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重症肌无力患者白细胞介素-36表达及其对调节性T细胞和Th17细胞平衡的调控
编辑人员丨3天前
目的:观察重症肌无力(MG)患者白细胞介素(IL)-36的表达,研究IL-36对MG患者调节性T细胞(Tregs)和Th17细胞的调控作用。方法:入组2016年7月至2021年8月新乡市中心医院就诊的MG患者51例(MG组)和健康对照者25名(对照组),采集外周血,分离血浆和外周血单个核细胞(PBMCs),采用酶联免疫吸附试验检测血浆IL-36α、IL-36β、IL-36γ、IL-36RA、IL-35、IL-17水平,流式细胞术检测Tregs和Th17细胞比例,实时定量聚合酶链反应法检测叉头盒蛋白3(FoxP3)和维甲酸相关孤独核受体γt(RORγt)mRNA表达。用重组IL-36β(5 ng/ml)刺激MG患者的PBMCs或纯化的Tregs,分析Tregs和Th17细胞比例、IL-35和IL-17分泌、FoxP3和RORγt mRNA表达、Tregs抑制活性的变化。结果:IL-36α、IL-36γ、IL-36RA水平在对照组和MG组之间的差异均无统计学意义(均 P>0.05)。MG组IL-36β水平高于对照组[(73.43±13.91)pg/ml比(60.91±12.65)pg/ml, t=3.79, P<0.001)。MG组Tregs比例[(4.67±1.33)%比(6.32±1.81)%, t=4.48, P<0.001]、IL-35水平[(50.06±7.93)pg/ml比(65.37±8.90)pg/ml, t=7.59, P<0.001]、FoxP3 mRNA(1.03±0.14比1.57±0.46, t=7.78, P<0.001)低于对照组,而Th17细胞比例[(1.05±0.15)%比(0.94±0.21)%, t=2.61, P=0.011]、IL-17水平[(40.61±13.13)pg/ml比(33.09±11.48)pg/ml, t=2.44, P=0.017]、RORγt mRNA(1.26±0.16比1.03±0.13, t=6.08, P<0.001)高于对照组(均 P<0.05)。上述指标在不同性别之间、早发型和晚发型之间、非胸腺瘤组和胸腺瘤组之间、不同Osserman分型之间的差异均无统计学意义(均 P>0.05),与定量重症肌无力(QMG)量表评分均无明显相关性(均 P>0.05)。重组IL-36β对MG患者PBMCs增殖无影响( P=0.248),可降低Tregs比例[(3.05±0.66)%比(4.18±1.07)%, t=4.23, P<0.001]、IL-35分泌[(48.12±10.93)pg/ml比(56.96±13.73)pg/ml, t=2.36, P=0.023]和FoxP3 mRNA表达(0.99±0.17比1.18±0.13, t=4.01, P<0.001),但对Th17细胞比例、IL-17分泌和RORγt mRNA表达无影响(均 P>0.05)。重组IL-36β刺激的Tregs免疫抑制活性减弱,表现为细胞增殖升高[(0.83±0.12)×10 5个比(0.69±0.15)×10 5个, t=3.02, P=0.005]和IL-35分泌降低[(28.71±10.08)pg/ml比(37.12±10.47)pg/ml, t=2.39, P=0.023]。 结论:MG患者中升高表达的IL-36β可能主要通过抑制Tregs功能调控Tregs/Th17细胞平衡。
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编辑人员丨3天前
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2016年浙江省温岭地区EV71型轻、重症手足口病患儿病毒分离株VP1和VP4区基因特征分析
编辑人员丨3天前
