随着对体外胚胎形态学参数、时差动力学参数的认知，时差成像技术（time-lapse technology，TLT）已经进入了一个快速发展的阶段。TLT能实时连续记录胚胎从受精、卵裂、囊胚形成的各项细节图像并发现传统观察胚胎技术不能发现的细节，为胚胎筛选提供依据。此外，TLT还能在临床应用、实验室质量控制中发挥作用。与此同时，TLT在体外胚胎发育分析、人工智能开发中也存在问题，本文将对其进行探讨。

目的:探讨完全型圆头精子症患者临床表型、精子形态特征及辅助生殖技术治疗的效率。方法:收集2019年11月至2022年5月期间在广西壮族自治区人民医院生殖医学与遗传中心就诊的完全型圆头精子症患者（完全型圆头精子症组），采集外周血进行遗传学检测，全外显子测序挖掘致病基因，并对精液常规、精子形态及超微结构进行分析；全部患者均接受了卵胞质内单精子注射（intracytoplasmic sperm injection，ICSI）联合人工卵子激活（artificial oocyte activation，AOA）治疗。选取同日取卵的行常规ICSI周期患者作为对照组，并采用时差动态监测系统监测发育全程动态参数，分析2组受精及胚胎发育效率、发育动力学参数及临床治疗结局。结果:完全型圆头精子症组4例，对照组9例。完全型圆头精子症患者均合并精子活力低下、精子DNA碎片率升高，精子形态及顶体荧光染色均显示头部呈小圆形伴顶体区缺失；透射电子显微镜下圆头精子头部顶体完全缺失且多见核质松散、空泡化等异常，颈部线粒体鞘数量减少且排列杂乱，鞭毛轴丝“9+2”结构多见异常。4例患者中1例为 DPY19L2基因纯合缺失，1例为 DPY19L2基因新发纯合移码变异。完全型圆头精子症组受精率、双原核受精率、第3天优质胚胎率、第6天囊胚形成率、第6天优质囊胚形成率与对照组差异均无统计学意义（均 P>0.05）；完全型圆头精子症组胚胎发育早期时间参数第二极体释放时间、原核消失时间，2至6-细胞各时期时间显著早于对照组且差异均有统计学意义（均 P<0.05），2组胚胎分裂模式差异无统计学意义（ P>0.05）。4例完全性圆头精子症患者中，2例新鲜胚胎移植各活产健康男婴1名，2例解冻周期移植活产健康男婴、女婴各1名。 结论:完全型圆头精子症患者精子形态学异常表型特征明显，ICSI联合AOA是有效的辅助生殖治疗手段。

目的:探讨蜡样透明带卵母细胞与正常形态卵母细胞临床助孕结局的差异。方法:回顾性队列研究分析2015年1月至2019年12月期间在南京医科大学第一附属医院生殖医学中心行辅助生殖助孕的93个卵胞质内单精子注射（intracytoplasmic sperm injection，ICSI）周期，根据卵母细胞的形态和授精方式分为三组：正常形态卵母细胞组（A组， n=52），蜡样透明带卵母细胞常规ICSI组（B组， n=30）；蜡样透明带卵母细胞补救ICSI组（C组， n=11）。比较三组间的实验室和临床结局。 结果:三组的获卵率、正常受精率、临床妊娠率、种植率差异均没有统计学意义（均 P>0.05）。A、B组的优质胚胎率［62.50%（250/400），59.07%（114/193）］均高于C组［40.85%（29/71）］，差异有统计学意义（ P=0.001， P=0.006）。A组的囊胚形成率［64.78%（160/247）］高于C组［37.14%（13/35）］，差异有统计学意义（ P=0.002）。另外，A组的流产率［2.44%（1/41）］低于B组和C组［21.05%（4/19）， P=0.031；44.44%（4/9）， P=0.002］，累积妊娠率［82.69%（43/52）］高于B组和C组［56.67%（17/30）， P=0.009；45.45%（5/11）， P=0.014］，差异有统计学意义。 结论:蜡样透明带样的卵母细胞采用常规ICSI授精可获得与正常形态卵母细胞相当的优质胚胎率和囊胚形成率，但总体的临床结局仍低于正常形态卵母细胞。建议蜡样透明带的异常卵母细胞直接采用ICSI授精方式，可以获得较为理想的临床结局。

