为了寻找莲子心(Nelumbinis Plumula)具有心肌细胞保护活性的化学成分,本研究采用多种柱色谱技术分离和纯化莲子心的80％乙醇提取物,运用1HNMR、13C NMR等波谱技术和文献数据比对鉴定化合物结构,并对化合物进行心肌细胞保护活性筛选.从莲子心80％乙醇提取物分离纯化得到14个化合物,分别鉴定为柚皮苷(1)、山柰酚-3-O-β-D-芸香糖苷(2)、芹菜素-6-C-β-L-阿拉伯糖-8-C-β-D-葡萄糖苷(3)、木犀草素-7-O-β-D-新橙皮苷(4)、木犀草素-3'-O-β-D-葡萄糖苷(5)、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷(6)、橙皮苷(7)、异夏佛塔苷(8)、松脂素-4-O-β-D-葡萄糖苷(9)、对香豆酸-4-O-β-D-葡萄糖苷(10)、对香豆酸(11)、苯乙基6-O-α-L-呋喃阿拉伯糖基-β-D-葡萄糖苷(12)、淫羊藿次苷D1(13)、淫羊藿次苷F2(14).化合物1～6、9、11～14均为首次从莲子心中分离得到.黄酮类化合物1～8对缺氧/复氧损伤下的小鼠HL-1心肌细胞具有明显的保护作用,对小鼠HL-1-STAT3-Luc细胞中STAT3的表达也具有促进作用,且均具有剂量依赖性.

目的 建立HPLC法特征图谱结合化学计量学和一测多评法(quantitative analysis of multi-components with a single-marker method,QAMS)的方法,对北刘寄奴(Siphonostegiae Herba,SH)配方颗粒(formula granules,SHFG)进行质量评价.方法 利用 15 批北刘寄奴标准汤剂(SH standard decoctions,SHSD)建立 HPLC 特征图谱,并对指认的成分采用QAMS法测定含量.基于标准汤剂出膏率、指标成分含量及转移率,研究配方颗粒与标准汤剂的一致性,同时以特征图谱相似度评价法、聚类分析及主成分分析(principal component analysis,PCA)、QAMS法对配方颗粒进行质量评价.结果 15批标准汤剂和 8 批配方颗粒特征图谱相似度均＞0.9,确定了12 个共有峰,指认咖啡酸、夏佛塔苷、对香豆酸、阿魏酸、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷、木犀草素、芹菜素 8 个成分.聚类分析及PCA可将 15 批标准汤剂和 8 批配方颗粒分成2 类,C厂家 2 批配方颗粒(S22、S23)单独为一类.15 批北刘寄奴标准汤剂出膏率为 11.70%～21.73%,咖啡酸、夏佛塔苷、对香豆酸、阿魏酸、木犀草素、芹菜素、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷质量分数分别为 0.18～0.60、0.21～3.83、0.64～2.36、0.05～1.03、0.54～2.52、0.23～0.63、8.97～24.62、5.78～16.80 mg/g,其从饮片到标准汤剂转移率分别为 23.28%～42.17%、26.73%～47.73%、21.98%～39.62%、24.00%～42.48%、8.85%～14.88%、18.54%～30.86%、19.12%～30.56%、26.87%～44.35%.A厂家 3 批北刘寄奴配方颗粒(S16～S18)出膏率、指标成分含量及转移率与同批次饮片制备的标准汤剂接近,且均在质量标准规定范围内;B、C厂家 5 批北刘寄奴配方颗粒(S19～S23)8 种指标成分含量均在标准汤剂按制成量折算后含量范围内.结论 所建立的特征图谱结合化学计量学及QAMS法,可系统全面地评价北刘寄奴配方颗粒的质量,为北刘寄奴配方颗粒的工艺研究、质量控制以及临床应用提供参考.

