目的:分析尿液的脂阿拉伯甘露聚糖（LAM）抗原检测方法对肺结核患者的诊断价值，为尿液LAM抗原试剂盒在中国地区的推广提供依据。方法:2023年3—5月，前瞻性收集首都医科大学附属北京胸科医院诊治肺部疾病患者228例［男134例，女94例，年龄20~82（44.8±16.7）岁］，其中肺结核患者143例，非结核病患者85例。收集所有患者的痰标本和尿液，进行传统病原学检测和尿液LAM抗原检测，分析各检测阳性组合的筛查结果，并通过卡方检验等统计学方法对结果进行进一步分析。结果:尿液LAM试剂盒的检测敏感度为46.2%（95% CI：37.9%~54.7%），检测特异度为96.5%（95% CI：89.3%~99.1%），总体符合率为64.9%。联合应用尿液LAM抗原检测和结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测（Xpert）两种方法检测阳性样本的检出率（60.8%，87/143）高于单独应用Xpert检测阳性样本的检出率（49.7%，71/143），差异有统计学意义（ P<0.05）。风险因素分析结果表明，尿液LAM抗原检测结果阴性的风险随着细菌载量的降低而增加。 结论:尿液LAM抗原检测方法特异度高，与传统病原学联用可有效提高检出率。尿液LAM抗原检测法仍具有受细菌载量影响和区分非结核分枝杆菌样本能力不强等局限性，需进一步试验验证。

目的:探讨非结核分枝杆菌肺病的临床病理学特征和分子病理学方法在其诊断中的价值。方法:分析首都医科大学附属北京胸科医院2016年2月至2019年8月石蜡包埋标本诊断肺部非结核分枝杆菌（NTM）感染的45例患者病理组织学形态、抗酸杆菌形态特征及临床、影像、细菌学资料；荧光PCR方法检测结核分枝杆菌特异基因序列IS6110；探针熔解曲线方法行分枝杆菌菌种鉴定；选取同期确诊肺结核病例50例进行比较分析。结果:NTM肺病病理组织学表现为坏死性肉芽肿34例（75.6%，34/45），非坏死性肉芽肿1例（2.2%，1/45），非肉芽肿病变10例（22.2%，10/45）；坏死为粉染坏死、富于核碎片的嗜碱性坏死及化脓性坏死，与肺结核比较，后者更多表现为粉染坏死及嗜碱性坏死，差异有统计学意义（χ 2=10.270， P=0.001；χ 2=7.449， P=0.006）；17例（37.8%，17/45）NTM肺病中观察到巨大奇异形多核巨细胞，与肺结核组比较差异有统计学意义（χ 2=13.446， P<0.01）。抗酸杆菌数量多少不一，形态多样，胞内分枝杆菌常见大量抗酸杆菌，堪萨斯分枝杆菌奇异形抗酸杆菌易见。胞内分枝杆菌18例（40.0%，18/45），蟾蜍分枝杆菌8例（17.8%，8/45），鸟、堪萨斯、龟分枝杆菌各6例（13.3%，6/45），猿猴分枝杆菌1例（2.2%，1/45）。 结论:NTM肺病的诊断和鉴别诊断值得病理医师关注，仅靠组织形态学特征和抗酸杆菌形态特点不能明确诊断，分子病理学方法是确诊结核病和NTM肺病的重要手段。

目的:了解2013—2018年广州市某医院HIV/AIDS住院患者全因病死率的变化趋势、死亡原因构成及其影响因素。方法:对广州医科大学附属市八医院2013—2018年艾滋病死亡病例499例进行回顾性分析，并对死亡病例按定义分为艾滋病相关死亡及非艾滋病相关死亡，分析患者全因病死率趋势、死亡原因构成及死亡相关危险因素。结果:2013—2018年广州医科大学附属市八医院住院HIV/AIDS患者，6年总病死率为4.25%，呈逐年下降趋势（ x2=52.082， P<0.01）。死亡原因以艾滋病相关疾病为主，共381例，其中机会性感染343例，占68.73%，以马尔尼菲篮状菌、分枝杆菌（包括结核分枝杆菌及非结核分枝杆菌）及隐球菌3种病原感染为主。死于非AIDS相关的疾病死因共118例以非艾滋病相关恶性肿瘤、肝脏疾病为主。死亡前最近一次的CD4 + T淋巴细胞计数：<200 cells/μL相对于≥200 cells/μL者，病死于艾滋病相关疾病风险显著增高（ OR=0.175，95% CI：0.088~0.350）；未实施ART相对于已实施ART者，死于艾滋病相关疾病风险显著增高（ OR=2.641，95% CI：1.513~4.609）；血乳酸>2.0 mmol/L，病死于艾滋病相关疾病风险显著增高（ OR=2.341，95% CI：1.366~4.014）。 结论:2013—2018年广州地区HIV/AIDS患者全因病死率逐年下降，死亡的主要原因仍为AIDS相关性机会性感染，ART能减少AIDS相关疾病的死亡。

