目的:采用坐骨神经慢性压迫性损伤（chronic constrictive injury, CCI）方法构建神经病理性疼痛小鼠模型，探讨伏隔核（nucleus accumbens, NAc）内瞬时受体电位通道锚蛋白1（transient receptor potential ankyrin 1, TRPA1）对神经病理性疼痛的影响。方法:10只雄性昆明小鼠采用随机数字表法分为2组（每组5只）：假手术组（SHAM组）、坐骨神经慢性压迫性损伤组（CCI组）。采用Western blot法检测建模后第7天两组小鼠NAc内TRPA1表达变化。另24只小鼠采用随机数字表法分为4组（每组6只）：CCI小鼠注射A967079（A96）组（CCI+A96组）、CCI小鼠注射PBS组（CCI+PBS组）、SHAM小鼠注射A967079组（SHAM+A96组）和SHAM小鼠注射PBS组（SHAM+PBS组）。建模后第7天于手术对侧NAc内注射TRPA1拮抗剂A967079或其溶剂PBS，检测各组小鼠给药前及给药后2、4、6 h热缩足潜伏期（thermal withdraw latency, TWL）变化。结果:术后第7天，CCI组小鼠手术对侧NAc脑区TRPA1表达较SHAM组明显增加（ P<0.05）。与CCI+PBS组比较，CCI+A96组小鼠给药后2、4 h TWL明显升高（ P<0.05），并于给药后6 h基本恢复至给药前状态（ P>0.05）；SHAM+A96组与SHAM+PBS组之间TWL差异无统计学意义（ P>0.05）。 结论:NAc TRPA1参与坐骨神经CCI所诱导的神经病理性疼痛的调节。

目的:研究臭氧对慢性压迫性坐骨神经损伤（chronic constriction injury of the sciatic nerve, CCI）模型小鼠疼痛的影响，探讨CCI模型小鼠脊髓Homer1b/c在此过程中的作用。方法:按随机数字表法将62只雄性昆明小鼠分为8组（每组8只）：假手术组（S1组）、注射纯氧对照组（S2组）、CCI术后第7天组（C1组）、CCI术后第13天组（C2组）、术后第7天注射臭氧组（O1组）、术后第7~13天注射臭氧组（O2组）、鞘内注射反义寡核苷酸组（AS组）、鞘内注射生理盐水对照组（NS组）。各组小鼠均选择左侧坐骨神经建立CCI模型，术后7 d小鼠出现左后肢负重减少、挛缩等体征，且无肢体瘫痪、自噬等现象视为建立模型成功。术后第7天开始观测机械缩足阈值（mechanical withdrawal threshold, MWT）和热缩足潜伏期（thermal withdraw latency, TWL），Western blot法检测脊髓Homer1b/c和代谢型谷氨酸受体（metabotropic glutamate receptor, mGluR）5表达水平，免疫荧光法检测Homer1b/c和mGluR5在脊髓的分布与表达。S1组只游离神经不结扎，术后第7天观测MWT和TWL；S2组行左侧坐骨神经结扎，逐层缝合，在术后第7天注射纯氧2、4、8、24 h后观测MWT；C1组行左侧坐骨神经结扎，逐层缝合，术后第7天观测MWT和TWL，其中MWT观测时间点同O1组；C2组行左侧坐骨神经结扎，逐层缝合，术后第7~13天观测MWT和TWL；O1组行左侧坐骨神经结扎，逐层缝合，在术后第7天注射臭氧，观测注射后2、4、8、24 h的MWT和注射后2 h的TWL；O2组行左侧坐骨神经结扎，逐层缝合，在术后第7~13天每天注射臭氧2 h后观测MWT；AS组行左侧坐骨神经结扎，逐层缝合，在术后第4天起鞘内注射Homer1b/c的反义寡核苷酸至第7天，术后第4~9天观测MWT；NS组为AS组的生理盐水对照组，与AS组相同时间点观测MWT。结果:与S1组比较，C1和C2组小鼠MWT及TWL均降低（ P<0.05）；与C1组比较，O1组小鼠MWT升高（ P<0.05），而TWL差异无统计学意义（ P>0.05）；与C1组比较，O1组小鼠MWT在注射臭氧2、4 h后升高（ P<0.05），S2组小鼠MWT差异无统计学意义（ P>0.05）；与C2组比较，O2组小鼠MWT升高（ P<0.05）；与NS组比较，AS组小鼠MWT在术后第8、9天显著升高（ P<0.05）。与S1组比较，C2组和O2组小鼠Homer1b/c表达水平升高（ P<0.05）；与C2组比较，O2组小鼠Homer1b/c表达水平降低（ P<0.05）；S1组、C2组、O2组小鼠的mGluR5表达水平差异无统计学意义（ P>0.05）；与S1组比较，NS组和AS组小鼠Homer1b/c表达水平升高（ P<0.05）；与NS组比较，AS组小鼠Homer1b/c表达水平降低（ P<0.05）。与S1组比较，C1组小鼠Homer1b/c的表达增多；与C1组比较，O2组、AS组小鼠Homer1b/c表达减少；S1组、C1组、O2组和AS组小鼠的mGluR5表达未见明显差异。双重染色融合后，与S1组比较，C1组小鼠Homer1b/c表达位置与mGluR5的位置相近；与C1组比较，O2组和AS组小鼠Homer1b/c表达位置与mGluR5相近的结果减少。 结论:臭氧可以抑制CCI模型小鼠的机械痛敏，其机制可能是抑制Homer1b/c的产生，减少与mGluR5的相互作用。

