方胃痛颗粒干预胃癌的潜在作用机制。方法:运用TCMSP、TCMID和Swiss Target Prediction数据库筛选七方胃痛颗粒的药物化学成分及相关靶点，采用GeneCards、OMIM数据库筛选胃癌作用靶点，并获得药物-疾病共同靶点，上传至STRING数据库，构建蛋白相互作用关系（PPI）网络，得到关键靶点，在Oncomine肿瘤数据库中分析关键靶点与胃癌的相关性。通过Cytoscape软件构建药物-疾病调控网络，采用Cytoscape软件的CluoGO插件和R语言对关键靶点进行GO和KEGG富集分析。通过分子对接验证药物分子和靶分子结合的可能性。结果:获得七方胃痛颗粒的药物化学成分168个，胃癌作用靶点2 803个，药物-疾病共同靶点49个。药物-疾病调控网络中度值较高的化学成分为β-谷甾醇、芒柄花素、豆甾醇等。PPI网络中关键靶点为MAPK8、FOS、AR等，GO富集分析集中于凋亡信号通路中线粒体外膜通透性的正调控等，KEGG富集分析显著富集在细胞凋亡通路等。分子对接结果显示药物分子与靶分子结合性好、构象稳定。结论:七方胃痛颗粒可诱导与胃癌相关的基因、蛋白表达，影响激素水平、细胞凋亡等生物学过程，激活凋亡信号通路来发挥主效应。

目的:探究加味七方胃痛颗粒含药血清对胃黏膜上皮细胞铁死亡的影响及机制.方法:GES-1细胞分为空白对照组、模型组、加味七方胃痛颗粒含药血清低浓度组、加味七方胃痛颗粒含药血清中浓度组、加味七方胃痛颗粒含药血清高浓度组、si-E-cad-NC+加味七方胃痛颗粒含药血清组、si-E-cad+加味七方胃痛颗粒含药血清组.CCK-8法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡、ROS水平、线粒体膜电位和Fe2+水平;qPCR检测E-cadherin、NF2、YAP、TEAD、TfRl mRNA 表达;Western Blot 检测 E-cadherin、Merlin、p-YAP、YAP、TEAD、TfRl 蛋白表达.结果:与空白对照组比较,模型组GES-1细胞活力及E-cadherin、NF2(Merlin)、TEAD表达显著降低,细胞凋亡率、ROS水平、线粒体膜电位、Fe2+水平、TfRl mRNA及蛋白表达和p-YAP/YAP水平显著升高.与模型组比较,加味七方胃痛颗粒含药血清可逆转上述除TEAD外各指标的变化.给予加味七方胃痛颗粒的同时抑制E-cadherin表达则可抑制加味七方胃痛颗粒含药血清的作用.结论:加味七方胃痛颗粒可通过上调E-cadherin表达,活化NF2而拮抗Hippo通路,抑制胃黏膜上皮细胞铁死亡.

目的:探讨加味七方胃痛颗粒对裸鼠原位移植胃癌三叶因子3 (trefoil factor family3, TFF3) 的表达及其细胞外信号调节激酶 (extracellular signal-regulated kinase, ERK) /核因子кB (nuclear factor-кB, NF-кB) 信号通路的调控机制.方法:复制裸鼠胃癌原位移植模型, 随机分成正常组 (即空白对照组), 氟尿嘧啶 (5-fluorouracil, 5-FU) 组, 5-FU+加味七方胃痛颗粒组, 加味七方胃痛颗粒组, 每组15只.采用Western blot、RT-PCR检测加味七方胃痛颗粒对裸鼠原位移植胃癌中TFF3、NF-кB、ERK基因及蛋白表达的影响.结果:加味七方胃痛颗粒组TFF3、NF-кB、ERK m RAN及蛋白表达量较正常组降低 (P＜0.05), 5-FU+加味七方胃痛颗粒组TFF3、NF-кB、ERK m RAN及蛋白表达量较5-FU组降低 (P＜0.05) .结论:加味七方胃痛颗粒可能通过抑制ERK/NF-кB信号通路参与下调裸鼠原位移植胃癌TFF3、NF-кB、ERK表达水平, 从而达到抗癌作用.

