磁分离是从生物样本中富集特定目标物的常用方法.传统特异性磁分离方法一般通过将抗体与磁珠偶联获得免疫磁珠的方式用于特定目标物的捕获,但由于抗体有成本高、捕获目标物后不易释放等缺点,免疫磁珠难以满足众多研究领域对同时满足目标物大批量、高特异性富集的需求.核酸适配体同抗体一样具备目标物高特异性捕获的能力,相较抗体具有制备成本低、结构简单和化学稳定性高等优点,更适合用来大批量、高特异性富集特定目标物,因此在本研究中,本文利用石墨烯对单链和双链核酸的吸附能力不同的特性,以CD63适配体为例设计了一套可以将适配体展示于石墨烯表面并用于捕获、富集和释放目标物的方法.该设计主要包括2个单元,一是可以贴附于石墨烯表面并将CD63适配体展示于石墨烯外的双链寡核苷酸支架,二是采用与支架足部序列互补的单链寡核苷酸,将所捕获的目标物从石墨烯表面解吸附.本研究首先以氧化石墨烯(GO)纸为石墨烯界面,通过对支架或CD63蛋白等进行荧光标记,并对比支架释放前后及CD63蛋白捕获前后GO纸表面荧光强度变化表示其支架释放效果与CD63蛋白捕释情况,随后应用氨基修饰的石墨烯壳铁氮磁珠搭载CD63适配体双链支架,用于捕获细胞裂解液中CD63蛋白.结果表明,该支架可以将适配体展示于石墨烯表面捕获CD63蛋白并可以可控释放,使用挑选的改性石墨烯磁珠搭载该适配体双链支架,可以用于细胞裂解液中CD63蛋白的捕获.该方法有望实现多种蛋白质的特异性富集或通过捕获外泌体膜蛋白而富集外泌体等多种用途.

目的 建立药用明胶空心胶囊中铬的全自动石墨消解-石墨炉原子吸收分光光度快速测定方法.方法 用高纯氮气吹除空心胶囊试样中的残留内容物,准确称取0.500 g置于50 ml消解罐中,加入8.00 ml硝酸,全自动石墨消解仪消解约3 h,取上清液应用石墨炉原子吸收分光光度法测定铬含量(测定波长为357.9 nm,灯电流为25 mA,狭缝宽度为0.7 nm,进样体积为20 μ1).结果 铬元素在1.00～30.0 μg/L范围内线性关系良好,r＞0.998.方法的检出限为0.10mg/kg,平均回收率在99.3％～102.2％之间,RSD为2.7％～4.8％.结论 该方法操作简便、准确、快速,适用于药用空心胶囊中铬元素的大批量测定.

目的:通过研究证候的分类及证候名称组成要素的多层次表示方法，实现计算机对中医证候名称的批量处理，从而应用于中医智能辅助诊断系统的研究。方法:在中医理论指导下，结合证素辨证、证候要素学说，对证候要素进行更细粒度的拆分，提出证候层次划分方法和证候要素多层次表示方法，并通过对妇科月经病、不孕症的中医证候名称进行人工分析，以验证证候要素多层次表示方法的合理性。基于证候要素多层次表示方法，运用基于模式匹配的模式抽取方法，形成计算机批量处理证候要素的提取方法，并通过对《中医临床诊疗术语证候部分》证候名称的批量处理，验证计算机批量处理方法的准确性。结果:在中医理论指导下，将证候名称组成要素划分为病位要素、病性要素(包括基本物质、病因、病理状态)、连接词的两层五类的结构，基于此构建出证候拆分流程。月经病、不孕症中医证候名称的人工分析结果显示，所有证候名称均可被拆分为1个或多个病位要素、病性要素、连接词。通过计算机批量处理《中医临床诊疗术语证候部分》证候分类结果显示，计算机批量处理的准确率为71.4%。结论:构建的证候要素多层次表示方法为计算机大批量处理数据提供了理论框架，并提高了数据处理效率和准确率，为辨证模型训练数据集的构建提供了理论依据，为中医辨证推理模型提供支撑，可应用于中医智能辅助诊断系统的研究。

