[目的]研究坤宁颗粒对痛经模型大鼠COX-2/PGF2α通路、内分泌激素、炎症因子和氧化应激水平的影响,探讨其保护作用及机制.[方法]取SD雌性大鼠,随机分为6组,正常对照组、模型组、益母草颗粒(3.5 g/kg)阳性对照组、坤宁颗粒低(1.4 g/kg)、中(2.8 g/kg)、高(5.6 g/kg)剂量组,除正常对照组外,其余组建立痛经模型,第 1、10 天灌胃戊酸雌二醇每只 0.2 mg,第 2～9 天每只 0.1 mg,从第 5 天各给药组灌胃给药,正常对照组和模型组灌胃蒸馏水,每日1 次,第 10天正常对照组大鼠腹腔注射生理盐水,其余各组大鼠腹腔注射缩宫素每只 10 U.观察各组大鼠扭体反应次数;采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测大鼠血清前列腺素F2α(PGF2α)、前列腺素E2(PGE2)、β-内啡肽(β-EP)、雌二醇(E2)、孕酮(PROG)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;比色法检测大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)水平;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测大鼠子宫组织环氧合酶-2(COX-2)、前列腺素E2 受体(PTGER2)、雌激素受体α(ERα)蛋白表达;苏木精-伊红(HE)染色观察子宫组织病理形态.[结果]与正常对照组相比,模型组大鼠扭体反应次数显著增加,大鼠血清中PGF2α、E2、IL-1β、IL-6、TNF-α、MDA水平和子宫组织COX-2、ERα蛋白表达显著升高,而血清PGE2、β-EP、PROG、SOD、GSH-Px水平显著降低,子宫PTGER2 蛋白表达显著降低,子宫组织可见明显充血、水肿.与模型组相比,坤宁颗粒可以显著降低大鼠扭体反应次数和血清中PGF2α、E2、IL-1β、IL-6、TNF-α、MDA水平,升高PGE2、β-EP、PROG、SOD、GSH-Px水平,显著抑制子宫组织COX-2、ERα蛋白表达,升高PTGER2 蛋白表达,组织病理学明显改善.[结论]坤宁颗粒对痛经模型大鼠具有显著的改善作用,其机制可能与调节COX-2/PGF2α通路和PGE2、β-EP、E2、PROG等内分泌激素、降低炎症因子水平、改善氧化应激水平有关.

目的 建立坤宁颗粒HPLC指纹图谱,为其质量控制提供依据.方法 采用Kromasil 100-5 C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈–0.1％磷酸溶液,梯度洗脱;体积流量:1.0 mL/min;检测波长0～12 min为280 nm,12～55 min为230 nm;柱温:30℃;进样量:10μL.对指纹图谱共有峰进行指认,分析相似度,并考察了药材与制剂的相关性.结果 测定了10批坤宁颗粒,选择柚皮苷作为参照物,提取14个色谱峰作为指纹图谱共有峰,并将共有峰归属到各药材;10批样品相似度均大于0.95.结论 该法重复性好,简便可靠,为坤宁颗粒的质量控制和评价提供了依据.

目的 研究克龄蒙联合坤宁颗粒治疗更年期综合征的疗效.方法 选取2017年4月至2019年4月唐山市人民医院诊治的102例更年期综合征女性患者为研究对象.按照随机数字表法将其分为对照组(n=50)给予克龄蒙治疗,观察组(n=50)在对照组基础上给予坤宁颗粒治疗.观察两组患者疗效、性激素水平、生化指标、临床症状及不良反应情况.结果 治疗总有效率比较,观察组(92.16％)比对照组(76.47％)高,差异具有统计学意义(P＜0.05);治疗后,两组患者孕酮(P)、雌二醇(E2)均高于治疗前,黄体生成素(LH)、促卵泡激素(FSH)均低于治疗前,且观察组改善更加显著,差异具有统计学意义(P＜0.05);两组患者治疗后脂联素(ADPN)、超氧化物歧化酶(SOD)均高于治疗前,瘦素(LP)低于治疗前,且观察组改善更加显著,差异具有统计学意义(P＜0.05);两组患者治疗后Kupperman评分均低于治疗前,且观察组降低更加显著,差异具有统计学意义(P＜0.05);两组患者治疗期间均未发生严重不良发应.结论 克龄蒙联合坤宁颗粒治疗更年期综合征效果显著,可有效调节患者激素水平,缓解机体内氧化应激反应,促进临床症状改善,且联合用药的安全性较高.

目的 探讨坤宁颗粒联合米非司酮治疗围绝经期功能性子宫出血的临床疗效.方法 回顾性纳入2019年3月-2019年8月于新乡医学院第一附属医院妇产科接受治疗的102例围绝经期功能性子宫出血患者作为研究对象,按治疗方案分为对照组和观察组,每组各51例.对照组口服米非司酮片,10 mg/次,1次/d;观察组在对照组治疗的基础上口服坤宁颗粒,1袋/次,3次/d,两组共计治疗3个月.观察两组患者的临床疗效、平均控制出血时间、平均完全止血时间,比较两组治疗前后的血红蛋白水平、子宫内膜厚度及卵泡雌激素(FSH)、雌二醇(E2)、孕酮(P)、血管内皮生长因子(VEGF)、血管紧张素2(Ang-2)水平.结果 与对照组总有效率82.35％相比,观察组治疗后总有效率96.08％显著升高,差异具有统计学意义(P＜0.05).治疗后,观察组平均控制出血时间、平均完全止血时间均显著低于对照组,而血红蛋白水平显著高于对照组,差异均具有统计学意义(P＜0.05).治疗后,两组FSH、E2、P和子宫内膜厚度均显著降低,差异均具有统计学意义(P＜0.05);治疗后,观察组FSH、E2、P和子宫内膜厚度均显著低于对照组,差异均具有统计学意义(P＜0.05).治疗后,两组VEGF和Ang-2水平均显著降低(P＜0.05);且观察组VEGF和Ang-2水平显著低于对照组,差异均具有统计学意义(P＜0.05).结论 坤宁颗粒联合米非司酮能有效降低围绝经期功能性子宫出血患者的子宫出血量及缩短子宫出血时间,能显著降低FSH、E2、P、VEGF及Ang-2水平.

