多主棒孢菌(Corynespora cassiicola)是一种常见的植物病原菌,该真菌在自然界分布广泛,绝大多数为寄生菌,多存在于热带和亚热带地区的植物茎秆、枝条、叶片上或表层土壤中,主要引起黄瓜、豇豆、香蕉等植物叶斑病和落叶病,在人体中的感染比较少见,2010年至今共报道15例人类感染病例,其中皮肤和软组织感染9例、眼部感染5例、颅内感染1例.该文对C.cassiicola引起的人类感染病例进行综述分析,为相关疾病的诊断和救治提供参考.

群落内物种如何共存是群落生态学研究中最具争议的核心问题之一.根据当代物种共存理论框架,维持物种共存的机制可以分为稳定化和均等化机制.尽管植物叶片病原真菌在自然界中大量存在,但是目前尚不完全清楚叶片病原真菌如何通过稳定化和均等化机制影响物种共存.本文首先介绍了叶片病原真菌驱动同种负密度制约(稳定化机制)和"生长-防御"权衡(均等化机制)促进物种共存的证据,并阐述了在群落水平抑制叶片病原真菌后物种丰富度的变化.随后,本文归纳了该领域研究中的主要挑战:叶片病原真菌在驱动物种共存过程中相较于环境因子的可能重要性更低、部分叶片病原真菌较弱的宿主专一性无法起到维持物种共存的作用,以及控制叶片病原真菌过程中各种方法均有一定局限性等问题.最后,本文论述了该研究领域未来的主要方向:不同土壤养分/气候变化条件下叶片病原真菌如何影响物种共存、叶片病原真菌与其他高营养层次生物类群的交互作用及其对物种共存的贡献、基于系统发育推断叶片病原真菌对植物群落构建的影响、将叶片病原真菌生活史类型纳入病原真菌影响植物物种共存的相关研究中.

为明确鉴定白及块茎腐烂病(根腐病)的病原菌,并筛选能够抑制病原菌的中药材提取物.该研究利用常规组织分离法对病原菌进行分离,通过形态学和分子生物学技术对致病菌株进行鉴定,同时观察了7种中药材提取物对病原菌的抑菌效果.结果表明:(1)从感病叶片、叶鞘及块茎中共分离得到 14 株真菌和4 株细菌,病原菌室内和室外回接表明菌株 GF-1 致病症状与田间一致,致病率均达到 100%.(2)经形态学鉴定,菌株GF-1 为附球菌属(Epicoccum)病原菌,菌落白色绒絮状,圆形;菌丝匍匐向外、向上生长,气生,无色,有隔膜,有分枝,具有分生孢子和厚垣孢子.(3)菌株GF-1 的ITS序列(全长522 bp)与GenBank中已登录的甘蔗的高粱附球菌(E.sorghinum,MN493119.1)序列一致性最高,达 99.62%,与已报道的白及叶斑病致病菌高粱附球菌(E.sorghinum,MF948994.1)的一致性为 98.88%.(4)培养基中含有 0.1～0.2 g·mL-1的青钱柳等 7 种中药材提取物,能够完全抑制GF-1 菌落的生长;当培养基中含有 0.05 g·mL-1的提取物时,肉桂和丁香提取物仍然能够完全抑制菌落的生长.综上认为,引起白及根腐病的致病菌为附球菌属高粱附球菌(E.sorghinum),培养基中分别含有 0.1～0.2 g·mL-1的青钱柳、白及、厚朴、八角、肉桂、蛇床子和丁香 7 种中药材提取物且均能完全抑制致病菌的生长.该研究结果为白及根腐病的防治提供了理论指导.

