目的:探讨在蛛网膜下腔出血(SAH)早期阶段运用p38抑制剂后神经细胞线粒体蛋白表达的差异。方法:采用氧合血红蛋白(OxyHb)刺激Neuro-2a细胞(小鼠来源神经瘤母细胞，购买自中国科学院上海细胞库)，模拟SAH后血液中氧合血红蛋白对于神经细胞的刺激状态，建立体外SAH细胞模型，设立对照组(Con)、蛛网膜下腔出血组(SAH)及p38抑制剂组治疗组(p38+SAH组)，提取线粒体蛋白进行质谱分析，Maxquant软件和Perseus软件进行查库和非标记定量分析，两组间蛋白差异比较应用 t检验。对差异蛋白(p38+SAH/SAH组)进行基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路的富集分析；应用Multiple Experiment Viewer软件进行分层聚类热图分析；STRING在线工具构建出蛋白与蛋白互作网络(PPI)；通过蛋白质印迹法(Western blot)和实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)验证差异蛋白。 结果:3组中共筛出239个差异蛋白，上调差异蛋白105个，下调差异蛋白134个(符合差异倍数(FC)>1.5或<0.667， P<0.05)。GO富集分析表明，差异蛋白富集在调节丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的级联正调控、内吞作用、凋亡过程负调控等细胞生物学功能。在KEGG中：差异蛋白主要在p53信号通路、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)-蛋白激酶B(Akt)信号通路、轴突导向信号等通路富集。通过PPI分析：以Rab7a、Cox5a、Cacybp等蛋白为核心的9个蛋白互作网络SAH组Rab7a的表达低于CON组(蛋白：0.345±0.014比0.226±0.045， t＝13.920， P<0.05；mRNA：1.00比0.76±0.04， t＝9.813， P<0.05)；P38+SAH组中Rab7a的表达高于SAH组(蛋白：0.226±0.045比0.282±0.023， t＝-4.768， P<0.05；mRNA：0.76±0.04比0.95±0.02， t＝-6.802， P<0.05)，与蛋白组学结果一致。 结论:p38抑制剂并不是通过单一途径改善SAH后神经细胞线粒体功能障碍，而与多种蛋白及信号通路的调控有关。

丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase，MAPK)信号转导通路是调节细胞生长和存活的关键途径，异常的MAPK信号能促进癌症的发生发展，也决定了癌症的治疗反应。胃癌是中国常见消化道恶性肿瘤之一；近年来研究发现，在胃癌中存在诸多细胞信号传导通路的调控异常。细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase，ERK)信号通路是MAPK家族中的一条重要信号通路，该信号通路通过整合传递细胞外信号至细胞及其核内控制细胞的生长、凋亡和分化等。MAPK/ERK信号通路的异常激活可导致细胞丧失凋亡和分化能力，引发细胞异常增殖和恶性转化，促进胃癌的恶性表型；相反，阻断MAPK/ERK信号通路的相关组分则可逆转这一过程。本文结合国内外最新研究报道，对近年来在胃癌研究中发现MAPK/ERK信号通路的激活或失活在促进或抑制胃癌细胞恶性表型的重要作用及其相关的分子机制加以综述。

