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储存红细胞保护的研究进展
编辑人员丨4天前
红细胞输注是临床输血中应用最广泛的治疗方法之一,也是挽救生命和液体复苏的一个重要组成部分,常用于重度贫血、失血性休克以及严重创伤的患者,在医疗应急保障中发挥着重要作用。尽管现在的保存方法延长了红细胞的保存时间、提高了保存质量,但随着红细胞体外储存时间的延长还是会引起其生理、生化以及形态学相应的改变,导致输血产生不良后果。如何提高红细胞保存质量一直是医学研究的热点,文章对储存红细胞保护的研究进展进行综述。
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编辑人员丨4天前
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单采血小板体外储存过程中微小RNA表达水平的分析
编辑人员丨4天前
目的:探讨单采血小板体外储存过程中其微小RNA(miRNA)的表达水平。方法:选择2022年3月至2023年5月成都市血液中心采集的15份单采血小板为研究对象。15份单采血小板采集自15例健康状况良好,符合《血站技术操作规程》(2019版)采集要求的单采血小板献血者。血小板捐献者的中位年龄为30岁(22,40岁);男性捐献者为8例,女性为7例。将单采血小板置于恒温震荡保存箱中,温度(22±2)℃,振荡频率60 Hz条件下储存,分别于储存第1天(采集当天)、第5天和第7天的上午10点留取血小板标本3~5 mL。应用血细胞分析仪检测血小板常规指标,实验室pH计测定血小板pH值,流式细胞术(FCM)测定血小板CD62P表达水平,实时荧光定量PCR法测定miRNA-126、-145、-150、-197、-223的相对表达水平。血小板标本存储1、5、7 d时各项指标比较采用重复测量方差分析;采用Spearman相关性分析血小板miRNA表达水平与储存时间的相关性。本研究遵循的程序符合成都市血液中心伦理委员会要求[批准文号:伦审(研)2020年第04号],并且于血小板捐献前与所有捐献者签署《献血者知情同意书》。结果:①随着储存时间延长,本组15份单采血小板标本的血小板压积(PCT)增大[储存1、5、7 d时分别为(0.68±0.21)%、(0.89±0.13)%、(0.99±0.17)%],大血小板比例(P-LCR)上升[储存1、5、7 d时分别为(20.5±6.0)%、(26.0±3.4)%、(30.4±2.8)%];pH值下降[储存1、5、7 d时分别为(7.2±0.1)、(7.1±0.2)、(7.0±0.2)],并且差异均有统计学意义( F=5.60, P=0.007; F=9.12, P=0.001; F=5.44, P=0.004);其余指标分别比较,差异均无统计学意义(均 P>0.05)。②单采血小板标本储存1、5、7 d时,其CD62P表达水平分别为(6.3±2.9)%、(22.0±7.3)%和(38.4±12.1)%。随着储存时间延长,血小板标本的CD62P表达水平升高,并且差异均有统计学意义( F=36.16, P<0.001)。③本组血小板标本随着储存时间的延长,其miRNA-126、-150、-197相对表达水平增加,而miRNA-145和-223相对表达水平下降;并且差异均有统计学意义( F=88.58、32.64、33.59、35.42、22.91,均 P<0.001)。④本组单采血小板标本的储存时间与其miRNA-126、-150和-197的表达水平呈正相关( r=0.811、0.812、0.856,均 P<0.001),而与miRNA-145和-223的表达水平呈负相关( r=-0.720、-0.767,均 P<0.001)。 结论:单采血小板在体外储存过程中,其miRNA-126、-145、-150、-197和-223表达水平发生明显变化,尤其是miRNA197。
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编辑人员丨4天前
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原位肝移植患者输血因素与术后早期转归的关系
编辑人员丨4天前
