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运用S/D法和膜过滤法对人凝血因子Ⅸ中辛德毕斯病毒和猪细小病毒灭活/去除效果的验证
编辑人员丨4天前
目的 验证运用有机溶剂/去污剂(S/D)处理法和膜过滤法对人凝血因子Ⅸ中辛德毕斯病毒(Sindbis virus)和猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)的灭活/去除效果.方法 采用S/D处理法灭活人凝血因子Ⅸ中添加的Sindbis virus,噬斑滴定法检测灭活前后的病毒滴度;膜过滤法去除添加的PPV,细胞病变法检测去除前后的病毒滴度.结果 经S/D处理法灭活后,3 批人凝血因子Ⅸ中Sindbis virus降低量分别为>4.62 lgPFU/mL、>4.64 lgPFU/mL、>4.50 lgPFU/mL.经Planova 15N膜过滤后,3 批人凝血因子Ⅸ中PPV降低量分别为≥4.50 lgTCID50/0.1 mL、≥4.56 lgTCID50/0.1 mL、≥4.38 lgTCID50/0.1 mL.结论 通过对指示病毒的验证效果评估,证明运用S/D法和膜过滤法对人凝血因子Ⅸ中的Sindbis virus和PPV均有较好的灭活/去除效果.
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编辑人员丨4天前
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黑素瘤相关DNA甲基化位点的初步筛查及异常甲基化谱的构建
编辑人员丨4天前
目的:运用基因芯片技术筛查与黑素瘤相关的DNA异常甲基化位点,初步构建黑素瘤特异性甲基化谱。方法:采用Illumina Human Methylation 450K全基因组甲基化芯片对6例黑素瘤组织及其瘤旁组织标本进行全基因组DNA检测,得出差异DNA甲基化位点。采用Gene Ontology(GO)富集分析及KEGG_Pathway分析了解基因功能。结果:基因芯片检测结果显示,黑素瘤组织与瘤旁组织存在差异甲基化位点,共27 779个,其中16 673个为高甲基化位点,11 106个低甲基化位点。提高筛选条件为 P < 0.01、︳Δβ︳> 0.2,过滤掉所有单核苷酸多态性相关探针、位于XY染色体上的探针以及交叉反应的探针,共筛选得到4 883个差异甲基化位点,其中1 459(30%)个位于启动子区(包括TSS1500、TSS200、5′UTR、1st Exon)。GO富集分析显示,差异甲基化基因参与的生物学过程主要包括细胞生长、分化、黏附、运动迁移、信号转导及转录调控等。KEGG_Pathway分析显示,差异甲基化基因主要参与黏着斑、癌症通路、转化生长因子β信号通路、磷脂酰肌醇信号通路、黑素生成、趋化因子信号通路、黏合连接、钙信号通路、细胞黏附分子、MAPK信号通路、Wnt信号通路、JAK-STAT信号通路。基于"启动子区高甲基化位点对应的前16个基因、出现甲基化频率最高(CpG位点≥ 7)的基因、具有一定的功能或参与某条信号通路"条件,选出8个基因( KAAG1、 DGKE、 SOCS2、 TFAP2A、 GNMT、 GALNT3、 ANK2、 HOXA9)作为黑素瘤候选生物标志物。 结论:黑素瘤组织存在较多高甲基化基因,8个差异甲基化基因有可能作为黑素瘤的生物标志物。
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编辑人员丨4天前
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镀碳基纳米多层膜钛合金球头五百万次摩擦磨损实验及颗粒分析
编辑人员丨4天前
目的:分析镀碳基纳米多层膜钛合金球头五百万次摩擦磨损实验产生的颗粒特征,并与钴铬钼合金(CoCrMo)球头对比,以评估新型镀膜球头摩擦磨损性能的优劣。方法:根据球头种类不同,将髋关节摩擦磨损实验设置为3组:A、C组分别选用进口及国产的CoCrMo球头,B组选用镀碳基纳米多层膜的钛合金球头(Ti 6Al 4V)。所有球头均与相同的超高分子量聚乙烯(UHMWPE)髋臼杯配伍。3组关节在髋关节模拟机运行五百万次后收集血清样本,消解稀释后依次通过5 μm、1.2 μm及0.4 μm的滤膜过滤。使用扫描电镜在滤膜上随机选取颗粒图像,确定颗粒元素种类及成分结构,计算颗粒的大小、形状、数量及体积等相关参数,比较组间相关参数的差异,以评估新型镀膜球头摩擦磨损性能。 结果:各组颗粒主要成分均为UHMWPE,且多为亚微米级(粒径<1 μm),B组亚微米级颗粒占比为49.4%,显著低于A组的75%及C组的60%(χ 2=66.032、31.754,均 P<0.017)。各组颗粒均以类圆形为主,形状相关参数纵横比(AR)组间无统计学差异(χ 2=0.590, P=0.744)。B组颗粒数量在全部滤膜上均明显少于C组( t=9.960、8.019、5.790,均 P<0.01),在0.4 μm滤膜上显著少于A组( t=7.810, P=0.000)。 结论:新型镀碳基纳米多层膜钛合金球头摩擦磨损性能明显优于国产球头,部分超过进口球头水平,对预防UHMWPE颗粒诱导的骨溶解和无菌性松动有积极作用。