目的:探讨葛根总黄酮（PRF）诱导的急性早幼粒细胞白血病NB4细胞凋亡与丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）转导通路相关信号分子的关系及意义。方法:将NB4细胞分为对照组[以0.025%二甲基亚砜（DMSO）代替PRF]和10、30、50 μg/ml PRF组，作用24、48、72 h后用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞增殖抑制率，作用48 h后用激光共聚焦显微镜观察细胞核形态学变化。将NB4细胞分为对照组（加入0.025% DMSO）和10、30、50 μg/ml PRF联合或不联合10 μmol/L c-Jun氨基末端激酶（JNK）抑制剂（SP600125）组，作用48 h，蛋白质印迹法检测MAPK通路相关蛋白JNK、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、细胞外信号调节激酶（ERK）和p38 MAPK表达变化。结果:10、30、50 μg/ml PRF作用24、48、72 h后NB4细胞增殖受到抑制，呈浓度-时间依赖性（均 P<0.05），24、48、72 h半数抑制浓度（IC 50）分别为（40.03±2.23）μg/ml、（22.92±1.72）μg/ml、（17.99±1.48）μg/ml。激光共聚焦显微镜观察到NB4细胞经PRF处理后呈现明显凋亡特征。10 μmol/L SP600125与不同浓度PRF共培养NB4细胞48 h后，NB4细胞JNK1表达受抑（ P<0.05），JNK2/3、p38 MAPK表达有所下降，但差异均无统计学意义（均 P>0.05）；ERK1、ERK2在单药组表达逐渐上调，联合用药组则表达递减，TNF-α在50 μg/ml PRF+SP600125组较50 μg/ml PRF单药组表达下调，10、30 μg/ml PRF+SP600125组则较10、30 μg/ml PRF单药组表达上调。 结论:10~50 μg/ml PRF可能通过TNF-α激活MAPK信号途径，JNK、ERK1/2、p38 MAPK三者相互作用、相互影响，激活促凋亡相关蛋白，诱导NB4细胞凋亡。

本文回顾了近年来国内外学者对丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（RAF）/丝裂原活化蛋白激酶（MEK）/细胞外信号调节激酶（ERK）信号通路在RA中的调控机制研究，发现该通路在类风湿关节炎-成纤维细胞样滑膜细胞（RA-FLS）中介导免疫调控、炎症反应、氧化应激、细胞凋亡等，并与RA-FLS自噬关系密切。此外，RAF/MEK/ERK信号通路与RA骨破坏也具有相关性，但目前的研究鲜有报道。因此，RAF/MEK/ERK信号通路与RA骨破坏的相关性研究可能会成为未来的研究热点。同时，提出以RAF/MEK/ERK信号通路为靶点开展RA药物靶向研究，可能会推动RA治疗药物的发展，为治疗RA开辟新途径。

目的:探究miR-20b通过调节丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)细胞外调节蛋白激酶(ERK)途径对慢性阻塞性肺疾病(COPD)动物模型气道炎症改善情况及作用机制。方法:SPF级成年SD雌性小鼠120只，使用随机数字表，将以上小鼠随机分为空白组、模型组、miR-20b组以及对照组，每组小鼠30只，分析4组小鼠的肺功能、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、炎性因子、ERK蛋白以及磷酸化蛋白水平之间的差异。结果:4组小鼠的肺功能比较，差异均有统计学意义( P值均<0.05)，其中空白组用力肺活量(FVC)、最大呼气流量(PEF)、0.1 s呼气量(PEV0.1)高于miR-20b组、模型组和对照组，miR-20b组FVC、PEF、PEV0.1高于模型组和对照组，差异均有统计学意义( P值均<0.05)；而模型组和对照组的FVC、PEF、PEV0.1之间比较，差异均无统计学意义( P值均>0.05)；4组小鼠的MDA以及SOD水平比较，差异均有统计学意义( P值均<0.05)，其中模型组和对照组MDA以及SOD水平高于miR-20b组、空白组，miR-20b组MDA以及SOD水平高于空白组，差异均有统计学意义( P值均<0.05)；而模型组和对照组的MDA以及SOD水平比较，差异均无统计学意义( P值均>0.05)；4组小鼠的白细胞介素6(IL-6)、IL-8、肿瘤坏死因子α(TNF-α)比较，差异均有统计学意义( P值均<0.05)，其中模型组和对照组IL-6、IL-8、TNF-α水平高于miR-20b组、空白组，miR-20b组IL-6、IL-8、TNF-α水平高于空白组，差异均有统计学意义( P值均<0.05)；而模型组和对照组的IL-6、IL-8、TNF-α水平比较，差异均无统计学意义( P值均>0.05)；4组小鼠的ERK蛋白以及磷酸化蛋白水平比较，差异均有统计学意义( P值均<0.05)，其中空白组ERK蛋白水平高于miR-20b组、模型组和对照组，miR-20b组ERK蛋白水平高于模型组和对照组，空白组磷酸化蛋白水平低于miR-20b组、模型组和对照组，miR-20b组磷酸化蛋白水平低于模型组和对照组，差异均有统计学意义( P值均<0.05)；而模型组和对照组的ERK蛋白以及磷酸化蛋白水平之间比较，差异均无统计学意义( P值均>0.05)。 结论:miR-20b通过抑制性调节MAPK/ERK途径，显著改善COPD动物模型气道炎症反应。