目的:建立用过硫酸铵作为消解试剂的氢化物发生-原子荧光测定尿砷含量的方法（以下称本方法）。方法:将待测尿样经过硫酸铵在管式电热自控恒温消解仪（60孔）上加热消解后，以5%盐酸溶液作为反应介质和载流，1.5%硼氢化钾溶液作为还原剂，用四道原子荧光光度计测定砷含量。制备0~10 μg/L的砷标准溶液测定本方法的标准曲线，从检出限、线性范围、相关系数、精密度、尿砷质控样品检测、加标回收实验对本方法进行评价，并与《尿中砷的测定　氢化物发生原子荧光法》（WS/T 474-2015，简称标准法）做比对实验。结果:尿样取样量为1 ml时，本方法（1.5 mol/L过硫酸铵1.0 ml消解）最低检出限为0.03 μg/L；在0~10 μg/L砷含量范围内，砷含量与荧光强度间线性关系良好，相关系数（ r）均为0.999 9。3份不同浓度尿样的平行测定相对标准偏差（ RSD）分别为1.00%、0.89%、0.49%。对尿砷质控样品进行测定，检测结果均在公议值范围内；总平均回收率为102.29%，回收率范围为92.10%~108.15%。本方法与标准法对20份尿样的测定结果比较，差异无统计学意义（ t = - 0.40， P > 0.05）。 结论:以过硫酸铵为消解试剂的氢化物发生-原子荧光法测定尿砷含量，检出限低、精密度好、准确度高，取样量和消解试剂用量较少，操作简单，样品前处理有害气体产生少，适用于大批量尿样砷含量的快速测定。

目的:验证电感耦合等离子体-质谱法（ICP-MS）对血清中碘含量的测定，并评价ICP-MS法与砷铈催化分光光度法测定血清碘的一致性。方法:采用ICP-MS法测定血清中的碘含量，以铼（ 187Re）作为内标，优化各项参数；采用ICP-MS法和砷铈催化分光光度法同时测定88份血清样本，方法学评价指标包括标准曲线的测定范围、最低检出限、精密度、准确度。并且通过组间相关分析、组内相关系数（ICC）分析、Passing-Bablok回归和Bland-Altman偏差图分析评价两种方法的一致性。 结果:ICP-MS方法标准曲线的线性范围为0 ~ 300 μg/L，碘浓度值与碘响应值之间呈现良好的线性相关关系，相关系数范围为0.999 8 ~ 0.999 9；最低检出限为1.96 μg/L；血清样测定的批内和批间精密度实验的相对标准偏差（ RSD）范围分别为0.2% ~ 1.4%、0.4% ~ 1.8%；加标回收率范围为90.44% ~ 108.71%。88份血清样相关分析的结果显示，两种方法测定结果显著相关（ r = 0.934， P < 0.05）；ICC为0.932；Passing-Bablok回归结果显示,两种方法的偏倚差异无统计学意义（ P > 0.05）；Bland-Altman图提示两种方法的测定结果具有一致性。 结论:ICP-MS测定方法最低检出限低，精密度和准确度高，简便快速且易于操作，适用于大批量血清样本中碘含量的检测；ICP-MS法与砷铈催化分光光度法测定血清碘结果具有一致性。

目的:建立一种可单管同时检测新型冠状病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒和人源基因内标的一步法多重巢式荧光逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法。方法:收集2020年2月至2022年2月广州白云机场海关入境人员新型冠状病毒核酸阳性样本30份和336份排查样本，以及2020年发生新型冠状病毒肺炎疫情前3年期间同样来自广州白云机场海关入境人员的其他呼吸道病原体阳性样本64份和呼吸疾病国家重点实验室提供的呼吸道病原体阳性毒株7份。选取新型冠状病毒 ORF和N基因，以及甲、乙型流感病毒M基因的核苷酸保守区域，设计和筛选出多重巢式荧光PCR引物和探针组合，同时引入人源基因内标的巢式扩增引物和探针，建立一套多重巢式荧光RT-PCR检测方法，应用制备的假病毒阳性质控品和样本盘，评估方法的敏感度、特异度，并进行临床样本应用性验证。结果:所建立的一步法多重巢式荧光RT-PCR方法可特异性检出新型冠状病毒和甲、乙型流感病毒，新型冠状病毒的最低检出限约为125拷贝/ml，甲、乙型流感病毒的最低检出限约为250拷贝/ml；检测101份各类呼吸道病原体阳性样本，显示新型冠状病毒和甲、乙型流感病毒的检测敏感度分别为96.67%、92.86%和96.15%，三者的特异度均为100%，超过300份临床样本的应用性检测中，未见假阳性检出。结论:建立了一套新型冠状病毒、甲、乙型流感病毒和人源基因内标的一步法多重巢式荧光RT-PCR方法，该方法具有良好的灵敏度和特异性，可用于新型冠状病毒和甲、乙型流感病毒的大批量样本快速筛查。

