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卵裂期优质胚胎的染色体嵌合体研究
编辑人员丨5天前
目的:应用基于多次退火环状循环扩增(multiple annealing and looping-based amplification cycles,MALBAC)的单细胞测序技术分析卵裂期优质胚胎的嵌合体率及类型。方法:收集接受卵胞浆内单精子显微注射治疗并生育正常后代的夫妇捐献的卵裂期冷冻优质胚胎,解冻,消化透明带,收集卵裂球,进行单细胞全基因组扩增及二代测序。结果:共解冻胚胎23枚,收集184个卵裂球。175个(95.1%)卵裂球获得了测序结果,其中100个(57.1%)为非整倍体。在23枚胚胎中,3个(13.0%)为正常的二倍体,20个(87.0%)为嵌合体,其中包括5个(21.7%)非整倍体嵌合型、7个(30.4%)为二倍体-非整倍体嵌合型、5个(21.7%)为异常嵌合型、3个(13.0%)为无规律分离型。结论:卵裂期优质胚胎中存在较高的染色体嵌合体率。复杂染色体异常或高比例异常细胞的嵌合体可能是影响胚胎发育潜能的重要因素。
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编辑人员丨5天前
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AZFc微缺失在无精子症/严重少精子症男性中的发生率及遗传生殖学特点
编辑人员丨5天前
目的:探讨无精子因子c区( AZFc)微缺失在无精子症/严重少精子症男性中的发生率,并分析其与染色体核型、生殖激素的相关性及其对卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)术后妊娠结局的影响。 方法:选取2013年1月1日至2020年12月31日于嘉兴学院附属妇儿医院就诊的1 364例无精子症/严重少精子症男性为研究对象。对无精子症/严重少精子症男性进行 AZFc微缺失检测和染色体核型分析,比较 AZFc缺失男性与对照组A(精液分析正常)、对照组B(无 AZFc微缺失的无精子症/严重少精子症男性)的生殖激素水平。跟踪随访 AZFc-ICSI夫妇的妊娠结局,将其受精率、优胚率和临床妊娠率与ICSI对照组进行比较。 结果:共检出 AZFc微缺失51例,检出率为3.74%,其中7例存在染色体核型异常。与对照组A相比, AZFc微缺失男性的泌乳素(PRL)、卵泡刺激素(FSH)和促黄体素(LH)均有不同程度的升高( P<0.05)。与对照组B相比,仅PRL与FSH显著上调( P<0.05)。共有22对 AZFc夫妇在本院接受ICSI辅助妊娠,其优胚率和临床妊娠率与ICSI对照组的差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:AZFc微缺失在无精子症/严重少精子症男性中的发生率为3.74%,与染色体核型异常相关,并伴有不同程度的PRL、FSH和LH上调,但不会降低ICSI术后的临床妊娠率。
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编辑人员丨5天前
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反复种植失败的竞争性内源核糖核酸调控网络构建及其临床验证
编辑人员丨5天前
目的:构建反复种植失败(RIF)相关竞争性内源RNA(ceRNA)调控网络并进行临床样本验证。方法:从高通量基因表达数据库(GEO)得到RIF相关的长链非编码RNA(lncRNA)、微小RNA(miRNA)和信使RNA(mRNA)表达谱数据集,构建lncRNA-miRNA-mRNA的ceRNA调控网络。同时利用加权基因共表达网络分析(WGCNA)探索网络中的枢纽基因。回顾性收集2020—2021年于郑州大学第一附属医院生殖医学中心行体外受精(IVF)/卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)助孕的RIF患者和对照组(助孕后至少有1次妊娠史)患者的子宫内膜组织,应用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)验证RIF相关枢纽基因的mRNA表达水平,并应用Western印迹和免疫组化技术验证血管细胞黏附分子-1(VCAM1)的蛋白表达水平。