目的:探讨加味七方胃痛颗粒对人胃癌细胞株SGC7901 肠三叶因子3 (Trefoil Factor3,TFF3) 的表达及其细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK) /核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路的调控机制.方法:参照血清药理学方法制备加味七方胃痛颗粒含药血清,分别用不同剂量的含药血清、5-氟尿嘧啶(5-FU)和生理盐水对SGC 7901 进行培养.分别采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法及流式细胞术检测细胞增殖及凋亡;采用western blot、RT-PCR 检测细胞TFF3、NF-κB、ERK mRNA 及蛋白表达水平.结果:与空白对照组相比,加味七方胃痛颗粒能抑制SGC 7901 的增殖、促进其凋亡(P ＜ 0. 05),并呈浓度、时间依赖性;中药血清干预后人胃癌细胞株TFF3、ERK、NF-κB蛋白和mRNA 表达降低,与空白对照组相比差异具有统计学意义(P ＜ 0. 05).结论:在体外试验中,加味七方胃痛颗粒能抑制SGC 7901 的增殖并促进其凋亡,可能通过下调胃癌细胞TFF3、ERK/NF-κB 蛋白的表达水平,从而到达抗癌作用.

目的 探讨七方胃痛颗粒对胃癌细胞中Fas/FasL通路的影响.方法 参照血清药理学方法制备七方胃痛颗粒含药血清,以10％、20％、30％浓度七方胃痛颗粒含药血清作用SGC-7901胃癌细胞后,MTT法检测七方胃痛颗粒对SGC-7901细胞的生长抑制作用;Western Blot和RT-PCR法检测经七方胃痛颗粒干预前后胃癌细胞SGC-7901中Fas,FasL,FADD,Caspase-3、Caspase-8因子的蛋白及mRNA表达变化.结果 与空白对照组相比,七方胃痛颗粒能抑制SGC-7901的增殖(P＜0.05),并呈浓度、时间依赖性;中药血清干预后人胃癌细胞株Fas,FasL,FADD,Caspase-3、Caspase-8蛋白和mRNA表达升高,与空白对照组相比差异具有统计学意义(P＜0.05),并呈浓度、时间依赖性.结论 在体外试验中,七方胃痛颗粒能抑制SGC 7901的增殖并促进其凋亡,可能通过下调胃癌细胞Fas、FasL、FADD、Caspase-3、Caspase-8蛋白的表达水平,从而达到抗癌作用.

目的 研究七方胃痛颗粒对胃癌实验大鼠的治疗作用.方法 Wistar大鼠220只,模拟改良MNNG+复合造模法建立胃癌大鼠模型155只,随机分为空白对照组、5-FU组、中药组、5-FU组+中药组,每组各38只,剩余备用,分别对各组大鼠进行药物干预.干预期间每天观察各组大鼠的一般情况及死亡情况,并于干预6周、干预12周后两个时段采集各个组大鼠胃组织标本,在HE染色镜下进行病理组织鉴定.结果 干预6周、干预12周后,5-FU组、中药组、5-FU组+中药组大鼠一般情况、死亡情况以及病理组织学检查均较空白对照组改善显著(P＜0.01),且随着干预时间的延长有明显改善趋势(P＜0.05);其中以5-FU组+中药组、中药组作用更加明显(P＜0.05).结论 七方胃痛颗粒治疗胃癌实验大鼠疗效确切可靠.

目的 研究七方胃痛颗粒对人结肠癌耐药细胞株Caco-2增殖与凋亡的影响.方法 采用不同浓度的七方胃痛颗粒(药物组成为红参、黄芪、茯苓、白术、炙甘草、丹参、木香、黄连、吴茱萸、白芍、枳实、炒鸡内金)药物血清干预人结肠癌耐药细胞株Caco-2,运用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定不同浓度的七方胃痛颗粒药物血清对Caco-2增殖抑制的影响,流式细胞术(FCM)法检测药物血清对Caco-2细胞凋亡的作用及其在不同浓度下对Caco-2细胞凋亡的干预强度.结果 七方胃痛颗粒药物血清对抑制细胞株Caco-2细胞增殖的作用呈时间-浓度依赖性,时间越长、药物浓度越高,抑制作用越强;而其对Caco-2细胞的凋亡作用随药物血清浓度增加而升高.结论 七方胃痛颗粒药物血清能够有效抑制人结肠癌耐药细胞株Caco-2增殖及诱导细胞凋亡.

