目的:培养鉴定银屑病患者皮损处真皮间充质干细胞（DMSC），并研究DMSC的发状分裂相关增强子1（HES1）和趋化因子配体6（CXCL6）表达情况。方法:分离培养15例银屑病患者皮损及18例健康人（健康对照组）皮肤的DMSC，利用流式细胞仪进行表型鉴定，实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）及免疫印迹（Western blot）检测HES1和CXCL6的mRNA及蛋白表达水平，两组间比较采用 t检验。 结果:银屑病组DMSC形态与健康对照组无差异，但HES1和CXCL6基因的mRNA水平分别是对照组的3.56和3.44倍，且差异有统计学意义（ P < 0.05）。在蛋白水平，银屑病组DMSC中HES1和CXCL6的表达明显高于对照组（ P < 0.05）。 结论:银屑病患者皮肤DMSC HES1及CXCL6表达升高可能参与银屑病的发病。

患者男，61岁，因"腹胀、腹泻伴右下腹疼痛1个月"于2017年5月8日就诊。既往体健，吸烟史10年(平均20支/d)，饮酒史8年(平均100 ml/d)，一妹妹有乳腺癌病史。初诊时腹部CT示，回盲部占位性病变，肠系膜淋巴结肿大。癌胚抗原(carcinoembryonic antigen, CEA)7.29 ng/ml。5月21日行剖腹探查+右半结肠切除+腹腔淋巴结清扫+末段回肠横结肠吻合术。术后病理诊断：(结肠)黏液腺癌，部分呈印戒细胞癌，侵及肠壁全层。免疫组化染色：癌细胞错配修复蛋白同源物1(mutL protein homolog 1, MLH1)、减数分裂后分离增强蛋白2弱阳性，错配修复蛋白同源物2(mutS protein homolog 2, MSH2)、错配修复蛋白同源物6阴性，Ki－67指数约为70%，肠周淋巴结可见转移癌(5/17)。术后病理分期为T3N2aM0 ⅢB期。术后3个月复查肿瘤标志物CEA，在正常范围。6—12月接受奥沙利铂+卡培他滨方案辅助化疗8个周期。末次化疗后3个月(2018年3月6日)常规复查腹部增强CT，见腹主动脉旁增大淋巴结，转移不除外。进一步行正电子发射计算机断层显像(positron emission tomography－computed tomography, PET－CT)检查，示腹腔多发增大淋巴结，代谢异常增高，考虑转移(图1)。患者当时无特殊不适症状，未接受进一步治疗。2018年6月患者开始出现腰腹部疼痛并逐渐加重，伴体重减轻，口服阿片类止痛药物症状缓解。8月21日行腹部增强CT检查，示吻合口周围肠管扩张，腔内积液，并可见气液平面，考虑肠梗阻；腹主动脉旁淋巴结较前明显增大，局部呈肿块样改变，与邻近降主动脉及脊柱分界不清(图2)。对手术标本进行基因检测，结果提示为微卫星高度不稳定(high frequency microsatellite instability, MSI－H)，肿瘤突变负荷为36.67个/Mb，检测到MLH1 K196fs、MSH2 Y757X基因突变，未检测到Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因同源物、神经母细胞瘤RAS病毒癌基因同源物、鼠类肉瘤病毒癌基因同源物B基因突变。遗传性肿瘤变异基因检测未见致病性胚系突变。患者入组了恩沃利单抗纳米抗体Ⅰb期临床试验，于9月3日开始接受恩沃利单抗治疗，180 mg(2.5 mg/kg体重)，皮下注射，每周1次。11月21日(治疗后3个月)首次疗效评价达部分缓解(partial remission, PR)。之后恩沃利单抗维持治疗2年，末次用药日期为2020年10月12日，后停药观察，维持PR，截至影像学末次疗效评价日期(2022年7月20日)依然未见复发(图2)，期间未出现明显的免疫治疗相关不良反应。