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编辑人员丨4天前
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血小板源性生长因子B在胃癌组织的表达及其临床意义
编辑人员丨4天前
目的:基于单细胞测序技术解析血小板源性生长因子B(PDGFB)在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法:选用3对胃癌及配对的癌旁组织样本进行单细胞转录组测序(scRNA-seq)。CellTypist对过滤后的单细胞表达数据进行亚群分类,使用Wilcoxon rank-sum对测序数据进行拟时序分析,探究不同细胞簇中PDGFB的差异表达。通过癌症基因组图谱(TCGA)及免疫组织化学技术(IHC)分析PDGFB在胃癌组织中的表达。收集68例胃癌患者临床数据,采用单因素和多因素Cox比例风险回归模型确定影响胃癌患者预后的独立因素。结果:scRNA-seq分析发现,PDGFB与4种促血管生成因子(FLT4、FLT1、TEK、KDR)在胃癌组织中均显著高表达(PDGFB与4种胃癌组织中的表达显著高于在癌旁组织中的表达,PDGFB在胃癌组织中的相对表达量为2.907,FLT4的相对表达量为2.293,FLT1的相对表达量为2.049,TEK的相对表达量为1.851,KDR的相对表达量为1.843, F=19.399, P<0.01);不同细胞亚群的标记基因分析显示,PDGFB在内皮细胞中显著高表达(PDGFB在内皮细胞中的表达显著高于其他细胞,内皮细胞中相对表达量为2.533,成纤维细胞中相对表达量为0.872,巨噬细胞中相对表达量为1.391,组织干细胞中相对表达量为1.618, F=8.945, P<0.01)。TCGA和IHC分析表明,PDGFB在胃癌组织中的表达显著高于癌旁组织(PDGFB在胃癌组织中阳性率为66.18%(45/68),癌旁组织阳性率为17.65%(12/68), χ2=32.89, P<0.05),并且PDGFB高表达的患者术后5年生存率显著低于PDGFB低表达的患者(PDGFB高表达患者中位生存时间为20个月;PDGFB低表达患者中位生存时间为58个月, χ2=17.64, P<0.05)。多因素Cox回归分析显示,PDGFB的表达在胃癌患者的不同年龄、肿瘤大小、T分期、肿瘤分期均存在显著性相关性[风险系数( HR)=1.950,95%可信区间( CI)=1.101~3.455, P<0.05; HR=5.102,95% CI=2.566~10.146, P<0.05; HR=2.645,95% CI=1.116~6.268, P<0.05; HR=3.985,95% CI=1.971~8.058, P<0.05; HR=6.820,95% CI=1.552~29.967, P<0.05],为总生存期相关的危险因素。 结论:PDGFB在胃癌中高表达,并且PDGFB的高表达与胃癌患者的不良预后明显相关。
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编辑人员丨4天前
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抗击新型冠状病毒肺炎疫情:麻醉相关感染控制的改良
编辑人员丨4天前
