目的 鉴定五倍子化学成分并探究其舒张血管的作用机制.方法 建立五倍子UNIFI数据库.采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间-质谱联用技术(UPLC-Q-TOF-MSE)与UNIFI数据处理平台,鉴定五倍子中的化学成分.用大鼠胸主动脉环实验探究五倍子提取物舒张血管的作用和其有效的物质成分发挥作用的机制.结果 超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱技术结合UNIFI数据库快速分析鉴定五倍子化学成分60种.五倍子提取物可能通过促进血管内皮一氧化氮合酶的活性;在药理通路中,它可能影响平滑肌细胞内Ca2+的释放和外钙内流,从而发挥作用.结论 本研究首次采用UPLC-Q-TOF-MSE结合UNIFI数据库对五倍子提取物进行鉴定.从五倍子提取物中鉴定出60种化合物.酚酸类占比较大,其药理作用可能是酚酸类化合物通过内皮依赖和内皮非依赖途径激活一氧化氮合酶发挥舒张血管的作用.药理通路其可能为通过促进平滑肌细胞内钙释放和外钙内流发挥作用.

[目的]探讨江山黄精醇提物(Jiangshan Polygonatum sibiricum alcoholic extract,PSAE)的化学成分、抗氧化和抗炎活性.[方法]使用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(ultra performance liquid chromatography-quadrupole time-of-flight mass spectrometry,UPLC-Q/TOF-MSE)分析PSAE化学成分,测定其抗氧化活性,体外实验测定其对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的THP-1细胞的影响,并使用分子对接进行验证.[结果]PSAE主要含有17种化学成分,包括黄酮类化合物5种、皂苷类化合物5种、木脂素类化合物3种、酚酸类化合物1种、甾体类化合物1种,其他类化合物2种.体外实验表明PSAE具有良好的体外抗氧化活性,能增加LPS诱导的THP-1细胞活力,显著降低细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)的含量及NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing CARD,ASC)和胱天蛋白酶-1(cysteinyl aspartate specific proteinase-1,Caspase-1)的表达.分子对接结果显示,17种化学成分中的16种均与核心靶点NLRP3、ASC和Caspase-1有良好的结合活性.[结论]PSAE具有较好的抗氧化活性和显著的抗炎活性,其发挥作用的主要活性成分可能为黄酮及皂苷类化合物.

基于高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱法(UPLC-Q-TOF-MSE)和分子对接表征银杏叶提取物(GBE)的苦味呈味物质,并探究其与苦味功效的关系.首先采用UPLC-Q-TOF-MSE对GBE成分进行定性分析,鉴定出61个化学成分,将这些化学成分与苦味受体进行分子对接,筛选出26个呈苦物质,主要为黄酮类成分;采用感官和电子舌苦味评价技术验证GBE总黄酮是主要的呈苦物质,与分子对接结果一致;最后以呈苦物质为研究对象,进行网络药理学预测与分析,并探究了呈苦物质作用靶点与苦味功效的关系,结果表明呈苦物质作用的关键靶点为CYP2B6、ALOX15和PTGS2等,并且呈苦物质可能通过作用于相关疾病靶点而发挥苦味功效,即GBE呈苦物质是苦味功效的物质基础.综上,该研究表明分子对接技术对中药呈苦物质的筛选具有指导作用,GBE的呈苦物质具有苦味功效,为今后中药的"味-效"关系研究提供思路与参考.