近年来,由弯孢属真菌侵染引发的病害在烟草上有上升的趋势,严重影响烟叶的产量和质量.为了更好地防治由弯孢属真菌引起的烟草叶斑病,本研究利用高通量测序技术对一株分离自烟草叶片的棒状弯孢菌 Curvularia clavata 线粒体基因组进行测序,组装得到一个环状的线粒体基因组,并对其组成特征、与典型叶斑病真菌的系统发育关系进行分析.结果表明,烟草棒状弯孢菌线粒体基因组长度为 41 763 bp,共编码 38个基因(13个蛋白编码基因、2 个rRNA基因和 23个tRNA基因),其碱基组成有显著的A-T偏好性,占比高达 70.35%.线粒体基因组中只有 3 个内含子和少量重复序列,这是造成其基因组大小收缩的主要原因.通过 6 个近缘病原真菌线粒体全基因的共线性分析,发现其线粒体基因组发生了基因重排事件.同时,物种同源区长度与对应物种的线粒体基因组大小呈正相关关系,同源区长度可能会影响物种的线粒体基因组大小.在选择压力分析中,发现烟草棒状弯孢菌线粒体为确保优势基因稳定遗传,自然选择和纯化选择起到了主导作用.系统发育分析表明烟草棒状弯孢菌与麦根腐平脐蠕孢 Bipolaris sorokiniana 和稻平脐蠕孢 Bipolaris oryzae亲缘关系最为密切,与前人基于ITS序列的进化分析结果一致.本研究首次从线粒体基因组方面对弯孢属真菌进行研究,丰富了弯孢属真菌线粒体基因组序列信息,为该属真菌的系统发育、资源保护及遗传多样性研究提供基础数据.

目的:鉴定引起薄荷叶斑病的病原菌种类及室内筛选该病害的防治药剂.方法:应用组织分离法获得疑似病原菌菌株,用柯赫氏法则确定病原菌.结合形态学与分子生物学方法进行鉴定,然后使用菌丝生长速率法测定8种杀菌剂对该病原菌的室内毒力活性.结果:从新乡市感染了叶斑病的薄荷叶片上分离出11个纯菌株,致病性试验结果表明,分离得到的真菌菌株HN-BH-3为薄荷叶斑病的致病菌.通过对致病菌rDNA-ITS序列、TUB2与TEF-1α基因序列分析,结合形态学特征,鉴定菌株HN-BH-3为球黑孢菌Nigrospora sphaerica;8种药剂的筛选结果表明,多菌灵、苯醚甲环唑和甲基硫菌灵对球黑孢菌的EC50值均小于1 mg/L,分别为0.0330、0.0415、0.7478 mg/L.结论:从染病薄荷叶分离的病原菌为球黑孢菌;多菌灵对球黑孢菌具有较好抑制效果.

[背景]青海高原特殊生境孕育着特殊适生性的微生物资源.[目的]探究适生于高原生境的芽孢杆菌对高寒牧草的促生防病效应.[方法]以分离自青海海西州大格勒干旱沙地白刺(Nitraria tangutorum)根围的Bacillus halotolerans DGL6 为研究材料,测定其对"青麦 7 号"的促生防病效应.分别以浸种、灌根的方法测定其对"青麦 7 号"种子萌发及幼苗生长的效应,并测定 12 d内幼苗生理指标的变化;测定菌株 DGL6 抑制"青麦 7 号"幼苗离体叶片感染病原真菌活性;以平板对峙法测定其对病原真菌的抑制率;以透明圈法检测其产抑菌相关水解酶活性.[结果]菌株DGL6 对"青麦 7 号"种子萌发及幼苗生长具有显著的促生效果,种子萌发的芽长、根长及鲜重分别提高 27.26%、23.03%和 45.42%,12 d内幼苗的株高、根长、鲜重分别显著提高 33.42%、107.85%和 95.24%,叶绿素、可溶性糖及可溶性蛋白含量显著增加,丙二醛含量下降;喷施DGL6 菌悬液可明显抑制小麦赤霉菌在"青麦 7 号"离体叶片上的生长;菌株 DGL6 对小麦赤霉菌(Fusarium graminearum)表现出显著拮抗活性(抑菌圈平均直径为 18 mm);菌株DGL6 在 4 种水解酶检测培养基上均形成明显透明圈,表明其具有分泌纤维素酶、果胶酶、蛋白酶和β-1,3-葡聚糖酶的能力.[结论]本研究为促进高原作物"青麦 7 号"的生长、提高其抗病性提供了优异菌株及理论依据.

