目的 探讨基于二代测序(NGS)技术的单核苷酸多态性(SNP)连锁分析在常染色体隐性遗传性多囊肾病(ARPKD)家系胚胎植入前遗传学检测(PGT)中的应用价值.方法 选取1个ARPKD家系,女方孕期产检发现胎儿有多囊肾行引产,胎儿基因检测为多囊肾/多囊肝病变1基因(PKHD1)复合杂合突变c.10444C>T(父源)和c.4303del(母源),其中c.4303del突变为首次报道.采用多重聚合酶链反应(PCR)和NGS在突变位点两侧2M区域内选择335个信息丰富、紧密连锁的SNP位点作为遗传连锁标记,构建夫妇双方携带基因突变的SNP风险单体型.体外受精后行囊胚培养.对活检获得的滋养层细胞进行全基因组扩增(WGA)后,采用Sanger测序直接检测PKHD1基因突变,采用基于NGS的SNP连锁分析鉴别携带突变的染色体,同时进行拷贝数变异(CNV)分析以进行低深度的染色体非整倍性筛查.结果 6个活检囊胚中有4个为未携带突变的整倍体,有1个携带杂合突变的嵌合体,1个测序数据波动大,无法判断.选择其中1枚未检测到突变的优质整倍体胚胎进行冻融胚胎移植(FET),足月分娩一健康婴儿.结论 应用基于NGS的SNP连锁分析进行PGT具有高效稳定的特点,可有效阻断ARPKD在家系中的垂直传递,同时可避免因妊娠非整倍体胚胎而导致的流产问题.该研究也是首次针对PKHD1基因c.4303del突变的PGT报道.

常染色体隐性遗传性多囊肾病(autosomal recessive polycystic kidney disease,ARPKD)是一种严重的单基因遗传的肝肾纤维囊性疾病,同时也是儿科终末期肾脏病的重要原因之一,其发病率约为1∶10 000～1:40 000[1].该病的临床表现具有高度的可变性,主要表现为双侧肾脏集合管弥漫性梭形扩张和不同程度的肝脏纤维化.此外,该病还可累及肺脏、胰腺、脉管系统,以及出现生长迟缓和认知功能障碍等表现.该病发病时间早且病情严重,患者的多种器官受累始于宫内发育期.大约有30％的患儿因肺功能发育不全而死于围生期,幸存下来的产后患儿多在青春期前因肾脏囊肿的占位性病变和严重的肾实质纤维化而发展为终末期肾病.目前,对于该病在临床上的处理多无良策.

@@

报道1例基因学诊断明确的Caroli综合征合并常染色体隐性遗传性多囊肾(autosomal recessive polycystic kidney disease,ARPKD)中国婴儿病例.本例患儿为8个月男婴,隐匿起病,以无症状性肝、肾肿大为主要临床表现,影像学检查提示肝内胆管囊状扩张、双肾多囊性改变,血生化检查示肝、肾功能正常,肝脏纤维化4项标记物血清水平均升高,肾早期损伤指标阳性,基因检测证实为多囊肾/多囊肝病变1基因(polycystic kidney and hepatic disease 1,PKHD1)错义杂合突变c.9292G＞A、c.2507T＞C,分别来自于患儿父母.前者为新发突变,经预测软件验证存在高致病性,后者目前见于1例中国双胞胎报道,可能为中国人群独有,基因型与临床表型之间关系未明.患儿出院后11个月随访,肝、肾功能正常,尚无严重并发症发生.婴儿期起病的Caroli综合征合并ARPKD临床表现隐匿,肝、肾肿大通常为唯一表现.通过对该患儿的临床表现系统性回顾分析以及文献复习可以得出,Caroli综合征合并ARPKD的肝、肾影像学表现具有特征性,在影像基础上联合基因检测手段有利于明确诊断并与其他肝、肾囊性纤维化疾病进行鉴别.针对此类患儿的长期管理,应包括定期随访,密切监测肝、肾功能及各种并发症的发生,适当干预,同时做好患儿家庭的遗传咨询工作.

目的 探讨婴儿型多囊肾临床表型与基因型特点.方法 回顾分析1例婴儿型多囊肾患儿的临床资料,分析临床表型与基因型的相关性.结果 患儿于胎儿期即发现多囊肾,出生后出现气促、口吐泡沫.腹部磁共振提示双肾髓质海绵肾可能伴双肾轻度积液、右肾囊肿.基因检测患儿PKHD1基因Exon15存在错义突变c.1123 C>T(Arg375Trp);PKHD1基因Exon31存在错义突变c.3617G>T(Gly1206Val),且为新型错义突变体;PKD1基因Exon18存在错义突变c.7211 G>A(Arg 2404 Gln),为复合杂合突变纯合子;突变性质均为错义突变.患儿经治疗后好转出院,随访至4个月,肾功能无异常.结论 基因检测可早期诊断婴儿型多囊肾,存在两个错义突变的新生儿可以生存,新发现Exon 31突变c.3617G>T(Gly1206Val).