目的:探究多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome，PCOS）小鼠卵母细胞中miR-320-3p低表达对胚胎发育潜能的影响，并初步探讨相关分子机制。方法:脱氢表雄酮皮下注射法构建40只PCOS小鼠模型，40只对照组小鼠注射等量油剂。通过发情周期变化和卵巢组织苏木素-伊红染色，评估模型构建效果，超数排卵获取模型鼠的M II期卵母细胞，胞质内注射miR-320-3p模拟物（miR-320-3p mimics）或阴性对照物（negative control，NC），分为对照+NC组、PCOS+NC组、PCOS+miR-320-3p mimics组。①通过qRT-PCR方法检测三组小鼠M Ⅱ期卵母细胞中miR-320-3p的表达；②三组M Ⅱ期卵母细胞行卵胞质内单精子注射，收集双原核（two pronuclei，2PN）受精卵进行体外培养，于受精后48 h、84 h记录4-细胞期胚胎和囊胚的数量。③三组囊胚分别进行滋养外胚层分子标志物CDX2染色和脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导缺口末端标记法细胞凋亡检测，统计各组总细胞数、滋养外胚层（trophectoderm，TE）细胞数、内细胞团（inner cell mass，ICM）细胞数和凋亡细胞数；④通过qRT-PCR方法检测三组4-细胞胚胎中miR-320-3p的靶基因（ Ulk1、 Pbx3、 Kdm5b、 Satb2）及发育相关基因（ Pou5f1、 Myc、 Klf4、 Ago2、 Dppa3、 Wdr5）的表达变化。 结果:①qRT-PCR显示，与对照+NC组相比，PCOS+NC组小鼠卵母细胞中miR-320-3p表达相对下调，差异具有统计学意义（ P=0.009）；PCOS+miR-320-3p mimics组中miR-320-3p表达量显著多于PCOS+NC组（ P=0.002）；对照+NC组与PCOS+miR-320-3p mimics组组间差异无统计学意义（ P=0.146）。②对照+NC组、PCOS+NC组、PCOS+miR-320-3p mimics组的4-细胞率组间差异均无统计意义（均 P>0.05）；三组囊胚形成率分别是75.89％（85/112）、59.22％（61/103）、72.64％（77/106），与对照+NC组相比，PCOS+NC组囊胚率显著降低（ P=0.009）；与PCOS+NC组相比，PCOS+miR-320-3p mimics组囊胚率显著升高（ P=0.041）。③对照+NC组、PCOS+NC组、PCOS+miR-320-3p mimics组囊胚的总细胞数分别是85.81±9.26、67.29±7.07、82.71±8.40，TE细胞数分别是69.19±7.01、52.38±6.34、65.38±8.30，ICM细胞数分别是17.62±3.60、14.90±2.39、17.29±3.90，凋亡细胞数分别是8.64±2.80、11.73±2.07、9.55±2.81，凋亡率分别是9.64%±2.78%、16.68%±2.81%、11.18%±2.61%。对照+NC组囊胚的总细胞数、TE及ICM细胞数均显著多于PCOS+NC组（ P<0.001、 P<0.001、 P=0.011），凋亡细胞数、凋亡率均显著低于PCOS+NC组（均 P<0.001）；PCOS+miR-320-3p mimics组总细胞数、TE及ICM细胞数也均显著多于PCOS+NC组（ P<0.001、 P<0.001、 P=0.025），凋亡细胞数、凋亡率均显著低于PCOS+NC组（ P=0.007、 P<0.001）。对照+NC组与PCOS+miR-320-3p mimics组组间囊胚的总细胞数、TE及ICM细胞、凋亡细胞数、凋亡率差异均无统计学意义（均 P>0.05），三组TE/ICM的比值组间差异无统计学意义（ P>0.05）。④与对照+NC组相比， Ulk1、 Pbx3、 Myc、 Dppa3在PCOS+NC组4-细胞胚胎中相对表达下调（ P=0.012、 P=0.002、 P<0.001、 P=0.001）， Kdm5b、 Satb2相对表达上调（ P<0.001、 P<0.001）；与PCOS+miR-320-3p mimics组相比， Ulk1、 Pbx3、 Myc、 Dppa3在PCOS+NC组4-细胞胚胎中相对表达下调（ P=0.005、 P=0.001、 P=0.001、 P=0.004）， Kdm5b、 Satb2相对表达上调（ P<0.001、 P=0.001），对照+NC组与PCOS+miR-320-3p mimics组组间差异均无统计学意义（均 P>0.05）；与对照+NC组相比， Wdr5在PCOS+NC组和PCOS+miR-320-3p mimics组中相对表达均上调（ P=0.001、 P=0.003），PCOS+NC组与PCOS+miR-320-3p mimics组中差异无统计学意义（ P>0.05）。 Pou5f1、 Klf4、 Ago2在三组间差异均无统计学意义（均 P>0.05）。 结论:PCOS小鼠卵母细胞中miR-320-3p低表达影响胚胎植入前的囊胚形成率和囊胚质量，PCOS卵母细胞中补偿miR-320-3p能够改善胚胎发育潜能，提高胚胎质量。

