目的:建立健儿颗粒剂、消炎止痒醑、百草洗剂3种医院制剂的微生物限度检查方法。方法:参照2015年版《中华人民共和国药典》四部通则，采用常规法、培养基稀释法、薄膜过滤法、中和剂结合薄膜过滤法对3种医院制剂进行微生物计数检查方法的适用性试验。采用常规法、薄膜过滤法、中和剂结合薄膜过滤法对3种医院制剂进行控制菌检查方法的适用性试验。结果:健儿颗粒剂采用常规法进行微生物限度检查。消炎止痒醑采用薄膜过滤法进行微生物限度检查。百草洗剂采用中和剂结合薄膜过滤法进行微生物限度检查。结论:建立了3种医院制剂的微生物限度检查方法，方法准确可靠。

目的 探讨臭氧协同过氧乙酸(PAA)消毒法降低集中式纯水供应系统使用点末端纯水中需氧菌总数的效果.方法 开展两阶段对照研究,对某医院集中式纯水供应系统的末端纯水进行微生物限度检查.第一阶段使用PAA消毒法,第二阶段为臭氧强化消毒阶段,使用PAA协同臭氧的消毒方式.比较不同阶段的消毒效果.结果 试验期间共采集211份水标本,PAA消毒组101份,臭氧强化消毒组110份,用水点末端纯水菌落合格率臭氧强化消毒组(85.45％)高于PAA消毒组(74.26％),差异有统计学意义(P=0.04).臭氧强化消毒组的需氧菌菌落数的中位数(2 CFU/mL)低于PAA消毒组(20 CFU/mL).随着消毒后时间延长,PAA消毒组的水标本中需氧菌数量呈现明显的上升趋势(第1天VS第92天:9 CFU/mL VS 1 062 CFU/mL),臭氧强化消毒组纯水需氧菌数量则波动较小(第1天VS第92天:8 CFU/mL VS 58 CFU/mL).结论 臭氧协同PAA消毒法可降低集中式纯水供应系统的末端出水的需氧菌总数,且维持效果明显.

目的 建立反向高效液相色谱法同时测定复方银唑散中磺胺嘧啶银和酮康唑的含量并探讨其微生物限度检查方法.方法 色谱柱为Agilent C18(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相:0.07%三乙胺(A,冰醋酸调节pH至5.07)-甲醇(B),梯度洗脱:0～6 min,A80%;6～8 min,A80%～22%;8～21 min,A保持22%;21～22 min,A22%～80%,流速1.0 mL/min,检测波长:240 nm,柱温:30℃.采用培养基稀释法作为需氧菌总数、霉菌及酵母菌总数计数方法并按《中国药典》2020年版四部通则微生物限度检查法对控制菌检查法进行验证.结果 磺胺嘧啶银在0.029 64～0.069 15 g/L浓度范围下与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999),酮康唑在0.030 54～0.071 26 g/L浓度范围下与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 8),磺胺嘧啶银和酮康唑的平均回收率分别为101.5%(n=6,RSD=0.33%)和98.8%(n=6,RSD=0.65%).采用培养基稀释法,各试验菌的回收率均在0.5～2.0.结论 所建立的高效液相色谱法定量准确、专属性良好,可用于同时测定复方银唑散中磺胺嘧啶银和酮康唑的含量.采用培养基稀释法对复方银唑散进行微生物限度检查可行.

目的 优化桔梗生药粉湿热灭菌工艺,并考察辐照灭菌、湿热灭菌、乙醇灭菌、干热灭菌对其质量的影响.方法 在单因素试验基础上,以灭菌时间、灭菌温度、干燥温度为影响因素,桔梗总皂苷、桔梗皂苷D含量及灭菌率的综合评分为评价指标,响应面法优化湿热灭菌工艺.评价不同灭菌方法对微生物限度、鉴别项、水分、总灰分、浸出物、含量测定、指纹图谱相似度的影响.结果 最佳条件为灭菌时间 35 min,灭菌温度 103℃,干燥温度 76℃,综合评分为 95.14 分.4 种灭菌方法下微生物限度检查全部合格;灭菌后桔梗皂苷D含量有不同程度的下降,依次为辐照灭菌>湿热灭菌>乙醇灭菌>干热灭菌;指纹图谱相似度依次为辐照灭菌>乙醇灭菌>湿热灭菌>干热灭菌.结论 该方法便于操作,重复性好,生产成本低,灭菌彻底,可为桔梗生药粉大规模工业化生产提供理论依据.

