目的:研究高血脂人群的微小RNA-33a（microRNA-33a，miRNA-33a或miR-33a）和miR-33b的表达情况，探讨其与血脂指标的相关性。方法:纳入30例高血脂症患者为观察组，另纳入30位健康者为对照组。抽取观察组与对照组受试者的静脉血，采用全自动生化仪检测血清生化指标，包括：低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、甘油三酯（TG）、血糖（GLU）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、载脂蛋白A1（ApoA1）和载脂蛋白B（ApoB）。采用实时定量聚合酶链式反应（qPCR）检测所有受试者的血清miR-33a和miR-33b表达量。结果:观察组血清LDL-C、TG、TC明显高于对照组，HDL-C明显低于对照组，差异有统计学意义（均 P<0.05）。观察组miR-33a和miR-33b的相对表达量明显高于对照组（均 P<0.05）。miR-33a和miR-33b的表达量与LDL-C、TG、TC、ApoB水平正相关，与HDL负相关（均 P<0.05）。miR-33a和miR-33b的表达量的影响因素均为TG、TC和LDL-C。 结论:miR-33在高血脂人群中表达量升高，且与LDL-C、TG、TC、ApoB有一定的相关性。

目的:研究miR-378在宫颈癌组织中的表达水平，并探讨其对宫颈癌细胞增殖和侵袭的影响及作用机制。方法:收集2012年1月至2016年1月在山东大学齐鲁医院妇科检查的宫颈组织标本185例。采用RT-qPCR检测miR-378在宫颈组织和细胞中的表达水平；用Western Blot检测细胞中不同癌基因ATG12、CCND1和pRb的表达水平；应用BrdU细胞增殖检测和Transwell侵袭实验检测细胞增殖和侵袭情况；运用Target Scan预测并筛选miR-378的基因靶点，并用双荧光素酶报告系统进行验证。结果:miR-378在宫颈上皮内瘤变（CIN）Ⅲ病变组织和宫颈癌组织中的表达水平明显高于正常宫颈组织（ F=103.091， t=9.381、8.936，均 P<0.05）；miR-378在淋巴结转移阳性的宫颈癌组织中的表达水平明显高于淋巴结转移阴性的宫颈癌组织（ t=1.007， P<0.01）。miR-378的过表达显著促进了C-33A细胞的迁移和侵袭（ t=5.285， P<0.05），而miR-378的低表达则显著抑制HeLa细胞的迁移和侵袭能力（ t=2.941， P<0.05）。C-33A细胞中miR-378的过表达显著降低了ATG12、CCND1和pRb的表达水平（ t=1.382、1.431、2.086，均 P<0.05）；HeLa细胞中miR-378的低表达可增加ATG12、CCND1和pRb的表达水平（ t=3.961、3.062、2.894，均 P<0.05）。 结论:miR-378能显著促进宫颈癌的转移，ATG12作为miR-378的直接作用靶点，可为宫颈癌患者病理学和治疗靶点的分子机制提供新的见解。

目的:探讨微小RNA-124(miR-124)和RNA-1976(miR-1976)在帕金森病(PD)患者血清中的表达及临床意义。方法:选取2020年9月至2022年6月在我院治疗的原发性PD患者58例为PD组，采用统一帕金森病评定量表(UPDRS)评分对PD患者分为UPDRS≤60分(25例)和UPDRS>60分(33例)两组，并进行Hoehn-Yahr分级。同时选择同期体检健康者30例为对照组。收集研究对象血清后，采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测血清中miR-124和miR-1976的表达水平。采用Logistic回归分析法分析影响因素，采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-124、miR-1976对PD的诊断价值。利用TargetScan、miRTarbase等多个预测软件对miR-1976的靶基因进行分析。结果:与对照组相比，PD组血清miR-124表达下调[(1.49±0.36)比(1.02±0.32)]( t＝8.85， P<0.001)，miR-1976表达上调[(0.98±0.30)比(1.33±0.37)]( t＝6.92， P<0.001)；血清miR-124低表达、miR-1976高表达是PD发生的独立危险因素( OR>1， P<0.05)；UPDRS评分>60分的PD患者Hoehn-Yahr分级明显高于UPDRS≤60分的患者[(3.42±0.73)比(2.16±0.42)]差异有统计学意义( t＝3.05， P<0.05)，但血清miR-124、miR-1976表达水平差异无统计学意义[miR-124：(1.09±0.26)比(0.98±0.38)；miR-1976：(1.42±0.43)比(1.23±0.68)]( t＝0.89，0.62，均 P>0.05)；ROC结果显示，血清miR-124、miR-1976诊断PD的曲线下面积(AUC)分别为0.832、0.797，截断值分别为1.205、1.196，对应灵敏度分别为74.1%、51.8%，特异度分别为77.8%、90.1%；二者联合诊断PD的AUC为0.912，灵敏度为76.4%，特异度为93.2%。PINK1基因为miR-1976的潜在靶基因。 结论:PD患者血清miR-124表达水平降低，miR-1976表达水平升高，二者均对PD诊断有一定参考价值，且联合诊断价值更高，但二者表达水平与UPDRS评分无关。

