目的:评价外用凯普斯泰冷敷凝胶治疗成人轻中度特应性皮炎（AD）的疗效和安全性。方法:采用随机、双盲、氢化可的松乳膏对照临床研究。2019年7月至2020年5月，于首都医科大学附属北京友谊医院收集80例成人轻中度AD患者，分为两组，每组40例。试验组外涂凯普斯泰冷敷凝胶，对照组外涂氢化可的松乳膏，每日3次，治疗4周。分别于治疗前和治疗1、2、4周随访，根据湿疹面积及严重程度指数（EASI）、视觉模拟标尺法（VAS）、研究者总体评估（IGA）评分等评价疗效，记录不良事件。主要采用重复测量的方差分析和 χ2检验进行疗效和安全性比较。 结果:AD患者80例，男43例、女37例，年龄（52.71 ± 16.71）岁。治疗前，两组患者性别、年龄、EASI评分、VAS评分、IGA评分差异均无统计学意义（均 P > 0.05）。治疗1、2周时，试验组有效率分别为10.00%（4/40）、57.50%（23/40），对照组有效率分别为15.00%（6/40）、52.50%（21/40），两组差异均无统计学意义（均 P > 0.05）。治疗4周，试验组有效率82.50%（33/40），显著高于对照组57.50%（23/40， P < 0.05）。治疗1、2、4周时，试验组VAS评分均显著低于对照组（ U = 1 253.00、1 121.00、1 091.50，均 P < 0.05）。两组均无药物相关不良事件发生。 结论:凯普斯泰冷敷凝胶治疗成人轻中度AD安全、有效，可用于临床。

目的:探究lycosin-Ⅰ体外抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的活性及体外联合8种常用抗菌药物对MRSA的抗菌作用。方法:本研究遵循了随机对照试验的设计原则。收集中南大学湘雅二医院2021年9至11月临床分离的MRSA 10株，采用微量肉汤稀释法测定lycosin-Ⅰ体外抗MRSA的最低抑菌浓度（MIC）、最小杀菌浓度（MBC）和杀菌动力学试验；采用微量肉汤棋盘式稀释法检测lycosin-Ⅰ与青霉素、红霉素、左氧氟沙星、庆大霉素、利福平、米诺环素、万古霉素及利奈唑胺共8种常见抗菌药物的体外联合抑菌效果。结果:lycosin-Ⅰ体外抗MRSA的MIC范围为4~8 mg/L，MIC 50和MIC 90分别为4和8 mg/L；MBC范围为4~8 mg/L，其比值MBC/MIC为1~2；杀菌动力学试验结果显示，lycosin-Ⅰ浓度为1/2 MIC或MIC时，MRSA临床分离株和标准菌株均在短时间存活菌数下降而后出现恢复繁殖的现象，而浓度为2 MIC或4 MIC时存活细菌载量则呈现逐渐减少直至杀灭的趋势。lycosin-Ⅰ与庆大霉素体外联用时以协同作用为主而与其他抗菌药物联用主要表现为相加作用。此外，lycosin-Ⅰ与抗菌药物体外联用后可显著降低抗菌药物的MIC 50和MIC 90。 结论:lycosin-Ⅰ在体外对MRSA具有较好的抑菌和杀菌活性且杀菌快速、彻底，同时与其他抗菌药物体外联合抗MRSA时，能起到协同或相加作用。

