目的:建立超高效液相色谱法同时测定小儿肝炎颗粒中7种环烯醚萜苷类和4种黄酮类成分的含量测定方法。方法:采用Agilent Ecilipse C18(2.1 mm×100 mm，1.6 μm)色谱柱，柱温30 ℃，流动相为乙腈-0.05%磷酸水溶液，梯度洗脱，流速0.3 ml/min，检测波长240、278 nm。结果:獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷、山栀苷甲酯、羟异栀子苷、京尼平龙胆二糖苷、栀子苷、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素线性范围分别为19.16～306.56 μg( r＝0.999 4)、3.34～53.28 μg( r＝0.999 1)、5.30～84.64 μg ( r＝0.999 5)、0.80～12.80 μg( r＝0.999 4)、0.46～7.20 μg( r＝0.999 2)、2.78～44.48 μg( r＝0.999 6)、6.02～96.16 μg( r＝0.999 9)、33.22～531.36 μg( r＝0.999 9)、3.92～62.72 μg( r＝0.999 2)、2.38～37.92 μg( r＝0.999 7)、1.32～20.96 μg( r＝0.999 9)；平均加样回收率( n＝9)均在94.62%～107.53%之间， RSD均小于3.0%。 结论:经方法学验证，该法可同时测定小儿肝炎颗粒中11种成分含量，可为其质量控制提供参考。

基于网络药理学、组分结构理论剖析独一味抗炎有效成分(环烯醚萜苷类:山栀子苷甲酯、8-O-乙酰山栀子苷甲酯;黄酮苷类:木犀草苷;苯乙醇苷类:连翘酯苷B)的协同作用与配伍结构.网络药理学:利用CTD、SwissTargetPrediction、Pharm-Mapper数据库收集并筛选了各有效成分抗炎靶点;通过CTD、GeneCards数据库获得炎症相关靶点;利用Venny 2.1、STRING和Cytoscape 3.9.1得到核心靶点;通过DAVID数据库对核心靶点进行GO功能注释及KEGG通路富集分析.组分结构:基于二甲苯致小鼠耳肿胀模型和均匀设计法,以炎症因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleu-kin-6,IL-6)为因变量,通过二次多项式逐步回归,探究独一味抗炎成分间的配伍关系,并进行体内药效实验验证.网络药理学研究表明,与单一组分相比,3类组分共同作用可通过更多生物过程、通路、靶点协同发挥抗炎作用.组分结构研究表明,环烯醚萜苷组分内(山栀子苷甲酯∶8-O-乙酰山栀子苷甲酯)最佳结构比例为1.21∶1;3类组分间(环烯醚萜苷∶苯乙醇苷∶黄酮苷类)最佳结构比例为4.8∶1.6∶1.综上,独一味各抗炎成分可协同增效,且成分间存在最优配伍比例关系,为独一味内在质量控制提供了新的实验依据.

独一味Lamiophlomis rotata(Benth.)Kudo为藏族习用药材,药用部位为干燥地上部分.现代研究表明,独一味主要含有环烯醚萜苷类、苯乙醇苷类、黄酮类、挥发油类等化学成分,具有镇痛、止血、抗菌、抗炎、免疫调节、抗肿瘤等药理作用.在对独一味化学成分及药理作用总结的基础上,结合其质量研究现状,从药性、功效、成分可测性、药动学等方面对其质量标志物(Q-marker)进行预测,槲皮素、芹菜素、山栀苷甲酯、8-O-乙酰山栀苷甲酯、胡麻属苷、连翘酯苷B、木犀草苷、马钱苷等成分可作为独一味的主要Q-marker,以期为独一味产品开发研究及质量标准的合理建立提供参考.