目的:观察丹参酮ⅡA(TanⅡA)通过调节丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)/细胞外调节蛋白激酶(ERK)途径对膀胱癌动物模型肿瘤增殖及肿瘤组织内凋亡相关因子的影响。方法:选择30只4～5周龄的雄性BALB/-nu裸鼠，购自北京维通利华科技服务有限公司，其中20只注射1×10 7/ml的T24细胞悬液，待肿瘤体积大于0.1 cm 3，根据随机数表法对其进行分组干预，共分为模型组、治疗组，每组10只，另外10只裸鼠作为对照组；模型组及对照组给予生理盐水腹腔内注射，治疗组给予15 mg/kg的TanⅡA腹腔注射，均干预2周；开始干预后每天测量瘤体积1次，绘制肿瘤增殖曲线并在干预结束后将裸鼠处死后取0.1 g肿瘤组织检测半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、脱氧核糖核酸修复酶降解产物(Cleaved PARP)、细胞凋亡调控因子(bax)、B淋巴细胞瘤-2基因蛋白(bcl-2)、丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、磷酸化丝裂原活化蛋白激酶(p-p38 MAPK)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)水平，采用卡方分析计数资料差异，LSD- t检验及方差检验分析组间或多组间数据差异。 结果:给药7 d后治疗组裸鼠瘤体积明显低于模型组，且差异有统计学意义( t＝4.445， P<0.01)；3组小鼠组织中Caspase-3、Cleaved PARP、bax、bcl-2水平差异有统计学意义( F＝5.937、4.264、6.135、5.364， P<0.01)；相较于模型组，治疗组小鼠组织中Caspase-3、bcl-2明显降低(0.54±0.10、0.56±0.12比0.87±0.12、0.88±0.19)，Cleaved PARP、bax明显升高(0.94±0.21、0.79±0.13比0.65±0.12、0.32±0.08)，且差异存统计学意义( t＝6.681、4.503、3.392、9.731， P<0.01)；3组小鼠组织中p-p38 MAPK、p-ERK水平差异，有统计学意义( F＝3.046、3.216， P<0.05)，相较于模型组，治疗组下小鼠组织中p-p38 MARK及p-ERK水平明显降低(0.61±0.11、0.54±0.11比0.87±0.13、0.69±0.13)，且差异存统计学意义( t＝4.828、4.503， P<0.01)。 结论:TanⅡA通过有效调节p38MAPK/ERK途径实现抑制膀胱癌动物模型肿瘤增殖并调控肿瘤组织内凋亡相关因子。