目的:分析并比较2016年浙江省温岭地区EV71型轻、重症手足口病(HFMD)患儿病毒分离株VP1和VP4区基因特征及进化关系。方法:研究对象为2016年浙江省温岭市第一人民医院分离鉴定的EV71型HFMD患儿,随机选取轻、重症HFMD患儿EV71病毒株各6例,进行VP1和VP4区基因扩增和测序,利用DNAStar和Mega 6.0软件对测序结果与美国国立生物信息中心公布的EV71典型基因代表株(A、B1~5、C1~4亚型)进行核苷酸和氨基酸比对分析,并构建系统进化树。结果:轻、重症手足口病患儿性别(χ 2=14.51, P<0.05)和年龄( t=2.82, P<0.05)差异无统计学意义。两组EV71分离株的VP1区核苷酸同源性为95.8%~99.6%,氨基酸同源性为99.1%~100%;VP4区核苷酸同源性为95.0%~99.9%,氨基酸同源性为99.0%~100%,轻、重症EV71分离株同源性高。它们与典型C4a基因型代表株最接近,氨基酸同源性为:96.6%~100%(VP1)和94.3%~100%(VP4)。3例EV71型重症HFMD患儿分离株分别出现VP1区V170L突变(缬氨酸→亮氨酸),VP1区A293S(丙氨酸→丝氨酸)以及VP4区T7A(苏氨酸→丙氨酸),其他未见明显突变。 结论:2016年浙江温岭地区轻、重症HFMD患儿EV71病毒分离株VP1和VP4区同源性高,且均属于C4a基因亚型。其中几个位点的氨基酸突变可能与浙江温岭地区HFMD患儿疾病危重有关。
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编辑人员丨3天前
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调节性B细胞和调节性T细胞与英夫利昔单抗治疗克罗恩病临床疗效的关系
编辑人员丨3天前
目的:探讨外周血调节性B细胞(Breg细胞)和调节性T细胞(Treg细胞)与英夫利昔单抗治疗克罗恩病临床疗效的关系。方法:2017年1月至2019年6月期间,在温州医科大学附属第二医院收集32例活动期克罗恩病患者和33名性别、年龄相匹配的健康对照者。取空腹静脉血5 ml,分离外周血单个核细胞(PBMCs),经多色流式细胞术检测PBMCs中Breg细胞(CD3 -CD19 +IL-10 +B细胞)占B细胞的比例,以及Treg细胞(CD4 +CD25 +Foxp3 +T细胞)占CD4 +T细胞的比例。克罗恩病患者于第0、2、6周静脉注射英夫利昔单抗(5 mg/kg)诱导缓解,其后每隔8周给予相同剂量的英夫利昔单抗维持治疗。于第14周再次检测PBMCs中Breg细胞比例和Treg细胞比例,并与第0周进行比较。同时,克罗恩病患者分别于第0周和第14周检测C反应蛋白(CRP)、白细胞计数、血小板计数、血细胞沉降率辅助评估英夫利昔单抗疗效。 结果:英夫利昔单抗治疗前,克罗恩病组与健康对照组之间整体比较,PBMCs中Breg细胞比例较高[(3.15±1.17)%比(2.64±0.38)%, P=0.024],Treg细胞比例较低[(2.15±0.49)%比(4.25±0.41)%, P<0.001]。英夫利昔单抗治疗前和治疗第14周,克罗恩病组中Breg细胞比例和Treg细胞比例均呈独立正相关( r=0.628, P<0.001; r=0.749, P<0.001)。治疗第14周,根据症状、克罗恩病活动指数(CDAI)、内镜下黏膜愈合进行评估。CDAI<150且内镜下黏膜愈合者定义为缓解组(R组),CDAI≥150或内镜下黏膜未愈合者为未缓解组(N组)。治疗第14周与治疗前比较,R组中Breg细胞比例和Treg细胞比例均显著增高[(5.89±2.60)%比(3.19±1.27)%, P<0.001;(4.59±0.72)%比(2.08±0.47)%, P<0.001],CDAI和CR P均显著降低[CDAI:(63.19±14.69)比(195.62±58.13), P<0.001;CRP:(3.65±2.23) mg/L比(29.80±30.06) mg/L, P<0.001]。治疗前和第14周,克罗恩病患者中Breg细胞比例和Treg细胞比例与CRP( r=-0.279, P=0.026; r=-0.406, P=0.001)和CDAI( r=-0.409, P=0.001; r=-0.708, P<0.001)始终呈独立负相关。治疗第14周,ROC曲线分析显示"Breg细胞比例+Treg细胞比例"对英夫利昔单抗疗效的预测价值高于其他参数(曲线下面积:0.782,截断值:0.895 5, P=0.034)。 结论:Breg细胞和Treg细胞不仅与克罗恩病疾病活动密切相关,而且在活动期克罗恩病患者中,联合检测这两类免疫细胞对英夫利昔单抗疗效的预测价值更高。