目的:观察微小RNA(miRNA，miR)-185在骨肉瘤患者中的表达，探讨其在骨肉瘤诊断及预后中的价值。方法:采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)技术检测54对骨肉瘤患者和健康对照者(性别和年龄匹配)的miR-185表达。根据miR-185的中位数(2.381)，将所有患者分为两组：高miR-185表达组(21)和低miR-185表达组(33)。然后分析miR-185表达与患者临床病理因素的相关性。血清样本在郑州大学第一附属医院2012年1月1日至2014年12月份从接受手术但未接受化学疗法或放射疗法的患者中收集，并分析miR-185表达与骨肉瘤患者的临床病理特征和总体生存率的关系。使用Manne Whitney U检验比较骨肉瘤患者和正常对照组血清miR-185水平的差异。对数秩检验和Kaplan-Meier方法评估骨肉瘤患者的总体生存率。采用Cox回归和多因素分析评估预后价值。 结果:与正常对照组比较，骨肉瘤患者血清中的miR-185表达显著降低( U＝373.000, P<0.05)，差异有统计学意义。miR-185的低表达与较大的肿瘤体积(直径<5 cm比直径≥5 cm的miR-185：3.100±0.359比1.806±0.226， P<0.01)，较高的TNM分期(一、二期比三、四期的miR-185：2.986±1.562比1.566±1.305， P<0.01)和远处转移(未转移比转移的miR-185：3.014±1.660比1.590±1.148， P<0.01)密切相关，差异有统计学意义。Kaplan-Meier曲线生存分析和对数秩检验显示，miR-185的低表达与骨肉瘤患者的总生存率降低有关。此外，多变量分析表明，miR-185表达降低是骨肉瘤患者总体生存的独立预后生物标志物( P<0.01)，差异有统计学意义。 结论:血清miR-185可作为一种肿瘤抑制因子，有助于骨肉瘤患者的诊断、预后。

目的:探讨微小RNA-33b-5p(miR-33b-5p)靶向E26转录因子-1(E26 transformation specific-1，ETS1)在胰腺导管腺癌(PDAC)吉西他滨耐药中的作用。方法:通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测胰腺癌细胞ASPC-1和胰腺癌耐药细胞ASPC-1/GEM中miR-33b-5p和ETS1的表达水平，双荧光素酶报告实验验证miR-33b-5p与ETS1之间的靶向关系；免疫组织化学染色检测PDAC患者敏感组与抵抗组ETS1的表达；转染ASPC-1/GEM细胞，分为NC mimic组、miR-33b-5p mimic组、ETS1小干扰RNA(siRNA) NC组及ETS1 siRNA组，RT-qPCR检测转染后miR-33b-5p、ETS1 mRNA的表达水平，Western blot检测ETS1的表达水平，细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞活性并计算吉西他滨半数抑制浓度(IC 50)，流式细胞术检测细胞凋亡水平。 结果:与ASPC-1细胞比较，ASPC-1/GEM细胞株中miR-33b-5p表达下降( t＝－11.011， P<0.05)、ETS1表达升高( P<0.05)；双荧光素酶报告实验表明miR-33b-5p可明显降低野生型ETS1-33b-5p-WT载体荧光素酶活性( t＝－4.453， P<0.05)；免疫组织化学结果显示ETS1在抵抗组中表达量明显高于敏感组(8.11±2.80比2.78±0.83， P<0.05)；miR-33b-5p mimic组IC 50明显低于NC mimic组[(25.10±1.77)μmol/L比(43.63±3.04) μmol/L， t＝－9.110， P<0.05]，miR-33b-5p表达量明显高于NC mimic组( t＝19.444， P<0.05)，ETS1的表达量明显低于NC mimic组( P<0.05)，凋亡率明显高于NC mimic组[(18.8±1.9)%比(5.3±0.4)%， t＝12.239， P<0.05]；ETS1 siRNA组吉西他滨IC 50明显低于ETS1 siRNA NC组[(20.39±0.89) μmol/L比(37.38±2.62) μmol/L， t＝－10.628， P<0.05]。 结论:miR-33b-5p可能通过抑制ETS1表达促进PDAC对吉西他滨化疗的敏感性。