目的:探讨电针百会穴和大椎穴对脑瘫大鼠学习记忆能力及miR-126介导的血管内皮生长因子(VEGF)/Notch1通路的影响。方法:选取健康7日龄SD雄性大鼠54只，按照随机数字表法将其分为假手术组、模型组、电针组，每组18只。模型组、电针组采用左颈总动脉(LCCA)结扎结合缺氧的方法制备脑瘫大鼠模型。造模后24 h，电针组大鼠予以百会穴和大椎穴电针干预，共14次，隔日1次，持续至第28天。造模后第29天，采用Morris水迷宫法检测3组大鼠的学习记忆能力。采用免疫组化染色法观察大鼠海马组织VEGF及血管内皮细胞生长因子受体-2(VEGFR-2)的表达量。采用Western blot法检测大鼠海马组织Notch1、发状分裂相关增强子1(Hes1)蛋白水平。采用RT-qPCR法检测大鼠海马组织miR-126的表达水平。结果:与假手术组比较，模型组大鼠的学习记忆能力明显降低( P<0.05)，miR-126的表达水平下调，VEGF、VEGFR-2的表达水平上调，Notch1、Hes1蛋白表达水平上调( P<0.05)；与模型组比较，电针组大鼠的学习记忆能力明显改善( P<0.05)，miR-126的表达水平上调，VEGF、VEGFR-2的表达水平上调，Notch1、Hes1蛋白表达水平上调( P<0.05)。 结论:电针百会穴和大椎穴可以改善脑瘫大鼠的学习记忆能力，其机制可能与miR-126调控VEGF/Notch1通路，进而促进血管新生有关。

目的:观察舌鳞癌细胞Cal-27短时多次热疗的最佳间隔时间并探究Notch信号通路在热疗诱导舌鳞癌细胞凋亡中的作用。方法:将Cal-27细胞置入42℃培养箱热疗45 min，分别在6、12、24、48、72 h后进行第2次热疗，并在热疗结束后0、12、24 h通过CCK-8实验检测细胞增殖能力变化。确定最佳热疗间隔时间后进行多次热疗，分别通过CCK-8实验及流式细胞术检测热疗对Cal-27细胞增殖及凋亡能力的影响。通过实时反转录PCR实验及蛋白质印迹法实验分析Notch1、Jagged1、发状分裂相关增强子1（Hes1）的mRNA及蛋白表达变化。实验数据以 xˉ±s表示，两组间比较采用单因素方差分析。 结果:每隔12 h给予42℃ 45 min热疗1次可持续抑制舌鳞癌Cal-27细胞的增殖（ P<0.05）。在热疗持续进行7次后与对照组相比，热疗可明显抑制舌鳞癌Cal-27细胞的增殖并诱导其凋亡（ P<0.05），且热疗组细胞的Notch1、Jagged1、Hes1的mRNA及蛋白表达均显著降低（ P值均<0.05）。 结论:12 h热疗1次为抑制舌鳞癌Cal-27细胞增殖的最佳间隔时间，其机制可能与热疗通过抑制Notch信号通路的表达诱导舌鳞癌Cal-27细胞凋亡有关。