目的:探讨目前国内外航天员宇宙辐射损伤评估的主要研究进展，并展望未来研究方向，为今后宇宙辐射损伤评估的深入研究提供思路。资料来源与选择:国内外该领域的相关研究文献。资料引用:国内外文献资料52篇。资料综合:随着航天事业的飞速发展，航天员的宇宙辐射损伤评估已成为航天医学研究的重点，目前国内外在辐射剂量检测仪器、辐射预估计算技术和辐射生物剂量评估3个方面均有新的尝试和探索。上述3类辐射检测评估技术各有其优势与特点，综合运用能够满足短距离短时间的载人航天飞行任务的需求，但各项技术又有其局限性，例如抗干扰能力差、检测性能不稳，无法快速准确完成大批量标本检测等。结论:当前的辐射剂量检测仪器、辐射预估计算技术，以及辐射生物学效应评估技术的综合运用，可以大致满足辐射剂量估算需求。但针对航天中、长期飞行及深部空间飞行任务，现有的辐射评估技术储备远远不能满足载人航天后续发展的需要，仍需深入探索快速、稳定、精确、高通量的辐射剂量评估手段。

目的:建立尿氟含量全自动电位滴定仪测定方法（简称本方法）。方法:采用全自动电位滴定仪测定人尿中氟化物含量；方法学分析本方法的线性范围、检测限、精密度和准确度（质控样品检测和实际样品加标回收实验）。采用本方法与国家卫生行业标准《尿中氟化物测定离子选择电极法》（WS/T 89-2015，简称标准方法）检测实际尿样（ n = 33），并对结果进行对比分析。 结果:本方法尿氟含量标准曲线线性范围为0.1 ~ 10.0 mg/L；线性相关系数（ r）值范围为0.999 6 ～ 0.999 9；最低尿氟质量浓度检出限为0.01 mg/L（取样量为10.0 ml）；精密度实验显示，相对标准偏差（ RSD）范围为0.00% ~ 3.45%；质控样品测定结果均在公议值范围内；加标回收实验显示，回收率范围为100.0% ~ 104.4%，总平均回收率为102.1%；方法对比实验显示，本方法与标准方法检测结果比较，差异无统计学意义（ t = - 0.90， P = 0.375）。 结论:成功建立本方法，实现了取样后试剂加入、检测过程全自动化，具有线性范围宽、检出限低、精密度好、准确性高等特点，适合大批量尿样氟含量的快速自动化测定。

目的:建立人尿中碘含量的酶标仪自动比色测定方法。方法:采用酶标仪自动比色测定法测定人尿中碘含量，对该方法的线性范围、检测限、精密度进行验证；与国家卫生行业标准砷铈催化分光光度法的尿碘测定结果进行比较分析。结果:酶标仪自动比色测定法碘标准曲线的线性范围为0 ~ 300 μg/L，线性相关系数（ r）范围为- 0.999 5 ~ - 0.999 2，检出限为6.5 μg/L；低、中、高3种碘浓度尿样的相对标准偏差（ RSD）均< 3%，回收率范围为92.2% ~ 109.2%，总平均回收率为99.6%。酶标仪自动比色测定法与砷铈催化分光光度法对40份尿样的尿碘含量检测结果比较，差异无统计学意义（ t = 1.347， P > 0.05）；酶标仪自动比色测定法的检测速率是砷铈催化分光光度法的7.5倍。 结论:酶标仪自动比色测定法应用于尿碘含量测定具有合理的检测线性范围，精密度好，准确度高；且自动化快速比色提高了分析速度，适用于大批量样本检测。

根据诱导糖尿病视网膜病变（DR）的实验方法不同以及观察到的视网膜病变特点不同，DR动物模型可分为药物或食物诱发性模型、氧诱导视网膜病变（OIR）模型、自发遗传性模型和基因模型。诱发性模型是目前最常用于DR研究的动物模型，具有耗时短、成本低、方法简便、重复性较好和短期内可批量造模等优点；但其使用的药物对实验动物的全身各器官均有一定的毒副作用，动物死亡风险较大。OIR模型的表型重复性高、稳定性高且成本相对较低，但由于OIR小鼠缺乏全身性高血糖的代谢改变，此模型无法准确反映高血糖状态下由于代谢情况对视网膜病变的影响。自发遗传性模型病理改变较为稳定，但由于价格昂贵，且同系繁殖和单基因遗传会使其糖尿病的遗传同质性与人类有差异，限制了该模型的广泛应用。基因模型的优点是病因明确，但对技术、实验操作和实验仪器要求高，成本高不适合大批量造模，因此在应用中受限。研究者应从特定的研究目的、观察指标、实验条件和经费等多方面综合考量，结合DR模型的特点和局限性，从而选择最佳的动物模型。此外，仍需开发能够更精确模拟DR的动物模型，以扩展对DR机制的探索，为研发可行的预防和治疗方法提供更加有效的工具。