目的:探讨长链非编码RNA 565686(lncRNA-565686)对前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其分子机制。方法:收集武汉大学人民医院2017年1月至2020年1月行前列腺癌根治术的33例前列腺癌组织和同期行经尿道前列腺电切术的45例良性前列腺增生组织标本，采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)技术检测lncRNA-565686在前列腺组织和前列腺癌细胞的相对表达水平。在前列腺癌细胞(PC-3)中转染lncRNA-565686短发卡RNA，分别将未转染短发卡RNA、转染空载体和转染短发卡RNA细胞分为未转染组、空载体转染组和转染组。分别采用细胞克隆增殖实验检测细胞增殖能力；采用细胞迁移和侵袭实验(Transwell实验)检测细胞迁移和侵袭能力；采用双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA-565686与微小RNA-195(miR-195)的靶向调控关系。组间比较采用 t检验。 结果:前列腺癌组织中lncRNA-565686的相对表达水平高于良性前列腺增生组织，差异有统计学意义(2.51±0.19比0.99±0.13， t＝39.826， P<0.05)；前列腺癌淋巴结细胞(LNCaP)、PC-3细胞中lncRNA-565686表达水平高于人正常前列腺上皮细胞(RWPE-1)细胞，差异有统计学意义(2.36±0.04和3.58±0.06比0.99±0.06， t＝40.257、68.757， P<0.05)；干扰lncRNA-565686表达后，转染组细胞增殖、迁移和侵袭能力均低于未转染组和空载体转染组。双荧光素酶报告基因实验证实lncRNA-565686与miR-195之间的直接调控关系。 结论:lncRNA-565686在前列腺癌中高表达，下调lncRNA-565686的表达可明显抑制前列腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力，其机制可能与直接负向调控miR-195的表达相关。