新型冠状病毒肺炎(新冠肺炎)疫情引起包括中国在内的全世界各国人民密切关注。面对疫情,麻醉医师对于标准预防、消毒隔离、手卫生、环境物表卫生、无菌操作、职业防护等感染控制方面的专业知识和实践操作有待提高和规范。本文结合新冠肺炎疫情,针对中国麻醉感染控制存在的主要问题,梳理了相关的法律、法规、规范要求,提出如下建议。(1)在标准预防方面,在诊治疑似或确诊患者时,麻醉科医护人员应按照三级防护措施进行穿戴防护用具,包括戴N95医用防护口罩,护目镜或面屏,穿防护服等。(2)在手卫生方面,对新冠肺炎确诊或疑似病例进行麻醉时,应严格按照手卫生的规范要求进行洗手或卫生手消毒。在实施各类操作时,麻醉医师应戴双层手套;接触患者后,如需要碰触麻醉机等或其他区域,应脱掉并丢弃外层手套。(3)在环境物表卫生方面,对新冠肺炎疑似或确诊病例手术时,麻醉医师要对发生小面积的患者血液等污染及时清洁和消毒。手术后,严格执行《医疗机构消毒技术规范》,做好手术室(空气、物体表面、地面等)、医疗器械、患者用物等的清洁消毒,严格终末消毒,尤其不能忽略手频繁接触的物表。(4)在麻醉机消毒方面,面对新冠肺炎疫情,建议联合使用麻醉内回路消毒机与在呼气端及吸气端同时使用呼吸通路过滤器。首选高效低容量的疏水性过滤器,以使细菌和病毒清除率>99.999%,每3~4 h更换1次。(5)在隔离方面,新冠肺炎确诊或疑似病例应当在负压手术室进行手术。应有医务人员通知层流工程技术人员及时检查,必要时更换负压手术间高效过滤器。(6)其他方面,对新冠肺炎患者进行麻醉时,应谨慎处理麻醉操作中的锐器,防止刺伤,一旦发生应立即启动医源性职业暴露处理流程。
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编辑人员丨4天前
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孤独症谱系障碍儿童感觉异常特征及其与临床症状的相关分析
编辑人员丨4天前
目的:了解孤独症谱系障碍(autism spectrum disorder,ASD)儿童异常感觉特征情况,并探讨异常感觉与临床症状的关联,为ASD早期诊断、干预治疗提供参考依据。方法:采用横断面调查,于2021年9~12月收集符合DSM-5中孤独症谱系障碍诊断的216名儿童作为研究对象,采用简化版感觉特征问卷(short sensory profile,SSP)、孤独症行为评定量表(autism behavior checklist,ABC)、社交反应量表(social responsiveness scale,SRS)对所有患儿进行问卷调查。使用SPSS 21.0进行统计分析,采用Pearson相关分析评定ASD儿童感觉特征与临床症状的相关性。结果:216例ASD儿童中SSP总分异常有120例,异常率55.6%,7个维度中听觉过滤异常率最高,达到83.8%,其次依次为力量低下/虚弱(60.2%)、运动敏感(43.5%)、低反应/寻求感觉(39.8%)、味觉/嗅觉敏感(37.5%)、视觉/听觉敏感(27.8%)、触觉敏感(17.6%),感觉异常总发生率92.1%。不同感觉异常程度ASD儿童ABC量表总分及感觉、交往、躯体运动、语言、生活自理5个维度比较均差异具有统计学意义( F=39.15,39.99,46.02,29.18,50.98,51.76,均 P<0.01),不同感觉异常程度ASD儿童SRS量表总分及社交知觉、社交认知、社交沟通、社交动机、孤独症行为方式5个维度比较均差异具有统计学意义( F=19.33,29.47,24.82,29.68,31.48,39.86,均 P<0.01),且随着患儿感觉异常加重,ABC、SRS量表总分及各维度分数均增加。SSP总分与ABC量表中感觉、交往、躯体运动、语言、生活自理和ABC总分均呈负相关( r=-0.613,-0.631,-0.643,-0.558,-0.657,-0.679,均 P<0.01)。SSP总分与SRS量表中社交知觉、社交认知、社交沟通、社交动机、孤独症行为方式和SRS总分均呈负相关( r=-0.440,-0.527,-0.504,-0.522,-0.542,-0.595,均 P<0.01)。 结论:感觉异常在ASD儿童中普遍存在,且随着感觉异常的加重ASD儿童核心症状和行为表现越明显。
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编辑人员丨4天前
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超声影像组学对中低位直肠癌淋巴结转移的预测评估
编辑人员丨4天前
目的:探讨基于经直肠超声矢状面二维图及弹性图的影像组学模型对中低位直肠癌淋巴结转移的预测评估。方法:回顾性分析浙江省肿瘤医院2016年1月至2019年12月行经直肠超声检查并术后病理证实为直肠癌的80例患者的临床资料,分为淋巴结转移组(27例)及无转移组(53例),比较两组间一般特征(性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤浸润深度、肿瘤位置、癌胚抗原、糖类抗原199)并筛选出差异有统计学意义的临床一般特征;手动勾画肿瘤最大矢状面二维及弹性图感兴趣区,使用开源软件pyradiomics 3.0.1提取影像组学特征,采用过滤法和嵌入法减少数据维度以选取重要的特征,获取模型最佳参数。