目的:探讨白芍总苷(TGP)调节磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路对大鼠原发性痛经(PDM)的改善作用.方法:将雌性SD大鼠采用随机数字表法分为正常对照组(Nor组)、PDM模型组(PDM组)、低剂量TGP组(TGP-L组)、高剂量TGP组(TGP-H组)和高剂量TGP+PI3K激活剂740Y-P组(TGP-H+740Y-P组),每组12只.除Nor组外,其余各组大鼠采用苯甲酸雌二醇联合缩宫素制备大鼠PDM模型,并分别用50、100 mg/kg TGP干预TGP-L组、TGP-H组大鼠,TGP-H+740Y-P组大鼠另需10 mg/kg 740Y-P干预.末次给药后观察大鼠的扭体反应,记录扭体次数和潜伏期,行扭体反应评分.HE染色观察大鼠子宫组织的病理学变化,行病理学评分.ELISA法检测大鼠子宫组织前列腺素F2α(PGF2α)、前列腺素E2(PGE2)水平以及血清β-内啡肽(β-EP)水平.免疫印迹法测量子宫组织PI3K、Akt表达及其磷酸化水平.结果:与Nor组比较,PDM组子宫病理损伤严重,子宫组织病理学评分、PGF2α以及p-PI3K、p-Akt水平升高,子宫组织PGE2及血清 β-EP水平降低(均P＜0.05).与PDM组比较,TGP-L组、TGP-H组大鼠扭体反应潜伏期延长,扭体反应次数减少,扭体反应评分降低,子宫组织病理损伤减轻,子宫组织病理学评分、PGF2α以及p-PI3K、p-Akt水平降低,子宫组织PGE2及血清β-EP水平升高(均P＜0.05).高剂量TGP对大鼠PDM的改善作用更显著,而740Y-P减弱了 TGP对大鼠PDM的改善作用.结论:TGP可能通过抑制PI3K/Akt信号通路改善大鼠PDM.

目的 探讨中药痛消饮治疗寒凝血瘀证原发性痛经的效果及对丝裂原活化蛋白激酶/细胞外调节蛋白激酶(mitogen activated protein kinase/extracellular regulated protein kinase,MAPK/ERK)信号通路的影响.方法 选取衡水市中医医院 106 例寒凝血瘀证原发性痛经患者,按照随机数字表法分为中药组和常规组,各 53 例.常规组给予布洛芬颗粒治疗,中药组给予中药痛消饮治疗,2 组均于月经预来潮前 7d开始服药至月经来 3d后停服,共服用 3 个月经周期.比较 2 组疗效、治疗前后COX痛经症状量表(Cox dysmenorrhea symptom scale,CMSS)评分、疼痛视觉模拟评分(visual analog score,VAS)、血清疼痛介质[β-内啡肽(β-endorphins,β-EP)、前列腺素 F2α(prosta-glandin F2α,PGF2α)、前列腺素 E2(prostaglandin E2,PGE2)]水平、外周血单个核细胞 MAPK/ERK 信号通路相关因子[丝裂原活化细胞外调节激酶(mitogen activated extracellular regulated kinase,MEK)1、MEK2、ERK1、ERK2 mRNA]水平、子宫微循环状态[子宫动脉血流阻力指数(resistance index,RI)、搏动指数(pulsatility index,PI)、收缩期峰值/舒张期峰值(systolic peak/diastolic peak,S/D)]及不良反应发生率.结果 中药组总有效率高于常规组(P＜0.05).2 组治疗后 VAS评分、CMSS量表持续时间和严重程度评分低于治疗前,且中药组低于常规组(P＜0.05);2 组治疗后血清β-EP、PGE2 水平高于治疗前,且中药组高于常规组(P＜0.05);2 组治疗后 PGF2α水平,外周血单个核细胞 MEK1、MEK2、ERK1、ERK2 mRNA相对表达量,子宫动脉 PI、RI、S/D低于治疗前,且中药组低于常规组(P＜0.05).2 组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 中药痛消饮治疗寒凝血瘀证原发性痛经疗效显著,能通过抑制 MAPK/ERK信号通路相关因子和疼痛介质表达显著减轻痛经症状,还可改善子宫微循环状态,且安全性良好.