目的 利用网络药理学和分子对接技术阐明金丹健肝胶囊治疗肝纤维化可能的作用机制.方法 通过中药系统药理学数据库分析平台(http://tcmspw.com/tcmsp.php)和HERB数据库(http://herb.ac.cn)检索金丹健肝胶囊活性成分和靶点,通过DisGeNET、药物靶点数据库(Therapeutic Target Database,TTD)筛选肝纤维化疾病靶点;将金丹健肝胶囊活性成分的药物靶点与疾病靶点匹配,所得共同靶点导入STRING数据库平台构建蛋白质相互作用(protein pro-tein interaction,PPI)网络;利用Cytoscape3.9.1软件CytoNCA工具进行拓扑分析,筛选关键靶点;应用Cytoscape3.9.1软件构建"中药-关键活性成分-关键靶点"网络图;通过DAVID平台(https://david.ncifcrf.gov)对关键靶点进行KEGG(Kyoto encyclopedia of genes and genomes)富集分析;采用LeDock软件对活性成分与靶点进行分子对接验证.结果 筛选获得金丹健肝胶囊180个潜在活性成分,1 340个靶点,肝纤维化疾病1 060个靶点,两者共同靶点273个.PPI网络互作筛选出与肝纤维化相关的关键靶点29个,并通过KEGG分析及分子对接验证.金丹健肝胶囊通过异牡荆素、槲皮素7-O-β-D-葡萄糖苷、(3S,6S)-3-(苄基)-6-(4-羟基苄基)哌嗪-2,5-醌、6-O-丁香酰基-8-O-乙酰基山栀苷甲酯、丹参新酮Ⅱ、降丹参酮、茵陈色原酮、依靛蓝酮等活性成分,作用于EGFR、MMP9、PTGS2、ESR1、PIK3CA、F2、PPARG、PTPN11等关键靶点,具体机制可能与HIF-1信号通路、C型凝集素受体信号通路、Toll样受体信号通路、肿瘤坏死因子信号通路、松弛素信号通路以及FoxO信号通路等有关.结论 金丹健肝胶囊可通过多成分、多靶点和多通路方式抗肝纤维化.

建立同时测定独一味中胡麻属苷、山栀苷甲酯、绿原酸、咖啡酸、8-O-乙酰山栀苷甲酯、连翘酯苷B、木犀草苷和麦角甾苷8种成分含量的方法.采用Kinetex XB-C18色谱柱(4.6 mm×50 mm,2.6 μm)以乙腈(A)-O.1％磷酸溶液(B)为流动相进行梯度洗脱(0 ～ 10 min,6％ ～14.5％ A;10～18.5 min,14.5％ ～17％ A;18.5～23 min,17％ ～ 18％A),流速1.0 mL·min-1,检测波长238,320,350 nm,柱温30℃.结果发现8个成分分离度良好,在线性范围内呈现良好的线性关系(r≥0.999 8),平均加样回收率96.61％ ～ 100.4％.该方法操作简便,专属性好,精密度高,可用于独一味药材的鉴别及质量评价.研究表明,独一味各类成分之间具有相关性;产地是影响独一味成分含量的主要因素;退化梯度对其含量影响不明显;样品储藏一年后胡麻属苷含量显著降低.

目的:建立关节康胶囊的质量标准.方法:采用薄层色谱法(TLC)对制剂中的肿节风、独一味、鹿衔草、白芍、川芎进行定性鉴别;采用高效液相色谱法(HPLC)测定制剂中异嗪皮啶、山栀苷甲酯、8-O-乙酰山栀苷甲酯总和、芍药苷的含量.结果:TLC鉴别特征清晰,阴性对照无干扰;HPLC结果显示异嗪皮啶、山栀苷甲酯、8-O-乙酰山栀苷甲酯、芍药苷分别在0.00175～0.01750 mg(r=0.9996)、0.00425～0.04250 mg(r=0.9995)、0.00240～0.02400 mg(r=0.9993)、0.00750～0.09000 mg(r=0.9992)范围内线性关系良好,平均回收率分别为99.50％、98.37％、99.24％、99.75％,RSD分别为1.99％(n=6)、1.41％(n=6)、1.99％(n=6)、1.72％(n=6).结论:关节康胶囊的定性、定量方法准确、简便,可用于关节康胶囊的质量控制.