将所有样本按照8∶2的比例随机分为训练集和测试集,使用最佳模型参数训练模型,并在测试集上对模型进行测试和验证,根据ROC曲线评估不同方法的预测效能。结果:淋巴结转移组与无转移组肿瘤浸润深度差异有统计学意义(χ 2=11.555, P<0.05),其曲线下面积(AUC )值为0.699。从二维及弹性超声图中总共提取出1 710个影像特征,经过预处理及筛选其中10个特征与淋巴结转移状态强相关,筛选出的10个特征用来构建预测模型,Logistic回归模型、随机森林模型和支持向量机模型的AUC值分别为0.703、0.726、0.742。通过求均值的方法对3个模型融合,融合的模型在测试集上的AUC值为0.734。影像组学预测模型优于基于临床资料统计分析预测模型 (AUC:0.734比0.699, Z=1.984),差异有统计学意义( P<0.05)。 结论:本研究构建的影像组学模型优于仅基于临床资料统计分析构建的模型,对术前直肠癌淋巴结转移性预测具有一定应用价值。
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编辑人员丨4天前
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脓毒症患者HVHF治疗后血清可溶性CD14水平对并发急性呼吸窘迫综合征的预测价值
编辑人员丨4天前
目的:探讨脓毒症患者高容量血液过滤(high volume hemo filtration,HVHF)后血清可溶性CD14(soluble CD14,sCD14)水平对并发急性呼吸窘迫综合征(acute respiratry distress syndrme,ARDS)的预测价值。方法:选择2019年6月至2020年5月在甘肃省中医院住院进行HVHF治疗的200例脓毒症患者,根据患者治疗后是否发生ARDS将其分为ARDS组(64例)和非ARDS组(136例)。收集患者临床资料及相关实验室指标。通过曲线拟合和阈值效应分析确定sCD14与脓毒症患者HVHF治疗后发生ARDS的关系。通过多因素Logistic回归分析脓毒患者HVHF治疗后并发ARDS的独立危险因素。根据多因素结果,构建贝叶斯网络模型,使用Netica软件进行贝叶斯网络推理,并对模型效能进行评价。结果:ARDS组和非ARDS组在年龄、性别、饮酒史、身体质量指数(body mass index,BMI)、序贯器官衰竭(sepsis-related organ failure assessment,SOFA)评分、格拉斯哥昏迷(glasgow coma scale,GCS)评分、高血压病史、三酰甘油(triacylglycerol,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、总胆红素、白细胞总数等方面的差异均无统计学意义( P>0.05)。两组患者在体温、慢性健康状况评分系统Ⅱ(acute physiology and chronic health evaluation Ⅱ,APACHE Ⅱ)评分、吸烟史、糖尿病史、氧和指数(PaO 2/FiO 2)、sCD14、C反应蛋白(c reactive protein,CRP)以及脂多糖结合蛋白(lipopolysaccharide binding protein,LBP)间的差异具有统计学意义( t/ χ2=3.30、18.15、15.24、5.30、8.54、28.54、25.12, 10.36, P值均<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,APACHE II、吸烟史、sCD14及LBP水平为脓毒患者HVHF治疗后并发ARDS的独立危险因素( OR=3.83、4.14、5.14、5.26, P值均<0.05)。拟合曲线及阈值效应分析发现,当sCD14>36.76 μg/L时,随着sCD14的升高,ARDS发生率呈上升趋势( OR=0.84,95% CI:0.78~0.91, P<0.001)。贝叶斯网络模型显示,有吸烟史和sCD14>36.76 μg/L的患者发生ARDS的概率最高(75.70%),上述指标均正常者ARDS发生概率最低(8.65%)。ARDS预测模型内部验证结果显示,内部验证前后曲线下面积(area under curve,AUC)分别为0.88(95% CI:0.81~0.92)和0.87(95% CI: 0.80~0.92),灵敏度分别为89.53%和89.72%,特异度分别为90.58%和90.67%。 结论:血清sCD14水平为脓毒患者HVHF治疗后并发ARDS的独立危险因素,具有良好的预价值,可作为预判脓毒患者HVHF治疗后并发ARDS的早期指标。