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编辑人员丨3天前
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机器人辅助双侧三角固定治疗创伤性脊柱骨盆分离
编辑人员丨3天前
目的:探讨机器人辅助双侧三角固定治疗创伤性脊柱骨盆分离的临床疗效。方法:回顾性分析2016年3月至2020年3月治疗30例创伤性脊柱骨盆分离患者,根据手术及固定方式分为机器人辅助微创双侧三角固定组(简称机器人三角固定组)和传统切开复位髂腰固定组(简称髂腰固定组)。其中机器人三角固定组16例,男4例,女12例;年龄(35.7±13.3)岁(范围16~58岁);骶骨骨折形状分型,"U"型10例,"H"型4例,"Y"型2例;创伤性脊柱骨盆分离ROY-Camille分型,Ⅰ型4例,Ⅱ型9例,Ⅲ型3例;13例合并骶神经损伤,GibbonsⅡ级10例,Ⅲ级3例。髂腰固定组14例,男4例,女10例;年龄(37.4±15.1)岁(范围18~66岁);骶骨骨折形状分型,"U"型10例,"H"型3例,"Y"型1例;创伤性脊柱骨盆分离ROY-Camille分型,Ⅰ型1例,Ⅱ型10例,Ⅲ型3例;10例合并骶神经损伤,GibbonsⅡ级7例,Ⅲ级3例。比较两组患者年龄、手术时间、术中出血量、Majeed评分、性别、骶骨骨折分类、ROY-Camille分型、骨折复位质量、术后伤口感染、骶神经恢复与否。结果:两组患者均获得随访,随访时间12~54个月,平均23.6个月。机器人三角固定组:手术时间(95.3±27.5)min(范围70~180 min),术中出血量(98.7±47.5)ml(范围50~250 ml)。根据Mears和Velyvis影像学评价标准,6例解剖复位,9例复位满意,1例复位不满意;Majeed评分(85.5±7.7)分。术前10例Gibbons Ⅱ级骶神经损伤者,术后8例恢复为Ⅰ级;术前3例Ⅲ级骶神经损伤者,术后1例恢复为Ⅰ级,1例恢复为Ⅱ级。髂腰固定组:手术时间(148.6±59.1)min(范围90~240 min),术中出血量(582.1±244.6)ml(范围300~1 200 ml)。术后7例解剖复位,6例复位满意,1例复位不满意;Majeed评分(77.6±7.7)分;术前7例Gibbons Ⅱ级骶神经损伤者,术后5例恢复为Ⅰ级;术前3例Ⅲ级骶神经损伤者,术后2例恢复为Ⅰ级。与髂腰固定组比较,机器人三角固定组手术时间短、出血量少、术后功能恢复Majeed评分高,以上各指标比较差异均有统计学意义( t=3.23, 7.76, 2.83;均 P<0.05)。 结论:对于创伤性脊柱骨盆分离,特别是骨折累及腰骶结合部,术前评估无需行骶神经减压者,机器人辅助双侧三角固定微创、固定坚强、术后并发症少、临床疗效满意。
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编辑人员丨3天前
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先天性食管闭锁术后胸腔感染的临床特点分析
编辑人员丨3天前
目的:探究先天性食管闭锁(congenital esophageal atresia,CEA)术后发生胸腔感染的相关因素,为临床诊疗及预防提供经验。方法:收集2007年1月至2022年1月在北京儿童医院行手术治疗的207例Ⅲ型CEA患儿的基本临床资料。其中,男141例,女66例;出生体重为(2.90±0.49)kg;中位手术年龄为4.0 d。食管盲端远近端之间的距离为(1.66±1.03) cm。84.1%(174/207)的患儿伴发其他畸形;8.7%(18/207)的患儿被诊断为VACTERL综合征,包括心脏畸形17例、肛门直肠畸形3例、脊柱或锥体畸形8例、泌尿系统畸形5例和肢体畸形5例。46.9% (97/207)的患儿在术前存在肺炎表现。根据术后是否发生胸腔感染分为感染组24例和非感染组183例,比较两组间临床特征差异,并通过单因素分析探究CEA术后胸腔感染的相关因素。