目的:探讨超声引导下多模联合检查在淋巴结分枝杆菌感染诊断中的应用价值。方法:回顾性分析2019年1月至2020年12月绍兴文理学院附属医院初诊疑似淋巴结分枝杆菌感染患者42例的临床资料，均在超声引导下行淋巴结负压穿刺术，观察涂片抗酸染色、细菌培养、病理诊断及三种检查联合诊断，并与痰液和肺泡灌洗液涂片抗酸染色及细菌培养结果比较。结果:穿刺液涂片抗酸染色、细菌培养、病理联合诊断的阳性率为71.4%（30/12），显著高于穿刺液涂片抗酸染色阳性率［26.2%（11/42）］、细菌培养阳性率［42.9%（18/42）］、病理阳性率50.0%［（21/42）］，差异均有统计学意义（χ 2=17.20、7.00、4.04， P < 0.001、 P < 0.01、 P=0.040）。痰液涂片和培养阳性率为21.4%（9/33），肺泡灌洗液涂片抗酸染色和培养阳性率为28.6%（12/30），差异有统计学意义（χ 2=21.11、15.43，均 P < 0.001）。 结论:超声引导下对疑似分枝杆菌感染病变淋巴结进行负压抽吸、穿刺活检，采用抗酸染色、细菌培养、病理检查等多模式诊断相结合，可提高分枝杆菌的检出率和诊断率。

2018年2月，Gupta等 [ 1] 建议将分枝杆菌属( Mycobacterium)成员重新分类。分枝杆菌属最高水平中存在5个不同的单系分组(monophyletic groups)，分别为Tuberculosis-Simiae(结核-猿猴，TS)、Terrae(土地，Te)、Triviale(次要，Tr)、Fortuitum-Vaccae(偶发-母牛，FV)、Abscessus-Chelonae(脓肿-龟，AC)。Gupta等由此建议分枝杆菌属( Mycobacterium)重新分类为5个属，并依次对科和5个属进行了描述。

目的:探讨结核分枝杆菌( Mycobacterium tuberculosis，MTB)/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测(Xpert MTB/RIF)技术诊断艾滋病患者肺结核的应用价值。 方法:回顾性分析2017年7月至2019年11月上海市(复旦大学附属)公共卫生临床中心收治的226例疑似肺结核的艾滋病患者的临床资料。分别进行痰涂片荧光染色显微镜下检查、BACTEC MGIT 960液体培养(或罗氏固体培养)和Xpert MTB/RIF检测，并分析在艾滋病患者中Xpert MTB/RIF技术诊断MTB感染和利福平耐药的灵敏度和特异度。结果:226例疑似肺结核患者中，痰培养阳性94例(41.6%)，其中MTB阳性51例(54.3%)，非结核分枝杆菌(nontuberculosis mycobacteria，NTM)阳性43例(45.7%)。以痰分枝杆菌培养阳性且结核分枝杆菌分泌蛋白64抗原阳性为金标准，Xpert MTB/RIF技术诊断MTB的灵敏度为72.6%[95%可信区间(confidence interval， CI)66.7%～78.4%]，特异度为97.1%(95% CI 95.0%～99.3%)。Xpert MTB/RIF技术诊断痰涂片阳性患者MTB的灵敏度为76.7%(95% CI 67.7%～85.8%)，特异度为90.0%(95% CI 83.6%～96.5%)。Xpert MTB/RIF技术诊断痰涂片阴性患者MTB的灵敏度为50.0%(95% CI 41.8%～58.2%)，特异度为99.3%(95% CI 97.9%～100.0%)。18例患者同时检测利福平表型和基因型耐药，以表型耐药为金标准，Xpert MTB/RIF技术检测利福平基因型耐药的灵敏度为75.0%，特异度为100.0%。 结论:艾滋病患者中Xpert MTB/RIF技术诊断肺结核的灵敏度和特异度均较高，且能快速区分MTB和NTM，具有较好的应用价值。