目的:建立同时测定满山红疏肝颗粒中夏佛塔苷、田基黄苷、异槲皮苷、槲皮苷和原儿茶酸5种成分的含量的方法.方法:研究采用Agilent Zorbax SB-Aq-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱,体积流量0.8 mL/min,柱温30℃,检测波长为255 nm.结果:夏佛塔苷、田基黄苷、异槲皮苷、槲皮苷和原儿茶酸分别在浓度为0.097 6～1.171 2 μg/mL、0.083 3～0.999 6 μg/mL、0.046 9～0.562 8 μg/mL、0.037 4～0.448 8 μg/mL、0.011 0～0.132 0 μg/mL范围内线性关系良好,有效成分在24h内稳定性良好,重现性好,平均加样回收率分别为100.8%、100.8%,101.7%、101.3%、101.1%,RSD分别为1.1%、1.0%、0.7%、1.1%、1.3%.6批满山红疏肝颗粒中夏佛塔苷的含量在0.886 9～0.903 1 mg/g之间,田基黄苷的含量在0.191 7～0.203 4 mg/g之间,异槲皮苷的含量在0.082 7～0.105 2 mg/g之间,槲皮苷的含量在0.009 8～0.014 0 mg/g之间,原儿茶酸的含量在0.065 5～0.069 4 mg/g之间.结论:所建立的方法简便准确、专属性强、重现性好,为满山红疏肝颗粒建立了有效可行的质量控制体系.

目的:建立五虎口服液指纹图谱及多成分含量测定方法.方法:采用迪马钻石一代C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱;流速为 0.8 mL/min;检测波长为 254 nm;柱温为 35℃,建立 21 批五虎口服液指纹图谱,测定其中 8 个成分的含量.结果:21 批五虎口服液指纹图谱共标记了 18 个共有峰,指认了羟基红花黄色素A、夏佛塔苷、异夏佛塔苷、西红花苷、升麻苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、欧前胡素、异欧前胡素 8 个成分,样品相似度>0.900;经过方法学验证,上述 8 个成分均在一定浓度范围内线性关系良好,r>0.9990;精密度、重复性、稳定性试验结果均良好;21 批样品中上述 8 个成分的平均含量分别为 0.0573、0.0335、0.0322、0.0662、0.5041、0.7151、0.0464、0.0108 mg/mL.结论:该研究建立的方法可用于评价五虎口服液的质量.

目的 建立复方石淋通片的质量评价方法.方法 色谱柱为Waters Sunfire C18 柱(200 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.17%磷酸水溶液(梯度洗脱),流速为 0.9 mL/min,检测波长分别为 327 nm(绿原酸、咖啡酸),334 nm(夏佛塔苷、异夏佛塔苷),240 nm(芒果苷、马钱苷),柱温为 35℃,进样量为 10μL.以夏佛塔苷峰为参照峰,利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012A版)建立10 批样品的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,标定、指认共有峰,并进行相似度评价,并采用HPLC法测定 6 个成分的含量.采用聚类分析和主成分分析对 10 批样品进行质量评价.结果 共标定 21 个共有峰,指认出其中 6 个,分别为夏佛塔苷、异夏佛塔苷、绿原酸、咖啡酸、马钱苷、芒果苷;相似度为 0.979～0.996.上述 6 个成分质量浓度分别在 13.96～279.3μg/mL、5.468～109.4μg/mL、10.07～201.3 μg/mL、2.762～55.24 μg/mL、5.390～107.8 μg/mL、5.252～105.0 μg/mL 范围内与峰面积线性关系良好(r>0.999 0);精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均小于 2.0%;平均加样回收率分别为 100.00%,98.43%,99.91%,98.52%,99.35%,99.08%,RSD为 0.30%～1.14%(n = 6).10 批样品中上述 6 个成分含量分别为 1.595～1.699 mg/g、0.5811～0.6024 mg/g、1.116～1.217 mg/g、0.299 4～0.310 5 mg/g、0.6022～0.6142 mg/g、0.6017～0.6245 mg/g.10批样品共聚为 3类,主成分 1-3是影响复方石淋通片质量评价的主要因子.结论 所建立的方法结果准确,重复性和稳定性好,特征性强,可用于复方石淋通片的质量控制.