目的:探讨微小RNA-30c（miR-30c）是否通过靶向酪氨酸3-单加氧酶/色氨酸5-单加氧酶激活蛋白zeta多肽（YWHAZ）介导胰腺癌细胞对吉西他滨（gemcitabine，Gb）耐药性的作用。方法:用RT-qPCR法筛选出人胰腺癌细胞系中miR-30c表达最低的SW1990细胞株，并建立吉西他滨耐药细胞株SW1990/吉西他滨，设置为SW1990/吉西他滨组（未转染）、miR-30c过表达（Ad-miR-30c）组、Ad-miR-30c阴性对照（Ad-eGFP）组、SW1990组。RT-qPCR法检测miR-30c水平；CCK-8法测细胞半数抑制浓度（IC 50）及耐药指数（IR）；Western blot法检测耐药相关蛋白P-gp、凋亡相关蛋白Caspase-1、迁徙转移相关蛋白MMP-9、YWHAZ蛋白及下游通路-激酶丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）/细胞外调节蛋白激酶1（ERK1）蛋白表达。共转染Ad-miR-30c及YWHAZ过表达腺病毒（Ad-YWHAZ），Western blot法测细胞P-gp及YWHAZ通路相关蛋白表达。 结果:SW1990/吉西他滨耐药细胞的IC50[（59.16±5.14）nmol/L]及IR（11.15±0.19）、YWHAZ蛋白（1.59±0.15）、P-gp（2.43±0.26）表达升高，miR-30c（0.25±0.02）表达降低（ P<0.05），p38MAPK/ERK通路处于活化状态。上调SW1990/吉西他滨细胞中miR-30c（1.59±0.15）表达后，细胞的IC50[（25.14±2.15）nmol/L）及IR（5.48±0.12）、YWHAZ（1.49±0.13）、P-gp（1.46±0.10）降低（ P<0.05），p38MAPK/ERK通路处于活化状态。上调YWHAZ表达，可逆转Ad-miR-30c的上述作用（ P<0.05）。 结论:胰腺癌耐吉西他滨细胞株中miR-30c表达降低，上调miR-30c表达可靶向抑制YWHAZ/p38MAPK/ERK途径，并抑制耐药蛋白P-gp表达，降低胰腺癌细胞对吉西他滨的耐药性。

目的:中耳胆脂瘤是一种非肿瘤性疾病,通常会引起听力丧失、骨质破坏和其他严重并发症.尽管手术是主要的治疗方法,但其复发率较高.因此,探讨胆脂瘤的分子机制对寻找新的治疗方法具有重要意义.本文旨在探究长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)中N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m6A)甲基化参与中耳胆脂瘤的生物学功能及相关通路.方法:利用lncRNA m6A转录组芯片分析中耳胆脂瘤组织(n=5)和正常耳后皮肤组织(n=5)的m6A修饰模式.采用基因本体(Gene Ontology,GO)和京都基因与基因组数据库(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)途径分析中耳胆脂瘤发病的可能生物学功能和信号通路.并运用甲基化RNA免疫沉淀(methylated RNA immunoprecipitation,MeRIP)-PCR验证中耳胆脂瘤和正常皮肤组织中的lncRNA m6A修饰.结果:与正常皮肤对照组相比,中耳胆脂瘤组织中m6A甲基化修饰了1 525个lncRNAs(高甲基化1 048个,低甲基化477个),差异有统计学意义[差异倍数(fold change,FC)≥3或<1/3,P<0.05].GO富集分析表明:高甲基化的lncRNA参与蛋白磷酸酶抑制剂活性、神经元间突触和α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸(α-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazole propionic acid,AMPA)受体活性的调节.低甲基化lncRNA参与mRNA甲基转移酶活性、分泌颗粒膜和mRNA甲基化.KEGG分析表明:高甲基化lncRNAs主要与5条通路相关,包括Hedgehog信号通路、病毒蛋白与细胞因子及细胞因子受体的相互作用、丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPK)信号通路、细胞因子-细胞因子受体相互作用和心肌细胞的肾上腺素能信号通路.低甲基化lncRNA主要与4种途径相关:肾细胞癌、肿瘤坏死因子信号通路、癌症的转录失调以及细胞因子-细胞因子受体相互作用.此外,通过MeRIP-PCR验证了NR_033339、NR_122111、NR_130744和NR_026800中m6A甲基化水平的改变,与微距阵分析相一致.并且通过real-time PCR验证了MAPK信号通路的关键基因MAPK1和NF-κB表达量显著上调.结论:本研究揭示了中耳胆脂瘤中lncRNA的m6A修饰模式,提示lncRNA m6A修饰在胆脂瘤病因学中的研究方向,为中耳胆脂瘤的治疗提供了潜在的靶点.

