目的:探讨血红蛋白氧载体(HBOC)对蛛网膜下腔出血(SAH)后早期脑损伤的保护作用及机制。方法:采用血管内穿孔法制备大鼠SAH模型。将150只成年雄性SD大鼠采用随机数字表法分为假手术组(sham组)、SAH组、HBOC组、铁死亡促进剂组(HBOC＋erastin组)和蛋白激酶B抑制剂组(HBOC＋MK2206组)，每组30只。HBOC组术后立即经股静脉泵入HBOC，SAH组大鼠输注等体积乳酸林格钠液。术后24 h行SAH评分、神经功能评分及脑含水量的测定；采用尼氏染色检测神经元损伤；检测右侧颞叶皮质谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)和组织铁含量；利用蛋白免疫印迹检测蛋白激酶B(Akt)通路蛋白及谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)的表达。组间比较采用 t检验。 结果:SAH组神经功能评分低于HBOC组[(12.50±2.48)分比(16.70±0.45)分， t＝3.734， P<0.05)。尼氏染色结果显示正常神经元细胞计数SAH组明显少于sham组和HBOC组[(17.60±2.41)个/视野比(50.40±4.39)、(27.80±3.35)个/视野， t＝14.640、5.532， P<0.05)。SAH组脑含水量高于sham和HBOC组[(79.65±0.13)%比(78.60±0.16)%、(79.05±0.27)%， t＝11.420、4.486， P<0.05]、GSH明显低于sham和HBOC组(0.43±0.12比0.80±0.07、0.65±0.06， t＝6.048、3.793， P<0.01)、MDA高于sham和HBOC组(4.69±0.85比1.34±0.34、2.14±0.88， t＝8.146、4.652， P<0.01)、组织铁含量高于sham和HBOC组[(0.02±0.01) mg/g prot比(0.11±0.03)、(0.05±0.01) mg/g prot， t＝7.194、4.496， P<0.05]、磷酸化Akt(pAkt)/Akt比值(0.75±0.05比2.19±0.04、2.035±0.04， t＝5.855、3.545， P<0.05)和GPX4含量低于sham和HBOC组(0.31±0.01比1.81±0.05、1.28±0.04， t＝73.290、55.810， P<0.05)，使用HBOC后改善了由SAH造成的指标变化。 结论:HBOC可通过激活Akt信号通路抗氧化应激并抑制铁死亡减轻蛛网膜下腔出血后早期脑损伤。

目的:探讨血红蛋白氧载体(HBOCs)对蛛网膜下腔出血(SAH)后早期脑损伤的保护作用及机制。方法:采用血管内穿孔法制SAH模型。将成年雄性Sprague-Dawley大鼠(贵州医科大学实验动物中心)按随机数字表法分为假手术(Sham)组、SAH组和HBOC组，每组15只。HBOC组术后立即经股静脉输注15 ml/kg HBOCs，SAH组大鼠输注等体积乳酸林格氏液。术后24 h行SAH评分、神经功能评分及脑含水量的测定。采用尼氏染色和原位末端转移酶标记(TUNEL)检测神经元损伤及细胞凋亡。利用蛋白免疫印迹法检测蛋白激酶B(Akt)通路蛋白及凋亡相关蛋白的表达。组间比较采用 t检验。 结果:SAH组神经功能评分低于Sham组和HBOC组(14.97±1.70比17.80±0.32， t＝6.363， P<0.05；14.97±1.70比16.33±1.44， t＝2.383， P<0.05)。SAH组细胞凋亡率高于Sham组和HBOC组[(26.66±6.01)%比(3.90±1.83)%， t＝14.030， P<0.05；(26.66±6.01)%比(11.30±4.26)%， t＝8.075， P<0.05]。SAH组磷酸化Akt(p-Akt)/Akt比值低于Sham组和HBOC组(0.51±0.10比0.97±0.09， t＝5.936， P<0.05；0.51±0.10比0.86±0.17， t＝3.088， P<0.05)。 结论:HBOCs通过激活Akt信号通路抑制细胞凋亡，减轻SAH后早期脑损伤。

红细胞输注已广泛应用于创伤救治、外科手术、输血治疗以及战伤急救等多个方面,但依然存在血液资源紧缺、储存期短、输前需交叉配型、可能经血传播病原体等问题.血红蛋白氧载体(hemoglobin-based oxygen carriers,HBOCs)是一类由无基质血红蛋白通过化学修饰等方法制备的可溶性纳米级具有携释氧功能的氧载体,能代替红细胞为体内各器官、组织输送氧气,且具有无血型和病毒传播风险、储存长,即时可用的特点,也称为红细胞代用品.本文旨在综述HBOCs研究的进展,同时探讨其在除替代红细胞输血治疗以外,针对其他如器官保存、脑缺血、肿瘤等治疗中的应用前景.

