针对市场拳参只有统货规格,基于辩证论质法,建立拳参商品规格等级标准.首先,对24批拳参外观性状和数量指标进行测定.同时,检测浸出物、总酚酸、没食子酸三个内在成分,并对拳参抗氧化药理活性进行评价.随后,为了探究可能作为拳参药材规格等级的参数,分析单个外观指标与内在质量指标相关性;并采用信息熵赋权法对内在质量指标整体进行综合评分,进一步地分析内在质量指标综合评分与外观性状的相关性.最后,运用描述统计分析、主成分分析、方差分析确定性状指标的重要度.内在指标综合评分、总酚酸含量与长度值1、最粗直径、单个质量、L*、b*呈极显著正相关;浸出物与长度值1、L*呈极显著正相关.抗氧化能力与长度值1、最粗直径、单个质量、L*、b*呈极显著正相关.筛选得到最粗直径、单个质量、百克个数三个重要性状指标,制定拳参商品规格等级分为统货、选货,统货断面颜色偏暗,呈棕褐色,直径在0.8～3.0 cm;选货断面颜色鲜亮,偏黄,分为2等,一等品拳参最粗直径在1.8 cm以上,单个质量6.9 g以上,百克个数16个以内,综合评分≥64.63;二等品拳参最粗直径1.5 cm以上,单个质量3.8 g以上,百克个数33个以内,综合评分≥ 35.74.研究证实了本草记载的科学性,即个大、断面浅棕色为佳,制定了拳参商品规格等级标准,利于其市场环境和质量控制,确保临床用药的稳定性和有效性.

目的:基于"辨状论质"理论研究前胡外观性状与内在质量的相关性.方法:采用体视显微镜测量前胡木质部占比;采用分光测色仪采集前胡色度值;采用高效液相色谱法测定白花前胡甲素和白花前胡乙素含量;分析性状指标与药效成分含量的相关性.结果:白花前胡甲素质量分数与红绿值呈显著负相关,说明红绿值越低,白花前胡甲素含量越高;白花前胡甲素质量分数与白花前胡乙素质量分数呈极显著正相关.结论:外观性状指标可作为前胡"辨状论质"的依据.研究结果为建立客观、科学的前胡质量评价方法提供了参考.

目的:探讨磷酸化叉头框O4型（phosphorylated forkhead box subtype O4, p-FoxO4）在H9c2心肌细胞缺氧/复氧（hypoxia/reoxygenation, H/R）损伤过程中的作用。方法:H9c2细胞正常培养24 h后，均匀接种于6孔板中，密度为4.5×10 5个/ml，每组≥3次重复，按照随机数字表法分为4组：对照组（Control组）、缺氧1 h复氧1 h组（H1R1组）、缺氧1 h复氧3 h组（H1R3组）和缺氧1 h复氧6 h组（H1R6组）。采用细胞增殖-毒性检测法检测4组细胞相对存活率；实时定量聚合酶链反应（real-time quantitative polymerase chain reaction, qPCR）法检测叉头框O4型（forkhead box subtype O4, FoxO4）、Bcl-2细胞死亡的相互作用介质（Bcl-2 interacting mediator of cell death, Bim）、B淋巴细胞瘤-2基因（B-cell lymphoma-2, Bcl-2）和Bcl-2相关X蛋白（Bcl2-Associated X, Bax）的mRNA含量，以此确定最佳H/R时间点。Control组与H1R1组分别通过Hoechst染色检测细胞凋亡程度，Western blot法检测FoxO4、p-FoxO4、Bim、Bcl-2和Bax蛋白含量。将6~8周C57BL/6小鼠按随机数字表法分为5组（每组3只）：假手术组（sham组）、缺血30 min再灌注3 h组（R3组）、缺血30 min再灌注6 h组（R6组）、缺血30 min再灌注12 h组（R12组）、缺血30 min再灌注24 h组（R24组）。采用qPCR法检测结扎小鼠左前降支后导致缺血的左心室前壁的FoxO4、Bim、Bcl-2和Bax的mRNA含量。 结果:与Control组比较，H1R1组、H1R3组和H1R6组细胞相对生存率下降，H1R1组最低（ P<0.05）；与H1R1组比较，H1R3组和H1R6组细胞相对存活率升高（ P<0.05）；与H1R3组比较，H1R6组细胞相对存活率升高（ P<0.05）。与Control比较，H1R1组、H1R3组、H1R6组FoxO4 mRNA表达增加（ P<0.05），H1R1组Bim mRNA表达增加（ P<0.05），H1R1组Bcl-2 mRNA表达降低（ P<0.05），H1R1组Bax mRNA表达增加（ P<0.05），H1R3组、H1R6组Bax mRNA表达减少（ P<0.05）；与H1R1组比较，H1R3组、H1R6组Bim mRNA表达和Bax mRNA表达降低（ P<0.05）。与Sham组比较，R12组、R24组FoxO4 mRNA含量增加（ P<0.05），R6组Bim mRNA减少（ P<0.05），R24组Bim mRNA含量增加（ P<0.05），R3组、R12组、R24组Bcl-2 mRNA含量减少（ P<0.05）；R6组和R24组Bax mRNA含量增加（ P<0.05）；与R3组比较，R12组和R24组FoxO4 mRNA含量增加（ P<0.05），R12组和R24组Bim mRNA含量增加（ P<0.05），R6组、R12组和R24组Bax mRNA含量增加（ P<0.05）。与R6组比较，R12组和R24组FoxO4 mRNA含量及Bim mRNA含量增加（ P<0.05）；与R12组比较，R24组FoxO4 mRNA、Bim mRNA、Bax mRNA含量增加（ P<0.05）。与Control组比较，H1R1组出现较多核固缩、高亮的凋亡细胞，凋亡率差异有统计学意义（ P<0.05）。与Control组比较，H1R1组FoxO4、p-FoxO4、Bim、Bax蛋白含量增高，Bcl-2蛋白含量降低（ P<0.05）。 结论:p-FoxO4可能通过调控细胞凋亡内在途径参与H9c2心肌细胞的H/R损伤。

