目的:探究脓毒症对血脑屏障通透性的影响。方法:采用盲肠结扎穿孔术建立脓毒症大鼠模型。根据干预时间随机（随机数字法）分组：假手术组、脓毒症1 d组、脓毒症4 d组、脓毒症7 d组。采用荧光素钠检测血脑屏障的通透性变化；采用Western blot和免疫荧光方法检测脑微血管内皮细胞紧密连接蛋白的表达变化。结果:和假手术组大鼠相比较，脓毒症组的大鼠呼吸急促，精神萎靡、反应迟钝，活动量少、进食饮水少，腹胀明显，排稀便。腹腔解剖可见肠系膜黏连，近端肠管扩张，盲肠结扎部位颜色暗红且表面有脓液渗出，整个腹腔可见血性渗出液。和假手术组大鼠相比较，脓毒症组的大鼠体质量下降，随着脓毒症的病程发展，大鼠体质量持续降低，脓毒症7 d组的大鼠体质量最低，且明显低于脓毒症4 d（ P < 0.05）、脓毒症1 d（ P < 0.05）以及假手术组（ P < 0.05）的大鼠。和假手术组大鼠相比较，盲肠结扎穿孔1 d后大鼠脑组织中的荧光素钠的渗漏显著增加（ P < 0.05）。随着脓毒症的病程发展，荧光素钠渗漏含量持续增加。脓毒症7 d的大鼠脑组织中的荧光素钠含量最高，并且明显高于脓毒症4 d、脓毒症1 d以及假手术组的大鼠（均 P < 0.05）。和假手术组大鼠相比较，盲肠结扎穿孔1 d后大鼠脑组织的脑微血管内皮细胞紧密连接蛋白Claudin-5、Occludin和ZO-1的蛋白表达量明显降低（均 P < 0.05）。随着脓毒症的病程发展，紧密连接蛋白的表达量持续降低。脓毒症7 d的大鼠脑组织中的紧密连接蛋白Claudin-5、Occludin、ZO-1的表达量最低，并且明显低于脓毒症4 d、脓毒症1 d以及假手术组的大鼠（均 P < 0.05）。 结论:脓毒症可诱导大鼠的血脑屏障通透性增加，并且脓毒症持续的时间越久，血脑屏障的通透性越高。

目的:探讨重组腺病毒缺氧诱导因子-1α(AdHIF-α1)在大鼠缺氧脑微血管内皮细胞(BMEC)中的转染情况，为AdHIF-1α治疗缺氧的BMEC提供理论基础。方法:建立大鼠BMEC的体外分离培养及鉴定，并用含100 μmol/L二氯化钴(CoCl 2)的维持培养液培养，制成BMEC缺氧模型；然后将AdHIF-1α转染入缺氧的BMEC中，在荧光显微镜下观察荧光蛋白的转染情况。 结果:AdHIF-lα转染入缺氧的BMEC后，分别在12 h、24 h、48 h、72 h于荧光显微镜下观察AdHIF-lα的转染情况，结果显示，12 h开始出现少许荧光，光密度值( A值)0.13±0.01；24 h荧光表达有所增强， A值0.46±0.03；48 h荧光表达最明显， A值0.97±0.05；72 h可见荧光减弱， A值0.38±0.02；不同时间点比较差异有统计学意义，两两比较结果显示，相邻时间点 A值比较差异均有统计学意义( q＝25.88、40.00、46.28，均 P<0.01)。 结论:重组腺病毒缺氧诱导因子-1α能成功转染至缺氧的BMEC。

目的:探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对大鼠脊髓损伤(SCI)后微血管内皮细胞(EC)葡萄糖转运体1(GLUT1)表达的作用及机制。方法:改良Allen’s法制作Sprague-Dawley大鼠SCI模型，观察SCI 1 d后抑制HMGB1作用脊髓GLUT1表达。培养大鼠脑脊髓EC，建立氧糖剥夺/复氧(OGD/R)模型，观察减少HMGB1对OGD 6 h/R 12 h处理EC的GLUT1表达的作用。使用Toll样受体4(TLR4)、TRIF及核转录因子-κB(NF-κB)的激动剂或抑制剂，激动或抑制通路蛋白作用，观察TLR4/TRIF/NF-κB通路在体内外HMGB1调节GLUT1表达中的作用。统计学方法采用单因素方差分析，两两比较采用Tukey’s检验。结果:SCI 1 d后大鼠脊髓GLUT1表达增高(SCI 1 d组高于sham组，1.655±0.083比1.000±0， q＝24.580， P<0.01)。丙酮酸乙酯(实验组低于SCI组，1.356±0.096比2.107±0.115， q＝14.730， P<0.01)或甘草甜素(实验组低于SCI组，1.311±0.093比2.107±0.115， q＝15.620， P<0.01)抑制HMGB1作用减少SCI 1 d大鼠脊髓GLUT1表达。