目的:观察鞘内给予独一味单体8-O-乙酰山栀苷甲酯(8-O-acetyl-SM,8-OaS)对慢性神经病理性痛大鼠脊髓背角内丝苏氨酸蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)-哺乳动物雷帕霉素靶点(the mammalian target of rapamycin,mTOR)信号转导通路表达的影响.方法:采用大鼠腰5脊神经结扎(spinal nerve ligation,SNL)构建神经病理性痛模型,使用Von-Frey 细丝连续观察造模后大鼠术侧后足的痛阈改变;应用Westernblot法定量分析大鼠腰膨大节段AKT和mTOR的磷酸化水平;采用免疫荧光组织化学染色观察pAKT和磷酸化mTOR(pmTOR)在脊髓背角内的细胞定位.结果:由行为学数据可见,SNL模型大鼠机械性痛阈明显降低(P<0.01).术后1~7 d鞘内连续给予8-OaS进行人为干预,与给药前对比差异有统计学意义(P<0.05);免疫荧光双重标记记实验结果显示,脊髓背角内pAKT与星形胶质细胞标记物胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein, GFAP)存在大量共表达,pmTOR在星形胶质细胞和神经元上均观察到大量阳性染色.Western blot实验结果提示,8-OaS能显著下调脊髓背角内pAKT和pmTOR蛋白的表达水平.结论:鞘内给予8-OaS可有效缓解由SNL诱导的机械性痛阈,其机制可能是8-OaS通过下调脊髓背角内AKT-mTOR信号通路的表达水平,进而抑制了星形胶质细胞的活化,从而达到缓解神经病理性痛的效果.

目的 研究独一味Lamiophlomis rotata (Benth.) Kudo的化学成分.方法 独一味的50％乙醇提取液采用硅胶、ODS、Sephadex LH-20进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构.结果 从中分离得到10个化合物,分别鉴定为去咖啡酰基类叶升麻苷(1)、markhamioside A(2)、gentioside (3)、6-O-乙酰山栀苷甲酯(4)、phloyoside Ⅰ(5)、7,8-dehydropenstemoside (6)、phlorigidoside C(7)、β-胡萝卜苷(8)、咖啡酸(9)、棕榈酸(10).结论 化合物1～3首次从该植物中分离得到.

目的:建立HPLC法同时测定壮药玉叶金花中山栀苷甲酯、玉叶金花苷酸甲酯、8-O-乙酰山栀苷甲酯、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、3,4-O-二咖啡酰基奎宁酸及4,5-O-二咖啡酰基奎宁酸9个成分的含量.方法:采用CAPCELL MGⅡC18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈(A)-0.1％磷酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL· min-1,检测波长254 nm,柱温35℃,进样量10μL.结果:玉叶金花中9个成分在各自的线性范围内(新绿原酸0.151～189.2 μg·mL-1,山栀苷甲酯0.768～960.4 μg· mL-1,绿原酸0.775～968.7 μg·mL-1,隐绿原酸0.886～1 107 μg·mL-1,玉叶金花苷酸甲酯0.734～917.0 μg·mL-1,8-O-乙酰山栀苷甲酯0.795～993.5 μg·mL-1,3,4-O-二咖啡酰基奎宁酸0.872～1 090 μg· mL-1,3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸0.788～985.3 μg· mL-1和4,5-O-二咖啡酰基奎宁酸0.767～958.9 μg· mL-1)均呈良好的线性关系,平均加样回收率、精密度、重现性和稳定性均符合有关规定.样品中9个成分的含量分别为新绿原酸0.30 ～1.57 mg· g-1,山栀苷甲酯0.34～5.20 mg· g-1,绿原酸0.34～5.84 mg·g-1,隐绿原酸0.32 ～2.26 mg· g-1,玉叶金花苷酸甲酯0.05～21.63 mg·g-1,8-O-乙酰山栀苷甲酯0.07～18.93 mg·g1,3,4-O-二咖啡酰基奎宁酸1.02～4.21 mg· g-1,3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸0.39～5.77 mg· g-1,4,5-O-二咖啡酰基奎宁酸1.38～5.25 mg· g-1.结论:该方法可用于玉叶金花中9种成分的含量测定.

目的 建立栀子的指纹图谱并采用电喷雾离子源-四极杆-飞行时间质谱(ESI-Q-TOF MS)对其共有峰进行定性分析.方法 采用Kromasil 100-5 C18柱,以乙腈-0.1％磷酸梯度洗脱,体积流量为1mL/min,柱温为35℃,检测波长为238、327、440 nm.使用Matlab 7.1软件编程,对3波长下的CSV格式数据进行全时段融合.结果 各色谱峰分离度良好,3波长融合指纹图谱全面体现了栀子238、327、440 nm特征吸收波长的指纹信息,标定20个共有峰,并完成其中16个成分的鉴定.10批不同批次的栀子指纹图谱与对照指纹图谱之间相似度较好,相似度大于0.90以上.结论 实现了栀子融合指纹图谱的测定,同时解析了图谱中的化学组成,并制定了主成分与栀子苷相对峰面积的范围,为全面控制药材质量提供了数据支撑.