目的:建立黄芪药材三维荧光光谱质量评价方法。方法:利用荧光光谱分析技术测定黄芪提取物三维荧光光谱，通过对激发-发射矩阵荧光数据的平行因子分析，解析黄芪三维荧光光谱的荧光组分特征；测定23个产地黄芪样本的三维荧光光谱，并进行质量判别分析。结果:在优化条件下，黄芪80%乙醇提取液的三维荧光光谱图主要呈现出305 nm/420 nm（峰1）、280 nm/315 nm（峰2）和265 nm/475 nm（峰3）3组特征激发/发射峰。平行因子分析结果表明，荧光特征峰峰1和峰3各含有1种异黄酮类荧光组分，峰2含有2种氨基酸类荧光组分。不同产地黄芪样本三维荧光光谱的特征峰个数及荧光强度均存在差异。结论:三维荧光光谱可实现对不同产地黄芪药材质量一致性评价，该方法简便、快捷、准确，可为黄芪质量评价提供参考。

目的:研究建立酸枣仁三维荧光光谱鉴别方法,为酸枣仁真伪鉴别提供依据.方法:建立6批不同产地酸枣仁三维荧光光谱,并利用三维荧光技术对2批酸枣仁伪品、3批掺伪品鉴别分析,采用荧光区域积分法对不同产地酸枣仁、酸枣仁伪品及掺伪品三维荧光图谱进行区域积分,将区域积分值进行相似度评价、聚类分析和主成分分析.结果:相似度结果显示,不同产地酸枣仁三维荧光图谱相似性均为1,相似性极高;聚类结果与主成分分析结果一致,明确将样品分为3类,均能通过区域积分值实现酸枣仁正品、伪品、掺伪品的区分.结论:利用三维荧光技术可以对不同产地酸枣仁质量进行一致性评价,实现酸枣仁真伪的快速鉴别,为酸枣仁的质量评价提供参考.

目的 制备黄芪甲苷(ASⅣ)脂质体原位凝胶(ASⅣ lips gel),对ASⅣ lips gel进行制剂学表征及细胞学评价,探讨ASⅣ lips gel在眼部给药系统的应用潜力.方法 采用乙醇注入法制备黄芪甲苷脂质体(ASⅣ lips),以包封率为考察指标进行ASⅣ lips处方及制备工艺优化,对最优处方及工艺制得的ASⅣ lips进行表征;以壳聚糖(CS)和甘油磷酸钠(GP)为凝胶基质,通过物理交联制备CS/GP凝胶,对CS/GP凝胶进行表征;将ASⅣ lips载入CS/GP凝胶构建ASⅣ lips gel,并对ASⅣ lips gel进行稳定性研究、体外释放研究、细胞毒性及细胞摄取考察.结果 最优处方及工艺制得的ASⅣ lips平均粒径为(75.09±0.65)nm,与透射电镜观察到的粒子大小接近,且粒径分布均匀;包封率可达71.68％,对ASⅣ具有较好的包载效率.红外光谱与X射线衍射分析可知已成功制得CS/GP凝胶;CS/GP凝胶在扫描电镜下呈明显的三维网状结构,35℃下胶凝时间为3 min.ASⅣ lips gel连续7 d粒径基本无明显变化,稳定性良好;体外释放结果表明,与黄芪甲苷滴眼液相比,ASⅣ lips gel有明显的缓释作用.细胞毒性结果显示ASⅣ lips gel对人视网膜色素上皮细胞毒性较低,细胞相容性较好.分别用荧光显微镜定性观察、流式细胞仪定量分析制剂的细胞摄取情况,结果表明,脂质体原位凝胶制剂比滴眼液更易被人视网膜色素上皮细胞摄取.结论 制备的ASⅣ lips gel在眼部温度下可自发成胶,具有明显的缓释作用,更易被人视网膜色素上皮细胞摄取,有作为眼部给药系统的潜力.

