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外周血中5-羟色胺通过诱导中性粒细胞胞外诱捕网生成加重脓毒症小鼠肺损伤
编辑人员丨1周前
目的:观察外周5-羟色胺(5-HT)诱导中性粒细胞胞外诱捕网(NET)的生成对脓毒症小鼠肺损伤的影响。方法:选择6~8周龄野生型(WT型)和Tph1基因敲除(Tph1 KO)C57小鼠,按随机数字表法分为WT小鼠假手术组、WT小鼠脓毒症组和Tph1 KO小鼠假手术组、Tph1 KO小鼠脓毒症组。假手术组小鼠接受假手术处理(仅打开腹腔翻动盲肠但不结扎和穿刺,然后关腹);脓毒症组小鼠接受盲肠结扎穿孔术(CLP)建立脓毒症模型。术后12 h处死小鼠,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)含量;同时收集小鼠肺组织标本,光镜下观察肺组织病理学改变,采用免疫荧光显微镜观察小鼠肺组织中NET生成情况。 结果:病理学结果提示:假手术组小鼠肺组织结构完好,未见渗出;而脓毒症组小鼠肺泡结构破坏,肺泡腔内可见明显渗出,肺泡壁增厚并伴有大量炎性细胞浸润,且WT小鼠脓毒症组肺损伤程度较Tph1 KO小鼠脓毒症组严重。ELISA结果显示:不同品系假手术组小鼠BALF中TNF-α和IL-6含量比较差异无统计学意义;而脓毒症组小鼠BALF中TNF-α和IL-6含量均较假手术组明显升高〔WT小鼠:TNF-α(μg/L)为158.20±28.46比14.00±3.28,IL-6(μg/L)为304.98±21.78比57.70±12.30;Tph1 KO小鼠:TNF-α(μg/L)为85.88±20.13比14.95±1.53,IL-6(μg/L)为169.50±45.61比55.05±12.68,均 P<0.01〕,且WT小鼠脓毒症组上述指标水平均明显高于Tph1 KO小鼠脓毒症组〔TNF-α(μg/L):158.20±28.46比85.88±20.13,IL-6(μg /L):304.98±21.78比169.50±45.61,均 P<0.01〕。免疫荧光染色显示:假手术组小鼠肺脏中均检测到极少量的NET生成;而脓毒症组小鼠肺组织中均检测到大量的NET生成,明显高于假手术组〔WT小鼠:(34.75±7.27)%比(1.75±0.96)%,Tph1 KO小鼠:(14.25±5.74)%比(2.50±1.29)%,均 P<0.01〕,且WT小鼠脓毒症组小鼠肺脏组织中NET生成量较Tph1 KO小鼠脓毒症组明显增多〔(34.75±7.27)%比(14.25±5.74)%, P<0.01〕。 结论:脓毒症时,小鼠肺组织中炎性因子产生增加导致肺损伤,其机制与外周5-HT介导的肺组织中NET的生成增加有关;抑制外周血中5-HT的产生可有效减少肺组织中NET生成,从而减轻肺损伤。
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编辑人员丨1周前
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中性粒细胞胞外诱捕网在重症脑静脉窦血栓患者中的临床特征及其对急性期、亚急性期患者的预后价值研究
编辑人员丨1周前
目的:探讨中性粒细胞胞外诱捕网(NET)在重症脑静脉窦血栓(CVST)患者中的临床特征及其对急性期、亚急性期患者的预后价值。方法:本研究为回顾性病例系列研究。回顾性分析2019年6月至2022年6月在天津市环湖医院神经外科接受血管内治疗的52例重症CVST患者的临床和病理学资料。男性20例,女性32例,年龄(40.1±13.6)岁(范围:18~66岁)。纳入同期45名健康体检者作为对照组。CVST患者术前均行高分辨MRI对血栓进行分期,根据分期将患者分为急性组(11例)、亚急性组(28例)和慢性组(13例),并经血管内治疗获取血栓标本,经免疫荧光染色对比不同分期患者外周血NET标志物[瓜氨酸化组蛋白H3(CitH3)、髓过氧化物酶-DNA复合物(MPO-DNA)、中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)]的荧光强度,并采用ELISA测定患者外周血附着蛋白水平。