目的:评价原位肝移植患者输血因素(大量输血、输注储存血及无肝期输血)与术后早期转归的关系。方法:回顾性选取本院2021年1月至2022年3月终末期肝病行原位肝移植术且术中输血的患者,收集患者临床资料。根据患者术中的输血量分为大量输血组(M组,红细胞总输注量≥10 U)和非大量输血组(NM组),根据输注红细胞的储存时间分为新鲜血组(NS组)和储存血组(S组,红细胞储存时间>2周),根据无肝期是否输血分为无肝期输血组(T组)和非无肝期输血组(NT组)。采用多因素logistic回归、广义线性模型及广义线性混合模型分别分析输血因素与主要结局指标(术后肺部并发症、循环超负荷、急性肾损伤、腹腔感染、血栓形成)和次要结局指标(ICU滞留时间、术后住院时间、术后任一时点体温≥38.5 ℃、术后肝肾功能指标、凝血功能指标、血小板计数与术前的差值)的关系。结果:本研究纳入患者106例。多因素logistic回归分析结果:大量输血与输注储存血是术后肺部并发症的危险因素,大量输血是腹腔感染的危险因素,肝功能Child-Turcotte-Pugh评分和无肝期时间是术后急性肾损伤的危险因素,Child-Turcotte-Pugh评分是循环超负荷的危险因素,年龄和大量输血是血栓形成的危险因素( P<0.05)。广义线性模型分析结果:术中输注储存血和无肝期输血是ICU滞留时间延长的危险因素,大量输血、术中输注储存血和无肝期输血是住院时间延长的危险因素( P<0.05),大量输血、术中输注储存血和无肝期输血与术后任一时点体温≥38.5 ℃无相关性( P>0.05)。广义线性混合模型分析结果:是否大量输血、是否输注储存血以及是否无肝期输血患者术后肝肾功能指标、凝血功能指标、血小板计数与术前的差值差异有统计学意义( P<0.05)。 结论:大量输血及输注储存血是原位肝移植患者术后早期不良转归的危险因素。
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编辑人员丨4天前
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脂肪因子在脓毒症器官损伤中的作用研究进展
编辑人员丨4天前
脓毒症是机体对感染反应失调导致的严重危及生命的器官功能障碍性疾病,是重症监护病房患者死亡的主要原因。脓毒症的发生、发展和预后与机体代谢、炎症反应调控密切相关。脂肪组织不仅参与能量储存与代谢,同时作为重要的内分泌器官,分泌多种具有促炎或抗炎活性的脂肪因子,参与脓毒症的发生、发展过程。脂肪因子种类繁多,不同脂肪因子在脓毒症及其器官损伤中发挥的作用有差异,部分脂肪因子如脂联素、脂肪因子补体Clq/肿瘤坏死因子相关蛋白3、丝氨酸蛋白酶抑制剂、鸢尾素、Apelin与脓毒症器官损伤的发病机制和预后关系密切。
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编辑人员丨4天前
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T-2毒素和黄绿青霉素的研究进展
编辑人员丨4天前
真菌毒素是一类数量众多、种类繁杂的次级代谢产物,能够在哺乳动物中诱发毒理学效应。T-2毒素和黄绿青霉素(CIT)是常见的真菌毒素,很多农产品在收获或储存过程中受到其不同程度的污染,毒素水平取决于诸如土壤的温度和湿度、储藏条件等环境因素。两种真菌毒素对人类健康构成潜在危害,其中,T-2毒素导致发育期骺板软骨变性坏死,产生与大骨节病相似的病理性改变;CIT引起心肌损伤,与地方性克山病的爆发相关联。因此,T-2毒素和CIT的致病作用受到广泛的社会关注。本文综述了T-2毒素和CIT的产生、理化性质、毒理学效应、致病机制及防治措施等方面的研究进展。
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编辑人员丨4天前
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长期家庭氧疗的规范使用
编辑人员丨4天前
氧气是人体维持生命活动的必备原料,成年人静息状态下每分钟需要250 ml的氧气,而体内储存的氧气仅有1 500 ml,因此急性缺氧数分钟即可致命。较之急性缺氧,慢性缺氧更为常见,慢性阻塞性肺疾病(慢阻肺)、特发性肺纤维化、慢性心力衰竭、贫血等均会导致缺氧,此时机体虽然可以通过加快呼吸频率,增加心排血量等代偿性反应降低缺氧的损害,但长期慢性缺氧仍会导致肺动脉高压、心肌功能下降、心律失常、记忆力下降、嗜睡等,从而导致肺心病、心力衰竭。长期低氧还可刺激造血功能,血红蛋白代偿性增高,产生高红细胞血症,其增加携氧能力的同时,也导致血液黏稠度增加,产生高凝状态,使得心、脑血管病发病增加。一旦患者病情加重或患者需氧量增加(如寒冷、紧张、运动等),均可进一步加重低氧带来的损伤。