目的:探讨宏基因组二代测序技术（metagenomic next generation sequencing，mNGS）在除结核、非结核分枝杆菌感染以外的脊柱感染性疾病诊断中的应用价值。方法:回顾性分析了2019年1月至2020年11月收治的疑似脊柱非结核感染性疾病患者171例的临床资料，全部患者接受脊柱病灶穿刺活检或开放手术获取组织标本，进行组织病理学检查，病灶脓血液或灌洗液均行常规细菌培养及mNGS测序。比较两种检测手段在报告时间、敏感度（阳性率）、特异度（真阴性率）等方面的差异，分析脊柱感染病原微生物谱，分析标本采集方法、术前抗生素使用、标本类型对病原微生物检出的影响。结果:根据脊柱非结核感染性疾病诊断标准明确感染136例，其中明确病原微生物111例。报告时间常规细菌培养为（81.67+15.52）h，mNGS为（36.33+11.92）h。常规细菌培养阳性43例，假阳性5例，敏感度31.62%，特异度85.71%；mNGS阳性76例，假阳性19例，敏感度55.88%，特异度45.71%。mNGS与常规细菌培养在病原微生物检出敏感度、特异度、报告时间的差异均有统计学意义。非特异性感染病原微生物检出前3位分别为金黄色葡萄球菌及葡萄球菌属、大肠埃希菌、链球菌属。除结核、非结核分枝杆菌外确诊11例特异性感染患者，常规细菌培养阳性2例，mNGS测序真阳性11例，mNGS对少见病原微生物具有较高的检出率。Logistic回归分析提示术前4周规范抗生素使用、标本获取方法对常规细菌培结果有明显影响，而标本获取方法对mNGS测序结果无影响。结论:宏基因组二代测序技术诊断非结核脊柱感染性疾病对病原微生物检出具有较高的敏感度，特别是对少见病原微生物的检出具有明显优势，具有较高的诊断价值。

目的:研究DNA甲基化在结核分枝杆菌（MTB）裂解物诱导CD4 +T细胞白细胞介素6受体（IL-6R）表达下调中的作用及机制。 方法:本研究属于前瞻性研究。收集并分选2019—2020年深圳市第三人民医院10名健康人（对照组）和10例结核病患者（TB组）外周血单个核细胞（PBMC）中CD4 +T细胞，亚硫酸氢盐测序法分析 IL-6R启动子区和3′非翻译区（UTR）区CpG岛甲基化变化；RT-qPCR和Western blotting分别检测IL-6R和DNA甲基转移酶（DNMT）表达；进一步通过MTB裂解物刺激anti-CD3/CD28抗体活化的对照组PBMC和Jurkat E6-1细胞，检测 IL-6R不同区域CpG岛甲基化和IL-6R、DNMT表达的变化；双荧光素酶报告基因系统检测 IL-6R 3′UTR区甲基化状态对其转录活性的影响；两组间采用非配对 t检验，三组及以上多组运用one-way ANOVA分析。 结果:在对照组和TB 组外周血CD4 +T细胞中，TB组中IL-6R表达低于对照组，而DNMT1和DNMT3B则高于对照组；且与对照组比， IL-6R启动子CpG岛甲基化水平差异无统计学意义；3′ UTR区CpG岛甲基化率分别为54.3%±4.7%和69.5%±3.4%，差异有统计学意义（ P<0.001）；在体外，MTB裂解物刺激活化对照组PBMC后，IL-6R表达低于未刺激的，而DNMT1和DNMT 3B表达高于未刺激的；同时CD4 +T细胞中 IL-6R 3′ UTR区CpG岛甲基化率由58.9%±11.6%增加至79.4%±10.9%，差异有统计学意义（ P<0.001）；同样地，MTB刺激活化Jurkat E6-1细胞后的结果与对照组PBMC相一致。进一步发现DNA甲基转移酶抑制剂地西他滨（5-aza）与MTB裂解物共处理后IL-6R 的表达均高于MTB 裂解物单独刺激的；DNA甲基转移酶抑制剂地西他滨（5-aza）与MTB裂解物共处理后 IL-6R 3′ UTR区CpG岛甲基化水平低于MTB 裂解物单独刺激的，并且完全非甲基化修饰的 IL-6R 3′UTR报告基因的转录活性高于完全甲基化修饰的 IL-6R 3′ UTR区CpG岛。 结论:MTB裂解物刺激通过诱导CD4 +T细胞 IL-6R 3′UTR区CpG岛高甲基化抑制 IL-6R转录活性进而下调其表达；MTB诱导CD4 +T细胞 IL-6R 3′UTR区CpG岛高甲基化可能与DNMT1、DNMT3B表达增加有关。