采用Spearman秩相关分析法分析急性、亚急性组患者外周血中不同NET标志物与静脉窦内血栓体积、治疗后静脉窦再通程度、出院时改良Rankin量表(mRS)评分的相关性;通过绘制受试者工作特征(ROC)曲线并计算曲线下面积(AUC)分析不同NET标志物预测重症脑静脉窦血栓患者预后的准确性。结果:免疫荧光染色和ELISA实验结果显示,对照组外周血中未见NET结构形成,CVST患者外周血中CitH3、MPO-DNA、NE水平均升高,其中急性期组最高,亚急性组次之,慢性组最低。Spearman相关分析结果显示,急性组、亚急性组患者外周血CitH3、MPO-DNA、NE水平均与血栓体积及患者出院时mRS评分成正相关( P值均<0.05)。静脉窦完全再通患者外周血CitH3、MPO-DNA水平均低于静脉窦部分再通患者( P值均<0.01)。ROC曲线分析结果显示,MPO-DNA、NE对CVST患者预后无预测能力( P值分别为0.614、0.324),CitH3的AUC为0.800(95% CI:0.638~0.962, P=0.032),最佳截点值为13.5 μg /L,灵敏度为100%,特异度为58.8%。 结论:CVST患者体内有大量的NET形成,外周血NET含量高的急性期、亚急性期重症CVST患者治疗后静脉窦完全再通率低,神经功能恢复差。CitH3水平对急性期、亚急性期重症CVST患者有一定预后价值。
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编辑人员丨1周前
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中性粒细胞胞外陷阱在脓毒症作用机制中的研究进展
编辑人员丨1周前
在脓毒症中,入侵的病原体可以引起机体免疫失调,从而形成一种以持续过度炎症和免疫抑制为特征的病理综合征 [1]。主要表现为淋巴细胞减少和未成熟中性粒细胞增多 [2]。在过去40年里,严重脓毒症的发病率大幅增加 [3]。美国的一项研究发现,2017年全球脓毒症发病率估计为4870万例,与脓毒症相关的死亡人数为1.1亿人,占全球死亡人数的19.7% [4],降低脓毒症发病率及病死率并改善患者的长期预后,是急危重症医学面临的一大挑战 [5]。近年来,越来越多的研究提示NETs在脓毒症及其相关的功能障碍中发挥着重要的作用。NETs是一把双刃剑,一方面具有杀菌活性,局限感染灶,当机体被细菌、真菌等侵入时,这些胞外结构能够诱捕致病微生物,防止其扩散,并保证高浓度的局部抗菌药物降解毒力因子,使捕获及杀灭病原微生物变得容易 [6]。但是目前在临床研究中表明,NETs本身含有大量蛋白酶和抗菌肽以及组蛋白,可以直接损伤内皮细胞和上皮细胞。同时NETs的形成,也伴随着大量胞内和核内自身抗原的暴露,当NETs大量形成或清除不及时,可诱导机体产生众多的自身抗体。这些抗体一旦被激活,往往表现出超敏表型,在局部和全身发挥有害作用 [7],NETs控制病原的积极作用被促炎作用所抵消。不受管制的NETs对脓毒症诱导的多器官损害有显著影响,包括动脉低血压、低氧血症、凝血功能障碍、肾脏、神经系统和肝功能障碍。针对NETs的过度产生和不恰当的分解的调节在对抗脓毒症引起的多器官衰竭方面具有重要的治疗价值 [8]。因此,干预NETs的过度释放将会有效地预防脓毒症中与NETs有关的器官损伤 [9]。
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编辑人员丨1周前
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中性粒细胞外诱捕网和重症新型冠状病毒肺炎关系的研究进展
编辑人员丨1周前