SC 1 d大鼠激动TLR4增加GLUT1表达(实验组高于SCI组，1.880±0.120比1.655±0.076， q＝5.032， P<0.05)，抑制TRIF(实验组低于SCI组1.427±0.118比1.655±0.076， q＝5.109， P<0.05)或抑制NF-κB(实验组低于SCI组1.301±0.076比1.655±0.076， q＝7.948， P<0.01)都可减少GLUT1表达。体外培养的脑脊髓EC，加入含HMGB1的星形胶质细胞条件培养基(ACM)并进行OGD 6 h/R 12 h处理后增加GLUT1表达(OGD 6 h/R 12 h组高于Normal组，2.122±0.075比1.000±0， q＝38.720， P<0.01)，减少ACM内HMGB1含量降低GLUT1表达(实验组低于OGD 6 h/R 12 h组，1.316±0.131比1.950±0.166， q＝8.737， P<0.01)。抑制TLR4(CLI-095：实验组低于OGD 6 h/R 12 h组，1.753±0.103比2.230±0.103， q＝13.515， P<0.01；C34：实验组低于OGD 6 h/R 12 h组，1.306±0.038比2.230±0.103， q＝16.440， P<0.05)，抑制TRIF(实验组低于OGD 6 h/R 12 h组，1.383±0.027比2.230±0.103， q＝23.750， P<0.05)或抑制NF-κB(实验组低于OGD 6 h/R 12 h组，1.149±0.064比2.230±0.103， q＝17.510， P<0.05)都可减少加入ACM并进行OGD 6 h/R 12 h处理的EC的GLUT1表达。 结论:抑制HMGB1作用减少SCI后EC的GLUT1表达，HMGB1通过TLR4/TRIF/NF-κB信号通路发挥上述调节作用。

目的:探讨miR-26a介导磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase, PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B, AKT)信号通路对脑缺血大鼠血管生成的影响。方法:将100只雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、模型组、miR-NC组和miR-26a组。miR-NC组和miR-26a组分别侧脑室注射5 μl miR-26a模拟物阴性质控品和miR-26a模拟物，假手术组和模型组注射等量生理盐水。采用改良线栓法制作大脑中动脉闭塞模型，假手术组只插线不结扎。各组大鼠各取5只腹腔注射5-溴脱氧尿苷(bromodeoxyuridine, BrdU)，1次/d，连续7 d。将体外培养并转染的大鼠脑微血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cells, BMECs)分为对照组、氧葡萄糖剥夺(oxygen-glucose deprivation, OGD)组、miR-NC组和miR-26a组。双荧光素酶实验验证miR-26a对第10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome 10, PTEN)的调控作用。应用Longa评分检测大鼠神经功能损伤。氯化三苯四氮唑(triphenyltetrazolium chloride, TTC)染色法测定脑梗死体积。分别使用四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium, MTT)染色法、膜联蛋白Ⅴ-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶双染法和小管形成实验测定BMECs增殖、凋亡和血管生成。应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测缺血脑组织及BMECs miR-26a表达。免疫荧光双标记法[BrdU/von Willebrand因子(von Willebrand factor, vWF)]检测大鼠血管内皮细胞增殖。蛋白质印迹分析检测缺血脑组织血管内皮生长因子(vascularendothelial growth factor, VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)、血管生成素-2(angiopoietin-2, Ang-2)、PTEN、PI3K、AKT表达。