目的 探讨聚合人脐带血红蛋白氧载体(PolyCHb)增强小鼠 4T1 乳腺癌原位瘤化学免疫疗法敏感性的影响.方法 构建 4T1 乳腺癌原位瘤模型,将 15 只小鼠随机均分为 3 组,空白组:无干预;对照组:多柔比星(DOX)+PD-1 抑制剂(a-PD-1)治疗,腹腔注射DOX 5 mg·kg-1、1 次/周,腹腔注射PD-1 抑制剂12.5 mg·kg-1、1 次/周;实验组:DOX+a-PD-1+PolyCHb治疗,DOX和a-PD-1 用法同上,PolyCHb:尾静脉注射600 mg·kg-1、3 次/周;给药周期为4 周.给药期间记录肿瘤体积 3 次/周,绘制各组肿瘤生长曲线并计算抑瘤率.29d处死小鼠,剥瘤后称瘤重;免疫荧光法检测肿瘤组织中HIF-1α的含量;HE染色观察肿瘤组织病理变化;TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡情况;免疫组化法检测肿瘤增殖指标Ki67 表达情况.结果 与空白组和对照组相比,实验组组肿瘤体积显著减小(P<0.05)、抑瘤率(％)显著提高(P<0.05);实验组肿瘤组织中HIF-1α含量降低(P<0.05);实验组肿瘤组织生长区减少,并伴坏死区增加;各组肿瘤组织细胞凋亡阳性率(％)分别为 18.79±0.62、20.68±1.19、41.65±2.99(F=135.2,P<0.001);此外肿瘤增殖指标Ki67 结果显示对照组与实验组比较有统计学差异(P<0.05).结论 PolyCHb可以增加乳腺原位瘤小鼠化学免疫疗法的敏感性,其作用机制可能与降低HIF-1α表达,促进细胞凋亡和坏死,抑制肿瘤细胞增殖有关.

目的 基于微阵列数据分析筛选中国人冠心病(CHD)的关键基因和信号通路,以期为临床探究潜在的发病机制与治疗靶点.方法 以CHD为检索关键词从基因表达图谱(GEO)数据库下载GSE71226微阵列芯片数据进行进一步分析,利用R Studio软件中"limma"包筛选冠心病患者与正常健康人群的差异基因并对其进行可视化处理,利用R Studio软件中"clusterProfiler"包和"org.Hs.eg.db"包对差异基因进行基因本体(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,蛋白互作(PPI)网络利用STRING在线网站和Cytoscape软件进行构建,以此来获取毂基因.结果 与健康对照人群相比,CHD患者有76个基因显著上调和44个基因显著下调;差异表达基因显著富集在血红蛋白复合体和结合珠蛋白-血红蛋白复合体等细胞成分(CC)中,分子功能(MF)主要体现为结合珠蛋白结合以及氧气载体活性,上调差异表达基因主要富集在单纯疱疹病毒1型感染信号通路,真核生物中的核糖体合成信号通路,信使RNA监测通路以及RNA转运信号通路,上调差异表达基因主要富集在疟疾信号通路,金黄色葡萄球菌感染信号通路,补体和凝聚级联信号通路以及神经活性配体受体相互作用信号通路;通过cytoscape筛选得出与冠心病关联最大的基因为AHSP.结论 本研究成功构建CHD患者血液中差异表达基因的PPI调控网络,并确定AHSP为其关键基因.

血红蛋白氧载体(HBOC)作为血液代用品,应用于急性脑梗死血运重建前脑保护,有广阔的临床应用前景.将血红蛋白制备成适用于临床的HBOC已有40余年,国内近几年对HBOC在脑保护方面的研究也有显著进展.本文综述以血红蛋白作为基础血液代用品临床应用于保护缺血脑组织的最新研究进展.