目的:基于TGF - β/smad信号通路探讨七方胃痛颗粒对人胃腺癌AGS - EMT细胞ZEB2、E - cad及Vimentin的影响及可能的机制.方法:用TGF -β1处理AGS细胞建立上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)模型,将细胞分为空白组、七方胃痛颗粒(含药血清+EMT模型)组、LY2109761 (TGF - β/Smad抑制剂+ EMT模型)组,用RT -PCR、Western Blot法检测ZEB2、E -cad及Vimentin的表达.结果:与空白组比较,七方胃痛颗粒及LY2109761干预后能上调E - cad蛋白及其mRNA的表达,下调ZEB2蛋白及其mRNA和Vimentin蛋白及其mRNA的表达(P＜0.05),并呈时间依赖性.与七方胃痛颗粒组相比,LY2109761组ZEB2蛋白及其mRNA的表达明显下调(P ＜0.05).结论:七方胃痛颗粒与LY2109761作用相似,其可能是通过抑制TGF- β1/Smad信号通路,上调E - cad表达,下调ZEB2及Vimentin表达,抑制EMT形成,从而抑制人胃腺癌AGS细胞的上皮-间质转化.

目的 探讨七方胃痛颗粒对ZEB2、14-3-3ζ/TGF-β3/smad通路介导胃癌EMT和获得浸润侵袭转移能力过程中的作用和机制及对EMT细胞的ZEB2、14-3-3ζ表达的影响,为七方胃痛颗粒防治胃癌提供理论依据.方法 参照血清药理学方法制备七方胃痛颗粒含药血清,观察七方胃痛颗粒中药对AGS细胞、TGF-β1诱导AGS细胞形成EMT细胞的干预情况,分别采用细胞划痕试验、Transwell细胞侵袭试验和MTT法检测细胞侵袭迁移穿透能力;采用Western Blot、RT-PCR法检测细胞ZEB2、14-3-3ζ的转录及表达情况.结果 与TGF-β31/Smad组和空白对照组相比,七方胃痛颗粒能抑制人胃腺癌AGS细胞及EMT细胞的增殖、侵袭和穿透能力(P＜0.05),且EMT细胞中ZEB2、14-3-3ζ蛋白和mRNA表达降低(P＜0.05),并呈时间依赖性.结论 在体外试验中,七方胃痛颗粒能抑制人胃腺癌AGS细胞及其EMT细胞的增殖、侵袭和穿透能力,其机制可能与抑制其ZEB2、14-3-3ζ及TGF-β/smad通路相关,从而达到抗癌作用.

目的 探究七方胃痛颗粒对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导人胃腺癌细胞AGS上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)过程的影响及其潜在分子机制.方法 为了探究七方胃痛颗粒对TGF-β1处理的AGS细胞增殖、迁移和侵袭的影响,实验分为四组:AGS细胞对照组,EMT空白模型组,中药血清组,TGF-β/smad通路抑制剂组,分别利用CCK8、细胞划痕实验和Transwell实验检测细胞增殖、迁移和侵袭能力.此外,通过免疫荧光检测EMT过程中相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin、14-3-3ζ、Smad2和p-Smad2/3)的表达水平.结果 与AGS细胞对照组相比,TGF-β1诱导EMT过程,显著促进AGS细胞增殖、迁移和侵袭,下调了E-cadherin的表达,上调了N-cadherin、14-3-3ζ、Smad2和p-Smad2/3的表达;与EMT空白模型组相比,中药血清组、TGF-β/smad通路抑制剂组显著抑制了细胞增殖、迁移和侵袭,上调了E-cadherin的表达,降低了N-cadherin、14-3-3ζ、Smad2和p-Smad2/3的表达.结论 七方胃痛颗粒通过调控TGF-β/smad信号通路从而抑制人胃腺癌AGS细胞的EMT过程.