目前，采取异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)，是临床上大多数遗传性血液系统疾病和原发性免疫缺陷病的根治手段。但是由于缺少人类白细胞抗原(HLA)相合供体，以及移植后可能发生移植物抗宿主病(GVHD)，使该方法始终难以在临床推广、应用。近年来，基因编辑和干细胞生物学技术发展迅速，利用患者自体造血干/祖细胞(HS/PC)进行基因治疗的方法日渐兴起，成为遗传性血液系统疾病基因治疗领域的的研究热点。一方面，基因治疗从根源上避免了免疫排斥的难题；另一方面，成簇规律间隔的短回文重复序列(CRISPR)-CRISPR相关蛋白(Cas)9系统的发现，使靶向基因治疗更具有可行性。CRISPR-Cas9系统能够对靶向基因进行定点剪切，达到修饰基因组DNA的目的。因此，笔者主要就基因编辑技术、遗传性血液系统疾病基因治疗的临床研究进展，以及基因治疗面临的挑战和发展方向进行阐述。

目的:探讨儿童和青少年血浆氟含量、每日钙摄入量和血细胞参数的关联。方法:本研究基于2013 - 2016年美国国家健康和营养检查调查（The Ethics Review Board of National Center for Health Statistics，NHANES）数据库，以3 684名6 ~ 19岁儿童和青少年为研究对象，收集数据库中血浆氟含量、每日钙摄入量和血细胞参数信息。使用限制性立方样条分析血浆氟含量、每日钙摄入量与血细胞参数的非线性关系，若存在非线性关系，使用阈值/饱和效应分析法计算最佳拐点；随后利用多重线性回归模型分析三者之间的关联，并分析每日钙摄入量（二分类变量，依据每日钙摄入量的中位数分层）对血浆氟含量与血细胞参数关联的修饰作用。结果:血浆氟含量与白细胞计数、血红蛋白含量和血小板计数均无非线性关系（均 P非线性 > 0.05），而与红细胞计数、红细胞比容均存在非线性关系（均 P非线性 < 0.001），调整混杂因素后，血浆氟含量对红细胞计数和红细胞比容效应的最佳拐点分别为0.54和0.31 μmol/L；每日钙摄入量与各血细胞参数均无非线性关系（均 P非线性 > 0.05）。调整混杂因素后，血浆氟含量每升高1 μmol/L，白细胞计数升高0.49 × 10 9个/L（ P = 0.009）；血浆氟含量与红细胞计数和红细胞比容的关联存在饱和效应：血浆氟含量< 0.54 μmol/L时，其含量每升高1 μmol/L，红细胞计数降低0.46 × 10 12个/L（ P < 0.001）；血浆氟含量< 0.31 μmol/L时，其含量每升高1 μmol/L，红细胞比容降低6.29%（ P = 0.006）；上述关联在血浆氟含量高于最佳拐点后，均无统计学意义（均 P > 0.05）。依据每日钙摄入量的中位数分层后，在低钙组（每日钙摄入量< 0.87 g），血浆氟含量每升高1 μmol/L，白细胞计数升高0.77 × 10 9个/L（ P = 0.001）；血浆氟含量< 0.54 μmol/L时，其含量每升高1 μmol/L，红细胞计数降低0.41 × 10 12个/L（ P = 0.002）；血浆氟含量≥0.54 μmol/L时，其含量每升高1 μmol/L，红细胞计数降低0.47 × 10 12个/L（ P < 0.001）；血浆氟含量< 0.31 μmol/L时，其含量每升高1 μmol/L，红细胞比容降低8.29%（ P = 0.011）；而上述关联在高钙组（每日钙摄入量≥0.87 g）均无统计学意义（均 P > 0.05）。每日钙摄入量与血浆氟含量对血小板计数存在交互作用（ P交互 = 0.070），血浆氟含量每升高1 μmol/L，低钙组血小板计数升高12.68 × 10 9个/L（ P = 0.013），高钙组血小板计数降低9.05 × 10 9个/L（ P = 0.035）。 结论:儿童和青少年血细胞参数与血浆氟含量密切相关，而与每日钙摄入量无直接关联；但不同钙摄入人群中血浆氟含量与血细胞参数关联不同，且每日钙摄入量可修饰血浆氟含量与血小板计数的关联。

