目的 探究两歧双歧杆菌BD-1(Bifidobacterium bifidum BD-1,BD-1)以2-岩藻糖基乳糖(2'-fucosyl-lactose,2'-FL)作为唯一碳源时,与葡萄糖相比,其菌体和代谢产物诱导小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞分泌细胞因子的效应,以探索BD-1菌利用母乳低聚糖后免疫调节的菌株特性.方法 (1)菌体部分干预实验:将BD-1活菌接种于不同碳源的改良MRS肉汤培养基中,改良过的MRS肉汤培养基包括以2％2'-FL作为唯一碳源(2'-FL组)和以2％葡萄糖作为唯一碳源(Glu组)的培养基.将接种后的BD-1活菌在厌氧条件下培养24h后,分离各组菌体和培养基上清液.将菌体部分与RAW264.7细胞共同培养,并以肽聚糖(pep-tidoglycan,PGN)为菌体成分对照,同时设置不添加干预物的阴性对照(Ctrl组).(2)菌体代谢产物部分干预实验:将培养基上清液与RAW264.7细胞共同培养,以含有2％2'-FL或葡萄糖但未进行BD-1菌发酵处理的培养基作为实验对照,并设置不添加干预物的培养基与RAW264.7细胞的共培养上清液作为阴性对照(Ctrl组),以PGN与RAW264.7细胞的共培养上清液作为阳性对照(PGN组).培养24h后,提取RAW264.7细胞总RNA,逆转录后采用实时荧光定量PCR检测肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-10、IL-12、IL-1β的基因表达量;收集各组受试物与RAW264.7细胞的共培养上清液,采用酶联免疫吸附试验检测共培养上清液中上述细胞因子的分泌量.结果 (1)菌体部分干预:与PGN组相比,菌体部分2'-FL组和Glu组的TNF-α、IL-6、IL-10分泌量及基因表达量显著上升(均P＜0.05).与Glu组相比,2'-FL组的IL-6、IL-10分泌量显著下降(均P＜0.05),IL-6、IL-10的基因表达具有下降趋势.(2)菌体代谢产物部分干预:BD-1-2'-FL上清组和BD-1-Glu上清组的TNF-α、IL-6及IL-10分泌水平以及基因表达水平较2'-FL组和Glu组(未进行BD-1菌发酵处理的组别)有显著提高(均P＜0.05),而且2'-FL组中IL-6、IL-10的分泌量较Glu组显著增加(均P＜0.05),IL-6表达水平显著升高(均P＜0.05),IL-10表达水平有升高的趋势.2'-FL组相较于Glu组能产生更多的有机酸和种类更为丰富的糖类物质.结论 利用母乳低聚糖或葡萄糖作为唯一碳源培养BD-1菌体和诱导巨噬细胞分泌细胞因子的特征存在差异.当BD-1以母乳低聚糖为唯一碳源时,与葡萄糖相比,菌体成分呈现出抗炎倾向,在巨噬细胞中表现为IL-6的分泌和基因表达能力下降;而其代谢产物则具有刺激免疫激活的趋势,在巨噬细胞中导致IL-6和IL-10的分泌及基因表达能力上升.

食物过敏(FA)是一种潜在致命的免疫病理反应,其发病率持续上升,已成为影响儿童和成人的重要公共卫生问题.肠道厌氧共生细菌通过发酵代谢膳食纤维产生的短链脂肪酸(SCFAs)发挥重要的免疫调节功能,参与FA的发生与发展.本综述将在FA的背景下讨论SCFAs对肠上皮细胞及多种免疫细胞的免疫调节作用及相关分子机制,以期为FA的预防和治疗提供新思路.

目的:分析某三甲医院糖尿病足感染的病原学特征并评价抗感染药物选择的合理性.方法:回顾性分析2017年1月—2023年3月因糖尿病足感染收住苏州大学附属第一医院内分泌科、足部标本微生物培养阳性且有药敏结果的患者临床资料,包括疾病严重程度、感染指标和病原学等资料,根据指南制定糖尿病足感染治疗的抗感染药物选择评价标准,评价经验性和目标抗感染药物品种选择的合理性.结果:共纳入98例患者,其中轻度感染30例、中度感染50例和重度感染18例.感染严重程度不同的患者,白细胞计数、中性粒细胞百分比、C-反应蛋白和降钙素原有显著性差异(P＜0.05).共检出病原菌104株,其中需氧革兰阳性球菌85株,需氧革兰阴性肠杆菌13株及需氧非发酵菌6株.经验性和目标抗感染药物品种选择的不合理率分别为64.6％和63.6％,硝基咪唑类联合其他具有抗厌氧菌活性的药物是不合理用药的主要原因,分别为49例(92.5％)和38例(77.6％).结论:该院糖尿病足感染患者抗感染治疗时抗菌药物选择不恰当,应减少不必要的联合用药.

