大量研究表明金银花和山银花在有机物上的确具有显著性差异,但仍然缺少有关两者间无机元素方面的研究.该研究通过电感耦合等离子体质谱(inductively coupled plasma mass spectrometry,ICP-MS)建立非靶向元素组方法,比较金银花和山银花在无机元素上的整体差异,并筛选其差异标志物.同时通过靶向方法定量分析这些差异标志物.非靶向元素组结果表明,得到的数学模型能够较好地反映金银花和山银花在元素含量的差异.以变量重要性投影值(VIP)>2.0,P<0.01 和倍数变化值(FC)>1.2 或<0.80 为筛选原则,确认了锰(55 Mn)、铋(209 Bi)、镉(111 Cd)、铷(85 Rb)等 4 种无机元素为两者的差异标志物.靶向定量结果表明,金银花中209 Bi的含量显著高于山银花,而山银花中55 Mn、111 Cd和85 Rb显著高于金银花.该研究所建立的基于ICP-MS的非靶向和靶向元素组方法可显著反映金银花和山银花的无机元素的整体差异;从元素的角度探讨两者间差异,可部分反映两者药性上的差异,也为进一步研究金银花与山银花中无机元素质量控制模式的建立和其药理功效奠定了基础.

目的 对山银花茎叶化学成分进行分离和结构鉴定,并进行体外抗炎活性评价.方法 山银花茎叶 80%甲醇提取物采用Diaion HP20SS、Sephadex LH-20、高速逆流色谱、反相半制备液相色谱等进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构.通过测定单体化合物抑制LPS诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7 释放NO水平评价其抗炎活性.结果 从山银花茎叶中分离得到 13 个化合物,分别鉴定为苄醇-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(1)、獐牙菜苷(2)、表断马钱子苷半缩醛内酯(3)、马钱子苷半缩醛内酯(4)、裂环马钱苷(5)、断氧化马钱苷(6)、裂马钱素二甲基乙缩醛(7)、绿原酸甲酯(8)、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷(9)、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷(10)、野漆树苷(11)、木犀草素-7-O-α-L-吡喃阿拉伯糖(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(12)、忍冬苷(13);化合物 2～8、11～13 可抑制LPS诱导RAW264.7 细胞释放NO.结论 化合物 1 首次从忍冬属植物中分离得到,化合物 3、5、7、9、11～12 首次从山银花茎叶中发现.化合物 2～8、11～13 具有一定的抗炎活性.

山银花是一种有价值的药用资源,但其油的化学成分和生物活性尚未深入研究.本文通过气相色谱-质谱仪联用法(GC-MS)及超高效液相色谱-高分辨质谱联用(UHPLC-QE-MS)对超临界CO2萃取法得到的山银花油进行系统的化学成分表征,并探讨其体外抗氧化及细胞抗炎能力等生物活性.GC-MS共鉴别出66种化合物,主要为脂肪酸类、甾醇类和烷烃类化合物.UHPLC-QE-MS在正负离子模式下分别鉴别出83和71种化合物,主要为萜类、黄酮类等化合物.抗氧化结果表明山银花油清除ABTS自由基能力呈良好的剂量依赖性,DPPH自由基的IC50值为3.49 mg/mL.同时抗炎实验表明山银花油可显著抑制脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞(RAW 264.7)炎性因子IL-6(P＜0.05)和NO(P＜0.05)的释放,发挥抗炎作用.以上结果表明,山银花油化学成分复杂多样,是一种具有较优抗炎作用的天然活性来源,且在食品医药中有较好的开发和应用价值.

目的 利用微芯片电泳技术对金银花和不同基原山银花进行鉴定.方法 根据忍冬科植物的基因序列变异位点分别设计出金银花和山银花的特异性聚合酶链式反应(PCR)引物,运用等位基因特异聚合酶链式反应(AS-PCR),对各药材的DNA进行特异性扩增,并应用全自动微芯片电泳技术对扩增产物进行分析.结果 使用金银花PCR引物时,金银花可扩增出约468 bp的特征性DNA片段,而不同基原的山银花几乎没有该片段;使用山银花PCR引物时,不同基原的山银花均扩增出约331bp的特征性DNA片段,而金银花几乎没有该片段.结论 本方法可对金银花和不同基原的山银花进行快速准确的鉴定,为中药DNA分子鉴定技术的拓展应用提供参考.

