目的 动态表征急性脑缺血/再灌注(ischemia/reper-fusion,I/R)后小鼠皮层和海马部位神经细胞的损伤情况.方法 取体质量为25～28 g的雄性C57BL/6J小鼠,线栓法阻断小鼠的大脑中动脉,1 h后进行再灌注,制备急性I/R损伤小鼠模型.实验为Sham组、I/R-6 h组、I/R-24 h组和I/R-72 h组.采用Longa神经功能评分评估各时间点小鼠的神经功能;TTC染色检测脑梗死体积;苏木精-伊红染色观察脑组织病理损伤;尼氏染色检测神经细胞损伤;免疫荧光组织化学染色检测星形胶质细胞和小胶质细胞的活化情况,以及成熟神经元的损伤情况;透射电镜检测海马神经元的线粒体损伤;Western blot检测线粒体分裂-融合相关蛋白p-Drp1/Drp1、Mff、Fis1和OPA1的表达情况.结果 随着脑I/R时间的延长,小鼠的神经功能损伤、脑梗死体积,皮层和海马部位的神经细胞损伤、胶质细胞活化、神经元缺失、线粒体损伤逐渐加重;线粒体分裂相关蛋白表达逐渐增加,而线粒体融合相关蛋白表达逐渐降低.结论 随着脑I/R时间的延长,胶质细胞活化、神经元缺失、线粒体损伤等神经病理损伤逐渐加重,这可能与线粒体动力学失衡有关.

目的:通过分析孤独症谱系障碍学龄前儿童(autism spectrum disorder-preschoolers，ASD-p)静息状态下功能连接的动态变化，表征ASD-p灵活社会认知的大脑网络动态性，并为了解其社会交往障碍的潜在神经机制提供全新视角。方法:选取2018年10—12月于扬州大学附属医院门诊就诊的60例ASD-p(ASD-p组)和与之匹配的60名典型发育儿童(typical development，TD组)，基于MATLAB 2013b平台使用组独立成分分析、滑动窗口分析方法研究动态功能连接。基于每种功能连接模式的空间相似性，进行k-均值聚类分析以识别不同的连接状态，从而分析功能连接的时间动态性。使用SPSS 21.0进行统计分析。结果:动态功能连接分析最终确立了3种不同的连接状态：不频繁和强连接的状态Ⅰ、更频繁和弱连接的状态Ⅱ以及相对频繁和较强连接的状态Ⅲ。ASD-p组处于弱连接的状态Ⅱ的窗口分数较TD组降低了48.04% ，状态Ⅰ和状态Ⅲ的出现比例分别增加22.01%、32.39%；ASD-p组状态Ⅱ平均停留时间降低了74.89个窗口，状态Ⅰ和Ⅲ的平均停留时间分别增加了22.55个窗口和14.84个窗口( Z＝－6.080，6.991，－6.107，均 P<0.001，Mann-Whitney U test)。ASD-p组各网络状态之间的转换次数显著多于TD组[(6.63±3.25)次，(2.65±2.56)次， Z＝－6.296， P<0.001，Mann-Whitney U test]。Spearman相关分析表明ASD-p社交障碍的严重程度与状态Ⅱ的平均停留时间呈负相关( r＝－0.263， P<0.05)，并与网络状态转换次数呈正相关( r＝0.272， P<0.05)。 结论:ASD-p强连接状态Ⅰ和较强连接状态Ⅲ的窗口分数、平均停留时间成比例的增加，转换次数增多。ASD-p核心症状相关的动态功能连接特征可能成为一种可靠的神经影像标记物。

