目的:探讨NOD样受体家族3（NOD-like receptors3，NLRP3）炎症小体介导的炎症反应与抑郁症发病的相关性，并研究氟西汀对该过程的影响。方法:选取雄性 C57BL/6J（野生型）小鼠120只，采用随机数字表法将其随机分为对照1组、对照2组、慢性不可预知性温和刺激（chronic unpredictable mild stress，CUMS组）及CUMS+氟西汀组。另取雄性 C57BL/6J（NLRP3基因敲除，NLRP3-/-）小鼠30只，作为NLRP3-/-组。对照1组及对照2组：不做处理；CUMS组、CUMS+氟西汀组及NLRP3-/-组给予慢性不可预知性温和刺激，连续6周。造模后，对照2组、CUMS+氟西汀组小鼠经腹腔注射氟西汀［10 mg/（kg·d）］，其他3组小鼠每天注射等量生理盐水，连续4周。各组小鼠在应激前即刻及应激后每周进行1次行为学测试。应激前即刻、应激后3周、应激后6周抽取尾静脉血，3 000 r/min离心10 min，留取上清液冻存备用，采用酶联免疫吸附法检测血清白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）、白细胞介素-18（interleukin-18，IL-18）水平。各组小鼠在给予药物干预［10 mg/（kg·d）氟西汀或等量生理盐水］后每周进行1次行为学测试，包括糖水偏好实验、强迫游泳实验（forced swimming test，FST）及悬尾实验（tail suspension test，TST），每组小鼠在给药后1、3、4周抽取尾静脉血，离心留取上清液冻存备用，采用酶联免疫吸附法检测血清IL-1β及IL-18水平，并分别于上述时间点每次每组处死5只小鼠，收集新鲜海马组织低温冻存备用，采用Western-Blot检测海马脑区NLRP3、胱冬肽酶-1（caspase-1）、诱导转录因子-κB（nuclear factor-κB，NF-κB）、IL-1β及IL-18的表达。结果:（1）造模情况：CUMS 6周后，与对照1组和对照2组相比，CUMS组及CUMS+氟西汀组小鼠糖水消耗量明显降低，FST及TST不动时间明显延长，造模成功。NLRP3-/-组小鼠经CUMS后，在FST、糖水偏好实验及TST中均未表现出抑郁样改变，造模失败。（2）经腹腔注射氟西汀后，对照2组小鼠与对照1组小鼠相比，糖水消耗量、FST及TST不动时间的差异均无统计学意义（ P>0.05），CUMS+氟西汀组小鼠相较CUMS组小鼠糖水消耗量明显增加（ P<0.05），FST及TST不动时间明显缩短（ P<0.05）。（3）酶联免疫吸附实验检测结果显示，给予CUMS后，与对照1组及对照2组相比，CUMS组及CUMS+氟西汀组小鼠血清 IL-1β、IL-18水平显著升高（ P<0.05），NLRP3-/-组小鼠则变化不明显（ P>0.05）。给药后，CUMS+氟西汀组小鼠血清中IL-1β、IL-18较CUMS组下降（ P<0.05）。（4）蛋白免疫印迹检测结果显示，给予CUMS后，与对照1组及对照2组相比，CUMS组及CUMS+氟西汀组小鼠海马脑区NLRP3的表达、胱冬肽酶-1的活化及诱导转录因子-κB（nuclear factor-κB，NF-κB）、IL-1β、IL-18的表达增加（ P<0.05），氟西汀治疗后，CUMS+氟西汀组小鼠海马脑区NLRP3的表达、胱冬肽酶-1的活化及NF-κB、IL-1β、IL-18的表达显著下降（分别恢复至对照1组的99%、91%、97%、95%及97%）。 结论:（1）CUMS可引起小鼠海马区NLRP3、胱冬肽酶、NF-κB、IL-1β、IL-18蛋白表达增加以及血清上述炎症指标水平升高，而NLRP3基因敲除小鼠未发现此现象；（2）氟西汀治疗可显著降低抑郁症模型小鼠NLRP3、胱冬肽酶-1、NF-κB、IL-1β、IL-18蛋白表达及血清水平，改善小鼠抑郁样表现。