β地中海贫血为单基因遗传病，患者因β珠蛋白基因突变致红细胞无法形成正常成年人血红蛋白，而发生溶血性贫血。目前的主要治疗方法为异基因造血干细胞移植或对症定期输血并使用祛铁剂减轻铁负荷。重型患者预后很差，如不经治疗可危及生命。通过基因修饰自体造血干细胞为β地中海贫血患者提供了新的治疗选择，可能通过单次给药即实现长期、稳定提升血红蛋白水平，使一次性治愈β地中海贫血成为可能。文章从有效性评价终点、临床试验设计、入组人群、受试者监测等方面，对基因治疗β地中海贫血的临床试验设计关键要素进行探讨，以期为加快企业研发该类药物提供参考。

目的:探讨急性髓系白血病(AML)患者表观遗传学修饰基因突变(EMMs)的携带率及其临床特征。方法:选取2011年5月至2021年2月于连云港市第一人民医院初诊的172例AML患者为研究对象。应用二代测序技术检测42种髓系基因的变异情况，回顾性分析EMMs患者的临床及分子学特征，以及去甲基药物(HMAs)对其生存的影响。结果:在172例初诊的AML患者中，71例(41.28%)携带EMMs [EMMs(+)]，变异基因分别为 TET2(14.53%，25/172)、 DNMT3A(11.63%，20/172)、 ASXL1(9.30%，16/172)、 IDH2(9.30%，16/172)、 IDH1(8.14%，14/172)、 EZH2(0.58%，1/172)。EMMs(+)患者的外周血血红蛋白低于EMMs(-)患者(72 g/L vs. 88 g/L， Z＝-1.985， P<0.05)。老年AML患者的EMMs(+)携带率显著高于青年患者[71.11%(32/45) vs. 30.70%(39/127)， χ2 ＝ 22.38， P<0.001]。 EMMs与 NPM1基因变异呈正相关( r＝0.413， P<0.001)，与 CEPBA基因双变异呈负相关( r＝-0.219， P<0.05)。EMMs(+)的预后中危AML患者中，与常规化疗方案相比，含HMAs的化疗方案可以延长患者中位无进展生存时间(PFS)及中位总生存时间(OS)(PFS：11.5个月 vs. 25.5个月， P<0.05；OS：12.5个月 vs. 27个月， P<0.05)。在老年患者中，与常规方案相比，含HMAs化疗方案也可延长中位PFS及中位OS(PFS：4个月 vs. 18.5个月， P<0.05；7个月 vs. 23.5个月， P<0.05)。 结论:AML患者的EMMs携带率较高，含HMAs的化疗方案可以延长预后中危及老年AML患者的生存，对AML的个体化治疗有一定的指导意义。