目的:检测肾衰泄浊汤主要活性成分,并预测肾衰泄浊汤治疗慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)合并动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)关键靶标与作用机制.方法:运用高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱法(UPLC-Q-TOF-MSE)与中药系统药理学数据库与分析平台/中药分子机理的生物信息学分析工具(TCMSP/BATMAN-TCM)数据库分析肾衰泄浊汤主要活性成分与靶标名称、数量等信息.通过在线人类孟德尔遗传(OMIM)、基因疾病关联数据库(DisGeNET)、人类基因综合数据库(GeneCards)数据库筛选疾病靶标,与药物靶标取交集,构建"中药-活性成分-作用靶点"网络,应用蛋白质/基因互作数据库(String)构建蛋白互作网络(PPI),基因本体论(Go)生物学功能注释和京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析潜在作用机制;分子对接初步验证网络药理学结果.结果:UPLC-Q-TOF-MSE鉴定出33个活性成分,数据库检索获得75个活性成分,药物成分靶标349个,疾病靶标4 241个,得到249个交集靶标.获得槲皮素、山柰酚、β-谷甾醇、木犀草素、异鼠李素等核心活性成分与蛋白激酶1(Akt1)、丝裂原活化蛋白激酶3(MAPK3)、信号转导和转录激活因子3(STAT3)等核心靶标;GO分析共获得1 292条目;KEGG示潜在靶标主要富集在PI3K-AKT通路、脂质与动脉粥样硬化途径、糖尿病并发症相关AGE-RAGE信号通路等.分子对接表明核心成分与关键靶标结合良好.结论:肾衰泄浊汤活性成分可能通过干预MAPK3、Akt1、STAT3等靶标,调控炎症、氧化应激、脂质代谢等机制治疗CKD合并As,其中PI3K/Akt可能是重要的调节通路.

目的:采用UPLC/Q-TOF-MS技术结合化学计量学方法综合评价秋海棠、中华秋海棠、掌裂叶秋海棠、长柄秋海棠和柔毛秋海棠的质量.方法:采用ACQUITY UPLC HSS T3 C18(2.1 mm × 100 mm,1.8μm)色谱柱,以乙腈-0.1％甲酸为流动相进行梯度洗脱,柱温30 ℃,流速0.2 mL·min-1,检测波长254 nm;采用电喷雾离子源(ESI)正负离子同时扫描,以MSE方式进行采集,建立秋海棠属5种药材UPLC/Q-TOF-MS特征图谱,并对它们各自共有峰进行确认和归属,运用主成分分析法(PCA)和偏最小二乘判别分析法(PLS-DA)对数据进行统计分析.结果:筛选出秋海棠、中华秋海棠、掌裂叶秋海棠、长柄秋海棠和柔毛秋海棠药材各自的共有特征峰分别为15、13、12、12、15个,且共鉴定出29个化合物;秋海棠属5种药材质量存在较大差异,其中,柔毛秋海棠与其他4种药材的化学成分差异显著,秋海棠与中华秋海棠药材之间化学成分差异较小,掌裂叶秋海棠与长柄秋海棠药材之间化学成分差异较小;还筛选出对该5种药材区分贡献显著的8个化学标志物,原花青素B2、表儿茶素、葫芦素D或其同分异构体、葫芦素D葡萄糖苷和葫芦素B为潜在鉴别特征性化学标志物,原花青素B1、儿茶素和芦丁为潜在含量差异性化学标志物.结论:该方法直观、准确地反映了此5种药材的整体质量及化学成分差异情况,并对于建立科学、合理的秋海棠属药材质量评价方法和安全用药具有重要的指导意义,也为其整体质量评价和控制及标准修订提供参考.

目的 无歧视分析白术药材的整体化学成分,探究不同产地白术药材在化学成分上的差异.方法 采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MSE)对不同产地白术药材进行化学成分分析.应用主成分分析(principal component analysis,PCA)、正交偏最小二乘法-判别分析(orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA)对河北、安徽、浙江3个产区白术药材进行多元统计分析并结合方差分析筛选不同产地白术药材主要的差异化学成分.结果共鉴定出53个化学成分,包括21个萜类、11个有机酸类、3个氨基酸类、3个糖苷类以及15个其他类成分.表征出21个差异化学成分,包括3个特有成分及18个共有差异成分,其中河北安国白术的特有成分为9,10-环氧-12(Z)-十八碳烯酸,且腺苷、6,9-二经基-3,3a-二氢白术内酯Ⅲ、furan sesquiterpene、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、双白术内酯的含量最高.安徽亳州白术的特有成分为L-异亮氨酸,且新绿原酸、7-羟基香豆素、绿原酸、咖啡酸的含量最高.浙江磐安白术的特有成分为白术内酰胺,且尿苷、L-缬氨酸、8,9-epoxyatracolactone、4,6-二羟基-3,3a-二氢白术内酯Ⅲ、白术内酯Ⅲ、芹子二烯酮、3β-乙酰氧基苍术酮、棕榈酸含量最高.结论 不同产地白术化学成分差异明显,各产地的特有成分可作为产地区分的依据,21个差异化学成分可为不同产地白术质量评价提供依据,同时也为白术的开发利用提供了参考.