目的:探讨青春期睡眠剥夺(sleep deprivation，SD)对成年慢性不可预知性温和应激(chronic unpredictable mild stress，CUMS)模型小鼠抑郁行为及海马突触可塑性的影响。方法:将30只清洁级2周龄雄性小鼠按照随机数字表法分为对照组(CON组)、CUMS组和SD+CUMS组，每组10只。SD+CUMS组小鼠在青春期(3~6周龄)每天进行睡眠剥夺4 h，并于成年后(9周龄)采用CUMS方法建立抑郁模型；CUMS组小鼠在9周龄时建立CUMS抑郁模型；CON组小鼠不进行睡眠剥夺干预，不进行CUMS干预。采用体质量、糖水偏爱实验、悬尾实验、强迫游泳实验评价小鼠抑郁行为；采用高尔基染色技术检测小鼠海马CA1脑区基底神经元以及顶端神经元的树突棘密度，电生理膜片钳技术检测小鼠海马CA1脑区锥体神经元微小兴奋性突触后电流(miniature excitatory postsynaptic current，mEPSC)频率以及幅值的变化。采用Graphpad Prism 7.0软件统计分析和制图，多组间比较应用单因素方差分析，进一步两两比较采用Tukey检验。结果:(1)应激造模后，三组小鼠体质量、糖水偏爱率、强迫游泳不动时间和悬尾时间均差异有统计学意义( F＝71.63，39.82，44.13，43.07，均 P<0.01)，CUMS组和SD+CUMS组小鼠体质量均低于CON组[(22.92±0.31)g，(20.12±0.27)g，(25.51±0.37)g](均 P<0.01)，糖水偏爱率低于CON组[ (63.42±3.33)%，(49.68±3.70)%，(87.40±1.65)%，均 P<0.01]，强迫游泳不动时间长于CON组[ (119.20±12.03) s ，(153.80±9.17) s ，(34.30±5.32) s;均 P<0.01]，悬尾实验不动时间长于CON组[(115.20±8.19 )s，(156.80±4.35) s，(192.00±4.12) s，均 P<0.01]。与CUMS组相比，SD+CUMS组小鼠体质量低( P<0.01)，糖水偏爱率低( P<0.05)，强迫游泳的不动时间和悬尾实验的不动时间均更长(均 P<0.01)。(2)在高尔基染色中，三组小鼠海马CA1区顶端神经元和基底神经元树突棘密度均差异有统计学意义( F＝38.41，41.34，均 P<0.01)，与CON组相比，CUMS组和SD+CUMS组小鼠海马基底神经元树突棘密度以及顶端神经元树突棘密度均较低[基底神经元树突棘：(7.74±0.22)个/10 μm, (6.58±0.27)个/10 μm，(5.00±0.13)个/10 μm，均 P<0.01；顶端神经元树突棘：(8.90±0.23)个/10 μm，(7.63±0.30)个/10 μm, (6.01±0.14)个/10 μm，均 P<0.01]；与CUMS组相比，SD+CUMS组小鼠海马基底神经元树突棘密度以及顶端神经元树突棘密度均较低(均 P<0.01)。(3)电生理结果显示：三组小鼠海马锥体神经元mEPSC的频率和幅值均差异有统计学意义( F＝38.90，63.37，均 P<0.01)。与CON组相比，CUMS组和SD+CUMS组小鼠CA1脑区锥体神经元mEPSC频率和幅值明显低[频率：(0.39±0.03)Hz，(0.20±0.02)Hz，(0.07±0.02)Hz，均 P<0.01；幅值：(9.98±0.31)pA，(7.74±0.21)pA，(6.36±0.13)pA，均 P<0.01)；与CUMS组相比，SD+CUMS组小鼠mEPSC频率和幅值更低(均 P<0.01)。 结论:青春期的SD会加重CUMS模型成年小鼠抑郁行为以及海马突触可塑性的损害。

