目的 构建特应性皮炎(atopic dermatitis,AD)寒湿证病证结合小鼠模型,并对模型进行宏观表征及微观指标评价.方法 将Balb/c小鼠随机分为正常对照组、疾病模型组、寒湿证组、病证结合组,每组 6 只.其中正常对照组小鼠外涂基质液;疾病模型组小鼠外涂二硝基氯苯(dinitrochlorobenzene,DNCB),模拟特应性皮炎疾病模型;寒湿证组小鼠在外涂基质液基础上,采用人工气候箱模拟寒湿环境[温度(4±2)℃、相对湿度(90±5)%],并结合高脂饲料喂养模拟寒湿证;病证结合组小鼠在DNCB造模基础上,结合寒湿证证候模拟方法进行复合造模.采用经皮水分流失测量仪对动物经皮水分流失(transepidermal water loss,TEWL)进行测量和评估;对小鼠皮炎和寒湿证证候情况进行观察评价;对搔抓行为进行记录分析;HE染色观察小鼠背部皮肤组织病理改变,并对其表皮厚度和炎症细胞浸润情况进行分析;Western blot法检测皮肤中紧密连接蛋白 1(Claudin-1)、瞬时受体电位香草酸 3(transient receptor potential vanilloid 3,TRPV3)和TRPV4 蛋白的表达水平;利用流式细胞术分析淋巴结辅助性T细胞17(helper T cells 17,Th17)/调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)比值.结果 与疾病模型组比较,病证结合组小鼠的证候评分明显升高(P<0.001),TEWL值明显升高、背部皮肤表皮厚度明显增加(P<0.05),背部皮肤的Claudin-1、TRPV3 蛋白表达量显著降低(P<0.01),而TRPV4 蛋白表达显著升高(P<0.05).结论 采用DNCB进行特应性皮炎疾病造模,并结合寒湿环境及高脂饮食的寒湿证造模方式,能够成功构建特应性皮炎寒湿证病证结合小鼠模型.该研究为后续深入探索特应性皮炎寒湿证病证结合动物模型构建及中药复方对AD的药效学研究提供了较理想的动物模型.

目的 基于中医状态学宏、中、微观健康状态表征参数体系探讨冠心病血瘀证前证发展过程中的相关保护/危险因素.方法 收集湖南中医药大学各附属医院就诊于心内科门诊及住院部冠心病待查对象253例,按照宏观、中观、微观3个维度制定调查问卷,对采集的参数用Python软件进行分类整理,将患者诊断为冠心病血瘀证前证(150例)和冠心病血瘀证(100例),用频次分析、χ2检验及Logistic回归等方法进行统计分析.结果 ①单因素分析结果显示:年龄、BMI、吸烟史、饮酒史、高血压史、糖尿病史、月平均高温、空气质量、季节、职业类型、社会环境、冠脉造影狭窄、舒张压、收缩压、肌酐、尿酸、总胆固醇等指标在冠心病血瘀证前证和冠心病血瘀证之间存在差异,差异均有统计学意义(P<0.05).②二元Logistic回归分析显示:年龄、BMI、饮酒史、职业类型、冠脉造影狭窄、舒张压、肌酐、暗红舌是其独立危险因素.建立预测模型:P=1/[1+exp(16.522-1.427×年龄-0.975×BMI-3.55×饮酒史+1.982×月平均高温+0.709×季节-1.827×职业类型-1.1×冠脉造影狭窄-0.072×舒张压-0.076×肌酐+2.398×头晕-4.108×暗红舌+4.169×脉涩)],模型预测率为90.5%.结论 冠心病血瘀证logistic回归模型与临床诊断良好,为冠心病已病与未病之间的状态探索奠定基础,为亚健康理论提供重要的基础数据.