目的 建立皮灵膏的微生物限度检查方法.方法 用十四烷酸异丙酯乳化和无菌液体石蜡萃取两种方法制备供试液,比较两种供试液的验证结果.结果 用无菌液体石蜡萃取样品,需氧菌总数计数、霉菌和酵母菌总数计数采用薄膜过滤法,各试验菌的回收比值均符合要求;控制菌采用薄膜过滤法进行检查.结论 皮灵膏可用无菌液体石蜡萃取样品,采用薄膜过滤法进行微生物限度检查.

目的 用克拉霉素酶解试验指导建立克拉霉素制品的微生物限度检查方法.方法 采用不同剂量单位的大环内酯酶酶解克拉霉素,高效液相色谱法(HPLC)测定克拉霉素含量以确定酶解时间与克拉霉素降解速度之间的关系,选择最小剂量单位和最佳酶解时间,用于克拉霉素片和克拉霉素颗粒的微生物限度检查.结果 大环内酯酶作用20 min后接近最大酶解效果,30 min后达到酶解平衡,克拉霉素含量不再显著变化.20 U和10U的大环内酯酶对0.02 mg·mL-1克拉霉素的酶解作用没有显著差异.需氧菌总数选择1∶100 供试液,采用薄膜过滤法,冲洗量 300 mL,并在最后一次冲洗液中加入约 10U的大环内酯酶作用 20 min,霉菌和酵母菌总数选择 1∶10 的供试液采用平皿法(倾注法).大肠埃希菌检查采用直接接种法,2 000 mL胰酪大豆胨液体培养基联合 20U大环内酯酶,可检出所加试验菌.结论 大环内酯酶酶解试验指导建立了克拉霉素制剂的微生物限度检查方法,提高了检验效率,开拓了大环内酯类抗生素微生物限度检查的新思路.

启脾丸是含药材原粉的中药制剂,易受到微生物污染.按现行标准检验了 10家生产企业的149批启脾丸样品,并分析结果.随后,通过探索性研究建立启脾丸的微生物限度检查方法,并采用基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)或16S rRNA基因测序技术鉴定检出的微生物,分析其微生物污染状况.结果显示,149批样品微生物限度检查结果均符合规定.建立的启脾丸微生物限度检查法为需氧菌总数1:20平皿法、霉菌和酵母菌总数计数1:10平皿法,控制菌大肠埃希菌、耐胆盐革兰阴性菌、沙门菌均采用常规法;污染菌鉴定结果中,90％为芽孢杆菌属,提示各生产企业仍需加强微生物的过程控制.

文章旨在建立乳没活络散微生物限度的适用性检查方法.基于《中国药典》对微生物限度检查方式的应用要求,文章运用平皿法充分统计乳没活络散中枯草芽孢杆菌、黑曲霉以及白色念珠菌等的回收情况,并利用基础检验的形式针对性地检验制剂控制菌,然后对平皿法、基础检验方法进行评估,发现乳没活络散检验菌种的回收率可以达到 70%,同时均能够对控制菌进行诊断,适应要求标准.由此可知,在进行乳没活络散的微生物限度检查时,运用平皿法和基础检验方法,可以提高限度检查的准确性,值得推荐.

本研究遵照《中国药典》2020年版对 5 个厂家 15 个批次的二丁颗粒进行微生物限度检查,研究发现在需氧菌、霉菌和酵母菌计数方法的适用性试验中,各试验菌的回收率均在 0.5～2.0 之间;在控制菌检查方法的适用性试验中,大肠埃希菌检查阳性对照组和供试品对照组中均没有检出大肠埃希菌.最终结果表明,按照文章所建立的二丁颗粒微生物限度检查法进行检查,5个厂家15批次的微生物限度检查结果均符合规定.

目的:建立医院制剂乳腺增生丸的微生物限度检查方法适用性试验,并根据检查结果进行影响因素分析,进一步提高产品质量.方法:根据《中国药典》2020年版四部通则1105-1107,采用1:100稀释法测定需氧菌总数,常规法测定霉菌和酵母菌总数及检查控制菌是否存在.对近5年中国医科大学附属盛京医院制剂室生产的共265批次乳腺增生丸微生物限度检查结果进行汇总,分析乳腺增生丸微生物限度与丸剂水分、晾丸时紫外线照射时间、75％乙醇擦拭设备次数的关系,并检查乳腺增生丸中13种中药饮片的微生物限度.结果:乳腺增生丸共有20批次检出需氧菌,需氧菌总数随着水分的降低而减少,晾丸时紫外线照射时间2 h、使用75％乙醇擦拭设备2次,需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数均小于10 cfu·g-1,控制菌均未检出.中药饮片中,红花、蒲公英的微生物检出结果较为严重.结论:该文所采用的方法可用于乳腺增生丸微生物限度检查,生产时应严格控制乳腺增生丸的影响因素;建立了中药饮片微生物限度标准,可为逐步提高医院制剂产品质量提供参考.