目的:构建前脉冲抑制(prepulse inhibition，PPI)损伤的精神分裂症神经发育小鼠模型，并探讨奥氮平(olanzapine，OLZ)干预对PPI功能的影响。方法:SPF级C57BL/6孕9 d母鼠尾静脉注射聚肌苷酸-聚胞苷酸[polyinosinic acid-polycytidilicacid，Poly(I∶C)](6 mg/kg)进行免疫刺激，子代小鼠出生后30~40 d(PND30~40)采用慢性不可预知性温和应激方法构建应激模型。根据窝别和性别将子代小鼠分为孕期免疫刺激+青春期应激组(P+S+组)、孕期免疫刺激组(P+S-组)、青春期应激组(P-S+组)和无刺激组(P-S-组)，每组18只。其中P+S+组小鼠根据是否给予OLZ分为OLZ干预组(OLZ组)和非OLZ干预组(non-OLZ组)，每组9只。分别于造模后和给予OLZ后采用声惊跳反射实验检测小鼠PPI功能状况。采用StatViewVersion 5.0软件进行数据分析，多因素方差分析法检验各因素的主效应、交互效应、简单效应。结果:孕期免疫刺激及青春期应激主效应显著( F(1，330)＝47.72， P<0.01)，且二者存在显著交互作用( F(1，330)＝14.80， P<0.01)。简单效应分析发现，P+S+组PPI%[(15.42±6.13)%]显著低于P+S-组[(27.33±4.58)%]、P-S+组[(31.17±3.97)%]、P-S-组[(47.14±12.28)%](均 P<0.01)。不同性别间PPI值存在显著差异( F(1，396)＝61.94， P<0.01)，在雌雄性小鼠中，Prepulse+Pulse中不同强度Prepulse影响下的Pulse惊跳反应强度存在显著差异(( F(1，198)＝18.68、18.44， P<0.01)，孕期免疫刺激有显著主效应( F(1，198)＝32.18、12.58， P<0.01)，与青春期应激存在显著交互作用( F(1，198)＝34.54、11.39， P<0.01)，按性别作简单效应分析发现，P+S+组雄性小鼠的Prepulse+Pulse的惊跳反应强度(0.47±0.12)显著高于P+S-组(0.36±0.11)、P-S+组(0.25±0.22)与P-S-组(0.31±0.19)(均 P<0.01)；P-S+组雌性小鼠的惊跳反应强度显著高于P+S+组和P+S-组、P-S-组( P<0.01)。OLZ能够逆转双重应激小鼠成年期PPI%的下降( F(1，165)＝18.24， P<0.01)。OLZ能显著降低双重应激组雄性小鼠的PPI值( F(1，102)＝21.81， P<0.01)；OLZ能显著升高双重应激组雌性小鼠的PPI值( F(1，102)＝4.88， P<0.05)。 结论:OLZ能够逆转精神分裂症神经发育模型小鼠的PPI损伤；在利用声惊跳反射实验评价小鼠PPI功能时，PPI%具有更好的稳定性和对OLZ干预的反应性。

目的:探究孕期慢性应激对子代雌性大鼠抑郁行为及海马组织印记基因胰岛素样生长因子-2 (insulin-like growth factor-2，IGF-2)/长链非编码RNA(lncRNA)H19甲基化的影响。方法:32只SPF级雌性SD大鼠按照随机数字表法分为模型组和对照组，模型组大鼠采用慢性不可预知性温和应激(chronic unpredictable mild stress model，CUMS)方法建立抑郁模型，对照组正常饲养。应激刺激第7天时，雌雄鼠合笼交配。在应激刺激前1 d和应激刺激第1、7、14、21、28天对两组母鼠行内眦静脉采血，测定血浆皮质酮浓度；在雌性仔鼠出生后第28天和出生后第42天时，每组随机抽取8只，行内眦静脉采血后测定血浆皮质酮浓度；在出生后第42天时，分别通过糖水偏爱实验、悬尾实验和强迫游泳实验测定两组雌性仔鼠的抑郁样行为。采用RT-PCR和Western blot法检测仔鼠海马组织中IGF-2/H19及相关转移酶表达情况。利用Methyl Target技术，对IGF-2差异性甲基化区域(differentially methylated region，DMR)片段2的19个CpG位点，H19印记控制区(imprinting control region，ICR)片段1中8个CpG位点和H19-ICR片段2的15个CpG位点，同时捕获测序，计算每个CpG位点甲基化水平。