[目的]研究坤宁颗粒对痛经模型大鼠COX-2/PGF2α通路、内分泌激素、炎症因子和氧化应激水平的影响,探讨其保护作用及机制.[方法]取SD雌性大鼠,随机分为6组,正常对照组、模型组、益母草颗粒(3.5 g/kg)阳性对照组、坤宁颗粒低(1.4 g/kg)、中(2.8 g/kg)、高(5.6 g/kg)剂量组,除正常对照组外,其余组建立痛经模型,第 1、10 天灌胃戊酸雌二醇每只 0.2 mg,第 2～9 天每只 0.1 mg,从第 5 天各给药组灌胃给药,正常对照组和模型组灌胃蒸馏水,每日1 次,第 10天正常对照组大鼠腹腔注射生理盐水,其余各组大鼠腹腔注射缩宫素每只 10 U.观察各组大鼠扭体反应次数;采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测大鼠血清前列腺素F2α(PGF2α)、前列腺素E2(PGE2)、β-内啡肽(β-EP)、雌二醇(E2)、孕酮(PROG)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;比色法检测大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)水平;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测大鼠子宫组织环氧合酶-2(COX-2)、前列腺素E2 受体(PTGER2)、雌激素受体α(ERα)蛋白表达;苏木精-伊红(HE)染色观察子宫组织病理形态.[结果]与正常对照组相比,模型组大鼠扭体反应次数显著增加,大鼠血清中PGF2α、E2、IL-1β、IL-6、TNF-α、MDA水平和子宫组织COX-2、ERα蛋白表达显著升高,而血清PGE2、β-EP、PROG、SOD、GSH-Px水平显著降低,子宫PTGER2 蛋白表达显著降低,子宫组织可见明显充血、水肿.与模型组相比,坤宁颗粒可以显著降低大鼠扭体反应次数和血清中PGF2α、E2、IL-1β、IL-6、TNF-α、MDA水平,升高PGE2、β-EP、PROG、SOD、GSH-Px水平,显著抑制子宫组织COX-2、ERα蛋白表达,升高PTGER2 蛋白表达,组织病理学明显改善.[结论]坤宁颗粒对痛经模型大鼠具有显著的改善作用,其机制可能与调节COX-2/PGF2α通路和PGE2、β-EP、E2、PROG等内分泌激素、降低炎症因子水平、改善氧化应激水平有关.

目的:观察电针对原发性痛经(PDM)大鼠子宫组织磷脂酰肌醇 3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的影响,探讨电针治疗PDM的作用机制.方法:雌性SD大鼠随机分为空白组、模型组和电针组,每组10只.采用苯甲酸雌二醇皮下注射联合缩宫素腹腔注射法复制PDM大鼠模型.电针组予"关元"和双侧"三阴交"电针20 min,1次/d,连续10 d.观察并比较各组大鼠扭体次数、扭体评分和扭体潜伏期;HE染色法观察大鼠子宫病理形态,透射电镜观察各组大鼠子宫组织细胞超微结构的改变;ELISA法检测大鼠血清及子宫组织前列腺素E2(PGE2)、前列腺素F2α(PGF2α)的含量并计算PGF2α/PGE2;Western blot法检测各组大鼠子宫组织PI3K、Akt、mTOR及其磷酸化蛋白相对表达量并计算各自的比值.结果:HE染色显示,模型组大鼠子宫内膜严重水肿、细胞变性、凋亡,细胞核碎裂或消失,伴中性粒细胞浸润;电针组大鼠子宫内膜轻度水肿,伴少量中性粒细胞浸润.透射电镜示,模型组大鼠子宫组织成纤维细胞呈不规则形,细胞核严重不规则,线粒体肿胀,粗面内质网中度扩张;电针组上述超微结构损伤有所减轻.与空白组比较,模型组大鼠扭体次数、扭体评分升高(P<0.01),出现扭体潜伏期(P<0.01),子宫病理损伤评分,血清及子宫组织中PGF2α含量和PGF2α/PGE2比值,子宫组织中p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR比值升高(P<0.01,P<0.05),血清及子宫组织中PGE2含量降低(P<0.05);与模型组比较,电针组大鼠扭体次数、扭体评分降低(P<0.05,P<0.01),扭体潜伏期延长(P<0.01),子宫病理损伤评分,血清及子宫组织中PGF2α含量和PGF2α/PGE2比值,p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR比值降低(P<0.05),血清及子宫组织中PGE2含量升高(P<0.05).结论:电针能够明显改善PDM大鼠子宫炎性反应并缓解疼痛,其机制可能与降低PGF2α含量、抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路有关.