中药传统性状一般是指感官获得的宏观性状,如形、色、气、味等,不包括微观性状.在中药"辨状论质"相关研究中发现,中药的微观性状(显微特征)也与其质量相关,且其特征更容易量化和数字化,在中药"辨状论质"的机制探讨中具有重要作用.为此,依据遗传学中"性状"的概念,结合中药的特点,将中药的微观性状(显微特征)与宏观性状合二为一,提出"中药性状学"的概念,即对中药所呈现的宏观和微观性状进行表征和研究的应用科学.中药性状学不仅能够揭示中药"辨状论质"机制和传统的中药鉴别经验的科学内涵,而且还能与中药化学、中药生物学质量标志物关联(三学关联),建立符合中医整体观的中药质量三维评价体系.因此有必要将其内涵、任务、地位加以归纳总结,以便更好地服务于中药质量评价和控制.

结合生物学学科特点,利用"宏观—微观—符号"三重表征理论开展基因连锁和交换定律教学,在新知获取中实现3个表征水平的结合与转化,并将此理论应用于生活中的真实情境来解决实际问题,落实学生核心素养的培养.

目的 评估DNV-1929在犬肺中的强化效应和可操作性,通过观察其在手术切除过程中的表征为其临床应用提供科学依据.方法 15只10～15个月龄的比格犬,随机分组,植入DNV-1929和阴性对照材料.用特定的手术技术将材料植入犬的左肺前叶后部、后叶前部和后叶后部共3个部位,通过气道压力测试评估其耐压性能,并评估植入材料的操作性能.在植入后的第2周和第4周,对犬左肺3个植入材料部位进行宏观肉眼观察和病理检查,比较DNV-1929与阴性对照材料的组织反应.此外,观察所有实验动物临床症状、进食量和体质量变化以评估材料植入的安全性.结果 在气道压力水平高达35 hPa时,DNV-1929和阴性对照材料在植入部位均无气体泄漏,表现出相似的压力抗性.在手术过程中,DNV-1929显示出与阴性对照材料相似的可操作性,未观察到明显的异常情况.植入2周和4周后通过肉眼病理观察可见,两种材料均在植入部位周围形成包囊,并与胸腔器官发生不同程度的粘连,但差异无统计学意义(P＞0.05).植入DNV-1929组在2周时有较多的残留植入物,而植入4周时几乎消失,而阴性对照组还存在少量植入材料,但两组残留材料差异无统计学意义(P＞0.05).组织学评估结果显示,植入DNV-1929于2周时,炎症情况小计评分略高于阴性对照组(P=0.016),而植入4周的组间差异无统计学意义(P＞0.05).研究期间实验犬未出现临床异常或进食量减少,DNV-1929和阴性对照物当天无死亡.实验犬在研究周期内体质量无明显变化(P＞0.05).结论 DNV-1929在犬肺中表现出强化效应和良好的可操作性,且对周围组织无毒性影响.这为DNV-1929在肺部手术治疗中的应用提供了初步证据,为其在临床上的应用奠定了科学基础和其潜在价值.

目的 归纳痰浊内涵,确定痰浊阻遏证动物宏观表征,搭建量表理论框架,为高脂血症痰浊阻遏证动物模型的评价提供可借鉴的方法.方法 检索2012年1月1日-2022年7月1日期间《中医基础理论》《中医大辞典》《中药新药临床指导原则》《中医临床诊疗术语·证候部分》等相关著作中痰浊阻遏证的内容及中国知网(CNKI)、万方(Wanfang)和维普(VIP)数据库发表的与痰浊阻遏证动物模型相关的实验文献,归纳痰浊的具体概念及表现,并以此为依据,确定量表基本框架,建立条目池并赋分.结果 高脂血症痰浊阻遏证动物模型评价量表共包括8个维度,5个测量指标以及7个观察指标.结论 引入量表的评价方式,可完善动物模型的评价体系,提高模型评价的稳定性和可靠性,为保证基于动物模型进行证候生物学基础及干预效果研究的同质性奠定基础.