结果:构建了由32个lncRNA、31个miRNA和88个mRNA组成的RIF相关ceRNA调控网络,并利用WGCNA鉴定出7个RIF相关枢纽基因。将ceRNA网络中的88个mRNA与枢纽基因取交集得到2个RIF相关关键基因:VCAM1和白细胞介素2受体α(IL-2RA)。临床验证中,对照组和RIF组的年龄[ M( Q1, Q3)]分别为26.50(25.00,34.00)和30.50(25.75,35.25)岁( P>0.05)。与对照组相比,RIF组子宫内膜中VCAM1的mRNA[ M( Q1, Q3)][0.30(0.15,0.42)比0.99(0.69,1.34), P=0.001]和蛋白表达水平[ M( Q1, Q3)][0.44(0.16,1.27)比2.39(1.58,2.58), P<0.001]均降低。 结论:本研究成功构建了RIF相关ceRNA调控网络,并通过临床样本证实RIF患者子宫内膜组织中VCAM1的表达水平降低。
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编辑人员丨5天前
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单精子测序技术在一个脊髓性肌肉萎缩症家系胚胎植入前遗传学检测中的应用
编辑人员丨5天前
目的:探讨单精子测序技术在脊髓性肌肉萎缩症(SMA)家系胚胎植入前单基因遗传病检测(PGT-M)中的应用价值。方法:选取2020年6月于江西省妇幼保健院就诊的一个生育过2例SMA患儿(均已夭折)的家系作为研究对象,利用机械制动法分离11份单精子样本并进行全基因组扩增,采用荧光定量PCR与Sanger测序法对扩增产物进行 SMN1基因变异检测。选取女方、女方父母和男方的基因组DNA,以及1份携带和2份未携带 SMN1基因变异的单精子扩增产物,在变异位点上下游2 Mb区域内选取100个单核苷酸多态性位点,设计引物进行靶向捕获高通量测序,通过连锁分析确定男女双方与 SMN1基因致病变异连锁的染色体单体型。经卵胞浆内单精子显微注射技术受精获取囊胚,活检滋养外胚层细胞,经全基因组扩增后行高通量测序检测胚胎的单体型,判断胚胎的致病性。对野生型胚胎进行染色体非整倍体检测,选择 SMN1基因型为正常的整倍体胚胎进行移植。于孕18周行羊水穿刺产前诊断,确认胎儿的基因型。新生儿出生后进行跟踪随访。 结果:基因检测发现夫妇双方均携带 SMN1基因第7、8外显子缺失杂合变异,其中女方携带的变异遗传自其父亲,男方为新发变异。利用单精子测序技术成功构建出男方单体型。PGT检测发现5枚胚胎携带 SMN1基因杂合变异,4枚为野生型,其中3枚为整倍体。移植1枚野生型整倍体胚胎,妊娠中期羊水检测证实胎儿未携带 SMN1基因第7、8外显子缺失变异。新生儿足月出生,随访9个月未见异常。 结论:应用单精子测序技术为1对夫妻双方均携带 SMN1基因第7、8外显子杂合缺失变异且男方为新发变异的夫妇构建出男方致病变异的连锁单体型,并为该夫妇提供PGT检测,成功避免了SMA患儿的出生。
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编辑人员丨5天前
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多囊卵巢综合征不孕伴胰岛素抵抗患者行IVF/ICSI-ET的临床结局分析
编辑人员丨5天前
目的:分析多囊卵巢综合征(PCOS)不孕伴胰岛素抵抗(IR)患者行体外受精/卵胞浆内单精子显微注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)的临床结局分析。方法:回顾性纳入2018年1月至2020年12月在漯河市中心医院行IVF/ICSI-ET的257例PCOS不孕患者,按照稳态模型评估胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)水平(中位数2.5),将患者分为IR组(HOMA-IR≥2.5,130例)与非IR组(HOMA-IR<2.5,127例)。比较两组的基础性激素[促卵泡生成素(FSH)、促黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、睾酮(T)、孕激素(P)、抗苗勒管激素(AMH)]水平及窦卵泡数,空腹、服糖后30、60、120min时血糖及胰岛素水平,助孕妊娠结局指标[促性腺激素(Gn)使用时间及剂量、获卵数、受精率、优质胚胎率、卵巢过度刺激症(OHSS)发生率、着床率、临床妊娠率、生化妊娠率、流产率、活产率及妊娠期并发症];对临床结局的影响因素进行Logistic回归分析。