目的:探讨重度β地中海贫血（β-thalassemia，β-TM）青春期前男孩在性腺毒性治疗前进行生育力保存的方法。方法:报道3例重度β-TM男孩行造血干细胞移植（hematopoietic stem cell transplantation， HSCT）前，采用慢速程序化冷冻方法行睾丸组织冷冻保存，并结合文献对青春期前男孩进行生育力保存的必要性和地中海贫血男孩生育力监测、睾丸冷冻方法学及其相关流程进行阐述。结果:采用慢速程序化冷冻方法分别成功为3例男孩冷冻31块、31块、20块睾丸组织，冷冻过程顺利。结论:对拟行HSCT的重度β-TM男孩，青春期前睾丸组织冷冻可以保存其生育力，为其成年后孕育后代留下希望。

卵巢组织冻存与移植技术不仅保护女性生育力,还可保存卵巢内分泌功能,有效防治医源性早发性卵巢功能不全,尤其适用于青春期前女童与亟需原发病治疗的女性.卵巢组织冻存的有效性与安全性已得到了广泛验证,目前的临床金标准为慢速冻存,而玻璃化冻存仅适用于研究.尽管该技术近年来发展迅速,但仍面临超低温冻存损伤、冷冻保护剂毒性、卵泡储备量的评估、冻存与移植的安全性等问题.本文针对以上问题的研究进展进行综述.

目的 比较银质封闭式玻璃化冷冻系统(SSCVS)、开放式冷冻薄膜(Cryotop)和传统封闭式麦管(CPS)对第 3 天分裂期胚胎的冷冻保存效果.方法 选择 2017 年 1 月至 2018 年 10 月在四川大学华西第二医院行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)助孕中由 3 原核(PN)发育的废弃的优质胚胎 300 个,将胚胎随机分配到 3 个冷冻组:SSCVS 组、Cryotop 组和 CPS 组,每组为100 个胚胎;通过胚胎冻融后存活率、完整胚胎存活率和囊胚形成率,比较 SSCVS、Cryotop 及 CPS 对分裂期胚胎冷冻的保存效果.结果 SSCVS组和Cryotop组及CPS组的分裂期胚胎冻融后存活率、完整胚胎存活率和囊胚形成率比较,差异均有统计学意义(x2 值分别为 26.190、9.028、24.129,P＜0.05).SSCVS组与Cryotop 组的分裂期胚胎冻融后存活率、完整胚胎存活率和囊胚形成率比较差异均无统计学意义(P＞0.05);SSCVS组的分裂期胚胎冻融后存活率、完整胚胎存活率和囊胚形成率均高于 CPS组(x2 值分别为 13.455、6.792、18.755,P＜0.05);Cryotop 组的分裂期胚胎冻融后存活率、完整胚胎存活率、囊胚形成率均高于CPS组(x2 值分别为 15.457、5.498、15.153,P＜0.05).结论 通过研究建立了适合应用于临床的人分裂期胚胎的新型封闭式玻璃化冷冻系统 SSCVS,其将为提高冻融胚胎妊娠率,同时预防生物污染,并提高活产率和后代安全性提供了新的技术支持.

近年来,恶性肿瘤治疗技术的进步改善了患者的远期预后,但放化疗对卵巢功能的损伤已成为新的焦点问题,越来越多的育龄期女性患者开始重视治疗后的生育力保存.女性生育力保存包括胚胎冷冻、卵母细胞冷冻及卵巢组织冷冻,其中,胚胎及卵母细胞冻存技术已近成熟,但不适用于儿童、未婚女性及迫切需要治疗的肿瘤患者.卵巢组织冷冻保存是继胚胎和卵母细胞冷冻技术之后的另一重大突破,其保存方法主要包括慢速程序化冷冻和玻璃化冷冻.

目的:探讨青春期前男孩睾丸组织冷冻保存手术护理配合的方法.方法:回顾性分析生育力保存的4 例青春期前男孩睾丸组织冷冻保存围手术期护理方法与效果,重点阐述与睾丸组织保护相关的术前、术中无菌冰盅的制作准备及使用注意事项,术中睾丸组织离体后的保护以及转运等细节.结果:进行生育力保存的 4例青春期前男孩手术均顺利完成,快速恢复,获取的睾丸组织得到良好保护并顺利转运到胚胎实验室,组织状态好,规范处理后采用慢速程序化冷冻方法分别为4 例患者冷冻了 31、31、20、34 块睾丸组织,为患者未来恢复、维持男性内分泌功能、生育自己的后代提供了可能.结论:对于需进行生育力保存的男孩,睾丸组织获取术围手术期无菌冰盅的准备、使用及术中护理操作配合、组织保护转运等措施,可以实现睾丸组织的有效保护,为后续胚胎实验室睾丸组织的处理及冷冻奠定了基础,取得了很好的护理效果,也为生育力保存护理的推进提供借鉴和参考.