结果:生物信息学及双荧光素酶实验验证了miR-26a对PTEN的靶向调控。与假手术组比较，模型组和miR-NC组缺血脑组织miR-26a、VEGF、bFGF、Ang-2、PI3K、AKT表达和BrdU +/vWF +细胞数量增加，而PTEN表达降低( P均<0.05)；与模型组比较，miR-26a组各项指标效果更加显著( P均<0.05)。与对照组比较，OGD组和miR-NC组BMECs增殖和血管生成能力显著增强，细胞凋亡显著减少( P均<0.05)；与OGD组比较，miR-26a组各项指标效果更加显著( P均<0.05)。 结论:miR-26a能靶向抑制PTEN表达，通过激活PI3K/AKT信号通路上调血管生成相关因子(VEGF、bFGF和Ang-2)，促进脑梗死大鼠血管内皮细胞增殖和血管生成。

目的:观察清脑滴丸对大鼠脑微血管内皮细胞(rat brain microvascular endothelial cells,RBMECs)氧糖剥夺/复氧(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)损伤模型的影响,探讨其调节长链非编码 RNA母系表达基因 3(long non-coding RNA maternally expressed gene 3,LncRNA MEG3)表达及对核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding oligome-rization domain-like receptor protein 3,NLRP3)炎症小体活化的作用.方法:将20 只SD大鼠随机分为空白血清组和清脑滴丸含药血清组(150 mg·kg-1),每组10 只,连续灌胃7d,每日2 次,从而制备血清样品.取对数生长期的RBMECs,随机分为对照组、模型组、清脑滴丸组、MEG3 过表达组、MEG3 过表达+清脑滴丸组.除对照组外,其余各组细胞均进行OGD/R造模.观察细胞血管形成情况,采用CCK-8 法检测细胞存活率,qRT-PCR法检测细胞LncRNA MEG3 mRNA表达水平,Western blot法检测细胞 NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a caspase recruitment domain,ASC)、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(cleaved cysteinyl aspartate specific proteinase-1,c-Caspase-1)、肿瘤抑制蛋白p53(tumor suppressor protein p53,p53)、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 3(cleaved cysteinyl aspartate specific proteinase-3,c-Caspase-3)表达水平.结果:与对照组比较,模型组细胞存活率降低、RBMECs形成的血管总长度缩短(P<0.01);与模型组比较,清脑滴丸组、MEG3 过表达+清脑滴丸组细胞存活率升高、RBMECs形成的血管总长度增加(P<0.05).与对照组比较,模型组LncRNA MEG3 mRNA水平升高(P<0.05);与模型组比较,清脑滴丸组LncRNA MEG3 mRNA水平降低(P<0.01),MEG3 过表达+清脑滴丸组、MEG3 过表达组LncRNA MEG3 mRNA水平升高(P<0.01);与清脑滴丸组比较,MEG3 过表达+清脑滴丸组细胞LncRNA MEG3 mRNA水平升高(P<0.01).与对照组比较,模型组细胞NLRP3、ASC、c-Caspase-1、p53、c-Caspase-3 蛋白表达水平升高(P<0.01);与模型组比较,清脑滴丸组、MEG3 过表达+清脑滴丸组细胞 NLRP3、ASC、c-Caspase-1、p53、c-Caspase-3 蛋白表达水平降低(P<0.05);与清脑滴丸组比较,MEG3 过表达+清脑滴丸组细胞NLRP3、ASC、c-Caspase-1、p53 蛋白表达水平升高(P<0.05).结论:清脑滴丸可能通过下调LncRNA MEG3 表达和抑制NLRP3 炎症小体活化,提高细胞存活率和血管形成能力,从而发挥对RBMECs的保护作用.