目的:分析汕头市2018年和2019年登革病毒主要流行毒株的分子特征，探讨两年间该市登革热呈现截然不同的流行态势的内在原因，同时了解病毒的传播特点和途径，为登革热疫情的防控提供决策依据。方法:对2018年和2019年检测到的共872例核酸阳性样本进行病毒核酸含量判定、 E基因扩增和序列测定，并构建系统进化树，从树结构上分析毒株的同源性特点，并推测可能的来源和传播途径。 结果:共获得登革毒株的 E基因序列99条，其中1型序列68条，2型序列31条；2018年的登革热呈现散发态势，系统进化树显示对应的毒株呈现多源性特点，与发现于广州及东南亚地区的毒株密切相关；2019年的登革热呈现暴发态势，对应的流行毒株主要为单一来源特点，毒株来源推测为柬埔寨。 结论:汕头市登革热的本地流行主要为当年的输入性毒株引起的，未见往年本地毒株引起的流行；东南亚地区或为汕头市流行的登革毒株主要发源地，并可通过多种路线传入汕头市。

宫颈癌是全球第4大常见的女性癌症,目前,手术和放疗仍然是治疗非转移性宫颈癌的主要方法,然而,复发性和转移性宫颈癌尚无有效治疗手段.寻找新的更加有效的宫颈癌治疗靶点就显得尤为重要.已知白介素-6(interleukine-6,IL-6)作为肿瘤促进因子在宫颈癌的发展和转移过程中发挥着十分重要的作用.已有报道显示,间充质干细胞在多种肿瘤中发挥抑癌作用,但对于其内在机制的报道较少;且在宫颈癌的发展过程通常伴随着IL-6表达的增加.在IL-6存在的炎症病理条件下,MSCs对于宫颈癌细胞的增殖和迁移是否仍具有抑制作用仍未可知.本研究通过检测人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUC-MSCs)对 IL-6 诱导的 HeLa 细胞增殖、迁移、侵袭以及STAT3/Bcl-2、AMPK/mTOR信号通路的调节作用,探讨其对宫颈癌Hela细胞生物活性的影响及其分子机制.集落形成实验、细胞划痕实验以及Transwell侵袭结果证明,炎症因子IL-6显著促进HeLa细胞增殖、迁移和侵袭(P＜0.05).而20％和50％MSCs条件培养基显著抑制IL-6诱导的HeLa增殖(P＜0.0001)、迁移(P＜0.01)和侵袭能力(P＜0.0001).进一步的机制研究结果显示,炎症因子IL-6显著上调抗凋亡信号通路中STAT3和Bcl-2的mRNA(P＜0.0001)和蛋白质(P＜0.01)含量;同时下调AMPK、TSC1和TSC2等基因的表达(P＜0.001),最终上调细胞代谢相关基因mTOR的表达(P＜0.01)和蛋白质磷酸化水平(P＜0.05).20％MSCs条件培养基显著抑制HeLa细胞中STAT3/Bcl-2信号通路(P＜0.05).50％MSCs条件培养基显著抑制HeLa细胞中STAT3/Bcl-2信号通路(P＜0.01)同时激活AMPK/mTOR信号通路(P＜0.05),诱导细胞周期阻滞(P＜0.0001).综上所述,MSCs条件培养基通过下调STAT3信号通路和上调AMPK信号通路抑制白介素-6诱导的HeLa细胞的增殖、迁移与侵袭.本研究结果有助于进一步阐释IL-6在宫颈癌中发生发展的作用和机制,为寻找宫颈癌治疗的新研究方向提供实验依据.