结果:IR组的基础LH[(8.86±1.60)mIU/ml vs(6.54±1.12)mIU/ml]、T[(63.20±7.47)ng/dl vs(52.11±5.69)ng/dl]水平均明显高于非IR组( P<0.05);不同时间点IR组的血糖及胰岛素水平均明显高于非IR组( P<0.05);IR组的Gn使用剂量[(1 947.35±129.13)IU vs(1 522.70±88.41)IU]、流产率[32.69%(17/52)vs 13.70%(10/73)]均明显高于非IR组( P<0.05),临床妊娠率[40.00%(52/130)vs 57.48%(73/127)]及活产率[51.92%(27/52)vs 72.60%(53/73)]均明显低于非IR组( P<0.05)。Logistic回归分析显示:年龄、BMI、基础LH、基础T、HOMA-IR是PCOS不孕患者行IVF/ICSI-ET临床结局的独立危险因素( P<0.05),基础AMH及Gn用量是临床结局的保护因素( P<0.05)。 结论:IR能对PCOS不孕患者行IVF/ICSI-ET的临床结局产生不良影响,HOMA-IR是临床结局的危险因素,对于PCOS不孕患者应当及时评估IR情况。
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编辑人员丨5天前
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胚胎玻璃化冷冻复苏存活率影响因素分析
编辑人员丨2024/6/22
目的 探讨影响卵裂期胚胎玻璃化冷冻复苏后存活的相关因素,以期提高冻融胚胎存活率.方法 回顾性分析2013年1月-2019年12月在泰安市中心医院行卵裂期胚胎玻璃化冷冻复苏移植的3 795个周期,所有患者每次均解冻2枚胚胎,共解冻7 590枚胚胎.按照胚胎复苏后存活程度分为3组,其中A组:2枚胚胎均完整存活;B组:2枚胚胎中有1枚胚胎非完整存活(一半以上卵裂球存活);C组:2枚胚胎中有1枚未存活(一半以下卵裂球存活).按照新鲜培养周期时的受精方式分为常规体外受精组(IVF组)和单精子卵胞浆内显微注射组(ICSI组).按照胚胎分级分为优质胚胎组(Ⅰ、Ⅱ级胚胎)和非优质胚胎组(Ⅲ级胚胎).按照冷冻液和复苏液是否使用同一种品牌分为同种品牌组和不同品牌组.结果 C组患者的年龄、不孕年限显著高于A、B两组,差异有统计学意义(P<0.05),3组的冻融移植周期数及冷冻保存时间比较,差异均无统计学意义(P>0.05),C组的临床妊娠率显著低于A、B两组,差异有统计学意义(P<0.01).ICSI组患者胚胎复苏后完整存活率显著低于IVF组患者,差异有统计学意义(P<0.05),未存活的胚胎数量显著增加.与I级、Ⅱ级胚胎相比,Ⅲ级胚胎复苏后存活率显著下降,差异有统计学意义(P<0.05).不同品牌的冷冻液和复苏液对胚胎复苏存活情况没有显著影响(P>0.05).结论 患者年龄、受精方式及胚胎质量影响玻璃化冷冻胚胎复苏后存活率,进而影响临床妊娠结局.
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编辑人员丨2024/6/22
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第3天新鲜胚胎移植周期中卵裂球数目与助孕方式对妊娠结局的影响
编辑人员丨2024/4/27
目的 探讨第3天新鲜胚胎移植周期中卵裂球数目及助孕方式对妊娠结局的影响.方法 回顾性分析2012年1月至2020年8月海军军医大学(第二军医大学)第一附属医院生殖医学中心收治的首次接受胚胎移植、采用常规体外受精(IVF)或卵胞浆内单精子显微注射技术(ICSI)助孕、胚胎质量为Ⅰ级或Ⅱ级的患者资料.共1 788个第3天新鲜移植周期纳入研究,先分为单胚胎移植和双胚胎移植两大类,每类再根据卵裂球数目分为≤6个细胞组、7个细胞组、8个细胞组、9个细胞组、≥10个细胞组.