结果:35.7%(74/207)的患儿接受胸腔镜手术治疗,64.3%(133/207)的患儿接受开胸手术治疗;胸膜外入路手术99例,胸膜内入路手术108例。术后并发症包括胸腔感染24例、气胸94例、吻合口漏74例、吻合口狭窄73例和复发性食管气管瘘13例。从胸腔感染患儿的胸水中分离出致病菌31株,其中58.1 % (18/31)为革兰氏阳性菌,41.9%(13/31)为革兰氏阴性菌。感染组气胸发生率为91.7%(22/24),吻合口漏发生率为70.8%(17/24);非感染组气胸发生率为39.3%(72/183),吻合口漏发生率为31.1 %(57/183)。与非感染组相比,感染组的开胸手术比例大,且气胸、吻合口漏发生率较高,差异均具有统计学意义( P<0.05)。而在性别、合并综合征、食管盲端远近端之间的距离、术前肺炎、手术年龄、手术入路、术后机械通气、胸腔引流管留置时间及术后住院时间方面,两组之间差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:CEA开胸手术更易发生胸腔感染,气胸和吻合口漏可能与胸腔感染的发生密切相关。
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编辑人员丨3天前
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儿童寰枢关节旋转固定性脱位中寰枢与寰枕旋转分离角特征分析
编辑人员丨3天前
目的:分析寰枢关节旋转固定性脱位(atlanto-axial rotatory dislocation,AARD)患儿的CT数据,探讨AARD患儿寰枢和寰枕旋转分离角的特征。 方法:本研究为回顾性研究,以2016年6月至2023年6月在北京大学第三医院骨科就诊并接受手术治疗的19例AARD患儿为研究对象,收集患儿术前CT影像、术前诊断、年龄、性别等临床资料。以双下颌支后缘连线代表枕骨实时位置,寰椎横突连线代表寰椎实时位置,枢椎椎体后缘平行线代表枢椎实时位置,测量寰枢旋转分离角(rotated separation angle of atlanto-axial joint,C1C2)、寰枕旋转分离角(rotated separation angle of occipito-atlantal joint,OcC1)以及枕枢旋转分离角(rotated separation angle of occipito-axial joint,OcC2)。以寰椎相对枢椎的旋转方向为正,根据寰枕关节旋转是否在儿童生理旋转范围内,将所有患儿分为OcC1绝对值(|OcC1|)≤3°组( n=9)和|OcC1|>3°组( n=10),采用线性回归分析法计算各组OcC1的预测方程。 结果:19例AARD患儿年龄(10.12±0.55)岁,病程中位数7个月;C1C2、OcC2分别为(24.5±2.9)°,(15.3±1.4)°;OcC1为-1.3 (-14.4,0.9)°。OcC1与C1C2呈显著负相关( r=-0.704, P<0.001),OcC2与C1C2呈显著正相关( r=0.602, P=0.006),OcC1与OcC2的相关性不显著( r=-0.033, P=0.892)。|OcC1|≤3°组和|OcC1|>3°组的C1C2分别为(14.7±9.9)°和(30.8±14.0)°,差异有统计学意义( P=0.011);而两组间OcC2的差异无统计学意义( P=0.719)。分组对OcC1与C1C2、OcC2与C1C2进行回归分析,发现|OcC1|>3°组的OcC1与C1C2(OcC1=-0.79×C1C2+10.44 , R2=0.823, P<0.001)以及|OcC1|≤3°组的OcC2与C1C2(OcC2=0.95×C1C2+1.09 , R2=0.987, P<0.001)线性拟合程度较高。 结论:寰枕关节代偿角度与寰枢关节的旋转程度成正比;当AARD患者寰枢旋转分离角大于临界值(20.8°)时,其寰枕关节才可能开始反向旋转代偿寰枢关节的旋转移位。
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编辑人员丨3天前
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河北省2013-2017年其他肠道病毒手足口病重症和死亡病例流行病学和病原特征分析