目的 采用网络药理学、分子对接和实验验证研究高良姜-香附药对(简称"良附")治疗原发性痛经(primary dysmenorrhea,PD)的作用机制.方法 通过TCSMP及文献检索,获得高良姜和香附的活性成分,由TCSMP与Swiss Target Prediction平台获得相应成分及靶点;以"primary dysmenorrhea""dysmenorrhea"为检索词,经GeneCard、DrugBank、DisGenet、TTD和OMIM数据库获取疾病靶点.利用STRING数据库进行PPI网络分析,由Metascape平台进行KEGG和GO富集分析,取高良姜-香附药对交集靶点、活性成分和相关通路构建"成分-靶点-通路"网络图.选取"成分-靶点-通路"网络和PPI网络的核心成分与靶点通过AutoDock进行对接.采用苯甲酸雌二醇和缩宫素联合制备小鼠原发性痛经模型,观察扭体反应;HE染色观察小鼠子宫病理变化;ELISA法检测PD小鼠血清中前列腺素E2(PGE2)、前列腺素F2α(PGF2α)和β-内啡肽(β-EP)的水平,Western blot法和RT-qPCR法验证蛋白和mRNA的表达.结果 良附共获得29种主要活性成分,核心靶点为STAT3、PIK3CA、AKT1、ESR1、TP53、PTGS2等;分子对接结果显示,关键成分与核心靶点都有较强的结合能力.动物实验结果表明,良附组可缓解PD小鼠子宫组织水肿、充血和炎症,降低小鼠血清中PGF2α的水平,升高PGE2和β-EP的水平,抑制COX-2、p38、PI3K、和p-AKT的蛋白表达,mRNA的表达与蛋白表达趋势一致.结论 良附能够缓解PD引起的疼痛,其机制可能是通过PI3K/AKT、MAPK和PTGS2等多途径发挥药效.