目的 探讨血浆肝素结合蛋白(HBP)对早期诊断新生儿脓毒症(NS)及脓毒症严重度分级的临床价值.方法 回顾性研究方法,选取2016年12月至2017年8月在湖南省儿童医院NICU住院的一般脓毒症患儿39例、严重脓毒症患儿37例、脓毒性休克患儿16例分别作为相应试验组,并选取同时期在各新生儿科住院的局部感染患儿34例及非感染患儿35例分别作为相应对照组;分别测定各组患儿入院时的HBP、降钙素原(PCT)及超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平并采用非参数统计方法比较各指标组间差异的显著性;运用受试者工作特征曲线(ROC)比较各指标对感染和脓毒症诊断的效能.结果 一般脓毒症组、严重脓毒症组及脓毒性休克组HBP(H=91.764,P<0.01)、PCT (H=51.757,P<0.01)及hs-CRP(H=28.418,P<0.01)水平均显著高于局部感染组和非感染组,差异有统计学意义;严重脓毒症[52.35(33.65,88.15)(ng/ml)]和脓毒性休克组[73.55(60.61, 145.51)(ng/ml)]血浆HBP水平明显高于一般脓毒症组[34.12(23.04,41.79)(ng/ml)],差异有统计学意义(H=24.092,P<0.01);三组患儿血清PCT 与hs-CRP水平差异无统计学意义[(HPCT=1.909,Hhs-CRP=0.292),P>0.05];HBP诊断新生儿脓毒症和新生儿感染的曲线下面积(AUC)分别为0.885和0.904,均高于PCT和hs-CRP;当诊断阈值(cut-off值)取19.8 ng/ml时,HBP诊断新生儿感染的敏感度和特异度分别为85.7%和82.9%,当cut-off值取28.0 ng/ml时,HBP诊断新生儿脓毒症的敏感度和特异度分别为80.4%和88.4%.结论 HBP在新生儿脓毒症早期诊断及临床分级方面优于PCT和hs-CRP,可能具有较好的临床应用价值.

目的 探讨胸腔积液肝素结合蛋白(HBP)检测在胸腔积液患者中对肺炎旁胸腔积液(PPE)鉴别诊断的应用价值.方法 病例对照研究.收集2018年2至7月在衢州市人民医院住院的189例胸腔积液患者的胸腔积液标本,其中肺炎旁胸腔积液(肺炎组)72例,结核性胸腔积液(结核组)24例,恶性胸腔积液(恶性组)46例,其他原因引起的漏出液(漏出液组)47例.对所有胸腔积液进行常规分析和胸腔积液乳酸脱氢酶(LDH)、胸腔积液腺苷脱氨酶(ADA)、胸腔积液总蛋白(TP)检测,并采用酶联免疫吸附法测定胸腔积液HBP水平.各组总体水平差异采用Kruskal-Wallis H检验,方差齐性多组比较采用单因素方差分析,方差不齐多组比较采用LSD检验,计数资料比较采用卡方检验.绘制ROC曲线评价胸腔积液中HBP、LDH、ADA、TP水平在PPE鉴别诊断中的应用.结果 胸腔积液HBP浓度在肺炎组为316.1(99.5,399.8)ng/ml,结核组为64.7(18.6,96.8)ng/ml,恶性组15.2(8.4,33.3)ng/ml,漏出液组14.1(6.5,23.0)ng/ml.肺炎组胸腔积液HBP水平与其他3组之间比较,差异有统计学意义(H=120.3,P<0.05).当cut-off值为64.2 ng/ml时受试者工作特征(ROC)曲线下面积为0.953,灵敏度为88.9％(64/72),特异度为89.7％(105/117),阳性预测值为84.2％(64/76),阴性预测值为92.9％(105/113),总符合率为89.4％(169/189).结论 胸腔积液HBP水平诊断效能高,能较好区分胸腔积液患者的PPE,可能是PPE鉴别诊断的生物标志物.

防御素是一类富含精氨酸和半胱氨酸的内源性阳离子抗菌肽,是软体动物抵御各种病原微生物侵染的重要免疫因子.太平洋牡蛎防御素(Crassostrea gigas defensin,CgD)近羧基端的43个氨基酸残基构成了其成熟肽区域,决定了CgD的生物学活性.首先通过逆转录PCR和设计特异性引物从太平洋牡蛎外套膜中分离并扩增到3'端添加和不添加6×His标签的两种目的基因CgDH+和CgDH-;与pPICZαA连接后构建的重组表达载体(pPICZαA-CgDH+和pPICZαA-CgDH-)电转至毕赤酵母Pichia pastoris X-33中,使用1.0％甲醇诱导表达目的蛋白CgDH+和CgDH-,最适培养条件为29℃、250 r/min、72 h;通过固化金属离子亲和层析(IMAC)获得分子量为5.78 kDa的纯化的重组蛋白CgDH+,根据其蛋白质浓度推算表达量为2.32 mg/Lo经MALDI-TOF-TOF质谱分析证明纯化产物即为预期的目的蛋白.抑菌试验结果显示分别含重组蛋白CgDH+和重组蛋白CgDH-的培养液上清对金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus和铜绿假单孢菌Pseudomonas aeruginosa都具有抑菌活性,表明重组蛋白中6×His标签的存在与否并不影响其生物学活性.