目的 建立肾石通颗粒中广金钱草的掺伪检测方法.方法 以常见混伪品广金钱草中夏佛塔苷为特征性成分,采用高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-PDA)法进行筛查与含量测定,色谱柱为Symmetry C18柱(250 mm × 4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-0.1％磷酸溶液(10∶90,V/V),流速为1.0mL/min,检测波长为340 nm,柱温为35℃.采用液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)法进行确证试验,色谱柱为Ultimate LP-C18柱(100 mm × 2.1 mm,1.8μm),流动相为乙腈-10 mmol/L乙酸铵溶液(梯度洗脱),流速为0.2mL/min,柱温为30℃;电喷雾负离子多反应监测模式,毛细管电压为3.5kV,鞘气流速为11 L/min,辅助气流速为7L/min,脱溶剂温度为300 ℃,离子传输管温度为350 ℃,以质荷比(m/z)563.0 → 353.0和563.0→ 383.0为特征离子对,碰撞能量为38 V和32 V.结果 夏佛塔苷进样量在0.030 8～0.615 5 μg范围内与峰面积积分值线性关系良好(R2=0.999 4,n=6);精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均低于2.0％(n=6);加样回收率为98.57％,RSD为1.03％(n=6).222批次样品中,2批次样品检出并确证含有夏佛塔苷,含量分别为40.83,45.62 μg/g.结论 该方法重复性和稳定性好、结果准确,可作为肾石通颗粒中广金钱草掺伪投料的检测方法.

目的 采用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱联用(UPLC-Q-TOF-MS/MS)技术对腰康宁汤中化学成分进行快速鉴定.方法 采用ACQUITY UPLC BEH C18 色谱柱(150 mm×2.1 mm,1.7 μm),流动相为0.2%甲酸水溶液-甲醇,梯度洗脱,流速:0.5 mL·min-1,柱温:40℃,进样量:3 μL;电子喷雾离子源,在正、负离子模式下对色谱流出物质进行质谱检测.结果 通过与对照品对照和结合文献,从腰康宁汤中鉴定出山奈苷、宝藿苷Ⅰ、葛根素、毛蕊异黄酮苷、芍药苷、夏佛塔苷、芒柄花苷、丹酚酸B、二十八烷酸、2-乙氧羰基-5,7-二羟基-4-甲氧基异黄酮 10 种成分.结论 建立的定性分析方法能快速、系统地分析腰康宁汤中的化学成分,为该方的质量控制及药效物质基础研究提供了理论基础.

目的 建立同时测定结石通片中 7 种成分含量的一测多评(QAMS)法.方法 采用高效液相色谱法,色谱柱为Waters SunFire C18 柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.15%甲酸水溶液(梯度洗脱),流速为 1.0 mL/min,检测波长分别为 330 nm(夏佛塔苷、异夏佛塔苷、异牡荆苷、绿原酸、芒果苷和大车前苷)和 210 nm(茯苓酸),柱温为 35℃,进样量为 10μL.以绿原酸为内参物,计算其他 6 种成分的相对校正因子,测定含量并与外标法测定结果比较.结果 夏佛塔苷、异夏佛塔苷、异牡荆苷、绿原酸、芒果苷、大车前苷和茯苓酸质量浓度分别在 1.54～38.61μg/mL、0.53～13.14μg/mL、1.17～29.24μg/mL、2.05～51.28μg/mL、1.61～40.37μg/mL、1.16～29.03μg/mL、0.92～23.09μg/mL范围内与峰面积线性关系良好(r>0.9991,n = 6);检测限分别为 0.13,0.06,0.11,0.19,0.15,0.10,0.08 μg/mL,定量限分别为 0.46,0.19,0.37,0.65,0.48,0.29,0.24 μg/mL,精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均小于 2.0%(n = 6);平均加样回收率分别为 99.84%,98.45%,98.76%,100.35%,99.07%,99.13%,99.29%,RSD分别为 1.05%,0.68%,0.98%,0.84%,1.11%,0.54%,1.26%(n = 6).夏佛塔苷、异夏佛塔苷、异牡荆苷、芒果苷、大车前苷、茯苓酸的相对校正因子分别为 1.325,1.684,1.944,1.957,1.251,1.342;在不同型号仪器(不同色谱柱)、柱温条件下测定结果的RSD均小于2.0%.QAMS法与外标法 7 种成分含量的测定结果无显著差异(P>0.05).结论 所建立的QAMS法操作简便、结果准确,可用于结石通片多指标成分的质量控制.