为探索喀斯特湖泊-河流系统溶解性有机质(DOM)光谱特征空间格局,该研究以我国贵州红枫湖、百花湖和老马河为对象,分析了表层水体 DOM 紫外参数(SUVA254、SUVA280、S275-295、S350-400、SR和 E2/E3),利用三维荧光-平行因子(EEM-PARAFAC)解析DOM主要成分,同时基于荧光参数(HIX、FI、BIX和β∶α)揭示其来源信息.该研究运用Spearman相关性分析及主成分分析(PCA)方法,揭示 DOM 参数的内在联系及重要组分贡献.结果显示,红枫湖、百花湖和老马河 SUVA254 和SUVA280值较低,而E2/E3、S275-295和S350-400值较高,说明芳香类成分占比较少且DOM整体分子量较小.水体DOM主要成分为:红枫湖/百花湖(C1:微生物代谢类腐殖质;C2:可见光范围腐殖质;C3:色氨酸),老马河(C1:色氨酸;C2:富里酸;C3:陆源类腐殖质).水体BIX范围在 0.77-1.12 之间,说明生物源和陆源输入共同贡献DOM.红枫湖与百花湖FI值小于 1.4,而老马河在1.4-1.9 间,说明河流内源DOM贡献率高于湖泊.水体β∶α值范围在0.73-1.10 之间,说明新生DOM具有显著贡献.湖泊与河流HIX值低于4,表明水体腐殖化程度低.老马河HIX与SR和S275-295呈正相关(P＜0.05)且与FI呈负相关(P＜0.05),说明DOM腐殖化程度与分子大小和来源密切联系.芳香类DOM的同质性导致SUVA254和SUVA280相互耦合.研究发现新生DOM多具有生物降解性,表现为BIX和β∶α强相关.相对于激流系统,湖泊具有更多的水力停留时间,这可能进一步促进内源微生物的代谢,导致生物驱动的有机质快速循环,因此不同DOM生物讯号相互耦合.研究阐明了喀斯特湖泊-河流系统DOM成分与来源特征,有望为研究全球碳循环过程提供数据支撑.

目的 选取3种海洋赤潮甲藻为研究对象,从广西涠洲岛海域来源细菌中筛选出高效溶藻的菌株,研究菌株的溶藻效果和初步作用机制,为开展赤潮的防治工作奠定基础.方法 采用细菌发酵液与甲藻共培养来测定菌株的溶藻活性,检测藻细胞中丙二醛和抗氧化相关酶系统的响应规律,分析甲藻胞外溶解性有机物组成,并通过KEGG和CAZy数据库预测目标菌株合成溶藻物质的能力.结果 从24株细菌中筛选到15株对至少一种甲藻表现出溶藻活性的菌株,总阳性率为62.5％,菌株M026对3种甲藻均表现出显著的溶藻效果.添加10％的M026发酵无菌滤液,共培养3d后,3种甲藻细胞死亡率均高达95.0％.生理生化响应表明,在M026发酵无菌滤液胁迫下,甲藻细胞膜脂过氧化损伤严重,3种抗氧化相关酶(SOD、CAT和APX)活性先增加后下降,且三维荧光光谱检测到藻细胞内溶产物为类富里酸和类蛋白类物质.通过全基因组分析,菌株M026含有溶藻活性的次级代谢产物生物合成基因,及多种降解植物细胞壁的酶.结论 菌株M026可作为微生物溶藻菌剂的候选菌株.

目的:研究负载仙茅苷的三维复合支架的理化特性,并评估其对人脐带静脉内皮细胞(human umbilical vein endo-thelial cell,HUVEC)和小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC)促进血管化和骨诱导方面的潜在作用.方法:采用乳液/溶剂蒸发技术制备负载仙茅苷(curculigoside,CUR)的聚己内酯微球(CUR-PM),借助3D生物打印技术成功构建了由羟基磷灰石(hydroxyapatite,HA)、明胶(gelatin,GEL)和海藻酸钠(sodium alginate,SA)组成的三维复合(hydroxyapa-tite gelatin sodium alginate,HGS)支架的基础上,制备了负载仙茅苷的聚己内酯微球(hydroxyapatite gelatin sodium alginate curcu-ligoside,HGSC)支架.通过扫描电镜、红外光谱、流变学、力学性能、药物释放和降解性等实验对支架进行表征;通过CCK-8、EdU荧光染色实验以验证支架的生物安全性;通过HUVEC细胞管形成实验、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色,评估HGSC用于促进细胞血管化和成骨调控的潜能.结果:HGSC内部具有大小均匀的网格状结构,与HGS相比,具有适当的力学性能和降解性.CCK-8和EdU荧光染色结果显示,HGSC支架具有良好的生物相容性.HUVEC细胞管形成实验和BMSC的ALP染色结果表明,HGSC支架表现出促进血管化和骨形成的潜能.结论:HGSC支架具备良好的生物相容性,并且对BMSC的骨诱导潜能和HUVEC的血管化具有明显的促进作用,为骨缺损修复提供了具有前景的治疗策略.