在新鲜单胚胎移植周期中,≤6个细胞组36个(IVF 21个、ICSI 15个),7个细胞组53个(IVF 25个、ICSI 28个),8个细胞组204个(IVF 146个、ICSI 58个),9个细胞组36个(IVF 22个、ICSI 14个),≥10个细胞组50个(IVF 34个、ICSI 16个);在新鲜双胚胎移植周期中,≤6个细胞组59个(IVF 27个、ICSI 32个),7个细胞组72个(IVF 48个、ICSI 24个),8个细胞组1 178个(IVF 820个、ICSI 358个),9个细胞组44个(IVF 24个、ICSI 20个),≥10个细胞组56个(IVF 24个、ICSI 32个).比较各组的胚胎种植率、临床妊娠率、流产率和活产率.结果 在新鲜单胚胎移植周期中,8个细胞组的胚胎种植率、临床妊娠率高于≤6个细胞组、7个细胞组、9个细胞组、≥10个细胞组(均P<0.05),活产率高于≤6个细胞组、7个细胞组(均P<0.05),流产率与≤6个细胞组、7个细胞组、9个细胞组、≥10个细胞组比较差异无统计学意义(均P>0.05);8个细胞组中ICSI助孕的胚胎移植后胚胎种植率、临床妊娠率、活产率均高于IVF助孕(均P<0.05),而≤6个细胞组、7个细胞组、9个细胞组、≥10个细胞组中IVF和ICSI 2种助孕方式的胚胎种植率、临床妊娠率、活产率差异均无统计学意义(均P>0.05).在新鲜双胚胎移植周期中,8个细胞组的胚胎种植率、临床妊娠率、活产率均高于≤6个细胞组、7个细胞组、9个细胞组、≥10个细胞组(均P<0.05),流产率与≤6个细胞组、7个细胞组、≥10个细胞组比较差异无统计学意义(均P>0.05),但低于9个细胞组且差异有统计学意义(P<0.05);≤6个细胞组ICSI助孕的胚胎移植后胚胎种植率、临床妊娠率、活产率均高于IVF助孕(均P<0.05),而7个细胞组、8个细胞组、9个细胞组、≥10个细胞组中IVF和ICSI 2种助孕方式的胚胎种植率、临床妊娠率、活产率差异均无统计学意义(均P>0.05).结论 在第3天新鲜胚胎移植周期中,可首选8个细胞胚胎,其次是9个细胞胚胎、≥10个细胞胚胎、7个细胞胚胎、≤6个细胞胚胎;8个细胞胚胎在ICSI助孕方式下的胚胎种植率、临床妊娠率和活产率比IVF高,可以优先选择;对于一部分ICSI助孕患者在无其他优质胚胎情况下,移植≤6个细胞的胚胎也可以获得较好的妊娠结局.
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编辑人员丨2024/4/27
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夫妇首诊生育力评估时年龄组合对IVF-ET/ICSI临床妊娠结局的影响——一项多中心回顾性队列研究
编辑人员丨2024/3/23
目的 探讨夫妇首诊生育力评估时登记的年龄组合和生育力评估结果对体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET)/卵胞浆内单精子显微注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)临床妊娠结局的影响.方法 选取东、中、西11家辅助生殖机构IVF-ET/ICSI共5 104个移植周期的资料建立回顾性队列,依据夫妇首诊生育力评估时登记的年龄分组分析:A组(女方<35岁,男方<40岁)、B组(女方<35岁,男方≥40岁)、C组(女方≥35岁,男方<40岁)、D组(女方≥35岁,男方≥40岁).采用x2检验和单因素方差分析比较四组间临床妊娠率和首诊生育力评估结果.结果 四个年龄组合IVF-ET治疗的临床妊娠率分别为58.23%、54.12%、40.57%、30.70%(x2=167.214,P<0.001);ICSI 治疗的临床妊娠率分别为 59.29%、62.50%、49.07%、34.31%(x2=23.834,P<0.001);A 与 B 组间 IVF-ET/ICSI两种治疗临床妊娠率的差异均无统计学意义(x2-0.574,PIVF-EF=0.449;x2=0.099,PICSI=0.754);C组IVF-ET/ICSI两种治疗的临床妊娠率均显著高于D组(x2=11.581,PIVF-EI=0.001;x2=4.695,PICSI=0.03).结论 女方<35岁时,男方年龄对IVF-ET/ICSI治疗的临床妊娠率没有显著影响;女方≥35岁时,男方<40岁接受IVF-ET/ICSI治疗的临床妊娠率显著优于男方≥40岁的人群,这提示有生育意愿的夫妇若已处于女方≥35岁,男方<40岁的组合年龄区间时,应积极进行生育力评估并及时选择恰当的医学治疗方案.