目的:探讨白细胞介素4修饰的金纳米酶颗粒（IL-4-AuNP）对糖尿病小鼠全层皮肤缺损创面愈合的作用及其机制。方法:采用实验研究方法。改进文献中的方法合成金纳米酶颗粒（AuNP）及IL-4-AuNP，采用透射电子显微镜拍摄2种颗粒形貌并计算其粒径，采用纳米粒度电位仪和粒度分析仪分别检测2种颗粒的表面电位和水合粒径。采用过氧化氢检测试剂盒和超氧阴离子检测试剂盒检测IL-4-AuNP的过氧化氢清除率和超氧阴离子清除率。取小鼠成纤维细胞系3T3细胞，采用随机数字表法（下同）将其分为空白对照组、仅使用过氧化氢处理的单纯过氧化氢组、先使用IL-4-AuNP处理0.5 h再使用过氧化氢处理的过氧化氢+IL-4-AuNP组，培养24 h后，采用免疫荧光法检测细胞活性氧水平，采用细胞计数试剂盒8检测细胞相对存活率。取Raw264.7小鼠巨噬细胞，将其分为空白对照组和用IL-4-AuNP处理的IL-4-AuNP组，培养24 h后，采用免疫荧光法观测细胞中精氨酸酶1（Arg-1）的表达。取12只8~10周龄雄性BALB/c小鼠（小鼠周龄、性别、品系下同），分为IL-4-AuNP组和空白对照组，分别作相应处理。在分组处理第16天，采集小鼠全血分析全血中白细胞计数（WBC）、红细胞计数（RBC）、血红蛋白水平与血小板计数和天冬氨酸转氨酶（AST）、丙氨酸转氨酶（ALT）、尿素与肌酐水平；采用苏木精-伊红（HE）染色观察小鼠心、肝、脾、肺和肾组织的炎症、出血或坏死情况。另取36只鼠，制作糖尿病模型后，在其背部制作全层皮肤缺损创面，将创面分为空白对照组、单纯AuNP组和IL-4-AuNP组，每组12只鼠，分别进行相应处理。于分组处理第0（即刻）、4、9、15天，观察创面情况并计算创面面积。分组处理第9天，采用HE染色检测创面中新生上皮长度和肉芽组织厚度。分组处理第15天，采用免疫荧光法检测创面组织中活性氧水平及Arg-1阳性细胞数。样本数均为6。对数据行独立样本 t检验、校正 t检验、Tukey检验或Dunnett T3检验。 结果:AuNP及IL-4-AuNP大小均匀，其粒径、表面电位、水合粒径分别为（13.0±2.1）、（13.9±2.5）nm及（-45.8±3.2）、（-20.3±2.2）mV与（14±3）、（16±4）nm。IL-4-AuNP的过氧化氢清除率和超氧阴离子清除率分别为（69±4）%和（52±5）%。分组培养24 h后，单纯过氧化氢组3T3细胞活性氧水平明显高于空白对照组（ q=26.12， P<0.05）；过氧化氢+IL-4-AuNP组细胞活性氧水平明显低于单纯过氧化氢组（ q=25.12， P<0.05），而与空白对照组接近（ P>0.05）。分组培养24 h后，过氧化氢+IL-4-AuNP组3T3细胞相对存活率明显高于单纯过氧化氢组（ t=51.44， P<0.05）。分组培养24 h后，IL-4-AuNP组Raw264.7细胞Arg-1的表达明显高于空白对照组（ t'=8.83， P<0.05）。分组处理第16天，空白对照组和IL-4-AuNP组小鼠的WBC、RBC、血红蛋白水平与血小板计数和AST、ALT、尿素与肌酐水平比较差异均无统计学意义（ P>0.05）；IL-4-AuNP组小鼠的心、肝、脾、肺、肾等重要脏器中均未观察到明显的炎症、出血或坏死，与空白对照组相比，无明显变化。分组处理第0、4天，空白对照组、单纯AuNP组和IL-4-AuNP组糖尿病小鼠创面面积比较差异均无统计学意义（ P>0.05）。分组处理第9天，单纯AuNP组和IL-4-AuNP组创面面积均明显小于空白对照组（ q值分别为9.45、14.87， P<0.05），IL-4-AuNP组创面面积显著小于单纯AuNP组（ q=5.42， P<0.05）。分组处理第15天，单纯AuNP组和IL-4-AuNP组创面面积均明显小于空白对照组（ q值分别为4.84、20.64， P<0.05），IL-4-AuNP组创面面积显著小于单纯AuNP组（ q=15.80， P<0.05）；且IL-4-AuNP组创面部位红、肿等炎症反应较其他2组明显减轻。分组处理第9天，相比于空白对照组和单纯AuNP组，IL-4-AuNP组糖尿病小鼠创面中新生上皮长度明显更长（ P值均 <0.05），创面中的肉芽组织厚度显著增厚（ q值分别为11.33、9.65， P值均 <0.05）。分组处理第15天，相比于空白对照组，单纯AuNP组和IL-4-AuNP组糖尿病小鼠创面组织的活性氧水平均明显降低（ P<0.05）。分组处理第15天，IL-4-AuNP组糖尿病小鼠创面中Arg-1阳性的细胞数显著多于空白对照组和单纯AuNP组（ P值均 <0.05）。 结论:IL-4-AuNP在体使用安全，可以通过清除活性氧改善氧化微环境和诱导巨噬细胞向M2表型极化，促进糖尿病小鼠全层皮肤缺损创面高效愈合与修复再生。