目的:探讨低强度聚集超声(LIFU)对小鼠神经病理性疼痛(NP)的疗效，以及对星形胶质细胞活化和促炎细胞因子表达的影响。方法:选择36只雄性C57BL/6J小鼠，并按随机数字的方法分为假手术(Sham)组、模型(CCI)组和治疗(CCI+LIFU)组，各组12只。采用坐骨神经慢性压迫性损伤(CCI)的方法建立NP模型。CCI+LIFU组于术后第7 d给予前扣带回皮层(ACC)LIFU治疗，分别于术前和术后3，6，12，18，24，27 d测量各组小鼠患侧机械性缩爪反射阈值(MWT)，采用HE染色观察ACC脑区的病理形态学变化，采用Western Blot和免疫荧光检测ACC脑区水通道蛋白4 (AQP4)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达水平，采用酶联免疫吸附测定法检测ACC脑区促炎细胞因子IL-1β和TNF-α表达水平。结果:与Sham组相比，CCI组小鼠于术后第3 d机械痛阈出现降低且维持到术后第27 d(均 P<0.05)；与CCI组相比，CCI+LIFU组小鼠机械痛阈于术后第24 d出现升高，并在术后第24和第27 d显著高于CCI组(均 P<0.05)；LIFU刺激未对ACC脑区产生明显的病理改变；Western Blot和免疫荧光显示周围神经损伤后，ACC脑区AQP4和GFAP表达上调(均 P<0.05)，而经LIFU治疗后ACC脑区AQP4和GFAP表达下调(均 P<0.05)；酶联免疫吸附测定显示周围神经损伤后，ACC脑区促炎细胞因子IL-1β和TNF-α表达量上调(均 P<0.05)，而经LIFU治疗后IL-1β和TNF-α的表达量下调(均 P<0.05)。 结论:LIFU可有效缓解由CCI诱导的小鼠机械性痛敏症状，其机制可能与抑制星形胶质细胞的活化及神经炎症反应相关。

目的:探讨鞘内注射右美托咪定(dexmedetomidine, DEX)对幻肢痛大鼠行为及脊髓胶质细胞的影响。方法:采用坐骨神经慢性压迫性损伤法(chronic constriction injury，CCI)制备大鼠幻肢痛模型。将18只大鼠按照电脑随机数字法分为假手术组、生理盐水处理组和DEX处理组，3组大鼠分别于鞘内注射前(T1)，注射后30 min(T2)、12 h(T3)、2 d(T4)、1周(T5)进行旷场试验，观察记录大鼠的行为，并检测各时点血液中缓激肽(bradykinin, BK)、组胺(histamine, HIS)含量。1周后通过电脑随机数字法每组选取3只大鼠处死，进行脊髓免疫组化染色，观察各组大鼠脊髓胶质细胞活化水平的改变。结果:与假手术组比较，生理盐水处理组和DEX处理组大鼠T1时移动总距离明显减少( P<0.05)，移动时间和穿越方格次数减少，但差异无统计学意义；DEX处理组大鼠T2、T3、T4、T5时的移动总距离及移动时间比T1时明显增加( P<0.05)，穿越方格次数随时间推移呈增加趋势，但差异无统计学意义。与假手术组比较，生理盐水处理组和DEX处理组大鼠T1时的BK( P>0.05)和HIS( P<0.05)含量呈不同程度增多，DEX处理组大鼠的BK和HIS分别于T3、T2时间点后呈下降趋势，但差异无统计学意义。与假手术组比较，生理盐水处理组大鼠星型胶质细胞和小胶质细胞显著增多( P<0.05)；与生理盐水处理组比较，DEX处理组大鼠星型胶质细胞数目显著减少( P<0.05)。 结论:鞘内注射DEX能够抑制致痛致炎因子产生及胶质细胞活化，从而改善幻肢痛大鼠的行为能力，这为临床幻肢痛治疗提供了新思路。