目的:评价缺刻基因1(Notch1)/发状分裂相关增强子1(Hes1)信号通路在高糖心肌细胞缺氧复氧损伤中的作用。方法:取H9c2心肌细胞在含10%胎牛血清的低糖DMEM培养基中培养、传代，采用随机数字表法分为6组( n＝12)：对照组(C组)用低糖培养基孵育72 h；缺氧复氧组(H/R组)用低糖培养基孵育72 h后，置于37 ℃、95%N 2-5%CO 2培养箱中缺氧24 h，然后立即置于37 ℃、95%O 2-5%CO 2培养箱中复氧6 h；缺氧复氧+Jagged-1组(H/R+J组)在低糖培养基中加入Notch1/Hes1信号通路特异性激动剂Jagged-1 5 μg/ml孵育72 h，然后进行缺氧复氧处理；高糖组(HG组)用高糖培养基(葡萄糖浓度33 mmol/L)孵育72 h；高糖+缺氧复氧组(HG+H/R组)用高糖培养基孵育72 h，然后进行缺氧复氧处理；高糖+缺氧复氧+Jagged-1组(HG+H/R+J组)用高糖培养基和Jagged-1 5 μg/ml共孵育72 h，然后进行缺氧复氧处理。于复氧6 h时，收集细胞培养液上清，测定SOD和LDH的活性，采用CCK-8法测定细胞活力，采用流式细胞仪测定细胞凋亡率，采用Western blot法检测Notch1、Hes1和c-caspase-3表达水平。 结果:与C组比较，H/R组、H/R+J组和HG组细胞活力和SOD活性降低，细胞凋亡率和LDH活性升高，H/R组和H/R+J组细胞Notch1、Hes1和c-caspase-3表达上调，HG组细胞Notch1和Hes1表达下调，c-caspase-3表达上调( P<0.05)；与H/R组比较，H/R+J组细胞活力和SOD活性升高，细胞凋亡率和LDH活性降低，细胞Notch1和Hes1表达上调，c-caspase-3表达下调，HG+H/R组细胞活力和SOD活性降低，细胞凋亡率和LDH活性升高，细胞Notch1和Hes1表达下调，c-caspase-3表达上调( P<0.05)；与HG组比较，HG+H/R组和HG+H/R+J组细胞活力和SOD活性降低，细胞凋亡率和LDH活性升高( P<0.05)，HG+H/R组细胞Notch1和Hes1表达下调，c-caspase-3表达上调( P<0.05)；与HG+H/R组比较，HG+H/R+J组细胞活力和SOD活性升高，细胞凋亡率和LDH活性降低，细胞Notch1和Hes1表达上调，c-caspase-3表达下调( P<0.05)；与H/R+J组比较，HG+H/R+J组细胞活力和SOD活性降低，细胞凋亡率和LDH活性升高，细胞Notch1和Hes1表达下调，c-caspase-3表达上调( P<0.05)。 结论:Notch1/Hes1信号通路激活是高糖心肌细胞缺氧复氧损伤的内源性保护机制。

目的:观察细胞分裂调节蛋白1(PRC1)在胶质瘤中的表达特征及其水平高低对患者生存期的影响，以及体外调控其表达后对胶质瘤细胞的影响，探讨PRC1在胶质瘤中的临床意义。方法:通过对胶质瘤数据库肿瘤基因组图谱(TCGA)中胶质瘤数据库挖掘PRC1 mRNA水平在胶质母细胞瘤与非肿瘤脑组织、不同WHO级别、病例类型间的水平差异，对56例胶质瘤肿瘤样本的免疫组织化学染色评价PRC1的表达特征及其与Ki67之间的关系，通过蛋白印记实验比较6个胶质瘤细胞系与人星形胶质细胞中PRC1的蛋白表达水平差异，对TCGA数据库中高表达PRC1组患者与低表达PRC1组患者的转录组数据进行生信分析研究PRC1可能调控的分子信号通路，探讨PRC1在胶质瘤中的临床意义。组间比较采用两独立样本的 t检验，等级资料采用秩和检验，生存分析采用Kaplan-Meier法。 结果:胶质瘤WHO级别越高(Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级)，PRC1 mRNA和蛋白水平越高( t＝9.665、11.200、24.980、8.120、5.957， P<0.05)，且在胶质母细胞瘤中水平显著高于少突神经胶质瘤、少突星形胶质细胞瘤，以及星形胶质细胞瘤( t＝16.110、15.460、13.290， F＝20.540， P<0.05)。胶质母细胞瘤中PRC1 mRNA水平较正常脑组织显著增高( t＝3.797、5.008、4.435、5.867、4.809、6.242， P<0.05)。胶质母细胞瘤细胞系中，PRC1的蛋白表达水平均显著高于正常星形胶质细胞( t＝6.432， P<0.05)，差异有统计学意义。PRC1高表达组患者的中位生存期显著小于PRC1低表达组，分别为13.3、40.45个月( χ2＝23.990， P<0.05)，差异有统计学意义。PRC1参与调控了细胞周期和p53信号通路，并且PRC1与Ki-67呈正相关( r＝0.815、7.774， P<0.05)。 结论:PRC1在胶质瘤中异常高表达，并且高表达PRC1肿瘤增殖明显增强，恶性程度更高，预示较差的临床预后，PRC1可能是一个新的胶质瘤治疗靶点。