新型冠状病毒肺炎(COVID-19)是由严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染导致的传染性较强的急性呼吸道疾病。该病临床表现轻重不一,轻症可仅表现为轻度的上呼吸道感染的症状,严重者可蔓延至下呼吸道,甚至出现危及生命的并发症,如急性呼吸窘迫综合征、败血症性休克、多脏器衰竭等。目前,COVID-19发病机制尚不十分明确,但是有病理研究显示在COVID-19患者肺、肾、肝组织中有大量的中性粒细胞外诱捕网(NETs),因此猜测NETs可能参与到COVID-19的病情进展中。本文就NETs在重症COVID-19中的研究进展作一综述。
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编辑人员丨1周前
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松墨天牛成虫卵巢发育过程及引诱剂诱集雌虫发育状态
编辑人员丨2024/6/1
[目的]探究松墨天牛Monochamus alternatus雌成虫卵巢发育过程,从日龄的角度对松墨天牛卵巢发育进行分级,并且判断引诱剂野外诱捕雌成虫的发育状态,为松墨天牛高效防控提供参考.[方法]对达到0,5,10,15,20,30,40和15日龄交配前后的松墨天牛雌成虫以及引诱剂诱集雌成虫进行生物解剖,观察卵巢发育状态.[结果]松墨天牛雌成虫卵巢发育过程分为5级:发育前期(0-5日龄):卵巢管透明纤细,无卵黄沉积;卵黄沉淀期(5-15日龄):卵巢管内含有少数乳白色和淡黄色未成熟的卵粒;卵巢成熟期(15-20日龄):卵巢管内包含大量完全成熟的卵粒,呈长纺锤形,黄色饱满有光泽;产卵盛期(20-40日龄):输卵管萼中堆满成熟卵粒,中输卵管和侧输卵管中存在待产的卵粒;衰老期(≥40日龄):卵巢管、输卵管萼和输卵管逐渐萎缩.交配后的雌成虫能够产生受精卵,输卵管萼膨大、形态清晰;未交配的雌成虫无法产生受精卵,卵粒堆积在输卵管中无法产出,输卵管萼未分化完全、形态不清晰.野外诱集结果显示,诱集的不同 日龄的雌成虫量具有显著性差异,其中处于产卵盛期的雌成虫占比最多,占总量的54.90%±5.50%;卵巢成熟期、衰老期和卵黄沉淀期的雌成虫占比较少,分别占总量的31.37%±5.52%,11.76%±1.54%和1.96%±0.51%;没有诱集到发育前期的雌成虫.[结论]松墨天牛雌成虫发育至15-20日龄达到性成熟;交配行为能够促进松墨天牛雌成虫卵巢发育.引诱剂可以诱捕到大量刚性成熟的松墨天牛成虫,对于减少松墨天牛产卵量,降低下一代发生基数,降低松材线虫Bursaphelenchus xylophilus传播几率具有积极意义.
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编辑人员丨2024/6/1
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针灸对大鼠呼吸机相关性肺炎中性粒细胞归巢及胞外诱捕网的影响
编辑人员丨2023/11/4
目的:探讨中性粒细胞归巢及胞外诱捕网在大鼠呼吸机相关性肺炎(VAP)中的发病机制及针灸治疗作用。方法:将30只Sprague-Dawley大鼠分为对照组、模型组、针灸组、针灸+ CXCR4抑制剂组、针灸+中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)抑制剂组,每组6只。对照组大鼠仅予气管暴露,保留自主呼吸;模型组大鼠麻醉后暴露气管并向气管中注入肺炎克雷伯杆菌;72 h后行经口气管插管接小动物呼吸机,每30分钟行2 ~ 3次大潮气量通气,每天连续通气5 h,持续2 d;针灸组大鼠于造模成功30 min后行针灸治疗;针灸+ CXCR4抑制剂组大鼠于第1天注射菌液前0.5 h按体质量以2.5 mg/kg的剂量腹腔注射CXCR4抑制剂;针灸+ NETs抑制剂组大鼠于机械通气前0.5 ~ 1.0 h按体质量0.8 μM/290 ~ 340 g的剂量鞘内注射NETs抑制剂。采用流式细胞术检测大鼠肺组织中性粒细胞变化趋势,苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织病理变化,免疫组织化学染色法检测肺组织瓜氨酸化组蛋白H3(Cit-H3)、髓过氧化物酶(MPO)表达水平。