多囊肾病(PKD)是一类常见的以进行性多发肾脏囊肿为主要特征的单基因遗传病,主要分为两大类:常染色体显性PKD和常染色体隐性PKD.大部分男性PKD患者具有生育能力,但仍存在一些病例伴有不育症的报道.近年来多项研究提示,除发展为终末期肾病外,男性PKD患者尚可出现精囊囊肿、附睾囊肿、少弱精子症、死精子症等而造成生殖障碍.本文将基于目前的研究现状和进展,从生殖系统组织结构、相关基因以及蛋白等方面对PKD男性患者生殖障碍机制进行简要概述,以促进对这一疾病的进一步认识.

多囊肾病(polycystic kidney disease,PKD)是人类最常见的单基因遗传性肾脏疾病,分为常染色体显性多囊肾病(autosomal dominant polycystic kidney disease,ADPKD)和常染色体隐性多囊肾病(autosomal recessive polycystic kidney disease,ARPKD)两种[1-2].其中,ARPKD较为罕见,常在出生前和新生儿期由超声显示双肾回声异常识别出来,患儿大多在早年就会死亡[3-4].

常染色体隐性遗传性多囊肾(autosomal recessive polycystic kidney disease,ARPKD)是一种多发于儿童肾脏和胆道系统的严重单基因遗传病[1],以肝门静脉系统发育不全为特征,包括胆管板重塑缺陷、胆管增生和先天性肝纤维化(congenital hepatic fibrosis,CHF)[2-4].ARPKD发病率为1:20 000～40 000,属罕见病[5],合并CHF的发病率更低.本文将一家系(3姐弟)ARPKD伴CHF的病例报道如下.

目的 对3例在儿童期、青少年期及老年期诊断的多囊肾患者的临床表型及遗传学病因进行分析,为家系遗传咨询和产前诊断提供依据.方法 采用二代测序(next generation sequencing,NGS)技术对来自3个家系分别为5岁、17岁及70岁的先证者进行包括多种囊性肾病在内的遗传性肾病基因检测包筛查,应用PCR和一代测序技术在先证者及其家庭成员中对NGS筛出的可疑致病基因变异位点进行验证,家系2先证者的母亲在基因诊断明确后行中孕期产前诊断.结果 NGS筛查、PCR和一代测序提示家系1中的5岁先证者携带PKHD1基因c.5935 G＞A(p.G1979R)和c.5428G＞T (p.E1810X)复合杂合变异,分别来自其父亲和母亲;家系2中17岁先证者携带PKHD1基因c.5512T＞C(p.Y1838H)和c.5935G＞A(p.G1979R)复合杂合变异,分别来自父母,先证者母亲产前诊断提示胎儿携带c.5512T＞C杂合变异,继续妊娠至出生后半年未见肾脏发育异常;家系3中70岁的先证者携带c.3860T＞G(p.V1287G)和c.11314C＞T (p.R3772X)复合杂合变异.结论 通过NGS筛查,明确这三个家系均为PKHD1基因变异导致的常染色体隐性多囊肾病,共发现5个PKHD1基因变异位点,包括2个已知致病变异:c.5935G＞A和c.11314C＞T;3个新的变异位点:c.5512T＞C,c.5428G＞T和c.3860T＞G,且预测为致病性变异可能性大,扩大了PKHD1基因变异谱.鉴于多囊性肾病遗传学和表型的复杂性,及早进行基因诊断对于明确病因和临床诊疗具有重要的意义.

多囊肾是一种常见的单基因先天性遗传病,可以显性或隐性方式遗传[1].其中,常染色体隐性遗传性多囊肾(autosomal reces-sive polycystic kidney disease,ARPKD)较为罕见,通常被认为是由PKHD1突变引起的遗传同质性疾病,与纤毛功能障碍有关,发病率约为1∶20 000,多见于婴幼儿时期,存活至成人者极少[2],至今国内外仍少有报道.其特征在于肾集合管的非阻塞性梭形扩张和肝脏的导管板畸形,导致进行性慢性肾病和肝脏疾病,包括扩张的胆管、先天性肝纤维化和门静脉高压症(Caroli综合征)[3-5].现将收治的1例成年ARPKD女性病例报道如下.