目的:通过比较系统性红斑狼疮(SLE)患者与健康对照组之间血浆N6-甲基腺嘌呤(m6A)修饰相关蛋白[甲基化转移酶3(METTL3)、甲基化转移酶14(METTL14)、肾母细胞瘤1关联蛋白(WTAP)、AlkB同源蛋白5(ALKBH5)、肥胖相关蛋白(FTO)]和m6A水平变化，探讨m6A在SLE中的临床意义。方法:共选取64例SLE患者和24例健康志愿者，比较两组血浆METTL3、METTL14、WTAP、ALKBH5、FTO和m6A水平，分析METTL3、WTAP、FTO水平与临床指标的相关性。结果:SLE患者血浆METTL3水平明显高于对照组( P<0.05)，血浆WTAP和FTO水平明显低于对照组(均 P<0.05)。SLE患者血浆METTL3水平与血红蛋白水平呈负相关( r＝－0.344， P<0.05)；血浆FTO水平与血浆IgM水平呈正相关( r＝0.337， P<0.05)，与血浆IgA水平呈负相关( r＝－0.286， P<0.05)。高水平METTL3组SLE患者肾脏累及的发生率、血浆抗组蛋白抗体阳性率更高(均 P<0.05)。低水平FTO组SLE患者血浆抗dsDNA抗体、抗Sm抗体及AuaA自身抗体阳性率更高(均 P<0.05)。 结论:SLE患者血浆METTL3水平明显升高，血浆WTAP和FTO水平明显降低，并与多种临床指标相关，与SLE发病可能存在一定联系。

目的:探讨多囊卵巢综合征（PCOS）患者血清缺血修饰白蛋白（IMA）水平的变化，分析其与PCOS的相关性。方法:选取我院2017—2018年诊治的80例PCOS患者作为观察组，选择同期健康体检人员75例作为正常对照组，分别检测两组血清IMA水平、计算IMA指数，并比较两组体质量指数和生化指标，包括空腹血糖、空腹胰岛素、糖化血红蛋白、总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、超敏C反应蛋白（hs-CRP），采用稳态模型评估法计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR），化学发光免疫分析法检测两组黄体生成素（LH）、卵泡刺激素（FSH）、睾酮（T）、雌二醇（E 2）、泌乳素（PRL），采用Pearson相关分析IMA与上述各项指标的相关性。 结果:观察组和正常对照组IMA水平为（86.4 ± 10.5）、（73.6 ± 7.84）kU/L，差异有统计学意义（ P<0.05）。观察组和正常对照组IMA指数分别为93.21 ± 8.40、74.60 ± 6.52，差异有统计学意义（ P<0.05）。观察组空腹胰岛素[（14.90 ± 6.23）mU/L比（9.21 ± 1.5）mU/L]、HOMA-IR（3.64 ± 1.35比1.89 ± 0.91）、hs-CRP[（2.84 ± 0.73）mg/L比（0.81 ± 0.13）mg/L]、LH[（7.34 ± 2.65）mU/L比（4.50 ± 2.25）mU/L]、LH/FSH值（1.75 ± 0.62比0.90 ± 0.33）和T水平[（2.64 ± 1.25）ng/L比（1.26 ± 0.36）ng/L]显著高于正常对照组，差异有统计学意义（ P<0.05）。Pearson相关分析结果显示，血清IMA水平与T、HOMA-IR呈正相关（ r=0.47， P<0.05； r=0.58， P<0.05），与体质量指数无相关性（ P > 0.05）。 结论:PCOS患者体内氧化应激标志物IMA水平增高，对PCOS患者检测血清IMA水平对疾病的治疗、评估有一定的临床意义。