目的:观察血清外泌体微小RNA-377(miR-377)在食管癌(EC)中的表达水平，并探讨其临床意义。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测OE33、Eca9706细胞株、5例EC癌组织中miR-377表达水平。选取2016年4月至2019年3月经山东第一医科大学附属济南人民医院确诊并住院治疗的EC患者40例作为观察组，另选取同期本院体检健康者40例作为对照组，RT-qPCR检测血清外泌体中miR-377表达水平。酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清血管内皮生长因子(VEGF)水平；采用 χ2检验分析EC患者血清外泌体中miR-377、血清VEGF水平与临床病理特征的关系；Pearson法分析EC患者血清外泌体中miR-377、血清VEGF表达相关性；受试者工作特征(ROC)曲线预测miR-377、VEGF表达水平对EC的诊断价值。 结果:与正常食管上皮细胞株HEEC细胞中miR-377表达水平(1.07±0.20)比较，OE33、Eca9706癌细胞中miR-377表达水平(0.74±0.21和0.68±0.19)显著降低( F＝6.604， P<0.05)；与癌旁组织中miR-377表达水平(1.10±0.23)比较，癌组织中miR-377表达水平(0.69±0.18)显著降低( t＝3.319， P<0.05)；观察组血清外泌体中miR-377表达水平(0.76±0.22)明显低于对照组血清外泌体中miR-377表达水平(1.04±0.25， t＝5.318， P<0.05)，血清VEGF表达水平[(22.79±4.79) pg/ml]明显高于对照组血清VEGF表达水平[(16.71±3.44) pg/ml， t＝6.521， P<0.05)；EC患者血清外泌体中miR-377及血清VEGF表达水平与TNM分期、分化程度和淋巴结转移均有关(miR-377： χ2＝6.172、8.780、13.864， P<0.05；VEGF： χ2＝6.839、5.402、6.114， P<0.05)；EC患者血清外泌体中miR-377与血清VEGF表达呈负相关( r＝-0.641， P<0.05)；血清外泌体中miR-377诊断EC的ROC曲线下面积为0.835(95% CI：0.684~0.933)，灵敏度为69.50%，特异性为88.20%；血清VEGF诊断EC的ROC曲线下面积为0.909(95% CI：0.775~0.977)，灵敏度为89.65%，特异性为76.50%；miR-377联合VEGF诊断EC的ROC曲线下面积为0.949(95% CI：0.829~0.994)，灵敏度为95.70%，特异性为88.21%。 结论:miR-377在EC患者血清外泌体中呈低表达，miR-377与VEG联合检测可有效提高EC诊断率。

目的:探讨微小RNA(miRNA，miR)-33对小鼠肝再生的促进作用及其分子机制。方法:2018年9月到2019年12月，将40只C57/B6小鼠(购自上海斯莱克实验动物有限公司)按照数字随机分组法分为模型组和miR-33 KD组。模型组小鼠经尾静脉注射对照腺相关病毒1×10 11 vg/ml，miR-33 KD组小鼠经尾静脉注射miR-33敲降的腺相关病毒1×10 11 vg/ml。在注射20 d后，模型组和miR-33 KD组采用70%肝切除方法建立小鼠肝再生模型。分别在肝切术后4 d计算肝重/体重比，采用溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)免疫组织化学染色分析肝脏细胞分裂能力；采用生物信息学分析miR-33的靶基因，采用蛋白质印迹法(Western blot)分析细胞增殖指标细胞核增殖抗原(Ki-67)和靶蛋白在两组肝组织中的表达。组间比较采用 t检验。 结果:模型组和miR-33 KD组小鼠术后4 d肝脏/体重比分别为(4.10±0.61)%和(4.98±0.72)%。与模型组比较，miR-33 KD组术后4 d肝脏/体重比显著增加，差异有统计学意义( t＝2.019， P<0.05)。与模型组肝脏细胞BrdU阳性率(32.47±7.99)%比较，miR-33 KD组小鼠肝脏细胞BrdU阳性率(75.38±10.56)%显著增加，差异有统计学意义( t＝4.391， P<0.05)。与模型组肝脏细胞Ki-67蛋白表达水平(0.43±0.11)比较，miR-33 KD组小鼠肝脏细胞Ki-67蛋白表达水平(1.37±0.31)显著增加，差异有统计学意义( t＝3.281， P<0.05)。生物信息学显示细胞周期素依赖性激酶(CDK6)是miR-33的靶基因。与模型组CDK6蛋白表达水平(0.25±0.15)比较，miR-33 KD组CDK6蛋白表达水平(1.02±0.28)显著增加，差异有统计学意义( t＝3.108， P<0.05)。 结论:miR-33通过靶向作用于CDK6 3’端非编码区(3’UTR)区域，调控CDK6蛋白表达水平，进而影响细胞周期，调节正常肝脏细胞增殖。