[背景]开发生物甲烷资源是减轻化石燃料供求紧张的有效措施,而秸秆类原料的预处理及甲烷生产方法需要不断创新,从而进一步满足可持续发展.厌氧真菌与甲烷菌共培养能够通过假根侵入及纤维降解酶双重预处理秸秆并生产甲烷,但目前全世界被报道的骆驼胃肠道来源的厌氧真菌分离培养物仅有 1 株.[目的]从新疆准噶尔双峰驼瘤胃内容物中分离出新型厌氧真菌和甲烷菌共培养物,研究其在降解秸秆并联合生产生物甲烷方面的应用潜力.[方法]采用Hungate滚管纯化技术将从骆驼胃肠道中分离的厌氧真菌和甲烷菌共培养,对其进行形态学及分子学鉴定,随后厌氧发酵 5 种底物(稻秸、芦苇、构树叶、苜蓿秆和草木樨),研究产甲烷量、降解效果及主要代谢产物等方面的特性.[结果]筛选到的共培养物中的厌氧真菌为Oontomyces sp.CR1,甲烷菌为Methanobrevibacter sp.CR1.其在降解稻秸时表现出最高的木聚糖酶酶活力(21.64 IU/mL)及甲烷产量(143.39 mL/g-DM),甲烷生产特性较分离自其他动物宿主的厌氧真菌共培养物更优.[结论]共培养厌氧真菌与甲烷菌菌株CR1 是一种新型高效降解菌株资源,其在利用木质纤维素生物质生产生物甲烷方面具有良好的应用前景.

应用I型聚酮合酶(PKS-I)基因筛选体系从32株海洋放线菌中寻找大环内酯类化合物的潜在产生菌,通过DNA序列相似性比对从5株阳性菌株中筛选获得了游动放线菌Actinoplanes sp.FIM060065.采用HPLC制备色谱从该菌株发酵液中分离纯化得到一个大环内酯类化合物FW060065,紫外、质谱以及核磁共振波谱分析表明它与台勾霉素B同质,药敏实验表明其对艰难梭菌、消化链球菌、双歧杆菌等革兰氏阳性厌氧菌显示出较强的抗菌能力.本研究通过基因筛选获得了台勾霉素的产生菌及其相应的代谢产物,为Ⅰ型聚酮合酶基因与大环内酯类化合物之间的联系提供了证据.

[背景]硝呋烯腙能够抑制厌氧真菌.共存甲烷菌可以促进厌氧真菌的生长以及对木质纤维素的降解,然而关于共存甲烷菌对厌氧真菌抗逆性影响的研究较少.[目的]旨在研究甲烷菌共存对厌氧真菌耐受硝呋烯腙的影响.[方法]采用体外批次培养,以稻草为底物,添加不同浓度的硝呋烯腙(0、5、10、25 mg/L),分别接种厌氧真菌纯培养和厌氧真菌与甲烷菌共培养悬浮液,于39℃静置培养96 h.测定不同时间点的产气量和甲烷产量,结束后测定pH、干物质降解率(DMD)、中性洗涤纤维消失率(NDFD)、半纤维素消失率(ADSD)、酸性洗涤纤维消失率(ADFD)以及上清液中甲酸、乳酸和乙酸的浓度.[结果]添加5、10和25 mg/L硝呋烯腙皆显著降低了厌氧真菌纯培养的发酵活性(P＜0.05);添加5 mg/L硝呋烯腙没有显著降低厌氧真菌与甲烷菌共培养的发酵活性(P＞0.05),添加10和25 mg/L硝呋烯腙则显著降低了共培养发酵活性(P＜0.05);比较5、10 mg/L硝呋烯腙对纯培养和共培养发酵活性影响的结果表明,共培养发酵活性显著高于纯培养发酵活性(P＜0.05).[结论]硝呋烯腙对厌氧真菌纯培养和厌氧真菌与甲烷菌共培养的抑制作用都存在剂量效应,在一定添加浓度范围内(＜25 mg/L),甲烷菌共存可以显著提高厌氧真菌对硝呋烯腙的耐受性.