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编辑人员丨4天前
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无二甲基亚砜细胞冻存技术的研究进展及展望
编辑人员丨4天前
冷冻保存技术已成为细胞治疗、辅助生殖、组织工程和疫苗储存等生物医学应用的必要方法。冰晶的形成是冷冻保存的主要限制因素,并会对生物样本造成致命性损伤。二甲基亚砜(DMSO)是传统上常用的冷冻保护剂,然而考虑到DMSO自身细胞毒性和给药后对机体产生的潜在不良反应,因此寻找具有安全性和有效性的替代DMSO方法的需求逐渐增长。本文拟概述多种治疗性细胞的无DMSO保存的研究进展及面临的问题和挑战,以期推动新型细胞冷冻保存技术更好地开展。
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编辑人员丨4天前
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辐照中脱矿骨基质粒径对胶原结构影响的实验研究
编辑人员丨4天前
目的:探讨不同粒径大小对γ辐照中脱钙骨基质(demineralized bone matrix,DBM)中胶原结构的影响以及辐照保护剂的有效性。方法:取同一供体的冻干皮质骨,依据Urist改良法制备不同粒径的(0.5~1.0 mm、1.2~2.8 mm、3.3~4.7 mm及5.7~7.0 mm)DBM样品,按照不同剂量分为:0 kGy、15 kGy、25 kGy及25 kGy(辐照保护剂),真空密封后储存于-80℃冰箱待用。通过扫描电镜观察胶原表面形态,大体观察胶原表面结构损伤的程度;将样品按照0.2 g/ml生理盐水比例在50℃条件下72 h,利用浸提液颜色深度观察胶原被辐照损伤的程度;使用2,4-二硝基苯肼(吸光光度计法)测定样品中羰基含量;十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺钠凝胶电泳法(Sodium dodecyl sulfatepolyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)测定样品中胶原分子量的变化;利用差示热量扫描法(differential scanning calorimetry,DSC)检测样品热变性温度以观察胶原热稳定性。结果:样品浸提液颜色与γ辐照剂量相关度较高,未辐照样品浸提液颜色清亮,而在同粒径下随辐照剂量加大浸提液黄色逐渐加深,5.7~7.0 mm粒径组颜色相对较浅;25 kGy组相比于25 kGy+保护剂组浸提液颜色加深。扫描电镜观察到γ辐照导致胶原结构紊乱,纤维断裂,随着辐照剂量增大损伤区域增多,当粒径增大时,损伤区域有减少的趋势;相比于25 kGy组,25 kGy+保护剂组胶原结构性破坏减少。差示热量扫描法得出样品热交换曲线,随着粒径增大,热变性温度有增高的趋势,粒径间对比有统计学差异( F=189.4, P<0.001);同粒径间差异不明显。SDS-PAGE发现同粒径下γ辐照剂量愈大,胶原分子量愈小;同辐照条件下随粒径较小,高分子量胶原含量减少明显;225 kGy+保护剂组相比于25 kGy组,高分子量增多。羰基含量结果显示在同一粒径下,γ辐照使羰基含量增多,0.5~1.0 mm组( F=13.631, P=0.002),1.2~2.8 mm组( F=6.390, P=0.016),3.3~4.7 mm组( F=5.630, P=0.023),5.7~7.0 mm组( F=4.150, P=0.048)的差异均有统计学意义,不同粒径间随着粒径增大羰基含量逐渐减小但差异统计学意义( F=0.560, P=0.650)。 结论:γ辐照与胶原的氧化损伤具有明显的剂量反应关系,随着γ辐照剂量的增加,胶原损伤程度逐渐增加;DBM的粒径大小影响着胶原对γ辐照的敏感度,随着粒径的减小,DBM颗粒更易被γ辐照损伤;辐照保护剂在辐照过程中对胶原有一定程度的保护作用。