旨在探讨《古今录验》续命汤对急性脑梗死大鼠脑缺血性损伤及血管新生的影响.以SD大鼠为研究对象,随机分为6组:假手术组,模型组,续命汤低、中、高剂量组,丁苯酞组.大鼠大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型成功建立后,各组大鼠每天分别灌胃给予蒸馏水,续命汤5.13、10.26、20.52 g·kg-1药液、丁苯酞混悬液(0.06 g·kg-1).连续干预7 d后,进行末次神经功能评分,处死所有大鼠,采集脑组织样本.通过神经功能评分和2,3,5-氯化三苯基四氮染色评估脑缺血损伤程度;苏木素-伊红染色观察脑组织病理学形态改变;透射电子显微镜观察缺血半暗区皮层脑组织神经元和微血管内皮细胞(endothelial cells,ECs)超微结构;免疫荧光检测缺血半暗区皮层脑组织血管性血友病因子(von Willebrand fac-tor,vWF)和造血祖细胞抗原CD34(hematopoietic progenitor cell antigen CD34,CD34)的蛋白表达情况;实时荧光定量PCR和免疫印迹法检测缺血半暗区皮层脑组织Runt相关转录因子1(Runt-related transcription factor 1,RUNX1)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、血管生成素-1(angiopoietin-1,Ang-1)、血管生成素-2(angiopoietin-2,Ang-2)、VEGF受体2(VEGF receptor 2,VEGFR2)mRNA和蛋白的表达情况.结果表明,与假手术组相比,模型组大鼠神经功能评分、脑梗死面积显著升高(P＜0.01);缺血半暗区皮层脑组织病理学形态结构、神经元与微血管ECs超微结构受损;RUNX1、VEGF、Ang-1、Ang-2、VEGFR2 mRNA 表达均显著升高(P＜0.01);vWF、CD34、RUNX1、VEGF、Ang-1、Ang-2、VEGFR2 蛋白表达均显著升高(P＜0.05或P＜0.01).与模型组相比,续命汤高剂量组、丁苯酞组神经功能缺损评分和脑梗死面积显著降低(P＜0.01);缺血半暗区皮层脑组织病理学形态结构、神经元与微血管ECs超微结构损伤情况得到改善;RUNX1、VEGF、Ang-1、Ang-2、VEGFR2 mRNA 表达显著升高(P＜0.01);vWF、CD34、RUNXl、VEGF、Ang-1、Ang-2、VEGFR2 蛋白表达也显著升高(P＜0.01).上述结果表明,《古今录验》续命汤可以促进MCAO大鼠缺血半暗区皮层脑组织的血管新生,加快侧支循环的建立,以减轻神经功能障碍,可能与RUNX1/VEGF途径有关.

目的 探讨天麻素(Gas)、薯蓣皂苷元(Dio)及其组合物(GDC)对大鼠缺氧损伤脑微血管内皮细胞(BMECs)的保护作用和对脑微血管新生的影响及其作用机制.方法 将BMECs分为 5 组:正常对照组,模型对照组,Gas组(1、2、4、8、16、32 μmol·L-1),Dio组(0.25、0.5、1、2、4、8 μmol·L-1),GDC组(Gas和Dio浓度分别为 1 和 0.25、2和 0.5、4 和 1、8 和 2、16 和 4、32 和 8 μmol·L-1).分组给药12h后,对模型对照组、Gas组、Dio组和GDC组通过氧糖剥夺法建立BMECs缺氧模型.检测乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、白细胞介素 1β(IL-1β)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)浓度;观察Hoechst 33258、FITC-Annexin V/PI染色,采用Transwell小室实验、细胞划痕实验和小管形成实验,考察Gas、Dio及GDC对缺氧损伤BMECs的保护作用及促进血管新生作用.进一步利用网络药理学和分子对接方法研究GDC抗脑缺血的作用机制.结果 Gas、Dio以 2、0.5 μmol·L-1组合时,可显著提高缺氧损伤BMECs细胞活力(P＜0.05),促进细胞增殖;与模型对照组比较,Gas组LDH漏出率降低(P＜0.05);Gas组、Dio组与GDC组IL-1β含量均显著下降(均P＜0.05),Gas 组、GDC 组 SOD 活力升高(P＜0.05),Gas 组、Dio 组以及 GDC 组凋亡小体减少.GDC 可促进BMECs缺氧模型的增殖、侵袭、迁移以及小管形成,表明其在细胞水平上一定程度促进血管新生.网络药理学研究发现,Gas与半胱天冬酶 3(CASP3)、过氧化物酶体增生激活受体 γ(PPARG)、凝血因子Ⅱ(F2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(Akt)1 蛋白具有良好的结合活性,Dio与内皮一氧化氮合成酶(NOS3)、KDR蛋白具有良好的结合活性,Gas、Dio可能主要通过血管内皮生长因子(VEGF)信号通路、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路、磷酯酰肌醇 3-激酶(PI3K)-Akt信号通路以及缺氧诱导因子-1(HIF-1)信号通路调控脑缺血后血管新生.结论Gas、Dio及GDC具有抗缺氧损伤作用并可促进缺氧损伤后血管新生,作用机制可能与其作用于Akt1、NOS3、VEGFR2 等蛋白,调控VEGF/Akt/MAPK等信号通路促进血管新生有关.