采用SPSS 26.0，采用重复测量方差分析、 t检验和非参数检验对相关数据进行统计分析。 结果:(1)重复测量方差分析结果显示，母鼠血浆皮质酮的时间与组别的交互效应不显著( F＝2.997， P＝0.066)，时间主效应显著( F＝4.44， P＝0.010)，组别主效应显著( F＝41.40， P＝0.001)。组间因素的单独效应分析，在应激第14、21、28天，模型组母鼠血浆皮质酮浓度均高于对照组母鼠(均 P<0.001)。(2)在糖水偏爱实验中，模型组雌性仔鼠的液体总消耗[11.10(10.38，11.58)mL，13.55(12.00，15.77)mL， Z＝－3.055， P＝0.002]、1%蔗糖水消耗[(5.50±1.30)mL，(8.56±2.04)mL， t＝－3.582， P＝0.003]及1%蔗糖偏爱百分比[(51.35±8.69)%，(62.11±8.05)%， t＝－2.576， P＝0.022]均低于对照组。(3)模型组雌性仔鼠悬尾实验中静止持续时间[(126.95±39.89)s，(54.30±25.00)s， t＝4.375， P＝0.001]和强迫游泳实验中持续不动时间[(7.97±6.66)s，(1.85±2.12)s， t＝2.478， P＝0.037]均长于对照组。(4)模型组雌性仔鼠海马组织IGF-2 mRNA[(0.46±0.24)，(1.00±0.00)， t＝3.821， P＝ 0.019]、H19 mRNA[(0.60±0.25)，(1.00±0.00)， t＝3.574， P＝0.007]表达均低于对照组；模型组雌性仔鼠IGF-2蛋白相对表达低于对照组[(0.77±0.04)，(1.00±0.00)； t＝9.876， P＝0.01)；CCTC结合因子(CCTC-binding factor，CTCF)的mRNA[(1.29±0.12)，(1.00±0.00)， t＝－4.850， P＝0.003]和蛋白相对表达水平[(1.90±0.28)，(1.00±0.00)， t＝－5.513， P＝0.005]均高于对照组。(5)模型组雌性仔鼠海马组织IGF-2 DMR区域3个CpG位点甲基化水平均低于对照组( t＝－3.21，－3.00，－3.34，均 P<0.05)，分别位于chr1215831028、chr1215831055和chr1215831205；IGF-2 DMR片段甲基化水平低于对照组( t＝－3.453， P＝0.048)；模型组雌性仔鼠甲基转移酶DNMT3A mRNA( t＝5.102， P＝0.002)、DNMT3A( t＝10.213， P<0.001)和DNMT3B( t＝4.169， P＝0.014)蛋白相对表达水平均低于对照组。 结论:孕期慢性应激致雌性仔鼠出现抑郁、绝望状态，其机制可能与甲基化转移酶表达降低引起印记基因IGF-2 DMR甲基化水平降低有关。

目的:探讨银杏二萜内酯对慢性不可预知性温和刺激(chronic unpredictable mild stress，CUMS)大鼠抑郁样行为的作用及其机制。方法:40只SD大鼠随机分为对照组、慢性应激组，以及慢性应激+银杏二萜内酯低剂量(1.5 mg·kg -1·d -1)组、中剂量(3 mg·kg -1·d -1)组和高剂量(6 mg·kg -1·d -1)组。除对照组，各组造模3周后给予药物治疗，持续给药3周并同时造模。应激期间和结束后测试行为学，取血清和海马下丘脑组织用于炎症因子、神经递质等试剂盒检测。 结果:慢性应激造成大鼠出现抑郁样行为，持续给予银杏二萜内酯可以改善大鼠糖水偏好、强迫游泳不动时间和旷场试验评分。银杏二萜内酯能够显著改善CUMS造成的血清中免疫细胞因子IL-1β、IFN-γ分泌减少，显著升高IL-10、IL-4分泌水平。