目的:探究高压氧（HBO）治疗对坐骨神经慢性压迫性损伤（CCI）所致神经病理性疼痛大鼠疼痛行为及脊髓胶质细胞活化的影响。方法:选取36只成年雄性SD大鼠，按照随机数字表法分为假手术组（S组）、CCI组和CCI+HBO组，每组12只。CCI+HBO组大鼠于造模后第1天开始给予HBO治疗，1 h/d，连续10 d。所有大鼠在造模前1 d及造模后第1、3、7、10天检测机械反射阈值（WMT）和热反射潜伏期（TWL）。第10天HBO治疗结束后，运用免疫荧光技术和RT-qPCR技术检测各组大鼠L4～L5节段脊髓组织胶质纤维酸性蛋白（GFAP）和离子钙结合衔接分子1（Iba-1）的表达水平。结果:造模后第10天，与S组比较，CCI组大鼠的MWT明显降低、TWL明显缩短，脊髓GFAP和Iba-1表达水平明显增加（ P<0.05）；与CCI组比较，CCI+HBO组大鼠的MWT明显增高、TWL值明显延长，脊髓GFAP和Iba1表达水平明显下降（ P<0.05或 P<0.01）。 结论:HBO治疗可减轻CCI大鼠的神经病理性疼痛，可能是通过抑制大鼠脊髓胶质细胞的活化来实现的。

目的:评价c-CBL过表达对神经病理性痛大鼠脊髓星形胶质细胞活化的影响及其与Kindlin-1的关系。方法:清洁级健康雄性SD大鼠18只，10~12周龄，体重250~280 g，采用随机数字表法分为3组( n＝6)：假手术组(S组)、神经病理性痛组(NP组)和c-CBL过表达组(c-CBL组)。采用坐骨神经慢性压迫性损伤法制备大鼠神经病理性痛模型。于制备模型前1 d时c-CBL组鞘内注射c-CBL过表达载体10 μl，S组和NP组鞘内注射空载载体10 μl。分别于制备模型前1 d(T 0)、制备模型1、4和7 d(T 1~3)时测定大鼠机械缩足反应阈和热缩足反应阈。T 3时痛阈测定结束后处死大鼠取L 4~6脊髓，采用Western blot法检测脊髓Kindlin-1、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、TNF-α和IL-Iβ的表达。采用免疫共沉淀法检测Kindlin-1与c-CBL共表达情况。 结果:与S组比较，NP组和c-CBL组T 2，3时机械缩足反应阈降低，热缩足反应阈缩短，NP组脊髓Kindlin-1、GFAP、TNF-α和IL-1β表达、c-CBL组脊髓c-CBL表达上调( P<0.05)；与NP组比较，c-CBL组T 2，3时机械缩足反应阈升高，热缩足反应阈延长，c-CBL组背髓Kindlin-1、GFAP、TNF-α和IL-1β表达下调，c-CBL表达上调( P<0.05)。免疫共沉淀结果显示：NP组Kindlin-1与c-CBL存在蛋白交互共表达。与NP组比较，c-CBL组脊髓Kindlin-1与c-CBL共表达增强。 结论:c-CBL过表达可通过下调脊髓Kindlin-1表达，抑制星形胶质细胞活化，进而减轻炎症反应，缓解大鼠神经病理性痛。