目的 实验通过双歧杆菌四联活菌片(思连康)对肠道致病菌体外生物拮抗作用的研究,揭示此药治疗腹泻等疾病的作用机制,为临床应用提供科学依据.方法 对组成药物的4株益生菌发酵培养,定时取样,检测活菌数与pH值.先分别单独培养大肠埃希菌、沙门氏菌、志贺氏菌、思连康活菌片,调整菌液浓度,然后将思连康与每一个致病菌的菌液共同接种于GAM肉汤,并将每种菌液单独接种作为对照组,厌氧培养,定时检测致病菌与双歧杆菌的活菌数并分析.结果 思连康4株菌株发酵终点活菌数均在109 CFU/mL以上,发酵过程中3株原籍菌的pH值逐渐下降,蜡样芽孢杆菌pH值先下降后升高.思连康与致病菌共培养6h,思连康显著影响大肠埃希菌生长(P＜0.05),而对沙门氏菌和志贺氏菌的生长无影响(P＞0.05);共培养12h,思连康对3株致病菌均产生明显抑菌作用(P＜0.05);共培养24 h,未检测到致病菌的存在(P＜0.01).结论 双歧杆菌四联活菌片对致病菌抑制作用强.

畜禽粪便是一种重要的廉价生物质资源,含有丰富的木质纤维素和矿质营养,但随意堆弃必然会对环境形成污染,同时造成资源浪费. 为促进实现畜禽粪便的循环再生利用,从牛粪肥料化利用、能源化利用和化学品生产原料3个方面综述牛粪生物质资源的研究进展,分析不同处理方式对牛粪利用效率的影响. 肥料化利用在一定程度上能消解环境中的牛粪, 但因生产成本高、资源利用率低等问题限制了其大规模推广. 而牛粪厌氧发酵能产生清洁能源沼气,结合厌氧共发酵方式可以提高甲烷产率,并且发酵后的沼液可用于浸种和生物农药利用; 同时牛粪可以作为制取乙醇的新型原料,通过分子生物学手段构建重组运动发酵单胞菌,扩大菌株的底物利用范围. 此外,牛粪作为乳酸、富马酸、纤维素等生物基产品的生产原料,丰富了牛粪利用方式. 最后提出在牛粪利用过程中加强对重金属和抗生素的脱除,着力研究沼气工程建设技术,稳定发酵温度,提高产率,同时构建糖利用范围广、乙醇得率高的菌株,发展多重牛粪利用方式,以实现牛粪生物质资源的高值高效利用. (图1 表1 参74)

有机物料厌氧发酵液(AFOF)能显著改善苹果再植障碍.本研究对AFOF中能拮抗苹果再植障碍主要病原菌(腐皮镰刀菌、层出镰刀菌、尖孢镰刀菌、串珠镰刀菌)的细菌进行了分离筛选,并对其作用效果进行了盆栽验证.结果表明:AFOF能显著抑制病原真菌的生长繁殖;对峙试验共得到4株具有较强拮抗作用的细菌(L11、L12、L13、L14),最高抑菌率达到57.3％,鉴定发现这4株细菌均属于芽孢杆菌属,相互之间没有明显的拮抗作用;在盆栽条件下,与连作土相比,溴甲烷熏蒸处理和拮抗菌菌液处理对平邑甜茶幼苗的生物量均有不同程度的促进作用;在幼苗的长势上,溴甲烷熏蒸处理效果要好于拮抗菌菌液处理;在根系活力上,拮抗菌菌液处理效果要好于溴甲烷熏蒸处理,根系长度、根尖数分别增加了25.1％、70.9％.与连作土处理相比,拮抗菌菌液和溴甲烷熏蒸均能显著降低土壤中的真菌数量,分别降低了71.2％和64.2％,拮抗菌菌液处理能显著增加土壤中的细菌和放线菌数量,分别增加了48.0％和140.2％,使土壤微生物结构向“细菌型”转化;而澳甲烷熏蒸处理显著降低了土壤中的细菌和放线菌数量,说明拮抗菌的确能够抑制土壤中病原真菌的生长.

嗜水气单胞菌是一种广泛分布于水体和泥土中的、有发酵产气能力的兼性厌氧革兰阴性杆菌,是典型的人-兽-鱼共患病病原菌.人类感染通常由外伤伤口暴露于污染水体所致,亦可经食源性途径感染该菌[1].嗜水气单胞菌可于感染部位引起坏死性软组织感染(necrotizing soft tissue infection,NSTI)、胃肠炎等局部炎症反应,也可播散至远端器官累及全身多处部位,在免疫功能低下的人群可导致严重的败血症[2].