此外，CUMS造成大鼠下丘脑-垂体-肾上腺(hypothalamic-pituitary-adrenal，HPA)轴功能亢进，增加促肾上腺皮质激素释放激素(corticotropin releasing hormone，CRH)、促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone，ACTH)和血浆皮质醇(cortisol，COR)的分泌，负反馈调节海马中神经递质释放，造成CUMS大鼠脑中神经递质水平如5-羟色胺(5-hydroxytryptamine, 5-HT)、5-羟吲哚乙酸(5-hydroxyindoleacetic acid, 5-HIAA)和去甲肾上腺素(norepinephrine, NE)含量降低。银杏二萜内酯能够显著抑制HPA轴功能亢进，增加脑中神经递质水平。结论:银杏二萜内酯可能通过调节机体免疫环境，抑制HPA轴亢进，增加神经递质释放改善大鼠抑郁样行为。

目的:探究柴胡疏肝散(Chaihu-Shugan San，CSS)对慢性不可预知性温和应激(chronic unpredictable mild stress，CUMS)致抑郁小鼠行为及神经再生功能的影响。方法:将30只清洁级健康雄性C57BL/6成年小鼠按照随机数字表法分为空白组(Con组)、模型组(CUMS组)、柴胡疏肝散组(CSS组)，每组10只。CUMS组和CSS组小鼠采用CUMS法建立抑郁模型，造模同时分别给予蒸馏水和CSS(2.7 g/kg)灌胃，Con组小鼠只给予等体积蒸馏水灌胃，不进行CUMS刺激。干预结束后，采用体质量增量、糖水偏爱实验、强迫游泳实验和悬尾实验检测小鼠抑郁样行为。采用免疫荧光染色法检测海马齿状回新生神经元数量。qRT-PCR法检测小鼠海马组织中脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor，BDNF)、成纤维细胞生长因子2(fibroblast growth factor 2，FGF2)、纺锤体与动粒相关复合物2(spindle and kinetochore-associated protein 2，SKA2)mRNA表达水平。采用SPSS 22.0软件进行统计分析，多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用Tukey检验。结果:(1)三组小鼠在造模后的体质量增量差异有统计学意义( F＝8.859， P<0.05)，CUMS组小鼠的体质量增量低于Con组和CSS组(均 P<0.05)。三组小鼠在行为学测试中的糖水偏爱率、悬尾不动时间和游泳不动时间均差异有统计学意义( F＝10.544，12.957，8.095，均 P<0.05)。CUMS组小鼠的糖水偏爱率低于Con组[(87.46±2.78)%，(93.90±3.31)%， P<0.05]，CSS组小鼠的糖水偏爱率[(91.65±2.61)%]则高于CUMS组( P<0.05)。CUMS组小鼠悬尾不动时间[(198.00±27.57)s]和游泳不动时间[(322.20±46.98)s]均高于Con组[悬尾不动时间(138.80±38.50)s，游泳不动时间(238.50±50.51)s，均 P<0.05]。CSS组小鼠的悬尾不动时间[(139.00±21.29)s]和游泳不动时间[(265.20±44.90)s]均低于CUMS组(均 P<0.05)。(2)免疫荧光染色结果显示，三组小鼠海马齿状回BrdU与NeuN双标的细胞数量差异有统计学意义( F＝9.486， P<0.05)。CUMS组小鼠双标染色细胞数量[(31.66±3.21)个/视野]低于Con组[(63.66±15.17)个/视野]和CSS组[(58.00±6.00)个/视野](均 P<0.05)。(3)qRT-PCR结果显示，三组小鼠海马齿状回BDNF、FGF2和SKA2的mRNA水平均差异有统计学意义( F＝14.522，9.337，8.701，均 P<0.05)。