目的:评价茵栀黄颗粒对妊娠期肝内胆汁淤积症患者糖脂代谢的影响,并检测治疗前后胎盘中胆盐载体( MRP)的水平.方法:选取2015年1月至2017年1月南阳南石医院将60例妊娠期肝内胆汁淤积症患者纳入研究,随机分为对照组及观察组,每组30例. 2组均使用熊去氧胆酸及丁二磺酸腺苷蛋氨酸,观察组在此基础上加用茵栀黄颗粒,比较2组孕妇临床症状、糖脂代谢指标、妊娠结局及胎盘MRP水平.结果:2 组瘙痒的症状评分均下降,观察组优于对照组( P＜0.05);治疗后2组糖化血红蛋白(HbAlc)、空腹血糖(FPG)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)均有不同程度改善,其中观察组改善更为明显,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05);观察组新生儿早产率、新生儿窘迫发生率均明显低于对照组,产后24 h出血的总量明显少于对照组,新生儿体重较对照组提高,差异有统计学意义(P＜0.05);治疗后2组的胎盘组织MRP1及MRP2水平均有所上调,其中观察组上调的趋势更为明显(P＜0.05).结论:茵栀黄颗粒可明显改善妊娠期肝内胆汁淤积症患者糖脂代谢水平,可通过上调MRP水平促进胎盘胆汁运转,促进病情恢复.

目的 考察透明颤菌血红蛋白基因(vgb)在大肠埃希菌(E.coli)和龟裂链霉菌(S.rimosus)中的表达,研究在不同溶氧条件下表达的透明颤菌血红蛋白(VHb)对龟裂链霉菌生长和土霉素合成的影响.方法 将vgb插入表达型质粒pET-28a中,导入E.coli BL21 (DE3)用以表达VHb并测定其活性.以整合型质粒pSET152为载体,利用ermE*启动子组成型表达vgb基因,将构建的质粒通过接合转移整合到S.rimosusM4018基因组上,利用CO差示光谱法和SDS-PAGE鉴定两个重组菌中的血红蛋白.在5L罐上考察不同溶氧条件下VHb的表达对重组龟裂链霉菌生长和土霉素合成的影响.结果 重组大肠埃希菌和重组龟裂链霉菌都能够表达具有生物活性的VHb,发酵结果表明,在117h时与对照菌相比,重组龟裂链霉菌在高氧和低氧条件下的干重分别提高了6％和32％,同时单位干重土霉素的产量分别提高了41％和93％.结论 VHb在重组龟裂链霉菌中成功表达,改善了菌体的生长和土霉素的合成,为解决工业发酵过程中氧限制问题提供了策略.

姜黄、郁金、莪术均来源于姜科植物,为同一植物的不同药用部分,但三者药性不同,从而产生的功效、针对的症状亦不相同,姜黄、莪术的药性组合均为温辛肝、温苦肝,郁金的药性组合为寒心肝、寒苦肝、寒辛心、寒苦心,对比分析郁金与姜黄、莪术的性效关系的相关性和差异性,阐释三者作用机制的异同点.该文以姜黄、郁金、莪术为研究载体,通过TCMD,TCMSP,ChEMBL数据库获取其有效成分及作用靶点,构建蛋白互作网络,对网络进行模块聚类分析.姜黄、郁金的对比研究表明,姜黄性温,通过P2RY12,GNG2等基因调节血液凝固发挥通经止痛功效;郁金性寒,通过LDLR,APOB,PRKCA,SOD1,TP53等基因调节脂质代谢、血浆脂蛋白水平、血小板活化、氧化应激反应、凋亡等过程发挥清心凉血的功效.姜黄、郁金的对比研究表明,莪术性温,通过GRIA2,GRIA4等基因调节神经系统过程发挥其破血逐瘀的功效;郁金性寒,通过CALM1,LPL,APOB,SOD1,TP53等基因调节血小板活化、脂质代谢、血浆脂蛋白、氧化应激、凋亡过程发挥清心凉血的功效.姜黄、郁金、莪术三者均为辛苦味,归肝经,其活血功效可能与参与脂质代谢、血液凝固、血红蛋白、血小板脱粒等过程有关.通过对3味中药的网络进行聚类分析,有利于阐释药性组合与功效的内在联系,为药性与功效规律的研究奠定基础.