目的:观察持续光照对骨骼肌肌纤维类型转化及脂代谢的影响，并探讨其内在联系。方法:按随机数字表法将小鼠随机分为正常光照组及24 h持续光照组。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清及骨骼肌脂质含量和尿6-羟基硫酸褪黑素(6-SML)水平，实时荧光定量PCR观察骨骼肌生物钟基因及脂代谢相关基因mRNA表达，组织免疫荧光及油红O染色评估肌纤维类型及脂质沉积。结果:与正常光照组相比，持续光照小鼠夜间尿6-SML水平降低( P<0.05)，骨骼肌核心生物钟基因脑肌类芳香烃受体核转位蛋白1(Bmal1)、昼夜节律运动输出周期蛋白故障(Clock)、周期2(Per2)mRNA表达水平及节律发生改变。与正常光照组相比，持续光照组小鼠的体重、血脂以及骨骼肌游离脂肪酸、三酰甘油含量显著增加( P<0.05或 P<0.01)，脂肪酸氧化关键酶肉毒碱脂酰转移酶1b(Cpt1b)mRNA表达明显降低( P<0.05)，而脂质合成相关基因硬脂酰辅酶A去饱和酶1(Scd1)mRNA表达显著增加( P<0.01)。进一步的免疫荧光检测显示，持续光照组小鼠骨骼肌慢肌纤维比例降低，而快肌纤维比例增加(均 P<0.05)。 结论:持续光照导致小鼠骨骼肌脂质异位沉积，该过程可能与骨骼肌肌纤维重塑有关。

金钗石斛为我国传统中药,具有益胃生津、滋阴清热等功效,其质量标准的建立一直是热点研究问题.金钗石斛主要包含生物碱类、菲类、联苄类、倍半萜类、多糖等多种化合物,主要具有改善糖脂代谢、保护神经系统、调节免疫反应、抗肿瘤等多种作用.在金钗石斛化学成分及药理研究基础上,基于中药质量标志物(Q-Marker)的概念,分析金钗石斛植物亲缘关系、生长年限、化学成分可测性、不同炮制方法、传统功效及网络药理学预测等,对金钗石斛的Q-Marker进行预测分析.选取化学成分可测定、功效相关的、成分含量较高的药效活性成分,石斛碱、毛兰素、石斛酚、moscatin可作为金钗石斛的Q-Marker.探讨可表征金钗石斛质量成分指标与药理作用及临床应用的内在关联性,为完善其质量标准提供依据.