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编辑人员丨4天前
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自制简易装置用于杀灭呼吸机废气新型冠状病毒的可行性
编辑人员丨4天前
目的:评价自制简易装置用于杀灭呼吸机废气新型冠状病毒的可行性。方法:选取用于新型冠状病毒肺炎危重型患者的呼吸机17台,分别于加装废气过滤-消毒装置前在呼吸机废气口、加装24和48 h时在消毒罐排气口采用新型冠状病毒核酸拭子进行检测。结果:加装前呼吸机废气新型冠状病毒核酸检测阳性率为100%,加装24 h时消毒罐排气新型冠状病毒核酸检测阳性率为0,加装48 h时消毒罐排气新型冠状病毒核酸检测阳性率为6%(1台阳性)。与加装前比较,加装后24和48 h时新型冠状病毒核酸检测阳性率降低( P<0.05)。 结论:自制简易装置可用于杀灭呼吸机废气新型冠状病毒。
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编辑人员丨4天前
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微管相关蛋白1轻链3β在胃癌组织的表达及其临床意义
编辑人员丨4天前
目的:基于单细胞测序技术解析微管相关蛋白1轻链3β(LC3B)在胃癌中的表达及其与患者预后的关系。方法:选用3对胃癌及配对的癌旁组织样本行单细胞转录组测序(scRNA-seq)。CellTypist对过滤后的单细胞表达数据进行亚群分类,使用Wilcoxon rank-sum对测序数据进行拟时序分析,探究不同细胞簇中LC3B的差异表达。通过癌症基因组图谱(TCGA)及免疫组织化学技术(IHC)分析LC3B在胃癌组织中的表达。采用单因素和多因素Cox比例风险回归模型确定影响胃癌患者预后的独立因素。实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)技术分析胃癌细胞中LC3B的表达水平,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、克隆形成、Transwell检测LC3B表达改变后,胃癌细胞增殖、迁移、侵袭能力的变化。两组间比较采用两独立样本 t检验。 结果:scRNA-seq分析结果显示,LC3B在胃癌组织中的表达量高于癌旁组织(2.001±2.706比1.010±1.634, t=44.094, P<0.01)且LC3B在内皮细胞、单核细胞中表达量高于其余细胞亚群(3.610±3.294,3.214±3.889, F=1 039.267, P<0.01)。通过TCGA和IHC分析结果显示,LC3B在原发性胃癌组织中的表达高于正常组织[67.983(53.874,83.827)比48.114(39.147,78.174), P<0.01;60.3%比19.1%, χ2=9.299, P<0.01]。生存分析显示,LC3B高表达的胃癌患者总体生存时间短于LC3B低表达的患者[风险比( HR)=4.143,95%可信区间( CI):2.352~7.298, P<0.05]。多因素Cox回归分析显示,LC3B为总生存期相关的危险因素( HR=4.966,95% CI:2.241~11.005, P<0.01)。CCK-8、Transwell迁移及侵袭实验、克隆形成实验检测分析发现,过表达LC3B后胃癌细胞的活力、迁移、侵袭、增殖能力高于空载体组[(1.837±0.057)比(1.287±0.091)、(338.000±39.950)个比(152.333±4.509)个、(287.667±44.230)个比(148.667±27.465)个、(202.333±12.503)个比(104.667±11.240)个, t=8.883、7.999、4.624、10.062, P<0.05],抑制LC3B表达后,胃癌细胞的活力、迁移、侵袭、增殖能力低于空载体组[(0.810±0.064)比(1.460±0.058)、(129.667±37.859)个比(389.667±43.822)个、(126.000±60.531)个比(290.000±70.682)个、(54.667±16.166)个比(109.667±3.055)个, t=12.963、7.776、3.052、5.790, P<0.05]。 结论:LC3B在胃癌中高表达,并且促进胃癌细胞的增殖和转移。
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编辑人员丨4天前
