目的:通过对三个非复制型痘苗病毒修饰株的细胞生物学特性及小鼠体内毒力对比研究，为天花/猴痘疫苗替代产品的研制提供参考依据。方法:在BHK-21/CEF中对复制型痘苗病毒天坛株(Vaccinia virus Tiantan strain，VTT)和复制缺陷型痘苗天坛株(non-replicating Tiantan Vaccinia virus strain, NTV)及其修饰株NTV-C7L、NTV-△F1L-C7L、NTV-K1L进行扩增纯化及Western blot鉴定后，采用免疫噬斑实验对各病毒株在细胞中的毒力和扩散能力进行评价；通过复制动力学曲线比较各毒株之间的复制差异，采用小鼠滴鼻实验进行体重变化观察，比较病毒的毒力水平。结果:Western blot结果证明扩增纯化的痘苗病毒各毒株均正确。免疫噬斑及复制动力学曲线表明三株NTV基因修饰株在CEF中的复制能力与NTV相近；在Vero细胞间的扩散能力和复制能力均有所提高，但复制倍数都小于100倍；在MRC-5中复制水平与NTV相比得到明显增强，其中NTV-C7L的复制倍数达20 000倍以上；小鼠体内毒力结果显示三个NTV基因修饰株与NTV相比体重变化无统计学意义。结论:三个NTV基因修饰株在人源性细胞MRC-5中恢复了复制能力，但在小鼠中的毒力与NTV相近，具备了作为天花/猴痘疫苗换代产品候选株的初步条件。

2022年，猴痘疫情从区域的地方性流行扩大至全球暴发，并被WHO列为国际关注的突发公共卫生事件。由于正痘病毒之间的基因序列具有高度相似性且正痘病毒可诱发交叉反应型抗体，接种天花疫苗可能会影响猴痘病毒感染诱导的免疫应答水平及感染者的健康结局。分析天花疫苗接种对猴痘病毒感染的保护作用将有助于确定疫情防控策略和措施。因此，本文通过了解既往猴痘疫情中天花疫苗的接种情况及其健康结局，综述天花疫苗接种、免疫应答情况和临床数据之间的关联性，为猴痘疫情的预防控制策略提供科学证据。

目的:对我国非复制型痘苗病毒NTV进行基因改造，以提高其免疫原性。方法:通过基于CRISPR-Cas9技术的痘苗病毒同源重组方法，在痘苗病毒F1L基因缺失的同时回插C7L基因，构建NTV修饰株NTV-ΔF1L-C7L。然后将该重组病毒以10 7 PFU免疫BALB/c小鼠，采用ELISA和ELISpot方法分别检测修饰株NTV-ΔF1L-C7L诱导产生的体液免疫和细胞免疫水平，并采用噬斑减少中和实验测定中和抗体水平。 结果:经PCR和western blot鉴定证明构建的NTV修饰株NTV-ΔF1L-C7L的F1L基因缺失，同时C7L基因回插在该区域，且C7L基因能正常表达，说明重组病毒构建正确。NTV-ΔF1L-C7L免疫小鼠后，ELISA结果表明重组病毒NTV-ΔF1L-C7L诱导产生的IgG抗体水平高于NTV；ELISpot结果亦能够表明该重组病毒能够诱导产生水平更高的IFN-γ；噬斑减少中和实验结果表明，该重组病毒比NTV能够诱导产生水平更高的中和抗体。结论:正确构建了NTV基因修饰株NTV-ΔF1L-C7L，相比于NTV，其能诱导更强的体液免疫和细胞免疫，为我国天花或猴痘疫苗的换代产品研发提供参考数据。

目的:应用新一代长读长测序技术精准确定复制缺陷型痘苗病毒天坛株(non-replicating Tiantan strain of vaccinia virus，NTV)全基因组序列及其开放阅读框(ORFs)组成。方法:基于本实验室储备的NTV，在鸡胚成纤维细胞上进行扩增并纯化，提取NTV全长基因组核酸。PacBio HiFi测序从头组装获取NTV全长基因组序列。以同源注释的策略确定其ORF组成，并分析其与已知复制缺陷型痘苗病毒毒株ORF异同。结果:NTV全长共171 729 bp，GC含量为33%，其独特的倒置末端重复(ITR)区域包含发夹结构、两个串联重复区域及3个非重复区域。NTV共有166个ORFs，与第三代天花病毒疫苗改良安卡拉株(MVA-BN)和复制缺陷型哥本哈根株(NYVAC)株相比，主要差异位于ITR及其周围区域，3个毒株共同享有138个ORFs，NTV特有6个编码与病毒逃避宿主抗病毒反应相关的ORFs。结论:通过三代测序技术精准确定NTV全基因组序列及ORFs组成，并揭示其与其他复制缺陷型痘苗病毒毒株的异同，为新一代猴痘疫苗和痘苗病毒载体研发应用提供重要参考。

麻疹是继天花和脊髓灰质炎后第三个要在全球范围内消除的病毒性传染病。近年来，我国麻疹的低发病率和病毒学监测数据证实我国目前正在接近麻疹消除状态；但在全球多个国家发生了麻疹复发和暴发，甚至在已经消除的国家又重新建立了本土传播，使我国麻疹消除面临较大挑战。为加速我国麻疹消除进程，国家应适时调整麻疹消除相关的政策和策略，持续保持高水平免疫接种率，进一步加强流行病学和实验室监测，并提升应对暴发疫情的处置能力，从而为麻疹消除提供支持。