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编辑人员丨4天前
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caspase-3在CPB因素加重储存红细胞氧化应激损伤中的作用:细胞实验
编辑人员丨4天前
目的:评价caspase-3在CPB因素加重储存红细胞(sRBC)氧化应激损伤中的作用。方法:选取CPB下行瓣膜置换术的O型血患者8例,于CPB前经中心静脉导管取血标本7 ml,于CPB后2 h时再次取血标本20 ml,离心后分别得到CPB前、后血浆备用。取8份O型且储存时间7~14 d的sRBC每份14 ml,每份平均分为4组,每组3.5 ml。A组和B组加入生理盐水30 μl,C组加入10% DMSO 30 μl,D组加入3.5 mmol/L的Z-DEVD-fmk 30 μl;4组于37 ℃水浴箱中静置2 h。然后A组加入CPB前血浆30 μl,B组、C组和D组加入CPB 2 h时血浆各30 μl,4组于37 ℃、80转/min的恒温振荡器中孵育48 h。分别于孵育2、24和48 h时,采用ELISA法检测caspase-3活性和ATP浓度,比色法检测谷胱甘肽(GSH)和游离血红蛋白(FHb)浓度,流式细胞术检测细胞膜磷脂酰丝氨酸(PS)暴露率。结果:4组sRBC随孵育时间的延长,caspase-3活性、细胞膜PS暴露率和FHb浓度逐渐升高,ATP和GSH浓度逐渐降低( P<0.05)。与A组比较,B组和C组孵育各时点caspase-3活性升高,D组孵育24和48 h时caspase-3活性升高,B组、C组和D组孵育24和48 h时ATP浓度降低,孵育各时点GSH浓度降低,FHb浓度升高( P<0.05);与B组和C组比较,D组孵育24和48 h时caspase-3活性降低,ATP和GSH浓度升高,细胞膜PS暴露率和FHb浓度降低( P<0.05);B组和C组上述各指标比较差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:caspase-3参与了CPB因素加重sRBC氧化应激损伤的过程。
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编辑人员丨4天前
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含有施万细胞样细胞外泌体的神经移植物促进大鼠周围神经再生
编辑人员丨4天前
外周神经损伤(PNI)多由炎症、肿瘤和外伤等原因引起,是各类创伤修复面临的主要挑战。从间充质干细胞分化而来的施万细胞样细胞(SCLC)在治疗PNI中具有良好潜力。然而,与干细胞移植相关的免疫排斥和致瘤性等风险限制了SCLC的应用。外泌体是SCLC发挥治疗作用的主要介质,与干细胞相比,它具有应用范围广、储存方便、功能稳定和致瘤风险低等优点。遵义医科大学附属医院烧伤整形外科魏在荣教授和徐广超教授团队在《Burns & Trauma》杂志发文《Neural grafts containing exosomes derived from Schwann cell?like cells promote peripheral nerve regeneration in rats》,探讨了SCLC外泌体(SCLC?exo)在周围神经再生中的作用。该研究团队在体外诱导人羊膜间充质干细胞(hAMSC)分化为SCLC,通过超速离心法分离hAMSC外泌体(hAMSC?exo)和SCLC?exo。在动物实验中,以神经功能恢复和组织形态学变化为研究指标,进一步证实与hAMSC?exo相比,SCLC?exo能显著促进神经轴突再生(P<0.05)、髓鞘形成(P<0.01)、神经功能恢复(P<0.01)、血管生成(P<0.01),降低肌肉失神经萎缩率(P<0.01)。此外,SCLC?exo在体外还能显著促进施万细胞的增殖和迁移(P<0.05),上调施万细胞髓磷脂阳性基因(P<0.01)和神经营养因子(P<0.05)的表达。这些研究结果表明,相较于hAMSC?exo,SCLC?exo能更有效促进PNI的再生,是一种治疗PNI的潜在方法。
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编辑人员丨4天前