编辑人员丨3天前
目的:掌握2013-2017年河北省其他肠道病毒感染所致手足口病重症和死亡病例的流行病学特征;分析柯萨奇病毒A组6型(CoxA6)的基因特征,进一步阐明其遗传进化特点及规律。方法:利用描述性流行病学方法对2013-2017年河北省其他肠道病毒感染所致手足口病重症和死亡病例的三间分布特征进行分析。运用Mega 5.2软件对CoxA6的VP1区序列进行系统进化树分析。结果:2013-2017年河北省累计报告其他肠道病毒手足口病重症和死亡病例86例(重症84例,死亡2例),占其他肠道病毒手足口病报告病例的1.12%(86/7 698)。每年4月份发病人数逐渐上升,5-7月达到最高峰。人群分布上,1~岁年龄组儿童的5年累计占比65.12%(56/86)。男女性别比为1.39∶1(50/36)。职业分布上,散居儿童占总发病人数的93.02%(80/86)。标本经病毒分离获得阳性毒株39份,阳性分离率为45.35%(39/86)。亲缘进化树显示,CoxA6分离株与D3a和D3b这2种亚型代表株处于同一分支。结论:2013-2017年河北省其他肠道病毒手足口病重症和死亡病例在发病时间上呈现季节性,与手足口病流行的整体趋势一致。CoxA6属于D3基因型,且未出现新的进化分支。
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编辑人员丨3天前
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改性柑橘果胶对兔关节软骨细胞糖酵解代谢的影响
编辑人员丨3天前
目的:研究改性柑橘果胶(MCP)对兔关节软骨细胞的糖酵解代谢的影响。方法:分离、培养兔膝关节软骨细胞至第3代后,分别用含0、500 μg/ml MCP的培养液(MCP0和MCP500)培养3 d,设MCP0为对照组;连续传代培养软骨细胞,每代软骨细胞分别以MCP0和MCP500培养3 d;以白细胞介素-1β(IL-1β)处理软骨细胞1 d后,再分别用MCP0和MCP500培养3 d。以2-脱氧-葡萄糖(2DG)处理软骨细胞1 d后,再分别用MCP0和MCP500培养3 d;于培养3 d后,通过CCK-8方法检测软骨细胞的相对增殖情况;利用葡萄糖和乳酸检测试剂盒测定软骨细胞的葡萄糖摄取量和乳酸生成量;通过免疫荧光染色方法考察连续传代软骨细胞的Ⅱ型胶原α1(COL2A1)合成情况;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测软骨细胞的 COL2A1、蛋白聚糖( ACAN)、性别决定区Y框蛋白9( SOX9)、缺氧诱导因子-1α( HIF-1α)、葡萄糖转运蛋白-1( Glut-1)、丙酮酸激酶M2( PKM2)、乳酸脱氢酶A( LDHA)和葡萄糖转运蛋白-3( Glut-3)的基因表达情况。 结果:与对照组相比,MCP处理提高了软骨细胞的葡萄糖摄取量和乳酸生成量,上调了 ACAN、 HIF-1α、 Glut-1和 PKM2的基因表达水平;与对照组相比,连续传代过程中,MCP可以促进软骨细胞的增殖、维持软骨细胞的表型,上调 COL2A1、 ACAN、 SOX9、 HIF-1α、 Glut-1、P KM2和 LDHA的基因表达,提高软骨细胞COL2A1合成量和乳酸生成量;在经IL-β处理后,与对照组相比,MCP处理提高了软骨细胞的葡萄糖摄取量,上调了 COL2A1、 ACAN、 HIF-1α和 Glut-1的基因表达。在经2DG处理后,MCP处理提高了软骨细胞的葡萄糖摄取量,上调 SOX9、 HIF-1α、 PKM2和 Glut-3的基因表达。 结论:MCP能够增强软骨细胞的葡萄糖摄取能力,提高软骨细胞糖酵解代谢水平。
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编辑人员丨3天前
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超声和关节造影辅助下治疗儿童肱骨远端骨骺分离的临床疗效分析
编辑人员丨3天前