目的 探究甲基转移酶样蛋白16(METTL16)在多发性骨髓瘤(MM)患者临床诊断及对预后预测的应用价值.方法 在多发性骨髓瘤研究基金会(MMRF)及基因型-组织表达项目(GTEx)数据库中分析参与N6-甲基腺苷(m6A)修饰的各基因在MM中表达水平及预后潜力.分别收集 26例初次诊断MM患者及19 例标准方案治疗后MM患者骨髓标本和 24 例正常人外周血标本,采用 qRT-PCR 技术测定m6A各基因表达量;同时收集MM初诊患者各实验室及临床指标:血红蛋白(Hb)、白细胞数(WBC)、血小板数(PLT)、血肌酐(Scr)、血清钙离子(Ca2+)、β-微球蛋白(β-MG)、骨破坏、ISS分期、分型、生存期(OS),对上述指标进行 MET-TL16 相关性分析.进一步检测标本中:白细胞介素(IL)-4、IL-6、IL-10、IL-18 及趋化因子(CCL)2、CCL3、CCL4 表达水平,并对其与METTL16 表达的相关性进行分析.结果 数据库分析提示METTL16 在MM患者样本中较正常对照表达显著升高,与不良预后相关.qRT-PCR结果显示,MM初诊患者骨髓中METTL16 表达水平显著高于治疗后患者以及正常对照组.其表达与血红蛋白、白细胞、骨破坏及分期、生存期等均有相关性,且其表达与CCL4 表达呈正相关.结论 METTL16 在MM患者中高表达,其表达水平与贫血、更严重的骨质破坏及更晚的分期等相关,可能提示不良预后.METTL16 与CCL4 表达有显著相关性,提示其可能通过相关通路发挥相应致病作用.METTL16 在MM的诊疗中将具有重要临床价值.

目的 探讨基于循证理论的临床干预路径对颅脑外伤(TBI)患儿营养情况及综合功能的影响.方法 纳入2018年6月-2023年6月丽水市中心医院收治的2～7岁TBI儿童128例为研究对象.对照组患儿采用常规干预方式,观察组患儿采用基于循证理论的临床干预路径.观察两组神经功能缺损程度、运动功能、生活活动能力、营养指标情况、满意度及预后情况.结果 在干预后,两组患儿的上肢评分、下肢评分及运动能力总评分均上升,且观察组高于对照组[(37.09±2.22)分vs.(29.69±3.63)分;(22.14±2.57)分 vs.(15.02±1.58)分;(58.21±4.19)分 vs.(43.22±4.52)分](P＜0.05);而两组的神经功能缺损程度评分均下降,且观察组低于对照组[(14.61±2.29)分vs.(21.95±4.10)分](P＜0.05).在干预后,两组患儿在大便、小便、修饰、用厕、进食、转移、活动、穿衣、上下楼梯及洗澡方面评分均上升,且观察组均高于对照组[(8.95±1.01)分 vs.(7.63±1.52)分;(9.06±0.59)分 vs.(6.38±0.72)分;(3.88±0.49)分 vs.(2.73±0.67)分;(7.38±1.33)分 vs.(4.73±0.91)分;(8.92±0.63)分 vs.(6.83±1.12)分;(13.00±2.04)分vs.(9.03±1.27)分;(13.72±0.83)分vs.(9.52±1.35)分;(8.33±1.05)分vs.(5.78±1.71)分;(9.08±0.54)分 vs.(6.75±1.60)分;(3.89± 0.36)分vs.(2.98±0.70)分](P＜0.05).在干预后,两组患儿的白蛋白、血红蛋白及总蛋白水平均上升,且观察组均高于对照组[(33.11±3.54)g/L vs.(29.22±2.04)g/L;(145.45±3.76)g/L vs.(115.78±6.64)g/L;(77.69±8.34)g/L vs.(66.54±4.78)g/L],差异有统计学意义(P＜0.05).干预后,观察组患儿家属满意度98.44％明显高于对照组85.94％(P＜0.05).干预后,观察组患儿正常的例数明显多于对照组[56例vs.43例],差异有统计学意义(P＜0.05),整体预后情况明显优于对照组.结论 基于循证理论的临床干预路径可明显TBI患儿营养情况,进而促进综合功能的恢复,提高患儿家属满意度.

红细胞输注已广泛应用于创伤救治、外科手术、输血治疗以及战伤急救等多个方面,但依然存在血液资源紧缺、储存期短、输前需交叉配型、可能经血传播病原体等问题.血红蛋白氧载体(hemoglobin-based oxygen carriers,HBOCs)是一类由无基质血红蛋白通过化学修饰等方法制备的可溶性纳米级具有携释氧功能的氧载体,能代替红细胞为体内各器官、组织输送氧气,且具有无血型和病毒传播风险、储存长,即时可用的特点,也称为红细胞代用品.本文旨在综述HBOCs研究的进展,同时探讨其在除替代红细胞输血治疗以外,针对其他如器官保存、脑缺血、肿瘤等治疗中的应用前景.