采用网络药理学结合体内、外实验验证探讨黄芪甲苷(astragaloside Ⅳ,AST Ⅳ)配伍三七总皂苷(Panax notoginseng saponins,PNS)调控血管生成治疗脑缺血的作用机制.运用网络药理学预测AST Ⅳ和PNS通过介导血管生成治疗脑缺血的可能机制.体内实验:SD大鼠随机分为假手术组、模型组、AST Ⅳ(10 mg·kg-1)+PNS(25 mg·kg-1)组,大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)法建立脑缺血模型.AST Ⅳ及PNS灌胃给药,每天2次.采用Longa法测定神经功能缺损症状;苏木素-伊红(HE)染色观察脑组织病理损伤;免疫组化测定血友病因子(von Willebrand factor,vWF)的表达;免疫荧光测定血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)的表达;蛋白质印迹法检测脑组织血管内皮生长因子受体 2(vascular endothelial growth factor receptor 2,VEGFR2)、VEGFA、磷酸化磷脂酰肌醇 3-激酶(phosphorylated phosphatidyli-nositol 3-kinase,p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,p-AKT)的表达.体外实验:原代培养并鉴定脑微血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cells,BMECs),取第 3 代 rBMECs,设置对照组、模型组、AST Ⅳ+PNS(50 μmol· L-1+30 μmol·L-1)组、LY294002(PI3K/AKT 信号通路抑制剂)组、740Y-P 组(PI3K/AKT 信号通路激动剂)、AST Ⅳ+PNS+LY294002 组及 AST Ⅳ+PNS+740Y-P 组,氧糖剥夺/复氧(oxygen glucose deprivation/re-oxygenation,OGD/R)建立缺血再灌注损伤模型.CCK-8检测rBEMCs存活情况,划痕实验检测rBEMCs迁移能力;人工基底膜(matrigel)检测rBEMCs成管数;内皮细胞渗漏实验检测内皮细胞渗透率;蛋白质印迹检测rBEMCs中VEGFR2、VEGFA、p-PI3K、p-AKT蛋白的表达.网络药理学结果显示,AST Ⅳ及PNS可调节脑梗死血管生成的21个靶点,包括VEGFA、AKT1等,大部分涉及PI3K/AKT信号通路.体内实验发现,与模型组比较,AST Ⅳ+PNS配伍能降低脑缺血后神经功能缺损评分(P＜0.05)及脑组织细胞损伤率(P＜0.05),增加vWF及VEGFA蛋白的表达(P＜0.01),促进血管新生,且显著升高PI3K/AKT通路相关蛋白表达(P＜0.05,P＜0.01).体外实验发现,与模型组比较,AST Ⅳ+PNS、740Y-P、AST Ⅳ+PNS+LY294002 及 AST Ⅳ+PNS+740Y-P 均能增加 OGD/R 后 rBEMCs 存活率,增强rBEMCs迁移率,增加rBEMCs成管数,增强PI3K/AKT通路相关蛋白表达,降低内皮细胞渗透率(P＜0.05,P＜0.01);与LY294002组比较,AST Ⅳ+PNS+LY294002组rBEMCs存活率、迁移率、成管数及PI3K/AKT通路相关蛋白表达显著增加,内皮细胞渗透率显著减少(P＜0.05,P＜0.01);与AST Ⅳ+PNS组和740Y-P组比较,AST Ⅳ+PNS+740Y-P组rBEMCs存活率、迁移率、成管数及PI3K/AKT通路相关蛋白表达显著增加,内皮细胞渗透率显著降低(P＜0.01).该研究表明,AST Ⅳ和PNS在脑缺血后能促进血管生成,机制可能与激活PI3K/AKT信号通路有关.