目的:比较超声与关节造影辅助下闭合复位经皮内固定术治疗儿童肱骨远端骨骺分离的临床疗效。方法:收集2013年4月至2017年8月收治于华中科技大学同济医学院附属武汉儿童医院骨科的30例肱骨远端骨骺分离的患儿的相关资料。其中,男25例,女5例;平均年龄为20.7个月,年龄范围为10~38个月;患侧为左侧10例,右侧20例。将12例采用关节造影辅助闭合复位经皮内固定术的患儿作为Ⅰ组,将18例采用超声辅助闭合复位经皮内固定术的患儿作为Ⅱ组。比较两组患儿的一般资料和肘关节功能。末次随访采用Flynn肘关节功能评定肘关节功能,按提携角减小角度进行外形评分,包括:①优,提携角减少范围为0°~5°;②良,提携角减小范围为6°~10°;③可,提携角减小范围为11°~15°;④差,提携角减小程度>15°。按屈伸功能减小的程度进行功能评分,包括:①优,屈伸功能减小范围为0°~5°;②良,屈伸功能减小范围为6°~10°;③可,屈伸功能减小范围为11°~15°;④差,屈伸功能减小>15°。结果:两组患儿在性别、年龄、患侧、术前受伤时间等方面的差异无统计学意义( P>0.05)。两组患儿在术中透视次数和手术时间上相比,差异具有统计学意义( P<0.05)。所有患儿均行闭合复位经皮内固定术,均获得随访,平均随访时间为28个月,随访时间范围为19~56个月。两组患儿在关节活动范围及Flynn功能评分上的差异均无统计学意义。Ⅰ组术后提携角平均减少5.0°,Ⅱ组术后提携角平均减少2.2°,两组之间的差异无统计学意义。Ⅰ组有2例发生针移位,Ⅱ组有1例发生针移位,两组之间的差异无统计学意义。Ⅰ组有2例肘内翻,Ⅱ组有1例肘内翻,两组之间的差异无统计学意义。两组术后均无骨折不愈合、针道感染等并发症发生。 结论:运用超声与关节造影辅助闭合复位经皮内固定术治疗儿童肱骨远端骨骺分离均可获得确切的疗效,并发症低且关节功能良好的恢复。超声辅助闭合复位经皮内固定术具有缩短手术时间和减少术中透视次数的优势。
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编辑人员丨3天前
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自体血小板分离回输对全弓置换术患者术后急性肾损伤的影响
编辑人员丨3天前
目的:评价自体血小板分离(APP)回输对全弓置换术患者术后急性肾损伤的影响。方法:选择全麻下拟行全弓置换术患者60例,性别不限,年龄18~64岁,BMI 19~34 kg/m 2,ASA分级Ⅲ或Ⅳ级。采用随机数字表法分为3组( n=20):APP回输组(A组)、急性等容血液稀释组(N组)和单纯自体血回收回输组(C组)。A组于手术开始前完成APP,浓缩红细胞根据术中情况及时回输,贫血小板血浆和富血小板血浆待鱼精蛋白中和后回输;N组在手术开始前完成急性等容血液稀释(ANH),放出的全血待鱼精蛋白中和后回输;C组在术中单纯行自体血回收及洗涤红细胞回输,A组和N组均行自体血回收。分别于麻醉诱导后10 min(T 1)、体外循环后5 min(T 2)、手术结束即刻(T 3)、术后24和48 h(T 4,5)时采集颈内静脉血及尿液,测定红细胞压积(Hct)、血浆游离血红蛋白(fHb)、尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、组织金属蛋白酶抑制物-2(TIMP-2)和胰岛素样生长因子结合蛋白-7(IGFBP-7)的浓度,计算[TIMP-2]×[IGFBP-7]。于术前、术后当天、术后1、2和3 d时测定肌酐(Scr)、肾小球滤过率(GFR)、尿素、尿酸和胱抑素C浓度。记录术中异体血制品输入量、术后机械通气时间、ICU停留时间及血液透析情况。 结果:与C组比较,A组和N组术后异体红细胞输注量和A组异体血小板输注量减少,N组T 2时Hct降低,N组和A组T 3和T 4时fHb降低,A组术后当天、术后1 d时Scr降低,术后当天、术后2和3 d时胱抑素C降低( P<0.05);与N组比较,A组术后异体血小板输注量减少,T 3~5时NGAL和TIMP-2浓度、T 3,4时IGFBP-7浓度和[TIMP-2]×[IGFBP-7]、术后当天、术后1 d时Scr、术后当天、术后2和3 d时胱抑素C浓度降低( P<0.05)。 结论:APP回输减轻全弓置换术患者术后急性肾损伤的效果优于急性等容血液稀释。
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编辑人员丨3天前