目的:观察微小RNA(microRNA，miR)-195调控结直肠癌中Notch通路配体Delta样配体4(Dll4)表达，探讨其作用靶点，明确miR-195通过Notch通路抗结直肠癌的分子机制。方法:收集北京大学人民医院胃肠外科2010年11月至2011年2月56例行结直肠癌根治术切除的标本，3、应用芯片技术筛选6例结直肠肿瘤组织和正常肠黏膜组织中micro-RNA的表达差异，用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测miR-195在组织中相对表达量，应用固定化蛋白质印迹法(Western blot)检测56例结直肠癌组织及其邻近正常肠黏膜中Notch通路中Dll4蛋白表达；采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-195与Dll4 3’端非编码区(3’UTR)区的相互作用及活性，采用基因过表达miR-195(40 pmol/L)处理结肠癌细胞系SW480，运用流式细胞仪观察其对细胞凋亡的影响，Western blot检测通路相关蛋白Dll4、锯齿状蛋白1(Jagged1)、Notch受体胞内段(NICD)、细胞周期蛋白(Cyclin) D1、转录因子发状分裂相关增强子1(HES1)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、核因子-κB(NF-κB)的表达。组间比较采用方差分析(ANOVA)，独立样本 t检验比较蛋白表达量差异，统计学方法分别采用独立样本 t检验、配对样本 t检验及单因素方差分析。 结果:结直肠癌组织中miR-195表达水平明显低于正常肠黏膜，而Dll4蛋白表达水平高于正常肠黏膜，分别为正常肠黏膜的0.34倍(0.341±0.008)及1.92倍(1.922±0.003) ( t＝3.116、2.374， P<0.05)，差异均有统计学意义，体外转入miR-195后，Dll4荧光素酶活性低于对照组(0.442±0.010、1.010±0.002， t＝4.305， P<0.01)，差异有统计学意义，miR-195和γ-分泌酶抑制剂(DAPT)都可阻断Notch1通路，抑制SW480细胞的增殖(3.1%比17.3%， t＝4.232， P<0.01)，差异有统计学意义，诱导其凋亡(13.7%比48.3%， t＝8.355， P<0.01)，两者具有协同作用( t＝7.474， P<0.01)，差异有统计学意义。同时Notch通路相关蛋白NICD、Hes-1随作用时间延长而表达下降。 结论:结直肠癌中miR-195及Dll4呈拮抗性表达，与其病理学特征密切相关，Dll4为miR-195调控的下游靶基因，miR-195通过负性调控Dll4/Notch信号通路抗结直肠癌。

目的:探讨短程抗精神病药治疗对首次发病未服药精神分裂症患者丘脑-皮质环路的影响。方法:在短程抗精神病药治疗前后，采集83例首次发病未服药精神分裂症患者的静息态功能磁共振成像数据，同时招募匹配的117名健康对照，评估药物治疗前后的丘脑-皮质环路与临床症状的变化。采用左右两侧半球丘脑为种子点，与全脑体素行功能连接分析。使用Spearman相关分析探索丘脑-皮质环路功能连接变化与临床症状变化之间的关系。结果:（1）基线期，与健康对照相比，精神分裂症患者丘脑-前额叶环路（包括额中回/下回、扣带中回/后回、顶下小叶等）的功能连接显著降低，同时丘脑-感觉运动区环路（包括中央前回、颞上回/中回/下回、海马旁回、枕中回等）的功能连接显著增强（均 P<0.05，FDR校正）。（2）短程抗精神病药治疗后，精神分裂症患者基线期异常降低的丘脑-前额叶连接显著增强，而基线期异常增强的丘脑-感觉运动区连接显著降低（均 P<0.05，FDR校正）。（3）进一步相关分析显示，治疗后丘脑-前额叶环路的连接增强及丘脑-感觉运动区环路的连接降低均与阳性与阴性症状量表总分的降低显著相关（ r=0.435， P=0.014； r=0.394， P=0.028，未校正）。 结论:首次发病未服药精神分裂症患者丘脑-皮质环路异常以丘脑-前额叶环路连接降低和丘脑-感觉运动区环路连接增强为特征；短程抗精神病药治疗能部分改善丘脑-皮质环路的功能异常，且与临床症状的缓解相关。