2022年5月13日至6月2日，在短短3周内全球5个大洲先后报告了780例人猴痘确诊病例。在我国，虽然还从未有猴痘确诊病例的报道，但存在猴痘病毒输入的风险。我国自20世纪80年代初停止接种天花疫苗后，目前40岁以下的人群对于天花和猴痘病毒普遍没有免疫力。在密切关注国际猴痘流行疫情的同时，应该提前做好准备，加强症状的监测，开发诊断方法，以便及时发现输入性病例。同时，应该着手储备疫苗和抗病毒药物，防止我国可能出现的猴痘流行。

目的:通过对比分析幼年是否接种天花疫苗的猴痘病例的临床特征、流行病学特征及实验室检测结果，探索猴痘确诊病例中幼年是否接种天花疫苗是否会对发病、临床特征及实验室检测产生影响。方法:将北京市2023年5月至2023年8月猴痘确诊病例中接种过天花疫苗的病例纳入接种疫苗组，未接种天花或猴痘疫苗的人群纳入未接种疫苗组。通过流调、电子病历查询和电话随访的方式收集数据，对比分析两组人群的人口学资料、发病就诊情况、临床特征、流行病学信息和实验室检测结果。结果:本研究共纳入90例，其中接种疫苗组（接种组）10例，未接种疫苗组（未接种组）80例，均为男性。接种组病例平均年龄（47.50±5.06）岁，未接种组病例平均年龄（31.68±5.34）岁；接种组中有9名为男男性行为（MSM）人群，6名HIV感染者；未接种组有78例MSM人群，43名HIV感染者。是否就诊、是否发病、发病与诊断时间差和21 d是否有性行为等指标中，接种组和未接种组差异均无统计学意义（ P>0.05）；发热、皮疹、皮疹发生部位、淋巴结肿大等临床特征在接种组和未接种组差异均无统计学意义（ P>0.05）；实验室指标中，咽拭子是否阳性在接种组和未接种组的差异有统计学意义（ P<0.05）；皮疹涂抹/痂皮是否阳性及Ct值分布在接种组和未接种组差异均无统计学意义（ P>0.05）。 结论:幼年接种天花疫苗，仍可以罹患猴痘。在猴痘确诊病例中接种天花疫苗的人群与未接种天花的人群相比，临床特征和流行病学特征无显著差异。但在后续猴痘疫苗的研发和接种过程中也不可忽视曾接种过天花疫苗的人群。

目的:分析广州市猴痘病例的临床与实验室特征。方法:收集2023年6月8日至6月21日广州医科大学附属市八医院收治的猴痘患者的一般情况、症状、体征、实验室检查结果，对比分析合并人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者与HIV阴性者的临床特征。统计学分析采用独立样本 t检验、曼-惠特尼 U检验和Fisher确切概率法。 结果:19例猴痘患者均未曾接种天花疫苗，均为男同性恋者，发病前21 d内均有男男同性性行为史，年龄为(33.2±6.4)岁，合并HIV感染、梅毒者各8例。19例均出现皮疹，15例为首发症状，4例在病程中出现。17例患者有淋巴结肿大，15例淋巴结压痛，15例咽部充血，13例扁桃体肿大，11例发热，10例瘙痒。分别有13例患者的CD8 ＋T淋巴细胞计数、降钙素原、白细胞介素10(IL-10)升高，12例血清淀粉样蛋白A升高，7例血淋巴细胞计数升高。8例合并HIV感染，其中1例急性感染，7例慢性感染，这7例均已接受规律抗病毒治疗，起病前CD4 ＋T淋巴细胞计数为657(400，757)/μL。HIV阳性者与HIV阴性者的年龄( t＝1.55)、并发症发生率(Fisher确切概率法)、皮疹数量( Z＝－0.21)、淋巴结肿大发生率(Fisher确切概率法)、发热发生率(Fisher确切概率法)、发热天数( Z＝－0.48)、血淋巴细胞计数( t＝－1.55)、CD4 ＋T淋巴细胞计数( Z＝－0.17)、CD8 ＋T淋巴细胞计数( Z＝－1.49)的差异均无统计学意义(均 P>0.05)。皮疹数量为19(6，26)个，主要分布在会阴及附近区域(17例)，入院时常见皮疹形态为丘疹(15例)、焦痂(15例)、脓疱(12例)。所有患者经外用药物和对症治疗后痊愈。 结论:广州市猴痘患者以青中年男男同性性行为者为主，主要表现为皮疹、淋巴结肿大伴压痛、咽部充血、扁桃体肿大及发热，常见的实验室检查异常为炎症指标升高，免疫功能正常的HIV感染合并猴痘患者的临床特点与HIV阴性猴痘患者相似。

猴痘目前在世界范围内流行，且感染率呈持续增长状态。基因组测序结果显示目前全球流行的猴痘病毒主要有2种进化支，即刚果盆地(中非)进化支与西非进化支。中非进化支具有人群普遍易感、传染性强和病死率较高等特点；而导致2022年欧洲及其他非流行区猴痘疫情的是西非进化支，病情多呈自限性，患者病死率相对于中非进化支较低，并主要集中在男男同性性行为人群中，且部分患者缺乏典型的临床表现。研究显示天花疫苗接种对预防猴痘具有较好的作用。现对猴痘的流行病学和临床特点进行综述，以期为猴痘的临床诊治提供参考。

猴痘是由猴痘病毒感染引起的罕见疾病，主要发生在中非和西非国家。截至2022年5月25日，19个非流行国家及地区报道了219例确诊猴痘病例。本次猴痘疫情不同寻常地发生于非流行地区，且出现较高人际传播性。其暴发原因可能与天花疫苗接种停止后群体猴痘免疫水平降低相关，加之特定人群中行为模式相关的传播可能是本次疫情出现人际传播的原因。目前猴痘全球流行可能性极低，但我国仍有输入风险；建立监测体系，及时识别可疑病例及密切接触者是防控的关键。