目的:构建一种新型阿霉素-壳聚糖乳酸盐纳米缓释载体用于骨肉瘤治疗研究。方法:2%乳酸水溶液制备水溶性的壳聚糖乳酸盐，pH 5.0的反应体系中，壳聚糖乳酸盐与TPP以10:1的投料比制备载阿霉素的壳聚糖乳酸盐纳米微粒（ChLa-Dox NPs），动态光散射（DLS）分析其粒径、多分散系数、Zeta电位，扫描电镜进行微观形貌学表征，ChLa-Dox NPs的生物学效应检测则通过缓释载体体外缓释动力学、MG63骨肉瘤细胞系细胞毒性实验、细胞迁徙能力及流式细胞术检测。结果:在pH 5.0及壳聚糖乳酸盐：TPP的投料比为10:1的反应条件下制备的ChLa-DoxNPs平均粒径为142.4±1.21 μm，多分散系数（PDI）为0.14±0.01，Zeta电位为+29.2 mV。ChLa-DoxNPs在体外10h时阿霉素达到缓释平台期，缓释12 h内阿霉素累积释放率为（69.4±2.6）%；MG63细胞系骨肉瘤细胞模型实验中，空载纳米微粒组细胞存活率为92.36±3.17%，而不同载药量的ChLa-Dox NPs组具备显著的骨肉瘤细胞杀伤作用。相比空载体组，ChLa-Dox NPs对骨肉瘤细胞迁徙能力有显著的抑制作用，明显促进骨肉瘤凋亡的发生[（凋亡率为（54.08±2.53%）]。结论:经改良制备的载阿霉素壳聚糖乳酸盐纳米微粒符合抗肿瘤纳米载体的理化特性要求，生物相容性好，体外缓释动力学及抗骨肉瘤相关分子-细胞生物学检测表明其具备较好的阿霉素缓释特性，体外能有效的抑制骨肉瘤细胞增殖、迁徙并促进其凋亡，具有较明确的临床转化前景。

PET可以实现局部体内肿瘤生物学的无创显像。通过设计放射性示踪剂来靶向与肿瘤相关的特定生物过程(例如肿瘤代谢、血流、增殖和肿瘤受体表达或配体结合)，PET可以检测肿瘤扩散，表征肿瘤表型，并评估其对治疗的反应。例如，放射性标记的葡萄糖类似物 18F－FDG糖代谢显像已被广泛用于完成上述3种任务，并在癌症护理中发挥着重要作用。然而，目前的临床实践通常是在示踪剂注射后的单个时间点进行显像(即静态显像)，并没有使用PET肿瘤显像可提供的所有信息，尤其是在解决肿瘤检测以外的问题时，仅依赖从静态显像获得的示踪剂测量信息可能出现误导性结果。该篇论文由2部分组成，描述了肿瘤PET显像动力学分析的原理(第1部分)，然后举例说明了肿瘤PET显像动力学分析的具体实现(第2部分)。该综述旨在介绍肿瘤显像中动力学分析的基本概念，阐明动力学分析如何增强对体内肿瘤生物学的理解，改进临床决策方法，并指导对静态图像定量测量的解释。

呼出气一氧化氮被认为是气道炎症的生物标志物，其中表征小气道炎症的肺泡呼出气一氧化氮(alveolar exhaled nitric oxide，CaNO)越来越多地被应用于呼吸系统疾病中。CaNO不仅可以应用于儿童支气管哮喘严重程度的评估、治疗方案的选择以及治疗效果的动态监测，还可以应用于间质性肺疾病的早期诊断及肺损害严重程度的评估，对于肺结核、肺动脉高压等其他疾病的诊断方面可能也有很大的帮助。该文就CaNO在儿童呼吸系统疾病的诊断及治疗指导价值作一综述，探讨CaNO在儿童肺部疾病中的诊断及治疗效果评估作用。