目的 探讨尿液中肝素结合蛋白(U-HBP)和白介素6(U-IL-6)及白细胞计数(U-WBC)对细菌性尿路感染(UTI)的辅助诊断价值.方法 病例对照方法.收集2017年9月至2018年3月于中南大学湘雅三医院收治的157例UTI患者、61例非UTI患者以及40名健康体检者的尿液标本,采用酶联免疫吸附法检测U-HBP;发光法检测U-IL-6;细菌定量培养鉴定病原菌种类;全自动尿沉渣分析仪及其配套试剂检测U-WBC、尿白细胞酯酶(U-LE)、尿亚硝酸盐(U-NIT)含量.对非正态分布的连续变量(定量资料和等级资料),两独立样本间的非参数检验采用Mann-WhitneyU检验,各组总体水平差异采用Kruskal-Wallis H检验.对二分类的定性资料,两组之间和多组之间比较使用卡方检验.建立受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析U-HBP、U-IL-6及U-WBC对细菌性UTI的临床诊断价值,并确定U-HBP、U-IL-6及U-WBC对诊断细菌性UTI的最佳截断值.结果 UTI组、非UTI组和健康对照组U-HBP的水平分别为513.43(50.45～644.40)ng/ml、55.65(20.43～314.55)ng/ml、4.83(3.28～12.63)ng/ml;U-IL-6的水平分别为5.72(3.84～9.02)pg/ml、5.31(4.31～6.39)pg/ml、5.06(4.56～6.18)pg/ml;U-WBC水平分别为205(24～754)个/μl、34(13～117)个/μl、0(0～0)个/μl.3组之间U-HBP、U-WBC比较,差异有统计学意义(HU-HBP=83.192,HU-WBC=100.416,P<0.05);U-IL-6比较,差异无统计学意义(HU-IL-6=2.585,P>0.05).U-HBP和U-WBC诊断细菌性UTI最大约登指数分别为0.475和0.441,最佳截断值分别为64.35 ng/ml和119.25个/μl.结论 检测尿液中HBP对由细菌感染引起的尿路感染的辅助诊断具有重要意义,而U-IL-6对细菌性尿路感染的诊断无显著意义.

在医学科学高速发展的今天,感染性疾病的发病率仍然很高.由于耐药细菌和变异病毒等不断涌现,人类寻找新型抗感染药物的脚步也从未停止.抗微生物肽是广泛存在于各种动植物中,具有免疫防御功能的阳离子多肽类,由于其抗微生物活性多样,具有免疫调节功能,是抗感染药物研发的理想分子.笔者就抗微生物肽在感染性疾病中的研究现状进行综述.