目的:探讨高乌甲素（LA）对坐骨神经慢性压迫性损伤（CCI）大鼠背根神经节（DRG）神经元轴突中嘌呤能P2X3受体（P2X3R）转运介导神经病理性疼痛（NPP）的影响。方法:选择72只健康SD雄性大鼠，采用手术结扎右侧坐骨神经造成坐骨神经CCI的方法构建NPP模型。按随机数字法表分为CCI组、CCI+LA组和正常对照组，每组24只。正常对照组仅暴露右侧坐骨神经不结扎。CCI+LA组行CCI组相同处理后给予2 g/L的LA（4 mg/kg，腹腔注射，1次/d，共1次），其余两组以同样方式注射等量生理盐水。三组大鼠分别于伤前、伤后2，6，12，24 h测定机械缩足反射阈（MWT）和热缩足反射潜伏期（TWL），评价神经损伤引起的神经痛症状。收集3组大鼠神经结扎点近端和远端的神经片段，通过Western blot检测各组大鼠伤后2，6，12，24 h P2X3R表达量和伤后24 h神经生长因子（NGF）及酪氨酸激酶受体A（TrkA）表达量，以评估LA对P2X3R、NGF和TrkA的影响。结果:伤前各组间MWT、TWL差异无统计学意义（ P均>0.05）；与正常对照组比较，伤后2，6，12，24 h CCI组和CCI+LA组MWT、TWL明显降低（ P<0.05或0.01）；伤后2，6 h CCI组和CCI+LA组MWT、TWL差异无统计学意义（ P均>0.05），伤后12，24 h CCI+LA组MWT、TWL明显高于CCI组（ P<0.05或0.01）。Western blot结果显示，伤后2，6，12，24 h在近端坐骨神经片段中，各组P2X3R表达量差异无统计学意义（ P均>0.05）。伤后2，6，12，24 h在远端坐骨神经片段中，CCI组P2X3R表达量高于正常对照组（ P均<0.01）；伤后2，6，12 h CCI+LA组P2X3R表达量高于正常对照组（ P均<0.05），伤后24 h与正常对照组差异无统计学意义（ P>0.05）；伤后2，6 h CCI组和CCI+LA组P2X3R表达量差异无统计学意义（ P均>0.05），而伤后12，24 h CCI+LA组P2X3R表达量低于CCI组（ P<0.05或0.01）。伤后24 h在近端和远端坐骨神经片段中，正常对照组NGF表达量低于CCI组和CCI+LA组（ P<0.05或0.01），CCI组和CCI+LA组NGF表达量差异无统计学意义（ P>0.05）。伤后24 h在近端和远端坐骨神经片段中，各组间TrkA表达量差异无统计学意义（ P均>0.05）。 结论:伤后早期给予LA可以缓解NPP大鼠的机械性和热性痛觉过敏，该作用可能与LA减少P2X3R在DRG神经元中的逆向轴突转运有关。

目的:观察微小RNA(miR)-137-3p对赖氨酸特异性去甲基化酶4A基因(KDM4A)的调控在坐骨神经慢性压迫损伤(CCI)引起的神经病理性痛中的作用。方法:将大鼠随机分为假手术组(Sham)、CCI模型组、2 mg/kg miR-137-3p模拟物(mimic)鞘内注射组、4 mg/kg miR-137-3p mimic鞘内注射组。术后的第14天，实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)法检测大鼠背根神经节(DRG)和脊髓(SC)中miR-137-3p及KDM4A的表达变化。于注射前及注射后的第1、3、7、14天，采用von Frey检测大鼠机械撤足阈值(PWT)和热撤足潜伏期(PWL)。蛋白质印迹法(Western blot)检测DRG和SC中KDM4A的表达变化；酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测脊髓L4~L5组织中脑源性神经营养因子(BDNF)的含量；双荧光素酶报告基因法检测miR-137-3p与KDM4A的靶向关系。应用GraphPad Prism 8.2.1软件，对数据进行配对 t检验、ANOVA单因素方差分析及双因素方差分析等方法分析。 结果:(1)与Sham组比较，miR-137-3p在CCI大鼠DRG和SC中的表达水平(0.363±0.130、0.490±0.099)显著低于Sham组(1.013±0.164、0.950±0.120)，且差异有统计学意义( t＝8.772、8.425， P<0.05)，但KDM4A在CCI大鼠DRG和SC中的表达水平(3.113±0.083、3.613±0.136)高于Sham组(1.025±0.158、0.975±0.198)，差异有统计学意义( t＝33.020、31.060， P<0.01)。(2)与Sham组大鼠机械撤足阈值(1 d，23.220±5.262；3 d，22.790±5.764；7 d，23.220±5.262)和热撤足潜伏期(1 d，11.617±0.518；3 d，11.345±0.867；7 d，11.645±0.588)比较，CCI组机械撤足阈值(1 d，10.269±2.422；3 d，6.484±2.314；7 d，4.434±2.273)热撤足潜伏期(1 d，8.061±0.123；3 d，6.661±0.298；7 d，5.067±0.335)显著下降( F＝7.841， P<0.05； F＝162.900， P<0.01)；而与CCI组比较，鞘内注射miR-137-3p mimic可显著促进大鼠机械撤足阈值(1 d，15.302±8.044；3 d，13.891±5.894；7 d，11.006±2.284)和热撤足潜伏期(1 d，10.995±0.139；3 d，9.972±0.336；7 d，8.522±0.322)的上升( F＝12.420， P<0.01； F＝80.300， P<0.01)，抑制KDM4A的表达(DRG中，1.554±0.071比2.698±0.160， t＝15.672， P<0.05；SC中，1.684±0.059比3.006±0.088， t＝5.223， P<0.05)。(3)与Sham组(153.600±15.600；150.900±6.302)比较，CCI组大鼠DRG和SC中BDNF表达水平(354.400±13.020；350.700±26.850)显著上升( t＝4.673， P<0.05； t＝1.981， P<0.05)；而与CCI组比较，鞘内注射miR-137-3p mimic可显著抑制BDNF的产生(188.000±5.685， t＝5.767， P<0.05；182.200±4.983， t＝20.034， P<0.05)。(4)与miR-scramble组相比，miR-137-3p mimic转染可显著降低KDM4A野生型载体的荧光素酶报告基因的荧光强度(1.002±0.080比0.486±0.063， t＝11.290， P<0.05)。 结论:miR-137-3p通过调控大鼠背根神经节和脊髓背角中KDM4A的表达参与神经病理性痛。