为了对来自酵母细胞的天然转化酶分子进行改造,以使其适用于工业和医药领域,利用壳寡糖(COS)对酵母转化酶(YInv)的氨基进行修饰.结果发现:COS修饰后的糖链成功连接到转化酶肽链的氨基上,修饰酶(COS-Inv)的分子量比天然酶(YInv)的明显增大;COS-Inv的催化活性比YInv的提高200.3％.YInv和COS-Inv分子中的多糖含量分别为 2.75 和 6.34 mg/mg.COS-Inv 的Km值(58.92 mmol/L)比 YInv 的Km值(125.45 mmol/L)低得多.YInv和COS-Inv的三维荧光光谱测定结果表明,COS-Inv的荧光强度比YInv的荧光强度低得多,说明COS-Inv与YInv两者的三维分子结构有非常大的差别.由此可见,利用壳寡糖修饰酵母转化酶以改造其分子结构是提高其催化活性的有效办法.

土壤可溶性有机碳(DOC)是森林土壤碳库中最活跃的部分,其对气候变暖的响应将深刻影响森林生态系统碳循环.本研究基于亚热带常绿阔叶林野外增温实验平台,原位收集土壤溶液,结合紫外可见光谱、红外光谱和三维荧光光谱分析,探究土壤剖面DOC通量及组成对增温(+4 ℃,1年)的响应.结果表明:土壤DOC通量在土层之间没有显著差异.土壤DOC主要由2个类腐殖酸组分和1个微生物代谢产物组分组成.与对照相比,增温显著降低了土壤DOC通量,降低了土壤溶液芳香化指数和疏水组分比例,增加了小分子碳水化合物的含量.此外,增温还提高了表层土壤(0～10 cm)类腐殖酸组分的相对贡献,增加了深层土壤(30～40 cm)微生物代谢产物组分的相对贡献,这在一定程度上表明变暖加速了深层土壤微生物周转.总体来说,土壤增温降低了亚热带常绿阔叶林土壤DOC数量,使DOC结构趋于简单.

目的 采用三维荧光光谱分析技术对口腔常见致龋菌荧光光谱特征进行初步分析.方法 选择口腔常见致龋菌变形链球菌及远缘链球菌,对其进行复苏和培养,运用三维荧光光谱分析技术对其菌液进行荧光学光谱检测.结果 变形链球菌及远缘链球菌的三维荧光光谱图相似,均出现2个荧光峰,最佳激发波长分别位于230 nm和280 nm,最佳发射波长相同,均为340 nm.结论 成功获得口腔常见致龋菌(变形链球菌及远缘链球菌)的固有荧光三维光谱图,为致龋菌荧光评价技术的应用提供参考.

目的 建立三维同步荧光光谱法测定黄芪中芒柄花素含量的方法.方法 通过扫描三维同步荧光光谱,确定同步荧光光谱的最佳波长间隔,用同步荧光测定不同产地的黄芪中芒柄花素含量.结果 同步荧光光谱的最佳波长间隔为130 nm,芒柄花素在0.005～1.28μg·mL-1范围内同步荧光强度与发射波长具有良好的线性关系,标准曲线的回归方程为:IF=252.55462c+4.95309,r=0.9996.结论该方法重复性良好,准确度高,检测限低,结果可靠,可用于黄芪中微量芒柄花素的测定.