目的:研究胚胎植入前遗传学检测（preimplantation genetic testing， PGT）周期中，卵裂期（第3日）胚胎质量、囊胚活检时间、囊胚扩张程度、囊胚内细胞团（inner cell mass， ICM）评分及囊胚滋养层（trophectoderm，TE）评分对其整倍体状态的影响。方法:回顾性病例对照分析郑州大学第三附属医院生殖医学科2017年1月至2019年10月期间255个行PGT助孕周期的患者临床资料，分析囊胚相关形态学参数与整倍体状态的相关性。结果:①977枚囊胚进行活检，共937枚囊胚成功获得染色体结果（95.9%），其中整倍体396枚（42.3%），非整倍体541枚（57.7%）。②在夫妻双方有染色体异常的周期中，633枚囊胚整倍体率与女方年龄未呈现明显相关趋势，无染色体异常的周期中304枚囊胚整倍体率随着女方年龄的增加呈显著下降趋势（ P=0.000 1）。③校正女方年龄及不同周期的影响后，第6日、第7日活检囊胚整倍体率显著低于第5日活检囊胚（ OR=0.7， 95% CI=0.5~0.9， P=0.009 1； OR=0.4， 95% CI=0.1~0.6， P=0.001 2）；ICM级别为B的活检囊胚整倍体率显著低于级别为A的囊胚 （OR=0.4， 95% CI=0.3~0.7 ， P=0.000 1）；TE级别为C的活检囊胚整倍体率显著低于级别为A的囊胚（ OR=0.4， 95% CI=0.2~0.7， P=0.000 4）。但囊胚扩张程度及已经形成囊胚后第3日胚胎质量对囊胚整倍体率无显著影响。 结论:形成囊胚后第3日胚胎质量、囊胚扩张程度与囊胚整倍体状态无关，活检时间、ICM级别及TE级别与整倍体状态显著相关。

目的:探讨不同体质量指数（body mass index，BMI）对多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome，PCOS）患者体外受精-胚胎移植（ in vitro fertilization and embryo transfer，IVF-ET）临床结局的影响。 方法:回顾性队列研究分析2016年1月至2018年12月期间在郑州大学第一附属医院生殖医学中心就诊的年龄<35岁首次行IVF-ET助孕并采用卵泡期长效长方案的患者临床资料，共2982例，其中PCOS患者（PCOS组）999例，单纯因输卵管因素不孕的患者（非PCOS组）1983例，所有患者均排除其他合并症。PCOS患者再根据BMI分为超重PCOS组（24.0 kg/m 2≤BMI<28.0 kg/m 2）和正常体质量PCOS组（18.5 kg/m 2≤BMI<24.0 kg/m 2）。计算并比较各组患者的一般资料、妊娠结局、胚胎发育指标，分析BMI对妊娠结局及胚胎发育潜能的影响，同时研究新生儿出生体质量与母体BMI的相关性。 结果:第3日（day 3，D3）胚胎移植的正常体质量PCOS组优质胚胎率［67.41%（1906/2826）］、囊胚形成率［56.39%（578/1025）］、优质囊胚形成率［29.75%（305/1025）］及可利用胚胎率［62.14%（1756/2826）］均高于超重PCOS组［62.65%（1753/2798）， P<0.001；47.30%（457/966）， P<0.001；16.35%（158/966）， P<0.001；59.04%（1652/2798）， P=0.018］。第5日（day 5，D5）囊胚移植的正常体质量PCOS组总受精率［82.38%（1711/2077）］、双原核受精率［68.03%（1413/2077）］、囊胚形成率［68.90%（554/804）］、优质囊胚形成率［62.56%（503/804）］及可利用胚胎率［57.16%（802/1403）］均较超重PCOS组高［80.21%（2954/3683）， P=0.044；64.76%（2385/3683）， P=0.012；63.95%（871/1362）， P<0.001；30.32%（413/1362）， P<0.001；53.03%（1250/2357）， P=0.014］，种植率［66.67%（72/108）］、临床妊娠率［66.97%（73/109）］及流产率［9.59%（7/73）］均较超重PCOS组低［80.57%（141/175）， P=0.008；80.46%（140/174）， P=0.011；20.71%（29/140）， P=0.040］。logistic回归分析显示D5移植的超重PCOS患者的临床妊娠率（a OR=1.92，95% CI=1.049~3.515， P=0.034）及流产率（a OR=3.09，95% CI=1.209~7.915， P=0.019）分别为正常体质量PCOS组的1.92及3.09倍。Pearson相关性分析结果显示，D3、D5移植的PCOS患者及D3移植的非PCOS患者BMI与新生儿出生体质量均呈正相关（ r=0.144， P=0.013； r=0.212， P=0.004； r=0.137， P<0.001）。D5移植的超重PCOS患者组新生儿出现巨大儿的概率（a OR=5.33，95% CI=1.525~18.597， P=0.009）为正常体质量PCOS组的5.33倍。 结论:高BMI可能是影响PCOS患者胚胎质量及流产率增高的主要因素。超重或肥胖可能会使新生儿出生体质量增加，PCOS患者在行IVF助孕治疗前减重将有助于改善胚胎质量及新生儿出生体质量。