目的:评价脊髓背角组蛋白去乙酰化酶6(HDAC6)在右美托咪定减轻大鼠神经病理性痛中的作用。方法:清洁级健康雄性SD大鼠40只，7~9周龄，体重190~240 g，采用随机数字表法分为5组( n＝8)：对照组(C组)正常饲养，不作任何处理；假手术组(SH组)分离坐骨神经但不结扎；神经病理性痛组(NP组)采用坐骨神经慢性压迫损伤(CCI)的方法制备大鼠神经病理性痛模型；右美托咪定组(D组)CCI后每天腹腔注射右美托咪定40 μg/kg；HDAC6抑制剂ACY-1215+右美托咪定组(AD组)CCI前即刻每天腹腔注射ACY-1215 25 mg/kg，CCI后腹腔注射右美托咪定40 μg/kg，直至CCI后15 d；S组和NP组腹腔注射等体积溶剂。于CCI前1 d(T 0)、CCI后3 d(T 1)、6 d(T 2)、9 d(T 3)、12 d(T 4)和15 d(T 5)时测定机械缩足反应阈(MWT)和热缩足潜伏期(TWL)，随后处死大鼠取L 4-6脊髓背角组织，采用Western blot法检测髓样分化因子88(MyD88)和NF-κB p65的表达。 结果:与C组和SH组比较，NP组、D组和AD组T 1~5时MWT降低，TWL缩短，脊髓背角MyD88和NF-κB p65表达上调( P<0.05)；与NP组比较，D组T 1~5时MWT升高，TWL延长，脊髓背角MyD88和NF-κB p65表达下调( P<0.05)，AD组上述指标差异无统计学意义( P>0.05)；与D组比较，AD组T 1~5时MWT降低，TWL缩短，脊髓背角MyD88和NF-κB p65表达上调( P<0.05)。 结论:脊髓背角HDAC6参与了右美托咪定减轻大鼠神经病理性痛的过程，与抑制MyD88/NF-κB信号通路有关。

目的:探讨高压氧（HBO）治疗减轻神经病理性疼痛的机制。方法:96只成年健康雄性C57BL/6J小鼠，采用随机数字表法分为假手术组（S组）、模型组（C组）和高压氧组（H组），每组32只。C组和H组采用坐骨神经慢性压迫损伤法建立神经病理性疼痛模型，S组仅行假手术。H组于术后第1天给予HBO处理，1次/d，连续处理5 d；S组和C组单纯放入氧舱，不接受HBO处理。造模后分别于术后第1、3、7、14、21、28天检测各组小鼠的机械反射阈值（WMT）和热反射潜伏期（TWL）。每组于术后第7、14、21、28天各处死8只小鼠，取右侧背根神经节，RT-qPCR法测定各组小鼠的背根神经节低氧诱导因子-1α（HIF-1α）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、精氨酸酶1（Arg-1）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素（IL）-6、IL-10 mRNA的表达水平。结果:与S组比较，C组小鼠各时点的MWT明显降低，TWL明显缩短（ P<0.001），HIF-1α、iNOS、TNF-α、IL-6 mRNA的表达水平明显升高，而Arg-1、IL-10 mRNA的表达水平明显降低（ P<0.05、 P<0.01或 P<0.001）。与C组相比较，H组小鼠术后第1、3、7、14天的MWT明显升高，TWL明显延长（ P<0.001），术后第7、14天的HIF-1α、iNOS、TNF-α、IL-6 mRNA表达水平明显降低，Arg-1、IL-10 mRNA表达水平明显升高（ P<0.01或 P<0.001）。 结论:HBO治疗对小鼠神经病理性疼痛短时程有效，其机制可能是通过调控HIF-1α介导的巨噬细胞极化、发挥抗炎作用有关。