目的 观察血红蛋白氧载体(HBOC)对非控制性失血性休克大鼠的早期复苏效果.方法 将170只SD大鼠按随机数字表法分为乳酸林格液(LR)对照组、全血对照组及0.5％、2.0％、5.0％ HBOC组,每组34只.采用离断脾动脉方法使平均动脉压(MAP)降至40 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)制备非控制性失血性休克大鼠模型.各组分别于制模成功后输注相应液体,维持MAP在50 mmHg 1 h,然后结扎脾动脉彻底止血,再次输注液体,维持MAP 70 mmHg和80 mmHg各1h,在维持MAP 80 mmHg输注液体完毕后,均用LR补充至2倍失血量,再继续观察2h.各组分别取16只大鼠用于观察存活率和失血率;再取10只大鼠用于测定血流动力学指标[MAP、左室收缩压(LVSP)和左室压力上升最大速率(+dp/dt max)];另外8只大鼠用于测定心排血量(CO)和组织氧供(DO2).结果 ①单纯采用LR复苏时,动物失血率高达60％ ～ 70％.与LR对照组比较,全血复苏可显著降低非控制性失血性休克大鼠止血前失血率[(46.6±4.5)％比(62.3±4.0)％,P＜0.01];0.5％、2.0％、5.0％ HBOC复苏也可显著降低失血率,以5.0％ HBOC组降低更为显著,与LR对照组比较差异有统计学意义[(45.6±4.1)％比(62.3±4.0)％,P＜0.01].②单纯采用LR复苏时,大鼠死亡较快,存活时间短,12 h仅存活1只,没有大鼠存活超过24 h.与LR对照组比较,全血复苏可提高非控制性失血性休克大鼠存活率,且存活时间明显延长(h:20.4±4.6比3.5±1.1,P＜0.01);0.5％、2.0％、5.0％ HBOC也可显著延长大鼠存活时间,以5.0％HBOC组效果最好,24 h存活4只,存活时间较LR对照组明显延长(h:18.4±4.0比3.5±1.1,P＜O.01),且与全血对照组相当.③与休克前比较,非控制性失血性休克大鼠CO、DO2和血流动力学指标均显著降低;随补液时间延长,各组上述指标均逐渐升高.与LR对照组比较,全血复苏可明显提高非控制性失血性休克大鼠各时间点CO、DO2,改善血流动力学;3个浓度HBOC也可提高止血后维持MAP 80 mmHg 1 h及复苏后1h、2h大鼠的CO、DO2和血流动力学指标,以5.0％ HBOC组效果更加显著,与LR对照组比较差异有统计学意义[CO(×10-3,L/min):维持MAP 80 mmHg 1 h为72.84±2.84比63.11±2.38,复苏后1h为70.25±4.55比59.88±9.31,复苏后2h为71.51±2.90比53.24±6.32;DO2 (L·min-1·m-2):维持MAP 80 mmHg 1 h为271.9±13.5比159.1±25.4,复苏后1h为261.0±15.0比145.7±20.1,复苏后2h为249.6±12.0比107.4±18.2;MAP (mmHg):维持MAP80 mmHg 1 h为82.1±2.1比74.0±2.8,复苏后1h为107.5±9.3比64.0±5.7,复苏后2h为104.0±9.7比73.0±4.2;LVSP (mmHg):维持MAP 80 mmHg 1 h为128.6±7.9比103.8±0.8,复苏后1h为129.3±15.0比99.4±0.0,复苏后2h为127.5±11.3比97.4±0.0;+dp/dt max(mmHg/s):维持MAP 80 mmHg 1 h为6534.2±787.6比5 074.0±71.7,复苏后1h为5961.5±545.4比4934.5±510.2,复苏后2h为5 897.4±350.5比4534.7±489.2,均P＜0.05].结论 创伤失血性休克早期应用HBOC能明显延长大鼠的存活时间,提高存活率,改善血流动力学、心脏功能和组织氧供应,并呈剂量依赖性,5.0％ HBOC的复苏效果与全血相当.