目的 利用近红外光谱结合化学计量学,同时建立金银花中多种指标成分定量检测模型和真伪金银花定性鉴别模型.方法 考察粉末粒径和装样厚度对NIR光谱的影响,结合偏最小二乘法建立绿原酸、酚酸、木犀草苷3种成分的定量检测模型,结合马氏距离法与偏最小二乘判别分析建立金银花与山银花定性鉴别模型.结果 当粉末粒径≤250 μm且装样厚度≥15 mm时,同一样品NIR光谱的相关系数大于0.95,均方根值、欧氏距离分别小于0.020、0.680且无明显变化,其重复性与稳定性可被接受;绿原酸、酚酸、木犀草苷定量检测模型的预测相对平均偏差分别为2.99%、2.44%、6.09%,预测值与真实值有较高拟合度;金银花与山银花定性鉴别模型预测准确率为100%.结论 在确定金银花前处理方法的基础上,同时建立多种定量和定性NIR快检模型,对提高检测效率并进行多角度分析有积极意义.

目的 建立UPLC-QTRAP-MS/MS法同时测定连花清瘟胶囊(颗粒)中连翘苷、连翘酯苷A、绿原酸、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸、木犀草苷、盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱、苦杏仁苷、(R,S)-告依春、芦荟大黄素、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、大黄酸、红景天苷、甘草苷、甘草酸铵,以及山银花中灰毡毛忍冬皂苷乙的含量.方法 该药物 40%甲醇提取液的分析采用 Waters ACQUITY UPLC HSS T3 色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8 μm);流动相(5 mmol/L乙酸铵+0.1%甲酸)-甲醇,梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;柱温35℃;电喷雾离子源;正负离子模式扫描;多反应监测模式.结果 19 种成分在各自范围内线性关系良好(r＞0.999 0),平均加样回收率89.37%～102.19%,RSD 2.03%～3.75%.各批样品均未检出灰毡毛忍冬皂苷乙.结论 该方法简便、准确、高效,可用于连花清瘟胶囊(颗粒)的质量控制及山银花的掺伪鉴别.

目的 比较山银花与金银花制备双黄连口服液质量可能存在的差异,为山银花用于双黄连口服液的制备提供依据.方法分别用山银花与金银花按照《中国药典》2015年版双黄连口服液的制备方法 ,采用煎煮法进行制备,并按照双黄连口服液质量标准分别检测其所含的绿原酸、黄芩苷和连翘苷含量,通过紫外分光光度计和T LC法对2种不同双黄连口服液进行鉴别比较.结果 山银花与金银花制备的双黄连口服液中绿原酸、黄芩苷和连翘苷的含量均符合《中国药典》要求,且山银花制备的双黄连口服液中绿原酸和连翘苷含量高于金银花;紫外分光光度计与T LC法检测,山银花与金银花制备双黄连口服液差异较小.结论山银花制备的双黄连口服液达到《中国药典》质量标准,分别用山银花与金银花制备的双黄连口服液比较二者无明显的质量差异,表明山银花可替代金银花用于制备双黄连口服液.

目的 了解金银花、山银花药材资源的分布及种植技术.方法 在有关文献基础上,结合实地调研与采集,参考近现代中药材资料与著作,对金银花与山银花的资源分布和种植技术方面相关资料进行整理及分析.结果与结论 金银花及山银花在我国广泛分布,种植技术发展较好.

目的:建立UPLC-MS/MS法同时测定山银花中10种有效成分的含量.方法:山银花药材采用60％甲醇为溶剂进行超声提取.提取后的样品采用UPLC-MS/MS分析,色谱柱采用Extend C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),以乙腈-0.1％甲酸溶液为流动相进行梯度洗脱,流速0.3 mL/min,柱温为30℃,进样量1μL;采用电喷雾离子源负离子多反应监测模式扫描.结果:10种有效成分在10 min内得到完全分离,峰面积与浓度有良好的线性关系,相关系数(r2)均大于0.9986,检出限和定量限分别在1.3～15.7 ng/mL和4.5～ 48.9 ng/mL范围,回收率为95.5％～103.5％.该方法用于测定5批山银花样品,10种有效成分的含量在23～ 25351 μg/g范围.结论:该方法可用于山银花药材中10种有效成分的快速、准确定量分析.

目的:建立HPLC指纹图谱及一测多评同时检测泸州古蔺山银花中9个成分的质量分析方法.方法:以绿原酸为参照物,建立泸州古蔺山银花HPLC指纹图谱,并采用斜率校正法计算其与新绿原酸、隐绿原酸、獐牙菜苷、3,4-二咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸、4,5-二咖啡酰奎宁酸、灰毡毛忍冬皂苷乙及川续断皂苷乙的相对校正因子,分别用外标法和一测多评法计算含量.结果:建立了10批古蔺山银花HPLC指纹图谱,相似度均在0.99以上,标定了11个共有峰,指认了其中9个共有峰,并分别采用外标法和一测多评检测其含量,二者无显著差异.结论:实验将一测多评和指纹图谱相结合评价泸州古蔺山银花的质量,该方法准确、简便、可行,为更全面控制山银花的质量提供参考依据.