目的:探索骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cell，BMMSC）来源凋亡囊泡对小鼠巨噬细胞系RAW264.7极化状态的影响及对牙龈卟啉单胞菌（ Porphyromonas gingivalis，Pg）诱导的促炎状态巨噬细胞的调控，为牙周炎治疗提供依据。 方法:使用Operetta CLS高内涵分析系统动态观察星形孢菌素（staurosporine，STS）诱导的BMMSC的凋亡过程；使用场发射扫描电镜、动态光散射技术、流动电势法测量凋亡囊泡相关表征；使用Operetta CLS高内涵分析系统动态观察小鼠巨噬细胞系RAW264.7对5-羧基四甲基罗丹明琥珀酰亚胺酯（5-carboxy-tetramethylrhodamine，succinimidyl ester，5-TAMRA-SE）标记的凋亡囊泡的吞噬作用；采用实时荧光定量PCR检测精氨酸合酶-1（arginase-1，Arg-1）mRNA相对表达量；采用细胞免疫荧光、蛋白质印迹法检测凋亡囊泡对Pg来源的脂多糖（lipopolysaccharide from Pg，Pg-LPS）诱导的RAW264.7中诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS）表达的影响；采用酶联免疫吸附测定法检测Pg-LPS诱导的促炎状态RAW264.7培养上清液中肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factro-α，TNF-α）的分泌情况。结果:0.5 μmol/L STS处理12 h后小鼠BMMSC形态皱缩，周围有明显的凋亡囊泡产生；凋亡囊泡的粒径为100~1 000 nm，平均Zeta电势为-16.6 mV；RAW264.7可以通过伪足吞噬小鼠BMMSC来源的凋亡囊泡；小鼠BMMSC来源的凋亡囊泡联合白介素-4（interleukin4，IL-4）刺激的RAW 264.7 Arg-1 mRNA表达量（261.97±15.91）较单独IL-4刺激的 mRNA表达量（115.29±15.42）显著升高（ P<0.01）；凋亡囊泡与Pg-LPS共同作用下，RAW 264.7 iNOS阳性细胞数量［（39.33±4.70）个］显著低于Pg-LPS单独诱导的RAW 264.7 iNOS阳性细胞数量［（95.33±4.70）个］（ P=0.007），RAW264.7 iNOS蛋白相对表达量（5.84±1.05）显著低于Pg-LPS单独诱导的RAW 264.7 iNOS蛋白相对表达量（14.91±3.87）（ P<0.01），RAW264.7细胞培养上清液中TNF-α含量［（21 899.71±409.73） ng/L］显著低于Pg-LPS单独诱导下RAW264.7细胞培养上清液中TNF-α含量［（71 296.50±2 344.22） ng/L］（ P =0.003）。 结论:小鼠BMMSC来源的凋亡囊泡可以调控巨噬细胞极化状态，并可减轻Pg-LPS诱导下巨噬细胞的促炎状态。

目的:分析男性阻塞性睡眠呼吸暂停（OSA）患者脑网络动态功能连接（dFNC）状态及其影响因素。方法:前瞻性选取2020年8月至2021年12月因打鼾就诊于苏州大学附属第二医院睡眠门诊，经多导睡眠监测（PSG）诊断的男性OSA及鼾症患者共111例。收集一般资料，根据氧减指数（ODI）将患者分为3组：单纯鼾症组（ODI<5次/h，34例）、轻中度OSA组（5≤ODI<30次/h，43例）、重度OSA组（ODI≥30次/h，34例）。采用蒙特利尔认知评估（MoCA）量表评估认知功能，Epworth嗜睡量表（ESS）评估日间嗜睡状况。采集静息态功能磁共振成像（fMRI）血氧水平依赖序列（BOLD）信号数据并预处理，使用滑动时间窗法构建dFNC矩阵，通过k-均值聚类分析确定动态脑网络dFNC状态数目，使用三种参数［时间分数（FT）、平均停留时间（MDT）、转换次数（NT）］来表征dFNC状态的时间属性，比较组间dFNC状态时间属性的差异，进一步分析时间属性与PSG参数及MoCA、ESS评分等的相关性，并采用逐步多重线性回归分析dFNC状态时间属性的影响因素。结果:患者年龄（40.2±8.6）岁（25~65岁），3组患者间年龄、吸烟饮酒史及MoCA评分差异无统计学意义（均 P>0.05）。通过k-均值聚类分析提取了3个脑网络dFNC状态：状态1：以视觉、感觉运动网络强连接为特征，出现频率为31.7%（4 611/14 541）；状态2：以默认模式网络、注意网络等认知网络的强连接为特征，出现频率最低（22.1%，3 213/14 541）；状态3：以全脑网络较弱的连接为特征，出现频率最高（46.2%，6 717/14 541）。重度OSA组状态2的FT［0.28（0.05，0.35）比0.39（0.26，0.53）］与MDT［8.20（4.35，12.54）比 11.68（8.50，16.69）］均低于单纯鼾症组（均 P<0.05），3组间状态1和状态3的时间属性差异均无统计学意义（均 P>0.05）。状态2的FT、MDT与患者的体质指数、呼吸暂停低通气指数、ODI、最低血氧饱和度相关（FT： r值分别为-0.218、-0.230、-0.249、0.198；MDT： r值分别为0.269、-0.253、-0.265、0.209，均 P<0.05），与MoCA评分、ESS评分相关均无统计学意义（均 P>0.05）。ODI是状态2时间属性的影响因素（FT：β=-0.225，95% CI：-0.227~-0.223；MDT：β=-0.241，95% CI：-0.289~-0.195）。 结论:OSA患者存在特定脑网络dFNC状态时间属性的改变，并与夜间低氧参数相关，这可能是OSA患者脑功能损伤的机制之一。