通过建立不同产地地胆草药材UPLC指纹图谱及13种主要成分的含量测定方法,并进行主要成分体外抑癌活性研究,为预测地胆草质量标志物(Q-marker)提供科学依据.色谱柱为Waters CORTECS UPLC C18(2.1 mm×150 mm,1.6μm),流动相为乙腈-0.1％甲酸溶液,梯度洗脱,柱温30℃,流速0.2 mL·min-1,进样量1μL,检测波长240 nm.以《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012版)拟合地胆草UPLC指纹图谱,确定共有峰,评价相似度,指认并测定主要成分的含量,并通过CCK-8实验探究主要成分抑制肺癌细胞增殖活性.结果显示,在所建立的地胆草UPLC指纹图谱中确定了35个共有峰,指认了新绿原酸(峰1)、绿原酸(峰2)、隐绿原酸(峰3)、咖啡酸(峰4)、夏佛塔苷(峰6)、木犀草苷(峰9)、异绿原酸B(峰10)、异绿原酸A(峰12)、异绿原酸C(峰18)、去氧地胆草素(峰28)、异去氧苦地胆素(峰29)、异地胆草种内酯(峰31)、地胆草种内酯(峰32)共13种主要成分并建立了定量分析方法.体外抑癌活性研究结果显示,去氧地胆草素、异去氧苦地胆素、异地胆草种内酯和地胆草种内酯在浓度为10μmol·L-1时,抑制肺癌细胞增殖率大于80％,高于阳性药紫杉醇.结果表明,所建立的地胆草指纹图谱特征性强,含量测定的方法准确、稳定,可为地胆草的质量标准研究提供参考.地胆草中4种倍半萜内酯类化合物具有显著抑癌活性,可作为地胆草的质量标志物.

研究不同遮荫度对宽叶山蒿生长、产量和品质的影响,为宽叶山蒿人工栽培提供参考依据.以生长一致的宽叶山蒿幼苗为试验材料,采用黑色遮阳网,设置 4 个遮荫水平(0、55%、85%、95%),进行遮荫处理,测农艺性状指标,产量,出绒率,绒总灰分,绒燃烧热解质量特性,挥发性、黄酮类、酚酸类成分含量.结果表明,宽叶山蒿的茎粗、叶宽、五叶间距、分枝数、产量在遮荫条件下显著降低,株高、叶长、叶片数、叶绿素含量和出绒率随遮荫度增加先增高后降低.自然光下叶绒燃烧性能优于中度遮荫下和重度遮荫下.桉油精的含量随遮荫度增加先增加后减少,葎草烯含量与遮荫度呈负相关,其他主要特征挥发性成分在各遮荫条件下无显著性差异;新绿原酸、隐绿原酸、异夏佛塔苷和异绿原酸B的含量与遮荫度呈负相关,绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸C的含量随遮荫度增加先减少后增加.综上所述,宽叶山蒿是喜光植物,遮荫会大幅降低产量、内在成分含量和叶绒燃烧性能,这是野外宽叶山蒿主要分布在中高山的林缘、疏林、路边和荒地草丛的主要原因;进行宽叶山蒿人工驯化栽培,宜选择光照充足地块.