目的 观察自拟疏肝健脾方对肝郁脾虚证大鼠的影响及其可能的作用机制.方法 慢性捆绑束缚法制备大鼠肝郁脾虚证模型.60只大鼠随机分为正常组,模型组,疏肝健脾方高、中、低剂量组,阳性对照组,每组10只,连续21 d每日束缚3 h,束缚前30 min大鼠灌胃给药.通过记录大鼠宏观表征观察一般情况,体质量和小肠推进率观察大鼠"脾虚"情况,脾指数和胸腺指数反映大鼠免疫水平.通过旷场实验观察大鼠抑郁情绪以及糖水偏好率观察大鼠欣快感共同反映"肝郁"的情况.ELISA法检测大鼠血清中皮质酮(corticosterone,CORT)、5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)、多巴胺(dopamine,DA)的含量.结果 与正常组比较,模型组大鼠体质量减轻(P＜0.05),总活动距离明显减少(P＜0.05),活动速度减慢(P＜0.05),糖水偏好率、小肠推进率、脾指数均下降(P＜0.05),CORT含量、NE含量均升高(P＜0.05).与模型组比较,疏肝健脾方各剂量组大鼠总活动距离及糖水偏好率均增加(P＜0.05),疏肝健脾方低剂量组小肠推进率升高、脾指数上升(P＜0.05),疏肝健脾方中、低剂量组活动速度增快(P＜0.05),疏肝健脾方高、低剂量组CORT含量、NE含量均降低(P＜0.05),5-HT和DA含量差异无统计学意义(P＞0.05).结论 疏肝健脾方可以有效改善大鼠肝郁脾虚证,其机制可能与调控下丘脑-垂体-肾上腺(hypothalamic pituitary adrenal,HPA)轴功能相关.

目的 观察胃复春对胃癌前病变(Precancerous lesions of gastric cancer,PLGC)大鼠的干预作用.方法 选取健康SPF级雄性Wistar大鼠30只,按随机数字表法分为胃复春组、模型组、对照组,每组各10只,胃复春组给予胃复春灌胃,模型组及对照组给予生理盐水灌胃,1次/d,共灌胃16周.造模成功后,立即处死所有大鼠,按照组别取胃黏膜组织,进行病理组织学观察.其余组织应用RT-PCR法、Western Blot法检测Akt、p-Akt、NF-κB、COX-2的表达情况.结果 胃复春可以有效的改善PLGC大鼠模型的一般状态、宏观表征等,还可逆转大鼠胃黏膜的病理学状态,从而降低PLGC的发生率;与对照组比较,模型组大鼠胃黏膜组织Akt、p-Akt、NF-κB、COX-2蛋白表达水平均明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05);与模型组比较,胃复春组Akt、p-Akt、NF-κB、COX-2蛋白水平均明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).与对照组比较,模型组大鼠胃黏膜组织Akt、p-Akt、NF-κB、COX-2 mRNA表达水平均明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05);与模型组比较,胃复春组大鼠胃黏膜组织Akt、p-Akt、NF-κB、COX-2 mRNA表达水平均明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 胃复春可通过抑制Akt、p-Akt、NF-κB、COX-2增殖,调控PI3K/Akt信号通路的异常活化,进一步阻断PLGC的发生与发展.

中医症候实验动物模型的构建在中医药作用机理研究方面起到重要支撑作用,近年来脾虚证动物模型的构建和评价文献报道越来越多,但是构建方法标准不一,评价指标客观化不足,本文将从动物选取、模型建立、宏观表征、行为学实验、脾虚的客观指标等方面总结脾虚动物模型的构建和评价方法,以期为脾虚证实验动物模型的构建提供理论指导,为脾虚动物模型平台的选取提供文献参考.

目的 本文聚焦腐败这一重要晚期尸体现象,以期找到更客观的晚期尸体现象关键事件或特征节点,为准确评估尸体腐败程度、进而推断死亡时间(PMI)提供有力依据.方法 本研究通过对晚期尸体现象进行观测,对尸体腐败过程中肠道和尸坑土微生物菌群结构变化,以及尸坑土理化性质的检测,从宏观和微观两个层面,分析尸体腐败过程中腹腔自然破裂这一关键事件发生的时刻前后变化.结果 研究发现尸体腹腔自然破裂前后,腐败现象和相关微生物菌群结构以及环境理化性质三方面均有显著差异,且可观测性强,可以通过法医学观察、生物学和理化相关检测手段准确判断.本研究将这一关键事件发生时刻命名为"破溃点".结论 本文认为"破溃点"可以作为法医实践中尸体腐败程度评估的重要节点,也可以作为基于微生物菌群结构变化等表征构建PMI推断模型时的分界点,分段构建模型以提升PMI推断模型的准确度.