目的 探究不同树龄杜仲内生真菌群落组成、丰度及多样性,比较不同树龄杜仲内生真菌优势菌群随季节的动态变化规律.方法 采集不同树龄的杜仲叶片与枝条,利用高通量测序解析内生真菌群落结构,并进行生物信息学分析.结果 不同树龄杜仲之间存在较多共有可操作分类单元(operational taxonomic units,OUTs),杜仲树龄越低所具有的特有OTUs数量越多;不同树龄杜仲内生真菌群落的alpha多样性指数之间无显著差异,树龄越高alpha多样性指数越高;67年生与45年生杜仲内生真菌群落组成差异较小,28年生杜仲内生真菌群落组成与其他两组差异较大;杜仲中的优势菌门为子囊菌门(Ascomycota),其次为担子菌门(Basidiomycota);不同树龄杜仲所共有的优势菌属有9个,包括德福里斯孢属(Devriesia)、间座壳属(Diaporthe)、多臂菌属(Trichomerium)、亚球壳属(Sphaerulina)、短柄霉属(Aureobasidium)、近球腔菌属(Paramycosphaerella)、黑孢霉属(Nigrospora)、帚枝霉属(Sarocladium)和毕赤酵母属(Pichia),构成杜仲核心内生真菌组,其中Trihomerium、Sphaerulina仅在春季具有较高相对丰度,Paramycosphaerella仅在夏季具有较高相对丰度,Nigrospora、Sarocladium、Pichia仅在秋季具有较高相对丰度;基于FUNGuild预测,杜仲内生真菌中的优势菌群主要为植物病原菌.结论 杜仲中具有核心内生真菌组,不同树龄杜仲内生真菌优势菌属的相对丰度不同,优势菌属的种类随季节变化而演替,树龄是使同一生境下杜仲内生真菌群落结构和多样性产生差异的主要因素.

[目的]探讨鸦胆子提取物对阳春砂叶片2种典型病原真菌(Epicoccum thailandicum和Muyocopron laterale)的抑制机理,为鸦胆子开发为植物源农药提供理论依据.[方法]设置对照组(真菌团块+无菌磷酸盐缓冲液或无菌去离子水)和处理组(真菌团块+鸦胆子提取物100 mg·mL-1+无菌磷酸盐缓冲液或无菌去离子水),测定2组病原真菌内容物释放量、可溶性蛋白含量、过氧化氢(H2O2)含量、过氧化物酶(POD)和总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性,透射电镜观察病原真菌菌丝体超微结构的变化.[结果]相比初始时刻,处理组2种病原真菌的细胞膜通透性显著增加,E.thailandicum经鸦胆子提取物作用10 h,细胞内容物释放量升高了5.32倍(P＜0.001),M.laterale经鸦胆子提取物作用1h,细胞内容物释放量升高了98.55%(P＜0.001);相比对照组,处理组2种病原真菌经鸦胆子提取物处理3h后可溶性蛋白含量较对照组显著增加(P＜0.001);处理组2种病原真菌菌丝体内H2O2含量较对照组显著增加(P＜0.01),E.thailandicum经鸦胆子提取物处理24 h H2O2 含量升高了93.30%,M.laterale经鸦胆子提取物处理6 h H2O2含量增加了1.14倍;处理组2种病原真菌的POD均降至无活性(P＜0.001),2种病原真菌经鸦胆子提取物处理3h后T-SOD活性均显著降低(P＜0.001).由透射电镜结果可见,相比对照组,处理组2种病原真菌细胞膜出现缺损,细胞内空腔增多,核碎裂.[结论]鸦胆子提取物可通过降低过氧化作用相关的保护酶活性,使得病原真菌细胞中过量的活性氧无法及时消除,进而发生脂质过氧化,造成细胞膜通透性增加,细胞内容物外渗,从而达到抑制菌丝生长的效果.