CUMS组小鼠海马齿状回BDNF mRNA(0.79±0.06)、FGF2 mRNA(0.74±0.18)和SKA2 mRNA(0.52±0.32)的相对表达量均低于Con组[BDNF mRNA(1.03±0.10)，FGF2 mRNA(1.04±0.11)，SKA2 mRNA(1.05±0.37)，均 P<0.05]。与CUMS组相比，CSS组BDNF mRNA(1.07±0.80)、FGF2 mRNA(1.30±0.29)、SKA2 mRNA(1.40±0.55)相对表达水平均较高(均 P<0.05)。 结论:柴胡疏肝散能缓解抑郁模型小鼠的抑郁症状，其机制可能与提高海马区BDNF、FGF2、SKA2 mRNA的表达并促进神经干细胞增殖有关。

目的:为分析抑郁状态对阿尔茨海默病(AD)小鼠病理变化的影响,对3xTg-AD小鼠进行慢性社交挫败应激(CSDS)与慢性温和不可预知性应激(CUMS)刺激,建立早期AD诱发抑郁小鼠模型,并检测小鼠认知行为改变、海马区小胶质细胞的活化及神经元的丢失情况.方法:3xTg-AD小鼠3月龄时交替进行为期8 d的应激刺激,通过行为学评估小鼠抑郁状态并制订评价标准,进行认知行为的检测及分析,取海马部位脑组织切片进行免疫荧光染色,观察β-淀粉样蛋白(Aβ)沉积和微管相关蛋白(tau)的聚集情况、小胶质细胞活化及神经元的丢失情况.结果:抑郁相关行为学结果提示CSDS+CUMS组小鼠出现抑郁相关表型.认知行为检测发现CS-DS+CUMS组小鼠的新物体识别指数明显降低(P＜0.05),Morris水迷宫显示CSDS+CUMS组的空间记忆能力显著降低(P＜0.05),但条件恐惧实验中CSDS+CUMS组小鼠无明显恐惧记忆丧失.免疫荧光染色结果显示CSDS+CUMS组小鼠海马区4月龄出现Aβ沉积,小胶质细胞的活化增加(P＜0.001),并出现一定程度的神经元丢失(P＜0.001);8月龄时CSDS+CUMS组小鼠提早出现tau蛋白聚集.结论:我们建立了一种AD诱发抑郁小鼠模型,3xTg-AD小鼠抑郁后提早出现学习记忆能力下降,海马区神经元AD相关病理沉积增多,并伴随小胶质细胞活化及神经元丢失.

目的:探究百合地黄汤对抑郁症大鼠肠道菌群的影响.方法:采用孤养和慢性不可预知性温和应激刺激制备大鼠抑郁症模型,经百合地黄汤给药后,采用糖水偏好试验和旷场试验进行药效学评价,并对大鼠的结肠进行病理学检测;收集大鼠粪便,应用16S rRNA高通量测序技术对大鼠肠道菌群多样性进行分析,并进行功能预测.结果:与正常组比较,模型组大鼠体质量明显降低;给药后,各剂量组大鼠体质量均有增加的趋势.糖水偏好实验结果显示,与正常组比较,模型组大鼠糖水偏爱度明显减弱(P＜0.01);给药后,各剂量组糖水偏爱度均有增强的趋势,且中剂量组和低剂量组差异有统计学意义(P＜0.01).在旷场实验中,与正常组比较,模型组大鼠自主活动显著减弱(P＜0.01);给药后,各剂量组大鼠自主活动均有增强的趋势,且低剂量组与模型组比较差异有统计学意义(P＜0.05).病理结果显示,模型组大鼠结肠黏膜遭到破坏,经百合地黄汤给药后,各给药组结肠黏膜损伤均有不同程度的恢复.在菌群多样性方面,经百合地黄汤治疗后,在门水平上,厚壁菌门的丰度明显增加,拟杆菌门、疣微菌门、变形菌门及蓝藻门的丰度明显降低,其中变形菌门和蓝藻门改变具有统计学意义(P＜0.05).在属水平上,降低了 norank_f__Muribaculaceae、瘤胃球菌属及粪球菌属等菌属的丰度,升高了乳酸菌属、罗姆布茨菌属、Turicibacter及芽孢杆菌属等菌属的丰度,其中norank_f_Muribaculaceae、罗姆布茨菌属、Turicibacter、norank_f_Eubacterium_coprostanoligenes_group、Prevotellaceae_UCG-001 及 Prevotellaceae_UCG-001 的改变有统计学意义(P＜0.05).京都基因和基因组百科全书(KEGG)功能预测显示,差异菌群的功能与氨基酸代谢、能量代谢、神经系统以及神经退行性疾病等相关.结论:百合地黄汤能够调节抑郁症大鼠的肠道菌群进而改善抑郁症大鼠的抑郁样行为.