目的:通过生物信息学方法分析骨关节炎(OA)患者与正常人血清微小RNAs(miRNAs)表达差异。方法:从基因表达数据库(GEO)和ArrayExpress数据库中查找OA血清相关的芯片数据，并下载GSE105027数据集。筛选样本包括8例OA患者血清和12例正常(NC)人样本，其中女性患者5例，健康女性7例。用R语言Limma包分别筛选出男/女性OA和男/女性NC之间的差异表达miRNAs(DEMs)，设定阈值为 P<0.05和|log2FC|>1，用ggplot2包绘制火山图和韦恩图，得到2个DEMs：hsa-miR-33b-3p和hsa-miR-4284。用STRING和Cytoscape软件构件蛋白互作网络图(PPI)网络，依据LncBase和MNDR数据库筛选相关的长链非编码RNA(lncRNAs)，绘制内源竞争RNA(ceRNA网络互作图，Cytohubba筛选出关键基因，结合NONCODE和lncRNA SNP2数据库筛选与骨关节炎相关的lncRNAs，得出关键调控轴。 结果:共筛选出男、女性共有的DEMs 2个：hsa-miR-33b-3p和hsa-miR-4284，均为下调。结合ceRNA网络及数据库综合分析出lncRNA KCNQ1OT1-miR-33b-3p-PIK3CA轴。结论:通过生物信息学分析结果显示OA和NC的血清miRNAs表达差异集中在细胞凋亡、炎症和代谢，而lncRNA KCNQ1OT1-miR-33b-3p-PIK3CA轴在OA发病机制中尤为很重要。

目的:探讨长链非编码RNA肿瘤蛋白53靶基因1(lncRNA TP53TG1)在人皮肤基底癌细胞中的表达及其与增殖的关系。方法:人正常皮肤细胞(HaCaT)和人皮肤基底细胞癌TE 354.T和A431细胞系采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术分析lncRNA TP53TG1表达水平。选取高表达的皮肤基底细胞癌TE 354.T细胞作为研究对象，采用慢病毒感染TE 354.T细胞，建立lncRNA TP53TG1过表达细胞系和对照细胞，分别命名为对照组和TP53TG1组。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和克隆形成实验分析对照组和TP53TG1组细胞的增殖能力；采用蛋白质免疫印迹分析两组细胞增殖指标细胞核增殖抗原(Ki-67)和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达水平；采用7-氨基放线菌素D(7-AAD)试剂盒测定两组细胞的增殖活性；在裸鼠建立体外移植瘤模型，分析两组细胞形成肿瘤的体积和重量；采用实时荧光定量PCR分析lncRNA TP53TG1下游与细胞增殖相关的基因水平。组间计量数据比较采用 t检验。 结果:人正常皮肤细胞(HaCaT) lncRNA TP53TG1表达水平(0.83±0.34)明显低于人皮肤基底细胞癌TE 354.T和A431细胞系表达水平(1.65±0.20、1.58±0.13)，差异统计学意义( t＝5.579、5.503， P<0.05)。TP53TG1组细胞24 h吸光度值(2.06±0.12)明显高于对照组细胞(1.50±0.08)，差异有统计学意义( t＝10.070， P<0.05)。TP53TG1组细胞14 d克隆形成率[(81.86±8.71)%]明显高于对照组细胞[(54.85±6.79)%]，差异有统计学意义( t＝6.469， P<0.05)。TP53TG1组细胞7-AAD阳性率[(65.57±5.62)%]明显高于对照组细胞[(37.43±4.50)%]，差异有统计学意义( t＝10.340， P<0.05)。TP53TG1组细胞Ki-67和PCNA蛋白表达水平(1.31±0.14、1.38±0.15)明显高于对照组细胞(0.70±0.08、0.72±0.08)，差异有统计学意义( t＝10.240、10.150， P<0.05)。TP53TG1组细胞小鼠皮下形成肿瘤的体积和质量[(986.71±81.64) mm 3、(3.45±0.36) g]明显高于对照组细胞[(699.29±53.62) mm 3、(2.15±0.26) g]，差异有统计学意义( t＝7.786、7.709， P<0.05)。TP53TG1组细胞微小RNA(miR)-33a-5p和miR-33b(0.72±0.10、0.65±0.06)明显高于对照组细胞(0.99±0.30、1.03±0.12)，差异有统计学意义( t＝2.227、7.589， P<0.05)。 结论:lncRNA TP53TG1在人皮肤基底癌细胞中的表达显著下降。过表达lncRNA TP53TG1可显著抑制人皮肤基质癌细胞的增殖，可能与miR-33a-5p和miR-33b表达有关。