目的 分析早期慢速冷冻的D3卵裂期胚胎复苏后培养至囊胚移植的临床结局. 方法 选取2013年1月至2016年12月深圳中山泌尿外科医院生殖中心D3卵裂期胚胎慢速冷冻复苏周期为研究对象,同一患者复苏的胚胎来自于同一取卵周期.根据移植胚胎策略不同分为:(1)卵裂期移植组,即慢速冷冻复苏后直接行卵裂期胚胎移植,共55个复苏周期.(2)囊胚移植组,即复苏后继续培养至囊胚移植,共57个复苏周期.分析囊胚移植组胚胎复苏后继续培养的囊胚形成率,两组患者移植后的种植率、临床妊娠率、异位妊娠率、多胎妊娠率、早期流产率及抱婴率等临床结局. 结果 早期慢速冷冻的D3卵裂期胚胎复苏存活率为72.57％,继续培养后的囊胚形成率为29.50％.移植时卵裂期移植组平均移植胚胎数显著高于囊胚移植组[(2.64±0.53) vs.(1.39±0.54)枚,P＜0.05],移植胚胎中优质胚胎占比无显著性差异(58.82％ vs.47.37％,P＞0.05).移植后的临床结局显示,两组临床妊娠率(44.44％ vs.39.02％)、异位妊娠率(5.00％vs.0％)、多胎妊娠率(20.00％vs.25.00％)、早期流产率(20.00％ vs.18.75％)、抱婴率(26.19％ vs.28.21％)比较均无显著性差异(P＞0.05).卵裂期移植组的种植率略低于囊胚移植组(22.69％ vs.33.33％),但无显著性差异(P＞0.05). 结论 两组临床结局差异不大,培养至囊胚移植显著减少平均移植胚胎数,但是增加无可移植胚胎的风险,各中心需要综合考虑患者意愿及具体情况,选择合适的慢速冷冻胚胎复苏后移植策略.

目的 对比分析慢速冷冻法、玻璃化冷冻法保存小鼠卵巢组织的效果.方法 将BALB/C雌性小鼠随机均分为慢速冷冻组、玻璃化冷冻组,取卵巢组织后分别迸行慢速冷冻、玻璃化冷冻.冷冻21天结束时,取卵巢组织迸行病理学观察,比较两组各级卵泡正常率;采用免疫组化法检测卵巢组织中血管生成素2 (Ang-2)及其受体酪氨酸激酶受体2(Tie-2)表达.结果 慢速冷冻组始基卵泡正常率高于玻璃化冷冻组(P<0.05),初级卵泡、次级卵泡正常率比较差异均无统计学意义(P 均 >0.05).两组颗粒细胞冷冻前Ang-2(+++)、Tie-2(+++)阳性表达率均高于冷冻后,慢速冷冻组解冻后颗粒细胞 Ang-2(+++)、Tie-2(+++)阳性表达率均高于玻璃化冷冻组;两组卵泡膜细胞冷冻前Ang-2、Tie-2阳性表达率均高于冷冻后,慢速冷冻组解冻后卵泡膜细胞 Ang-2、Tie-2阳性表达率均高于玻璃化冷冻组;组间及组内比较 P均 <0.05.结论 慢速冷冻法、玻璃化冷冻法均会损伤卵巢组织内各级卵泡,并导致Ang-2、Tie-2表达变化,但慢速冷冻法对卵巢组织的损伤更小.

目的 比较研究在玻璃化冷冻和慢冻解冻后卵裂期胚胎的发育潜能和临床结局.方法 在我院生殖医学中心以同期慢速冷冻解冻胚胎为对照,收集2015年3月-2017年5月在行玻璃化冷冻解冻的分裂期胚胎,并进行囊胚培养,如继续发育后行胚胎移植,并随访比较其临床结局.结果 玻璃化组复苏率为99.4±4.1％,囊胚形成率为60.0％±33.0％,临床妊娠率为56.8％ (54/95),出生率为47.4％ (45/95);慢冻组复苏率为95.2±12.2％,囊胚形成率为48.3％±29.6％,临床妊娠率为50.0％ (19/38),出生率为44.7％ (17/38).两组冻胚时年龄、冷冻时平均优质胚胎数比较,差异无统计学意义(P＞0.05);两组囊胚形成率、临床妊娠率和出生率比较,未发现差异有统计学意义(P＞0.05).结论 胚胎的玻璃化冷冻保存,可以获得比较满意的囊胚形成率和临床结局;囊胚培养可以进一步筛选具有种植潜能的胚胎.

40年前,世界首例试管婴儿诞生;30年前,中国首例试管婴儿诞生.从自然周期到促排卵技术以及从动物源性、尿源性到高纯度生物合成药物的应用,从腹腔镜下到经阴道超声引导下取卵,从生殖配子移植到胚胎体外培养体系成熟,从经典的体外受精-胚胎移植(IVF-ET)到复杂的胚胎植入前遗传学检测技术,从慢速冷冻到玻璃化冷冻技术,人类辅助生殖技术(ART)在近半个世纪内得到了飞速发展.与此同时,新技术下我们也观察到一些新的现象乃至技术带来的一些新的问题.

癌症患者治疗前行卵巢组织冷冻保存、待其病情稳定后,重新进行卵巢组织移植,可使其保持女性的正常生殖内分泌功能,并能够进行正常生育.目前常用的冷冻方案包括慢速程序化冷冻和玻璃化冷冻,其中慢速程序化冷冻是卵巢组织冷冻的标准方法,但近年来玻璃化冷冻由于其方便、高效,越来越受到关注.卵巢组织冷冻保存作为癌症患者保留生育能力的一种选择具有广泛的应用前景.虽然卵巢组织移植已用于临床,并有成功分娩的报道,但卵巢组织体外培养技术尚处于研究阶段,仍不够成熟.本文旨在对卵巢组织体外培养及冻融技术的方法改进以及现阶段的研究情况作一综述.