研究益母草水煎液对原发性痛经(primary dysmenorrhea,PD)的治疗作用,并结合非靶向代谢组学分析其潜在作用机制.将 40 只雌性成年大鼠,随机分为正常组、模型组、布洛芬(0.12 g·kg-1)组和益母草水煎液高、低剂量(5、2.5 g·kg-1)组,每组 8 只.采用肌肉注射苯甲酸雌二醇联合腹腔注射缩宫素法制备PD大鼠模型.自造模第 4 天起灌胃给药,连续 7 d.末次给药后,腹腔注射缩宫素,记录扭体潜伏期和 30 min内扭体次数;测定子宫与卵巢脏器系数;通过ELISA和生化试剂盒测定子宫组织中雌二醇(estradiol,E2)、孕酮(progesterone,Prog)、催产素(oxytocin,OT)、环氧合酶 2(cyclooxygenase 2,COX-2)、前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)、前列腺素F2α(prostaglandin F2α,PGF2α)和Ca2+含量;苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察子宫和卵巢组织形态学变化;免疫组化法检测子宫组织催产素受体(oxytocin receptor,OTR)、前列腺素E2 受体 3(prosta-glandin E2 receptor 3,EP3)和雌激素受体α(estrogen receptor alpha,ERα)的蛋白表达情况;荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qPCR)法检测子宫组织OTR、PGE2 受体 1～4(EP1、EP2、EP3、EP4)和PGF2α 受体(prosta-glandin F2α receptor,FP)的mRNA表达情况;采用超高效液相色谱-高分辨质谱仪联用(liquid chromatography quadrupole-time-of-flight mass spectrometry,LC-QTOF-MS)技术进行非靶向代谢组学分析,筛选潜在生物标志物并富集代谢通路.结果显示,益母草能够显著减少PD大鼠扭体次数(P<0.05 或P<0.01);显著降低子宫和卵巢系数(P<0.01),并使其组织形态得到改善;益母草处理后,PD大鼠子宫组织中的PGE2 含量显著提高(P<0.05),COX-2、PGF2α、Ca2+含量及PGF2α/PGE2 显著降低(P<0.05或P<0.01),OT含量降低,而E2、Prog含量有进一步提高趋势;子宫组织中OTR和EP3 蛋白表达显著下调(P<0.05 或P<0.01),ERα蛋白表达显著上调(P<0.05);子宫组织中FP、EP4 的 mRNA表达均显著下调(P<0.01),EP1、EP3 和OTR的mR-NA表达有下调趋势.非靶向代谢组学分析发现益母草处理后的PD大鼠血浆中有 10 个差异代谢物得到恢复.以上结果表明,益母草能够有效防治PD,调控前列腺素(prostaglandins,PGs)合成及对应受体结合可能是其潜在的作用机制.

目的 探讨当归芍药散配合布洛芬在原发性痛经(primary dysmenorrhea,PD)中的应用价值.方法 选取 2019 年 8 月至 2021 年 8 月来河南省许昌中医院妇产科就诊的 114 例PD患者作为研究对象,采用随机数字表法将其分为对照组(57 例)、研究组(57 例).对照组给予口服布洛芬治疗,研究组在对照组基础上给予当归芍药散治疗.比较 2组临床疗效、中医证候积分、血清疼痛介质[前列腺素F2α(prostaglandin 2α,PGF2α)、内皮素-1(endothelin-1,ET-1)、前列腺素 E2(prostaglandin E2,PGE2)、一氧化氮(nitric oxide,NO)]、子宫动脉血流动力学[阻力指数(resistance index,RI)、搏动指数(pulse index,PI)、收缩期峰值流速(peak systolic velocity,PSV)/舒张期峰值流速(diastolic peak velocity,DPV)]及炎性因子水平[白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、IL-10、血清淀粉样蛋白A(serum amyloid A,SAA)、超敏C反应蛋白(high sensitivity C-reactive protein,hs-CRP)].结果 研究组治疗总有效率 96%(55/57)高于对照组 75%(43/57)(P<0.05);治疗后研究组舌质黯、经血色暗、小腹胀痛证候积分较对照组低(P<0.05);治疗后研究组PGF2α、ET-1 水平低于对照组,PGE2、NO水平高于对照组(P<0.05);治疗后研究组RI、PI、PSV/DPV较对照组降低(P<0.05);治疗后2 组IL-6、SAA、IL-10、hs-CRP水平较治疗前降低,且研究组低于对照组(P<0.05).结论 当归芍药散配合布洛芬治疗PD具有较好疗效,可改善子宫动脉血流动力学,减轻炎症反应,有效缓解患者疼痛,促进疾病转归.