目的:探讨第3日（D3）4~5-细胞I、II及III级胚胎（4/I~5/III）囊胚的形成及移植对体外受精-胚胎移植（IVF-ET）临床结局的影响。方法:回顾性分析2016年1月至2019年2月期间在解放军联勤保障部队第901医院采用IVF-ET助孕患者共884个周期的临床资料。比较4/I~5/III组间囊胚形成差异；根据囊胚移植周期中D3卵裂胚的情况，将4/I~5/III胚胎来源的164个囊胚移植周期设为A组，247个优质胚胎来源的囊胚移植周期设为B组，比较两组间的临床结局并分析4/I~5/III组间不同细胞数和评级对临床妊娠率及流产率的影响。结果:4/I组的优质囊胚率（5.6%）高于4/II组（1.8%）（ P=0.003）及4/III组（0.6%）（ P<0.001）；5/I组优质囊胚率（8.3%）分别高于4/II组、4/III组及5/III组（1.6%）( P均<0.001)；5/II组优质囊胚率（8.4%）高于4/III组( P<0.001)。A组与B组在获卵数、成熟卵数、受精率、卵裂率、移植胚胎数、移植优质囊胚比、临床妊娠率、流产率、种植率及持续妊娠率差异均无统计学意义（ P>0.05）；A组D3优质胚胎率显著低于B组( P<0.001)；A组平均移植周期次数高于B组（ P=0.034）；4-细胞和5-细胞来源的囊胚移植临床妊娠率分别为51.6%和50.0%，流产率分别为15.2%和26.8%；I+II级与III级胚胎来源的囊胚移植临床妊娠率分别为53.6%和41.2%，流产率分别为22.4%和21.4%，组间差异均无统计学意义（ P>0.05）。 结论:4/I~5/III来源的囊胚能够获得与优质卵裂胚来源囊胚相近的临床结局；在4/I~5/III组间，细胞数和评级不会影响其囊胚的临床妊娠率及流产率，但5-细胞胚胎的囊胚形成率高于4-细胞胚胎。

目的:研究卵巢储备功能正常人群拮抗剂方案超促排卵中，人绒毛膜促性腺激素（human chorionic gonadotropin，hCG）扳机与双扳机对体外受精-胚胎移植（ in vitro fertilization and embryo transfer，IVF-ET）结局的影响。 方法:采用回顾性队列研究，分析2019年1月至2022年12月期间在四川省妇幼保健院生殖医学中心IVF-ET助孕的239例患者资料，患者卵巢储备功能正常，采用拮抗剂方案超促排卵。根据扳机方式不同分为两组，A组：重组hCG（recombinant hCG，rhCG）250 μg（ n=143）；B组：促性腺激素释放激素激动剂0.2 mg联合hCG 2 000 U进行双扳机（ n=96）。比较两组患者卵母细胞及胚胎发育情况、妊娠结局等。 结果:两组成熟卵率、正常受精率、第3天胚胎形成率、第3天优质胚胎率、囊胚形成率、优质囊胚率差异均无统计学意义（均 P>0.05）。A组的中度卵巢过度刺激综合征（ovarian hyperstimulation syndrome，OHSS）发生率为1.40%（2/143），高于B组［0（0/96）］，但差异无统计学意义（ P>0.05）。新鲜及解冻胚胎移植周期胚胎着床率和临床妊娠率差异均无统计学意义（均 P>0.05）。 结论:卵巢储备功能正常患者，双扳机与hCG扳机比较，卵母细胞、胚胎质量、妊娠结局无明显差异，双扳机似乎有减少OHSS发生的趋势。