肾上腺素受体是代表性的G蛋白偶联受体，在调节心血管系统活动中发挥重要作用。肾上腺素受体介导的信号发生异常可促进心血管疾病的发生发展。因此，肾上腺素受体是最重要的药物靶点。近年来，随着新技术不断应用到受体研究中。例如结合活细胞单分子技术和全内反射荧光显微术（TIRFM）、光激活定位显微成像（PALM）、随机光学重构显微成像（STORM）等超分辨成像方法，目前已经能够在活细胞单分子水平观察受体及其下游分子的动力学参数，为实时动态表征肾上腺素受体的信号转导过程提供技术保障。另外，冷冻电镜、磁共振等技术已经可以解析出肾上腺素受体与配体结合以及肾上腺素受体与下游效应分子结合的活性构象，这就揭示了肾上腺素受体导致不同信号转导的结构基础。这些技术的飞速进展，必将加深人们对于肾上腺素受体激活及信号转导的进一步认识，推动肾上腺素受体更深层次的信号转导机制的揭示。

结直肠癌为常见消化道恶性肿瘤之一，发病率、死亡率位于前列。前移结直肠癌早诊窗口，动态监测术后复发转移风险，提早干预对改善结直肠癌诊疗结局具有重要价值。循环肿瘤细胞（CTC）作为一种快捷无创、可重复取材的液体活检手段之一，已广泛应用于结直肠癌的早期诊断、疗效监测和预后评估，本文系统梳理了CTC计数、蛋白表达（肝再生磷酸酶-3、基质金属蛋白酶-9等）、分子表征（结肠腺瘤样息肉基因、erb-b2受体酪氨酸激酶等）、转运RNA表达谱、单细胞测序在结直肠癌诊疗中的应用研究价值，以期辅助临床合理应用CTC监测指标，为改善结直肠癌的预后提供支撑。

目的:探讨一氧化氮(NO)供体和聚多巴胺复合纳米体系的制备方法以及其对肝癌细胞的抑制作用。方法:采用化学合成法制备聚多巴胺(PDA)负载一氧化氮供体S-亚硝基半胱胺衍生物(SNO)得到纳米载药复合体系SNO@PDA，通过磁共振成像和质谱分析进行化学结构鉴定，通过动态光散射技术和透射电镜检测其粒径和形貌表征，分别通过电子温度计和Griess试剂盒检测光热稳定性以及NO的释放。最后通过噻唑蓝(MTT)实验检测纳米载药复合体系对肝癌细胞株Huh7的生长抑制作用。两组间均数比较用 t检验，多组间均数比较用单因素方差分析。 结果:磁共振成像和质谱分析确认成功合成SNO，动态光散射技术测定SNO@PDA的粒径在190 nm左右，透射电镜显示为球形颗粒，形态均一，且在生理条件下可稳定存在。SNO@PDA的载药率为19.4%，包封率为71.4%。当浓度为35 mg/L时，近红外(Near-infrared，NIR)照射后温度可升高12 ℃左右。重复4个开/关循环后升温幅度没有变化。3个循环后NO的释放率达到86%。MTT法测定细胞存活率，当浓度为60 mg/L时，SNO@PDA+NIR组的细胞存活率为(37.2±2.2)%，低于SNO+NIR组(60.1±7.2)%，差异有统计学意义( t＝6.500， P<0.01)；低于空白材料PDA组(73.9±0.5)%，差异有统计学意义( t＝5.900， P<0.01)；低于PDA+NIR组(57.9±7.1)%，差异有统计学意义( t＝6.400， P<0.01)。 结论:SNO@PDA可以发挥化疗-光热疗法的组合优势，有效抑制肝癌细胞的增殖。