探讨柴金解郁安神片调控前扣带皮层(ACC)-腹侧海马(vHPC)谷氨酸能神经环路异常改善抑郁症大鼠腹侧海马神经元突触重塑的分子机制.首先运用化学遗传将谷氨酸能腺相关病毒(AAV)定位注射至大鼠ACC脑区,并通过慢性温和不可预知性应激(CUMS)联合孤笼饲养复制大鼠抑郁模型,实验设正常组、模型组、AAV空载组、AAV病毒组、AAV病毒+糖皮质激素受体(GR)阻断剂组、AAV病毒+趋化因子受体 1(CX3CR1)阻断剂组、AAV病毒+柴金解郁安神片组,采用水迷宫(Morris water maze)、旷场(open-field)和强迫游泳(forced-swimming)实验联合动物行为分析系统评估大鼠抑郁样行为;苏木素-伊红(HE)染色检测大鼠ACC及vHPC脑区神经元形态结构变化;免疫荧光及核磷酸蛋白(c-Fos)检测大鼠ACC-vHPC谷氨酸能神经环路激活情况;高尔基染色和透射电镜检测大鼠vHPC神经元树突、树突棘及突触亚微结构变化;免疫荧光、Western blot分别检测大鼠vHPC谷氨酸能神经元细胞内突触重塑相关蛋白谷氨酸受体 2A(GRIN2A)、谷氨酸受体 2B(GRIN2B)、Ca2+/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)、丝裂原激活蛋白激酶激活蛋白激酶 2(MK2)、丝切蛋白(cofilin)表达水平.结果表明,谷氨酸能AAV病毒激活后模型组大鼠抑郁样行为表型、ACC及 vHPC神经元形态结构、突触超微结构损伤更加加重,而 GR、CX3CR1 阻断剂均能不同程度逆转其异常改变,提示ACC脑区内胶质细胞GR/CX3CR1 双信号介导的ACC-vHPC谷氨酸能神经环路异常激活可能与抑郁的发生发展密切相关.有趣的是,柴金解郁安神片也能显著抑制AAV病毒诱导的ACC-vHPC神经环路激活及Glu含量异常升高,同时有效逆转模型组大鼠进一步加重的抑郁样行为和vHPC谷氨酸能神经元突触重塑,并揭示其改善腹侧海马神经元突触损伤的分子机制可能与调控突触重塑相关信号NR/CaMKⅡ、MK2/cofilin有关.综上,该文证实了柴金解郁安神片能有效调控ACC-vHPC谷氨酸能神经环路异常进而改善抑郁症大鼠腹侧海马谷氨酸能神经元突触重塑,其分子机制可能与调节突触相关NR/CaMKⅡ、MK2/cofilin信号通路有关,这可能是其发挥抗抑郁作用的重要机制.

阈下抑郁(SD)是一种是常见心理亚健康状态,又称亚健康抑郁状态,建立一种与人类相似的SD动物模型是防治和了解该病复杂性及相关机制的重要工具.一般来说,SD动物模型是通过一定应激源引起行为情绪变化,诱发脑神经、分子生物学异常来进行构建的,常用的造模方法有不完全性慢性不可预知性温和刺激法、药物诱导法、阈下社会挫败应激法、光周期紊乱法、快速眼动睡眠剥夺法、基因突变法等,通常模型建造是否成功可通过行为学评价(蔗糖偏好实验、悬尾实验、高架十字迷宫实验、明暗箱实验、旷野实验、强迫游泳实验)、体征观察、体质量测定、脏器指数、脑成像等方法进行评判.虽然当前SD动物模型的造模方法与评价方法众多,但缺乏统一标准.因此,研究者应根据实际需求选用合适的造模方法和模型评价方法,以获取最佳的实验结果.