结果:对照组、模型组、针灸组和针灸+ CXCR4抑制剂组大鼠CD11b + CD62L表达水平比较,差异有统计学意义(F = 25.150,P<0.001)。进一步两两比较发现,与对照组比较,模型组CD62L + CD11b表达水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,针灸+ CXCR4抑制剂组表达水平显著下降(P<0.05)。HE染色结果显示,对照组大鼠肺组织未见明显充血、出血、水肿及中性粒细胞浸润;模型组肺组织明显水肿,充血及出血明显,大量炎症细胞浸润;针灸组肺泡及气道黏膜充血、水肿减轻,炎症细胞浸润减少;针灸+ NETs抑制剂组肺泡及气道黏膜充血、水肿明显减轻,炎症细胞浸润明显减少。对照组、模型组、针灸组和针灸+ NETs抑制剂组大鼠肺损伤评分、Cit-H3和MPO表达水平比较,差异均有统计学意义(F = 51.723、227.370、570.097,P均<0.001)。进一步两两比较发现,与对照组比较,模型组Cit-H3、MPO表达水平均显著升高,肺组织炎症浸润更严重(P均<0.05);与模型组比较,针灸组、针灸+ NETs抑制剂组中Cit-H3、MPO表达水平均显著降低,肺组织炎症浸润明显减轻且针灸+ NETs抑制剂组更为显著(P均<0.05)。结论:VAP大鼠模型中存在中性粒细胞归巢及NETs过度形成的现象;针灸对中性粒细胞归巢的抑制不明显,但可通过调控Cit-H3及MPO的表达抑制NETs的过度形成从而改善炎症反应;同时,针灸联用CXCR4抑制剂可明显改善中性粒细胞归巢,联用NETs抑制剂对NETs的调控效果更为显著,对肺组织炎症反应改善作用更强。
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编辑人员丨2023/11/4
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番茄潜叶蛾行为调控技术研究进展
编辑人员丨2023/9/2
番茄潜叶蛾Tuta absoluta是对番茄具有毁灭性危害的世界性害虫,2017年入侵我国,并呈扩散蔓延趋势,严重威胁我国的番茄产业.用于防治这一害虫的杀虫剂的不合理使用导致番茄潜叶蛾抗药性不断增加,防效下降,开发新型绿色防治技术迫在眉睫.物理诱控技术和嗅觉行为调控技术是有害生物综合防控体系中的重要组成部分.本文综述了物理诱控(灯光和颜色诱杀)及嗅觉行为调控(性信息素、植物挥发物)技术在番茄潜叶蛾防治中的研究进展.颜色显著影响信息素诱捕器和粘虫板对番茄潜叶蛾的诱杀效果,白色、黑色和蓝色诱捕器田间诱捕的成虫较多.黑色诱虫灯和波长为470 nm的LED灯对番茄潜叶蛾的诱杀效果最佳,且对性诱芯具有增效作用.番茄潜叶蛾性信息素包括主要成分(3E,8Z,11Z)-十四碳三烯乙酸酯和次要成分(3E,8Z)-十四碳烯醇乙酸酯,两者含量比约为9∶1,主要组分和次要组分95∶5混合时对番茄潜叶蛾的诱捕效果最佳.相比于其他诱捕器类型,含性信息素诱芯的三角形诱捕器的诱捕效果最佳.番茄潜叶蛾性信息素可广泛用于早期监测预警、大量诱杀和交配干扰.植物挥发物和传统食诱剂挥发物组分影响番茄潜叶蛾的寄主选择和产卵行为,乙酸辛酯、苯乙醛与冰醋酸混合物、冰醋酸与3-甲基-1-丁醇混合物,以及番茄挥发物组分柠檬烯、β-罗勒烯、α-松油烯、δ-榄香烯和(E)-β-石竹烯混合物对番茄潜叶蛾具有引诱作用;苯醌、2-蒈烯、δ-姜黄烯和邻二乙苯是番茄潜叶蛾的产卵刺激剂;而1-氟十二烷、石竹烯、姜黄烯、榄香烯、蛇麻烯、姜烯、2-十三烷酮、2-十一酮、(Z)-丙酸-3-己烯酯、水杨酸甲酯等物质则对番茄潜叶蛾的寄主选择、产卵或生长发育具有不利影响.最后讨论了番茄潜叶蛾行为调控技术存在作用机制不明确、防控效果不稳定、与其他绿色防控技术协同应用技术缺乏等问题,展望了未来可能的研究方向,以期为基于昆虫行为调控的番茄潜叶蛾绿色防治技术研发提供参考.