目的:对坤宁颗粒发挥抗凝血活性的质量标志物(Q-Marker)进行预测分析.方法:采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱法(UHPLC-Q-TOF-MS/MS)对坤宁颗粒的化学成分进行分析,检测条件为Waters ACQUITYUPLC HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8 μm),流动相乙腈(A)-25 mmol·L-1乙酸铵水溶液(B)梯度洗脱(0～5 min,5％～22％A;5～10 min,22％～30％A;10～15 min,30％～95％A;15～20 min,95％～5％A;20～30 min,5％A),流速 0.2 mL·min-1,柱温 30℃,进样量 1μL;电喷雾离子源(ESI),正、负离子检测模式.通过网络药理学方法对化学成分的靶点与异常子宫出血(AUB)的靶点进行交互分析,利用网络拓扑分析筛选出关键成分;通过高效液相色谱法(HPLC)建立10批坤宁颗粒的指纹图谱,采用血液凝固法及纤维蛋白原平板法测定坤宁颗粒的抗凝血活性,建立其谱效关系;选择拓扑分析与谱效关系中共有的成分作为Q-Marker,并对其抗凝血活性进行验证和确认.结果:坤宁颗粒含475个化学成分,丹酚酸B、芍药苷、柚皮苷和新橙皮苷等22个关键成分是治疗AUB的潜在物质基础;谱效分析结果表明,峰7(芍药苷)、峰9(柚皮苷)、峰10(新橙皮苷)和峰11(丹酚酸B)为最优主成分,体外活性实验表明这4个成分可较好地表征其抗凝血活性.结论:丹酚酸B、芍药苷、新橙皮苷和柚皮苷可能是坤宁颗粒发挥抗凝血活性的Q-Marker.

目的 研究坤宁颗粒治疗功能性子宫出血的药理作用.方法 用剪尾法和玻璃毛细管法测定小鼠出血时间、凝血时间;用血凝仪测定大鼠凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB);采用药物建立早孕大鼠不完全流产的功能性子宫出血模型,用紫外分光光度法检测大鼠的子宫出血量,ELISA法测定血清雌二醇(E2)、孕酮(P)含量,HE染色观察子宫内膜的病理损伤;用全自动血液流变仪测定气滞血瘀大鼠模型全血黏度、血浆黏度.结果 与空白组比较,坤宁颗粒可以明显缩短小鼠的出血时间、凝血时间及大鼠PT、APTT,升高大鼠FIB含量;与模型对照组比较,坤宁颗粒可以显著减少功能性子宫出血模型大鼠子宫出血量,升高血清E2、P含量,改善子宫内膜病变;与模型组比较,坤宁颗粒可以显著降低气滞血瘀模型大鼠全血黏度和血浆黏度.结论 坤宁颗粒可治疗功能性子宫出血模型大鼠子宫出血,其机制可能与调节E2、P水平,改善子宫血液循环,促进子宫修复有关.

目的 探讨坤宁颗粒联合屈螺酮炔雌醇片治疗功能失调性子宫出血的临床疗效.方法 选取2020年2月—2022年5月在苏州科技城医院就诊的78例功能失调性子宫出血患者,按照随机数字表法将所有患者分为对照组和治疗组,每组各39例.对照组口服屈螺酮炔雌醇片,于月经来潮第5天开始,1片/次,1次/d,连续口服21 d,以1个月经周期为1个疗程,连续治疗6个疗程.治疗组在对照组基础上温水冲服坤宁颗粒,1袋/次,3次/d,连续治疗6个月.观察两组的临床疗效,比较两组的症状改善时间、螺旋动脉的搏动指数(PI)、阻力指数(RI)、收缩末期峰值/舒张末期峰值的比值(S/D)以及血清中促卵泡激素(FSH)、促黄体生成素(LH)、泌乳素(PRL)、前列腺素E2(PGE2)、血管生成素-2(Ang-2)水平.结果 治疗后,治疗组总有效率为94.87％,明显高于对照组的总有效率76.92％(P<0.05).治疗后,治疗组患者月经周期恢复时间、完全止血时间、小腹坠痛消失时间均明显短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).治疗后,两组的螺旋动脉PI、RI、S/D均显著降低(P<0.05),治疗组螺旋动脉PI、RI、S/D明显低于对照组(P<0.05).治疗后,两组的血清FSH水平高于治疗前,血清LH、PRL、PGE2、Ang-2水平低于治疗前(P<0.05);治疗后,治疗组的血清FSH水平高于对照组,血清LH、PRL、PGE2、Ang-2水平低于对照组(P<0.05).结论 坤宁颗粒联合屈螺酮炔雌醇片可提高功能失调性子宫出血的临床疗效,改善临床症状,改善子宫血流动力学指标,调节患者的性激素分泌,药物安全性良好.