目的 探讨脑脊液肝素结合蛋白(HBP)检测在小儿化脓性脑膜炎(PM)诊断和预后预测中的价值.方法 采取回顾性研究方法,选取2018年8月至2019年1月湖南省儿童医院收治的化脓性脑膜炎患儿(PM组)76例,病毒性脑炎患儿(VE组)55例,另选择同期40例脑脊液白细胞计数正常的非感染性疾病患儿作为对照组.PM组患儿按照出院时的格拉斯哥临床结局评分分为预后良好亚组(65例)和预后不良亚组(11例).测定PM组入院第1天和第7天、VE组和对照组入院第1天的脑脊液HBP、白细胞计数(WBC)、中性粒细胞百分比(N％)、葡萄糖(Glu)、总蛋白(TP)、乳酸脱氢酶(LDH)及血清降钙素原(PCT)水平.利用非参数检验分析各组间检测指标的差异,Spearman相关检验分析HBP与其他各指标的相关性,建立受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)评价各检测指标对化脓性脑膜炎的诊断价值及预后预测能力.结果 入院第1天PM组、VE组和对照组之间脑脊液HBP[63.09(18.10～272.19)ng/mL、5.90(5.90～6.40)ng/mL和5.90(5.90～5.90)ng/mL]、WBC[365.00(20.00～1285.00)×106/L、21.00(8.00～30.00)×106/L和13.50(7.25～21.00)×106/L]、N％[0.65(0.50～0.79)、0.19(0.10～0.25)和0.21(0.15～0.27)]、Glu[1.97(1.07～3.08)mmol/L、2.89(2.66～3.42)mmol/L和3.04(2.68～3.42)mmol/L]、TP[1.43(0.63～1.88)g/L、0.23(0.16～0.32)g/L和0.13(0.10～0.31)g/L]、LDH[152.00(46.50～461.50)IU/L、16.00(13.20～22.00)IU/L和16.00(10.25～19.75)IU/L]及血清PCT[1.35(0.19～9.33)ng/ml、0.06(0.03～0.11)ng/ml和0.08(0.05～0.14)ng/ml]水平差异均有统计学意义(HHBP=138.62、HWBC=69.72、HN％=106.67、HGlu=34.08、HTP=68.00、HLDH=85.11、HPCT=79.20,P<0.001);各检测指标用于诊断化脓性脑膜炎的曲线下面积最大为HBP(AUC=0.997),HBP最佳诊断界值(11.84 ng/mL)时敏感度、特异度、阳性预示值、阴性预示值分别为98.70％、97.90％、97.40％、98.94％.PM患儿预后良好亚组入院第7天与第1天比较,脑脊液HBP、WBC、N％、TP、LDH及血清PCT水平均降低,差异有统计学意义(P<0.05),脑脊液Glu入院第7天与第1天比较差异无统计学意义(P>0.05);预后不良亚组入院第7天与第1天各指标比较差异均无统计学意义(P>0.05).入院第1天各指标预测PM患儿预后不良,差异均无统计学意义(P>0.05);入院第7天各指标用于预测PM患儿预后不良,差异均有统计学意义(P<0.05),AUC最大为HBP(0.976),HBP最佳预测界值(128.84 ng/mL)时敏感度、特异度、阳性预示值、阴性预示值分别为100.0％、93.8％、73.3％、100.0％.脑脊液HBP与WBC、N％、TP、LDH及血清PCT水平均呈正相关(rWBC=0.670、rN％=0.802、rTP=0.562、rLDH=0.524、rPCT=0.436,P<0.001),与脑脊液Glu水平呈负相关(r=-0.469,P<0.001).结论 脑脊液HBP检测在小儿化脓性脑膜炎诊断与预后预测中具有一定的临床价值.

背景:抗菌肽作为一种可从自然来源提取并用于对抗抗生素耐药细菌的潜在候选物,引起了科学家们的广泛关注,熟悉抗菌肽的抗菌机制有利于将抗菌肽的临床应用.目的:综述近年来对抗菌肽抗菌机制的研究进展.方法:由第一作者应用计算机检索PubMed、Springerlink、Web of Science、ScienceDirect等数据库2013年1月至2019年3月发表的文献,选择与抗菌肽抗菌机制及其研究进展相关的文献.结果与结论:抗菌肽是一类特殊的分子,为具有广谱抗菌性的宿主防御多肽,在一些生物体中其被认为是先天免疫系统的重要组成部分.抗菌肽的抗菌机制从作用模式上可以分为直接致死和免疫调节2类主要的模式,直接致死作用机制可进一步分为膜靶向和非膜靶向.与此同时基于抗菌肽的广泛应用,预计在葡萄球菌、口腔细菌(包括链球菌)和肠道细菌(包括沙门氏菌)等微生物环境中已发展出许多抵抗策略,主要分为被动抵抗和诱导或适应性抵抗机制.在未来的研究和应用中,阳离子肽是解决多重耐药性日益增多的一个有效选择,除了应设计新的方法来对抗细菌对抗菌肽的耐药性外,也应该预防由常规抗生素产生的耐药性.

抗菌肽(microbial peptides,AMPs)又称为抗微生物肽,是在外界因素的诱导作用下,在动物免疫防御系统中生成的一类具有免疫活性的阳离子多肽物质,可抑制细菌、真菌和病毒的生长繁殖,也是防御病原体细菌的首道屏障.反刍动物AMPs可分为防御素及内源性抗菌肽(Cathelicidins),其中Cathelicidins稳定性高,水溶性好,抗菌机理独特,具有广谱抗菌能力,可增强机体免疫力,且不易产生耐药性.本文就反刍动物AMPs的分类、作用机制、生产和转基因的应用及未来发展存在的问题作一综述.