目的:探讨Sestrin2(SESN2)在肠缺血再灌注损伤中的作用及内在调控机制,并探究SESN2与内质网应激之间的关联作用.方法:①动物实验:将 12只健康雄性成年C57BL/6J小鼠随机分为假手术组(Sham组,n=6)和肠缺血再灌注组(IIR组,n=6).采用无创动脉夹夹闭肠系膜上动脉根部45 min、恢复供血2 h的方法构建肠缺血再灌注小鼠模型.采用HE染色法和Chiu's病理学损伤评分观察各组小鼠小肠损伤情况.检测各组小鼠小肠组织中氧化应激指标超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平.免疫印迹法测定各组小鼠小肠组织中葡萄糖调节蛋白78(GRP78/BIP)、活性转录因子4(ATF4)、CCAAT-增强子结合蛋白(CHOP)、Sestrin2、Bcl2和Bax蛋白表达水平.②细胞实验:所有细胞实验选择人结直肠腺癌细胞(Caco-2细胞),通过缺氧12 h后复氧2 h建立缺氧复氧(HR)模型,随机分组为对照组(NC组,n=6)、缺氧复氧组(HR组,n=6);在此基础上,对Caco-2细胞转染Sestrin2-siRNA(siSESN2)和对照组siRNA(sicont),随机分为对照+对照组siRNA(NC-sicont组,n=6)、对照+siSESN2(NC-siSESN2组,n=6)、HR+对照组siRNA(HR-sicont组,n=6)和HR+siSESN2(HR-siSESN2组,n=6);免疫印迹法测定各组细胞中SENS2、BIP、ATF4和CHOP蛋白的表达水平,流式细胞学检测各组细胞凋亡水平.结果:与Sham相比,IIR组小鼠小肠组织损伤显著加重,其Chiu's评分和MDA含量显著升高,SOD含量显著降低(P<0.05).IIR组小鼠肠组织中BIP、ATF4及CHOP蛋白表达水平显著升高(P<0.05),肠细胞凋亡蛋白Bax显著升高、抗凋亡蛋白Bcl2显著降低,与此同时,IIR组小鼠小肠组织中Sestrin2蛋白表达水平较之于Sham组显著升高(P<0.05).与NC组相比,HR组细胞BIP、ATF4、CHOP及Sestrin2蛋白表达水平显著升高(P<0.05),细胞凋亡率显著增高(P<0.05).然而,较之于HR-sicont组,HR-siSESN2组中仅发现CHOP蛋白表达水平显著升高(P<0.05),并且抑制SESN2表达后细胞凋亡水平显著升高(P<0.05).结论:IIR和HR均可导致Sestrin2蛋白表达上调并激活内质网应激(ERS).抑制Sestrin2基因,加重了缺氧复氧诱导的Caco-2细胞损伤,它可能是通过削弱Caco-2的抗氧化功能,上调CHOP表达,加剧Caco-2细胞凋亡从而加重Caco-2细胞损伤.

目的 研究肠道异常代谢产物通过肝肠轴如何影响中性粒细胞胞外陷阱发生,并加剧急性肝衰竭进展.方法 对乙酰氨基酚诱导小鼠急性肝衰竭(acute liver failure,ALF)模型,以明确疾病状态与肝内中性粒细胞浸润及与中性粒细胞胞外捕获网(neutrophil extracellular traps,NETs)的内在关联.非靶向代谢组学系统分析肠道黏膜中代谢产物的异同,识别促发肝脏NETs的关键代谢物.在此基础上,利用抗体芯片探讨ALF进展中细胞因子与NETs的可能联系,最终聚焦并通过流式细胞及免疫荧光等方法,阐明NETs调控巨噬细胞极化及炎症因子介导的促疾病进展效应.结果 对乙酰氨基酚诱导ALF小鼠模型肝脏内有大量中性粒细胞浸润及NETs的形成.肠黏膜代谢产物的分析显示,LTD4含量显著上升,破坏了肠黏膜的屏障功能.导致内毒素和LTD4向肝脏的转移,促进NETs的形成.对肝脏细胞因子的分析表明,NETs可通过调节巨噬细胞的M1型极化,介导促炎因子的进一步释放.结论 ALF发生时,肝脏内浸润的大量中性粒细胞会被肠道中异位到肝脏的异常代谢产物刺激从而形成NETs,形成的NETs可以调节巨噬细胞的分化,进一步加剧ALF中的炎症效应.

目的 通过对不同炮制程度焦栀子色度值及内在成分的定量分析,研究栀子炮制过程中外表色泽和成分的关联性与内在成分变化规律,为焦栀子的质量评价提供参考.方法 采用色差仪测量3种不同炮制程度焦栀子样品粉末的色度值(L*、a*、b*、E*ab),通过高效液相色谱(HPLC)法测定焦栀子中8个指标性成分的含量,并采用主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)、Pearson法等分析方法分析色度和成分之间的相关性.结果 各个地区饮片厂因缺乏直观统一的标准,致使所生产的样品炮制程度差异较大.随着炮制的进行,焦栀子的表观颜色逐渐由红黄色转变为焦褐色.焦栀子的粉末色度值与内在成分之间高度相关.所测得的色度值参数和8个成分含量均呈下降趋势,其中与表观颜色变化最明显的a*呈极显著正相关性的成分异栀子苷、栀子苷和西红花苷Ⅰ可以作为栀子炮制过程监控及质量控制的标志物.结论 通过建立焦栀子炮制过程中颜色与成分变化的对应关系,弥补了传统经验鉴别的主观模糊性,为焦栀子炮制程度的判别和标志成分含量的预测提供线索.