目的:探讨齿轮状透亮致密透明带、卵周间隙小患者行卵胞质内单精子注射（intracytoplasmic sperm injection，ICSI）/补救ICSI（rescure-ICSI，Re-ICSI）妊娠结局。方法:回顾性病例对照研究2015年1月至2020年6月期间于石家庄市第四医院生殖医学中心就诊的6对夫妇共8个周期卵子透明带异常，其中5对夫妇6个周期M I卵占比≥50%（部分卵M I阻滞），1对夫妇2个周期为全部卵M I阻滞。对M II卵行ICSI或体外受精（ in vitro fertilization，IVF）短时受精，IVF短时受精完全受精失败，行Re-ICSI；对M I卵同时行ICSI/Re-ICSI。比较M II卵和M I卵、全部卵M I阻滞和部分卵M I阻滞之间ICSI/Re-ICSI受精率、退化率、卵裂率、优质胚胎率、囊胚率。 结果:37枚M II卵和65枚M I卵行ICSI/Re-ICSI，M I卵受精率、2PN受精率均低于M II卵［46.2%（30/65）比89.2%（33/37）；32.3%（21/65）比83.8%（31/37），均 P<0.001］，两组均有优质胚胎及囊胚形成；全部卵M I阻滞与部分卵M I阻滞相比，M I卵受精率、退化率、优质胚胎率及囊胚形成率差异均无统计学意义（均 P>0.05）。 结论:对透明带异常的M I卵占比高的患者行ICSI/Re-ICSI，可增加患者卵子利用率和可用胚胎。

目的:探讨移植囊胚数、质量及形成时间对<38岁女性冻融胚胎移植（frozen-thawed embryo transfer，FET）临床结局的影响。方法:回顾性队列研究分析2017年1月至2020年1月期间在中国人民解放军联勤保障部队第九〇一医院生殖中心行冻融囊胚移植且年龄<38岁女性1441个周期的临床资料。根据囊胚移植数、质量［内细胞团 （inner cell mass，ICM）、外胚滋养层细胞 （trophectoderm， TE）评分］分为单优质囊胚移植组（单优组）、双优质囊胚移植组（双优组）；再根据囊胚移植数、质量及形成时间将非优质囊胚分为双BC级囊胚移植组（双BC组）、双CB级囊胚移植组（双CB组）、BC级+CB级双囊胚移植组（BC+CB组）、单BC级囊胚移植组（单BC组）、单CB级囊胚移植组（单CB组）、第5日（day 5， D5）单BC级囊胚移植组（D5 单BC组）、D5单CB级囊胚移植组（D5 单CB组）及第6日（day 6， D6）单BC级囊胚移植组（D6 单BC组），比较各组的临床妊娠率、种植率、早期流产率、多胎妊娠率和异位妊娠率。结果:单优组的临床妊娠率、早期流产率、异位妊娠率与双优组间差异均无统计学意义（ P均>0.05），多胎妊娠率［2.96%（14/473）］则显著低于双优组［55.65%（69/124）］、双BC组［42.55%（20/47）］、双CB组［63.49%（473/745）比35.22%（31/83）］、BC+CB组［45.57%（36/79）］（ P<0.001）；单优组的临床妊娠率和种植率显著高于单CB组［63.49%（473/745）比45.59%（30/68）， 63.49% （473/745）比 45.59%（30/68）， P均=0.002］，与单BC组间差异无统计学意义（ P>0.05），各单囊胚移植组间多胎妊娠率、早期流产率、异位妊娠率差异均无统计学意义（ P均>0.05）；D5 单BC组的临床妊娠率、种植率均显著高于D6 单BC组［65.79%（50/76）比39.47%（15/38），65.79%（50/76）比 39.47%（15/38）， P均<0.001］；D5 单CB组的临床妊娠率、种植率均高于D6 单BC组，但差异无统计学意义（ P>0.05）。 结论:冻融囊胚移植周期，年龄<38岁女性应行单优质囊胚移植；无优质囊胚时，应优先选择D5 ICM评分更高的单囊胚移植，其次选择D5 TE评分更高的单囊胚移植。