目的 观察痛消饮治疗原发性痛经的效果及其对患者子宫血流动力学指标的影响.方法 将我院妇科门诊108例原发性痛经患者随机分为观察组与对照组各54例,对照组给予布洛芬缓释胶囊治疗,观察组在对照组治疗基础上联合中药治疗,治疗时间均为3个月,比较两组临床疗效、疼痛评分、中医症候评分、子宫血流动力学指标及血清前列腺素、β-内啡肽(β-EP)水平.结果 治疗后,观察组总有效率显著高于对照组(P＜0.05);观察组患者视觉模拟(VAS)评分和中医证候评分均显著低于对照组(P＜0.05);观察组患者的阻力指数(RI)、搏动指数(PI)和收缩期峰值/舒张期峰值(A/B)均显著低于对照组(P＜0.05);观察组患者血清前列腺素F2α(PGF2.)水平显著低于对照组(P＜0.05),血清前列腺素E2(PGE2)和β-EP水平均显著高于对照组(P＜0.05).结论 痛消饮治疗原发性痛经的临床疗效显著,可显著改善痛经症状,改善子宫血流动力学指标,调节子宫内分泌系统.

目的:从神经-内分泌-免疫网络的角度探讨穴位埋线法治疗原发性痛经的机制.方法:雌性Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、西药组、穴位埋线组,每组10只.缩宫素制备大鼠痛经模型.西药组采用芬必得灌胃治疗,穴位埋线组在“关元”“次髎”“三阴交”穴进行简易穴位埋线治疗.比较各组大鼠30 min内扭体次数,ELISA法测定各组大鼠血浆中β-内啡肽(β-EP)水平及子宫组织前列腺素E2 (PGE2)、前列腺素F2α(PGF2α)含量,MTT比色法检测脾脏自然杀伤(NK)细胞活性.结果:与正常对照组比较,模型组扭体次数增多(P＜0.01);与模型组相比,西药组、穴位埋线组均能减少30 min内扭体反应次数(P＜0.01).与正常对照组比较,模型组血浆β-EP含量显著降低(P＜0.01),子宫组织中PGE2含量明显降低、PGF2α含量明显升高(P＜0.01),脾脏NK细胞活性明显降低(P＜0.01);与模型组比较,西药组、穴位埋线组血浆β-EP的含量明显升高(P＜0.01),子宫组织中PGE2含量明显升高、PGF2α的含量明显降低(P＜0.01),脾脏NK细胞活性明显升高(P＜0.01).结论:穴位埋线法治疗原发性痛经疗效显著,其机制与调节神经-内分泌-免疫网络有关,可升高血浆β-EP含量,降低子宫组织中PGF2α含量、升高PGE2含量,提高脾脏NK细胞活性.

目的 探讨当归/白芍提取物调节原发性痛经大鼠子宫供血的作用机制.方法 雌性未孕Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、治疗组、白芍组、当归组, 采用缩宫素建立原发性痛经大鼠模型, 用ELISA法检测各组大鼠血清中丙二醛 (Malondialdehyde, MDA) 、超氧化物歧化酶 (Superoxide dismutase, SOD) 、精氨酸加压素 (Arginine vasopressin, AVP) 、缩宫素 (Oxytocin, OT) 的浓度及大鼠子宫组织中前列腺素F2α (Prostaglandin F2α, PGF2α) 、前列腺素E2 (Prostaglandin E2, PGE2) 、一氧化氮 (Nitric oxide, NO) 、内皮素 (Endothelin, ET) 的含量.结果 与空白组比较, 模型组大鼠血清中MDA、AVP、OT浓度明显升高, SOD浓度降低, 子宫组织中PGF2α、PGE2含量均明显升高, NO含量显著下降, ET的含量显著上升 (P<0.05).与模型组比较, 治疗组大鼠血清中MDA、AVP、OT浓度明显降低, SOD浓度显著升高, 大鼠子宫组织中PGF2α、PGE2含量明显降低, NO含量增加, ET含量明显下降, 差异具有统计学意义 (P<0.05).结论 当归/白芍提取物能通过抑制子宫收缩, 调节血管舒缩物质, 改善子宫供血, 从而达到对原发性痛经的治疗作用.