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编辑人员丨2023/9/2
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番茄潜叶蛾性信息素的研究和应用进展
编辑人员丨2023/9/2
番茄潜叶蛾Tuta absoluta原产于南美,是一种世界检疫性害虫,严重发生时可导致主要寄主作物番茄减产80%~100%.十几年的时间,该虫已从原产地入侵扩散至几乎整个亚非欧大陆,成为世界番茄产业的重大威胁因子.该虫于2017年在我国新疆伊梨首次发现,现已传入并扩散至云南、甘肃等地区,极大地威胁我国番茄产业及其他相关产业的健康发展.在国际上,基于性信息素监测、大量诱捕和交配干扰(迷向)防治已成为防治番茄潜叶蛾切实可行的措施.为了研究高效、环保的番茄潜叶蛾种群动态监测和防治技术,本文综述了番茄潜叶蛾性信息素在其监测、早期预警和防控的研究和应用现状.番茄潜叶蛾雌虫主要在清晨释放性信息素吸引雄虫交配,成虫交配在上午7:00达到高峰.1995和1996年先后报道番茄潜叶蛾释放的性信息素的主要和次要成分及它们的合成方法;该虫性信息素的主要和次要成分分别为(3E,8Z,11Z)-十四碳三烯乙酸酯(TDTA)和(3E,8Z)-十四碳烯醇乙酸酯(TDDA),约以90∶10的比例组成性信息素.生物测定发现,TDTA对雄虫具有很强的引诱作用,与TDDA混合使用时可使引诱作用进一步增强.近年来,研究发了更高效、简便的性信息素成分合成方法,为其规模化生产与应用提供了良好条件.目前番茄潜叶蛾性信息素在国际上已被广泛应用于该虫的防控,并取得良好成效.报道的常用于监测、大量诱捕该虫的性信息素诱捕器中,以水盆式诱捕器和三角形诱捕器的效果较优;商业化诱芯所含性信息素的常见剂量为0.5,0.8和3.0 mg.田间应用时需根据作物的生境和生长阶段、危害程度、当地的自然条件等实际情况,选用相应的诱捕器类型与性信息素剂量等.此外,性信息素迷向法在番茄潜叶蛾的防治中也较为常见,其成功应用要求封闭性较高的环境.由于性信息素在番茄潜叶蛾的监测和防治中具有高效、安全、环保等优点,其相关研究成果可为我国该害虫的可持续防治策略及措施提供重要的参考.
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编辑人员丨2023/9/2
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中性粒细胞胞外诱捕网在儿童系统性红斑狼疮的研究进展
编辑人员丨2023/8/6
中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)是一种不同于细胞凋亡或坏死的细胞死亡形式,其形成和降解之间的失衡被认为与系统性红斑狼疮(SLE)等自身免疫性疾病的活动程度密切相关.来自烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸(NADPH)氧化酶途径或线粒体DNA(mtDNA)途径的活性氧(ROS)被认为对NETs形成的初始阶段至关重要.中性粒细胞异常激活导致大量双链DNA(dsDNA)等自身抗原暴露,或其自身抗原不能及时清除,均可诱导自身抗体识别形成免疫复合物并沉积在局部组织,进而诱导浆细胞样树突状细胞(pDCs)分泌干扰素α(IFN-α)等炎症因子引发内皮细胞损伤.本文对NETs在SLE发病机制中的作用进行综述,以期为儿童SLE的诊断和靶向治疗提供理论基础.
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编辑人员丨2023/8/6
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中性粒细胞在急性炎症诱导的组织损伤中的作用
编辑人员丨2023/8/6
中性粒细胞是第一个到达感染部位的免疫细胞,也是哺乳动物体内含量最丰富的白细胞,其活化之后,会释放活性氧(ROS)、颗粒蛋白酶以及中性粒细胞胞外诱捕网络(Neutrophil extracelluar traps,NET),从而达到消灭病原微生物的作用.但在发生急性炎症时,中性粒细胞过度活化,会造成这些杀伤性武器大量释放,除消灭病原体外,还会造成组织损伤.现在越来越多的研究将中性粒细胞以及中性粒细胞释放的杀伤性武器作为缓解急性炎症组织损伤的药物靶标.
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编辑人员丨2023/8/6