目的 探究常压高浓度氧(NBO)对新生大鼠脑微血管内皮细胞损伤及核因子E2相关因子2/血红素氧合酶-1(Nrf2/HO-1)信号通路的影响.方法 取新生SD大鼠45只,采用随机数字表法分为常氧组、NBO组和NBO+Nrf2激活剂组,每组各15只.常氧组大鼠置于普通空气(21％氧气)中饲养,NBO组和NBO+Nrf2激活剂组大鼠置于90％常压氧气饲养,NBO+Nrf2激活剂组每日灌胃5 mg/kg Nrf2激动剂莱菔硫烷.测定脑组织伊文思蓝(EB)含量,采用酶联免疫法检测血管内皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)含量,干湿重法检测脑组织含水量,HE染色和TUNEL染色观察脑组织病理变化,蛋白质印迹法检测海马组织Nrf2/HO-1信号通路蛋白表达,水迷宫检测大鼠认知功能.结果 与常氧组比较,NBO组脑组织EB、VEGF、MMP-9含量及脑组织含水量升高,差异均有统计学意义(P＜0.05);与NBO组比较,NBO+Nrf2激活剂组脑组织EB、VEGF、MMP-9含量及脑组织含水量降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).病理染色结果显示,常氧组大鼠神经细胞形态及结构完整,未见明显病理变化和细胞凋亡;NBO组神经细胞形态及结构不规则,出现明显的水肿和空泡,并伴有大量的凋亡细胞;NBO+Nrf2激活剂组脑组织病理损伤较NBO组明显减轻.与常氧组比较,NBO组脑组织Nrf2、HO-1蛋白相对表达量降低,差异均有统计学意义(P＜0.05);与NBO组比较,NBO+Nrf2激活剂组Nrf2、HO-1蛋白相对表达量升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).与常氧组比较,NBO组第2～4天逃避潜伏期延长,穿越平台次数减少,差异均有统计学意义(P＜0.05);与NBO组比较,NBO+Nrf2激活剂组第2～4天逃避潜伏期缩短,穿越平台次数增多,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 NBO可诱导新生大鼠脑微血管内皮细胞损伤,导致远期认知功能障碍,可能与下调Nrf2/HO-1信号通路表达有关.

目的:探讨桃红四物汤对缺糖缺氧(OGD)大鼠脑微血管内皮细胞(rBMECs)血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2)、蛋白激酶B(Akt)基因及蛋白表达的影响及其作用机制.方法:取rBMECs进行培养并随机分为正常组培养、模型组培养、桃红四物汤(0.4mg/mL)组和桃红四物汤(0.8mg/mL)组,除正常组外,其余三组采用氧糖剥夺实验构建OGD损伤模型.桃红四物汤组在造模前lh按0.4mg/mL、0.8 mg/mL浓度加入桃红四物汤,而正常组及模型组则加入等量体积生理盐水.实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、蛋白免疫印迹试验检测VEGF、VEGFR-2、Akt基因及蛋白表达情况.结果:与正常组比较,模型组细胞凋亡率显著升高(P＜0.05).与模型组比较,桃红四物汤(0.4mg/mL)组和桃红四物汤(0.8 mg/mL)组均降低,且以桃红四物汤(0.8 mg/mL)组最为显著(P＜0.05).与正常组比较,模型组rBMECs中Akt、VEGFR-2、VEGF相对mRNA和蛋白表达水平显著升高(P＜0.05).与模型组比较,桃红四物汤(0.4 mg/mL)组和桃红四物汤(0.8 mg/mL)组显著降低,且以桃红四物汤(0.8 mg/mL)组最为显著(P＜0.05).结论:桃红四物汤可能通过降低OGD条件下rBMECs中VEGF、VEGFR-2、Akt基因及蛋白表达水平,从而发挥抑制内皮细胞的凋亡,保持内皮细胞的完整性,这可能是桃红四物汤对脑保护的机制之一.