该研究采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱法(UPLC-Q-TOF-MSE),对丹栀逍遥方在大鼠灌胃给药后体内血中移行成分进行分析,通过比较复方提取物、给药后含药血清及空白血清成分,从大鼠血清中发现入血成分共 49 个,其中首次在血清中发现的有 6-羟基香豆素、茯苓新酸F、去氧甘草内酯、30-降常春藤皂苷元、kanzonol R、3',6'-di-O-galloylpaeoniflo-rin、16α-hydroxytrametenolic acid、16-deoxyporicoic acid B、3-O-acetyl-16α-hydroxytrametenolic acid、16α,25-dihydroxydehydroeburi-conic acid.并通过悬尾实验、新物体识别实验、新奇抑制摄食实验进行行为学检测分析,证实该方剂具有治疗围绝经期抑郁症的作用,进一步结合网络药理学方法,筛选出MAPK1、HRAS、AKT1、EGFR、ESR1 等 53 个核心靶点,参与PI3K-AKT、AMPK、VEGFA、MAPK、HIF-1等 165 条信号通路.综合显示,丹栀逍遥方治疗围绝经期抑郁症的潜在作用与加快炎症修复、改善神经可塑性、影响神经递质、调节雌激素水平、促进新生血管形成等作用机制有关.

目的 使用超高效液相色谱-四极杆串联飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF MS)对脂肪酸修饰型胰高血糖素-1(GLP-1)类似物利拉鲁肽和司美格鲁肽一级结构进行测定.方法 分别在完整分子和酶切肽段水平上检测,采用ACQUITY UPLC peptide BEH C18(2.1 mm×100 mm,30 nm,1.7 μm)色谱柱,流动相 A 为 0.1%甲酸-水溶液,流动相 B 为 0.1%甲酸-乙腈溶液,梯度洗脱,流速0.3 ml/min;采用正离子 ESI+ 离子源和 MSE 采集模式进行数据采集.结果 分别从完整分子和肽段水平准确测定了两种脂肪酸修饰型 GLP-1 类似物一级完整序列结构信息,并对修饰侧链位点进行准确定位.肽段覆盖率为 100%,且专属性强、重复性好.结论 液质联用技术快速、灵敏、准确,可用于 GLP-1 类似物一级结构的表征分析.

目的:通过UPLC-Q-TOF-MSE技术联合UNIFI软件建立不同地黄炮制品的半定量分析方法.方法:采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18(100 mm×2.1 mm,1.7 μm)色谱柱;以乙腈-0.1％甲酸溶液为流动相,梯度洗脱;柱温为40℃;流速为0.3 mL/min.采用电喷雾离子源,分别在正、负离子模式下采集数据,通过UNIFI软件中的TCM数据库、对照品比对以及参考相关文献鉴定其化学成分.以升麻素苷为内标,以酒蒸地黄样品为半定量样品,在正离子模式下对具有合适线性相关系数的22个成分进行精密度和稳定性考察,并对地黄不同炮制品中22个成分进行半定量分析.结果:22个成分在药材浓度为0.7617～15.2340 mg/mL范围内线性关系良好;方法学考察结果均良好.结论:该方法稳定可靠,可为进一步制定地黄不同炮制品的质量标准提供实验依据.

目的:系统研究九味化斑丸治疗银屑病的关键成分并对其作用机制进行探讨.方法:基于UPLC-Q-TOF/MSE对九味化斑丸的化学成分进行全面分析与鉴定,利用SwissADME平台和TCMSP数据库筛选活性成分,采用网络药理学的方法研究九味化斑丸治疗银屑病的作用机制,采用分=对接技术验证关键成分与靶点蛋白的结合活性.结果:从九味化斑丸中共鉴定出75个成分,其中治疗银屑病的活性成分有木犀草素、黄芩素、黄芩苷、芍药苷和栀=苷等35个.30个核心靶点富集分析结果显示九味化斑丸主要通过调节IL-17信号通路、TNF信号通路、PI3K-Akt信号通路、Th17信号通路、MAPK信号通路发挥治疗银屑病的作用."成分-靶点-通路"网络中度值排名靠前的活性成分及靶点有较强的结合活性.结论:初步阐明了九味化斑丸治疗银屑病的有效成分和作用机制,为质量控制提供参考依据.