为获得广谱高效拮抗蔬菜软腐病菌的生防菌株,本研究以白菜软腐病菌Pectobacterium carotovorum BC2、圆葱软腐病菌Burkholderia gladioli YC1、娃娃菜软腐病菌Pseudomonas sp.WWC2 为靶标,采用梯度稀释法及抑菌圈法从蔬菜根际土中分离筛选拮抗菌株.通过形态、生理生化和 16S rDNA序列分析对菌株进行鉴定,明确生防菌株种属地位,并研究了菌株生长特性,利用牛津杯法测定生防菌株对3株软腐病菌及3株人源性病原细菌抑菌作用,采用平板对峙法测定其对8株植物病原真菌的抑菌作用,采用针刺接种法测定其对蔬菜离体叶片和田间的防效,并利用X-gal显色法测定其对白菜软腐病菌群体感应信号因子的降解活性.通过研究菌株生长特性、对白菜软腐病菌群体感应信号因子的降解活性、抑菌谱以及对白菜软腐病的田间防效.结果表明,从 20个土样分离的 1 012 个细菌中,筛选出 18 株拮抗菌,其中筛选出 1 株对 3 种软腐病菌YC1、BC2、WWC2 均有抑菌活性的生防菌株DJ1,其抑菌圈直径分别为(10.60±0.20)mm、(6.92±0.56)mm和(3.92±0.16)mm.经鉴定菌株DJ1 为贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis.菌株DJ1 最适生长温度为 30℃,具有较好的耐盐性,能在 1%-5%NaCl条件下生长,具有一定降解白菜软腐病菌群体感应信号因子的能力,能够抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和 8 种植物病原真菌生长,1×108 CFU/mL菌液浓度对白菜、圆葱、娃娃菜软腐病离体防效分别为 84.30%、60.21%和 69.96%,对白菜软腐病田间防效为 79.91%.因此,贝莱斯芽孢杆菌DJ1 在防治蔬菜软腐病方面具有潜在应用潜能.

为了评价药用植物海南槌果藤的抗氧化活性及抑菌活性,本实验通过气相色谱与质谱联用技术(Gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)分析鉴定了海南槌果藤叶片甲醇提取物的化学成分,采用紫外-可见分光光度法测定了海南槌果藤甲醇提取物的总多酚、总黄酮含量、DPPH自由基、ABTS自由基、羟基自由基和超氧阴离子的清除作用;以及槌果藤氯仿相萃取物对三种食源性致病细菌和六种植物病原真菌的抑制作用.实验结果表明:海南槌果藤叶片甲醇提取物中含量最多的是酯类(45.03％)和杂环类(33.74％),其中丁基4-庚烷基-邻苯二甲酸酯(20.58％)为主要的单组分物质.海南槌果藤甲醇提取物中总多酚含量为1.93％,总黄酮含量为2.3％;进一步研究表明海南槌果藤甲醇提取物对DPPH自由基和ABTS自由基有一定的清除能力,其IC50分别为0.454 mg/mL和0.297 mg/mL;而对羟基自由基和超氧阴离子有较强的清除能力,IC50分别为0.937、2.261 mg/mL,分别比芦丁和TBHQ标准品低.除此之外,海南槌果藤氯仿相萃取物对三种食源性致病细菌和六种植物病原真菌均有一定的抑制作用,其中对革兰氏阴性菌(大肠杆菌和铜绿假单胞菌)抑制效果较明显;同时对葡萄溃疡病菌抑制作用最强,抑制率为43.97％,其次是新暗色柱节孢,抑制率为37.5％.