目的 探讨地黄饮子通过磷脂酰肌醇三激酶-蛋白激酶B(phosphoinositide 3-kinase/protein kinase B,PI3K/Akt)和丝裂原激活蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路双重调节db/db小鼠视网膜胰岛素抵抗和糖代谢异常,探究地黄饮子多途径发挥治疗糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)作用的分子机制.方法 10只db/m小鼠作为空白组,30只db/db小鼠随机分为模型组、地黄饮子组(地黄饮子,30.03 g/kg)、阳性对照组(二甲双胍,0.61 g/kg).药物干预4周,每周检测小鼠体质量、空腹血糖.末次给药后进行口服糖耐量试验(oral glucose tolerance test,OGTT)及胰岛素耐量试验(insulin tolerance test,ITT)并计算曲线下面积(area under the curve,AUC);葡萄糖氧化酶法检测小鼠视网膜葡萄糖含量;酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠视网膜胰岛素含量;苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠视网膜组织病理改变;免疫组化法检测视网膜组织胰岛素受体底物1(insulin receptor substrate 1,IRS1)、葡萄糖转运蛋白4(glucose transporter 4,GLUT4)表达;实时荧光定量聚合酶链式反应法(RT-qPCR)检测视网膜PI3K、Akt、细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated kinase,ERK)、c-Jun 氨基末端激酶(c-Jun N-terminal protein kainse,JNK)、丝裂原活化蛋白激酶p3 8抗体(p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)mRNA表达量.结果 与空白对照组相比,模型组小鼠空腹血糖显著升高(P＜0.01);OGTT、ITT试验各时间点血糖均升高(P＜0.05,P＜0.01);视网膜组织水肿,新生血管生成;视网膜葡萄糖、胰岛素含量升高(P＜0.01);IRS1蛋白表达量显著升高而GLUT4蛋白表达量显著降低(P＜0.01);PI3K、Akt mRNA 表达量降低(P＜0.05,P＜0.01)、ERK、JNK、p38MAPK mRNA 表达量升高(P＜0.05,P＜0.01).地黄饮子和阳性对照药物均可降低小鼠OGTT、ITT试验AUC(P＜0.01);改善视网膜水肿,减少新生血管;降低视网膜葡萄糖、胰岛素含量(P＜0.05,P＜0.05);降低小鼠视网膜IRS1蛋白表达,提高GLUT4蛋白表达(P＜0.05,P＜0.01)、升高PI3K、Akt mRNA表达量,降低ERK、JNK、p38MAPK mRNA表达量(P＜0.05,P＜0.01).结论 地黄饮子可通过激活PI3K/Akt信号通路和抑制MAPK信号通路双重调节GLUT4表达从而改善db/db小鼠视网膜胰岛素抵抗和糖代谢异常.

多囊卵巢综合征以高雄激素血症、胰岛素抵抗、代谢综合征为主要临床表现,通常合并月经不调、排卵障碍、不孕症,其远期心血管疾病、骨质疏松症和癌症的发病风险增高.既往研究表明,磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B、丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶、Toll样受体4/核转录因子-κB、转化生长因子-β1/Smads蛋白、抑癌基因p53/腺苷酸活化蛋白激酶等信号通路可通过抑制雄激素分泌、改善胰岛素抵抗,调节卵巢颗粒细胞增殖、凋亡与自噬,促使卵母细胞成熟,抑制卵巢纤维化形成,改善炎症反应等途径治疗多囊卵巢综合征.故本文通过对参与多囊卵巢综合征形成过程的相关信号通路进行综述,并探讨中药的治疗机制.