目的:研究肌营养不良短小蛋白结合蛋白(Dysbindin)在胰腺癌中的作用及其与胆碱能激动剂卡巴胆碱的关系。方法:通过慢病毒和小干扰RNA分别构建Dysbindin上调组和下调组胰腺癌细胞系，通过Transwell实验验证Dysbindin和卡巴胆碱对胰腺癌细胞侵袭转移的影响，通过蛋白质印迹实验验证卡巴胆碱对Dysbindin的影响以及卡巴胆碱和Dysbindin分别对上皮间质转化(EMT)相关分子的影响。结果:Dysbindin上调组胰腺癌细胞转移侵袭能力增强，且与对照组相比，Dysbindin上调组上皮型钙黏蛋白减少[(0.94±0.00)比(0.74±0.08)]，而神经型钙黏蛋白(N-cadherin)增加[(0.60±0.17)比(1.33±0.10)]，且Snail增加[(0.43±0.11)比(0.81±0.06)]，差异均具有统计学意义( P<0.05)，而Dysbindin下调组结果相反。与对照组相比，卡巴胆碱实验组胞质紧密粘连蛋白1增加[(0.16±0.06)比(1.40±0.15)]，且N-cadherin减少[(1.34±0.13)比(1.03±0.14)]，差异均具有统计学意义( P<0.05)。 结论:Dysbindin能促进胰腺癌细胞的侵袭转移及EMT转化，卡巴胆碱能抑制Dysbindin的表达以及胰腺癌细胞的侵袭转移和EMT进程。

患者女，34岁，于顺产后43 d检查发现右侧卵巢囊实性肿块入院治疗。既往体健，生育史：孕4产2，曾流产2次。妇科查体：子宫正常大小，活动可，于右侧附件区可扪及一直径约5 cm肿块，活动可，界清，无明显压痛，左侧附件区未扪及明显肿块。辅助检查：CEA、CA199、CA125、AFP、卵巢癌相关抗原均为阴性。经阴道超声示：子宫体积正常(三径和约142 mm，宫颈厚28 mm，内膜厚约5.0 mm)，宫壁未见明显肿块占位；右侧卵巢体积大、内可见一大小约49 mm×41 mm×39 mm的囊实性肿块，肿块边界清楚，形态规则，内部回声不均匀，可见多个囊性无回声区(较大者约13 mm×11 mm)(图1)，能量多普勒示肿块内部及周边可见点条状血流信号(图2)，脉冲多普勒(PW)示最高流速(Vmax)0.18 m/s，最低流速(Vmin)0.09 m/s，阻力指数(RI)0.50；子宫及左侧附件区未见明显异常回声。超声提示：①右侧卵巢内囊实性肿块；②子宫及左侧卵巢未见明显异常。进一步行超声造影成像示：增强早期时，右侧卵巢内肿块周边呈环状高增强，并早于子宫肌层增强(图3)；内部实性部分呈不均匀等增强，并与子宫肌层同步增强；内部囊性部分无增强(图4)。造影剂消退时，肿块内部早于子宫肌层消退，而周边仍呈环状增强(图5)，超声造影提示右卵巢肿块血供较丰富，表现"快进快退"。磁共振增强扫描提示：子宫右上方占位，考虑来源右卵巢性索间质肿瘤－颗粒细胞瘤可能，其他待排。术前拟诊"盆腔肿块性质待查"，予行腹腔镜下右侧附件切除术，术中所见：右侧卵巢内见一肿瘤，直径约5 cm，呈囊实性，表面包膜完整，右侧输卵管攀附其上，外观正常；子宫正常大小，左侧卵巢及输卵管外观正常。术后病理镜下见肿瘤细胞弥漫性增生，呈片状、条索状，灶性腺样结构，部分区域可见大小不等的囊腔，核大小较一致，圆形或椭圆形，核仁可见，核分裂象约1~2个/10HPF，间质纤维组织及厚壁血管增生，黏液样变、灶性出血。免疫组化结果显示：Vimentin(+)，CD10(+)，ER(－)，PR(－)，CD34(血管+)，EMA(－)，P53(散在弱+)，Ki67(灶性15%+)(图6)。结合免疫组化考虑卵巢性索－间质肿瘤，倾向卵巢间质瘤，送至复旦大学妇产医院会诊，诊断为右侧卵巢微囊性间质瘤。