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编辑人员丨2024/3/23
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卵巢敏感指数、卵泡输出率及卵泡敏感指数对卵巢过度刺激综合征的预测价值
编辑人员丨2023/10/21
目的 探讨卵巢敏感指数(OSI)、卵泡输出率(FORT)、卵泡敏感指数(FSI)对行体外受精/卵胞浆内单精子显微注射(IVF/ICSI)患者发生卵巢过度刺激综合征(OHSS)的预测价值.方法 回顾性分析2012年3月至2021年12月于联勤保障部队第九四○医院生殖医学中心选择长效长方案/拮抗剂方案行控制性促排卵(COH)治疗共664例患者的临床资料.根据患者是否出现OHSS分为OHSS组(n=88)和对照组(n=576),分析两组患者的基本信息和临床资料,通过受试者工作特征(ROC)曲线及曲线下面积(AUC)分析OSI、FORT、FSI和OSI+FORT+FSI联合对OHSS的预测能力.结果 OHSS组的年龄、不孕年限、HCG总量和优质胚胎率显著低于对照组,而窦卵泡数(AFC)、长效长方案占比、扳机日雌二醇(E2)、扳机日孕酮、停针日卵泡数(PFC)、获卵数、OSI、FORT和FSI显著高于对照组(P<0.05);两组间体质量指数(BMI)、不孕因素、促性腺激素(Gn)启动量、Gn总量、Gn总天数、扳机日LH和受精率比较均无显著差异(P>0.05).在对OHSS的预测中,OSI+FORT+FSI联合ROC曲线AUC最大为0.746;对轻度OHSS的预测中,OSI的ROC曲线AUC最大为0.725;对中、重度OHSS的预测中,OSI+FORT+FSI联合ROC曲线AUC最大,分别为0.786和0.839.结论 OSI、FORT、FSI及联合应用对不同程度的OHSS都有一定的预测作用,其中联合应用效果最好.
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编辑人员丨2023/10/21
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新鲜周期D3卵裂期胚胎移植策略的选择
编辑人员丨2023/9/16
目的 对比新鲜周期不同D3卵裂期胚胎移植策略的妊娠结局,优化移植策略.方法 回顾性分析2016年1月至2021年12月于哈尔滨医科大学附属第一医院生殖医学科行常规体外受精/卵胞浆内单精子显微注射(in vitro fertilization/intracytoplasmic sperm injection,IVF/ICSI)助 孕且为第一促排周期并行新鲜周期移植的2 251例患者的临床资料.根据移植胚胎个数及移植胚胎的质量不同分为移植两枚D3优质胚胎组(A组),移植1枚D3优质胚胎+1枚D3非优质胚胎组(B组),移植2枚D3非优质胚胎组(C组)和移植1枚D3优质胚胎组(D组).根据患者年龄分层,各组均再分为两个亚组,分别为≤35岁组和≥36岁组,对比各组间妊娠结局.结果 A、B、C、D四组患者活产率、临床妊娠率、种植率、多胎率、早期流产率和早产率比较,差异均有统计学意义(P<0.05).在≤35岁患者亚组中,A1组、B1组、C1组和D1组活产率、临床妊娠率、种植率、多胎率、早期流产率和早产率比较,差异均有统计学意义(P<0.05).A1组活产率高于B1组和D1组(P=0.003、P<0.001),B1组和D1组活产率差异无统计学意义(P=0.021);A1组与B1组临床妊娠率高于D1组(P均<0.001);A1组的种植率高于B1组(P=0.004),与D1组差异无统计学意义(P=0.541);A1组与B1组的多胎率和早产率均高于D1组(P<0.001、P<0.001,P=0.011、P=0.007);B1组的早期流产率高于A1组(P=0.004).在≥36岁患者亚组中,A2组、B2组、C2组和D2组活产率、临床妊娠率、种植率和多胎率比较,差异均有统计学意义(P<0.05),而早期流产率和早产率比较,差异无统计学意义(P>0.05).A2组的活产率和妊娠率高于D2组(P=0.011、0.001).A2组种植率高于B2组(P=0.003).A2组多胎率高于D2组(P=0.008).各组间早期流产率和早产率差异无统计学意义(P>0.05).活产的二分类多因素Logistic回归分析结果显示,不同胚胎移植策略、年龄以及不同促排卵方案均是活产的独立影响因素.结论 对于年龄≤35岁的患者,第一周期首选移植1枚D3优质胚胎是较为适合的移植策略,而对于年龄≥36岁的患者,当患者有≥2枚D3优质胚胎时,第一周期可优先移植2枚优质胚胎以保证单次成功率;而当患者仅有1枚D3优质胚胎时,则建议给予1枚优质胚胎+1枚非优质胚胎的移植策略.
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编辑人员丨2023/9/16