目的:分析自身免疫性肺泡蛋白沉积症(APAP)患者继发肺部感染的临床特征，为临床诊疗提供依据。方法:本研究为病例对照研究。采用非随机抽样法，选取2010年10月至2019年12月经广州医科大学附属第一医院确诊的APAP继发感染病例22例，选择同期APAP无继发肺部感染病例79例作为对照，比较2组临床特征，并通过二元logistic回归分析APAP继发肺部感染的评估指标。结果:APAP继发肺部感染患者通常表现为原有症状加重，可有发热，影像学表现为新增实变影或团块影，部分空洞影；病原体以分枝杆菌和真菌多见，APAP继发肺部感染组年龄、白细胞计数、中性粒细胞计数、肺泡动脉氧分压差、癌胚抗原、非小细胞肺癌相关抗原、糖类抗原125(CA125)、乳酸脱氢酶、红细胞沉降率水平较APAP无继发肺部感染组升高，而动脉血氧分压较APAP无继发肺部感染组低，2组上述指标比较差异均有统计学意义( P值均<0.05)。二元logistic回归分析显示CA125>35 U/ml是APAP继发肺部感染的独立评估指标。 结论:APAP患者继发肺部感染多为机会性感染，常见分枝杆菌和真菌，影像学以实变影、团块影为主，部分可出现空洞影。白细胞计数、中性粒细胞计数、肿瘤指标、红细胞沉降率、乳酸脱氢酶等指标可升高，CA125>35 U/ml可能是预测APAP患者继发肺部感染的指标。

本研究旨在构建基于核酸滚环扩增（RCA）的简便快速、超灵敏的光学生物传感技术，并将其运用于结核杆菌耐药相关基因的多重检测。本研究在2020年2月至2021年5月期间，于陆军军医大学第一附属医院检验科，针对异烟肼、利福平和链霉素耐药的高频基因突变位点katG315（AGC?ACC）、rpoB531（CAC?TAC）和rpsL43（AAG?AGG），分别设计锁式探针（padlock probe，PLP）、引物和捕获探针，构建了基于磁珠的固相RCA恒温扩增反应体系，并进行了实验参数的优化。通过多色荧光探针（Cy3/Cy5/ROX）对RCA产物精准捕获与信号放大，实现了对3种突变基因的单管多重检测。进一步对该方法的灵敏度、特异性与线性范围等分析性能进行验证，结果显示同一反应体系中katG315的响应范围为1.0 pmol/L至0.1 nmol/L，rpoB531和rpsL43的响应范围为1.0 pmol/L至50.0 pmol/L和1.0 pmol/L至20.0 pmol/L，且该方法具有较好的特异度与灵敏度，在混合靶标中可精确识别单碱基突变，最低检出限低至1.0 pmol/L；在模拟血清样本的回收实验中，回收率可达95.0%~105.2%。综上，本研究构建的恒温扩增型多重检测方法可快速实现3种耐药突变位点的单管多重检测，该技术成本低廉、简便快速、不依赖大型设备，为病原体耐药基因检测提供了一种新的分析方法。