目的 观察活血补肾安神方对氧化应激损伤H9c2心肌细胞能量代谢的影响.方法 采用H2O2诱导H9c2细胞氧化应激模拟心肌损伤,CCK-8法筛选最佳造模条件及药物浓度.将细胞分为正常组、模型组、盐酸曲美他嗪组和活血补肾安神方组,对处理后的H9c2心肌细胞进行Na+-K+-ATP酶活性检测及实时ATP生成速率、线粒体压力、糖酵解速率和长链脂肪酸氧化压力测定,观察心肌细胞能量代谢变化.结果 与正常组比较,模型组H9c2细胞Na+-K+-ATP酶活性、糖酵解ATP生成速率及线粒体ATP生成速率、基础氧耗、非线粒体氧耗、ATP生成能力、细胞储备呼吸能力和最大呼吸能力降低,糖酵解速率减小,长链脂肪酸基础呼吸、急性响应及最大呼吸值降低(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,活血补肾安神方组H9c2细胞Na+-K+-ATP酶活性升高,糖酵解ATP生成速率及线粒体ATP生成速率增大,基础氧耗、非线粒体氧耗、ATP生成能力、细胞储备呼吸能力及最大呼吸能力升高,基础糖酵解速率增大,长链脂肪酸基础呼吸、急性响应及最大呼吸值升高(P<0.05,P<0.01).结论 活血补肾安神方可显著改善氧化应激损伤H9c2心肌细胞Na+-K+-ATP酶活性,提高ATP生成速率,改善线粒体压力、糖酵解速率及长链脂肪酸氧化压力,发挥改善心肌细胞能量代谢作用.

目的:探究补肾活血方可能通过调控circ_0036763/miR-583轴对髓核细胞增殖和胞外基质合成的影响。方法:采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测正常及椎间盘退变(IDD)髓核细胞中circ_0036763、miR-583表达水平；将IDD髓核细胞分为pcDNA组、pcDNA circ_0036763组、pcDNA circ_0036763＋mimic NC组、pcDNA circ_0036763＋miR-583 mimic组，采用qRT-PCR检测各组髓核细胞circ_0036763、miR-583表达水平，MTT检测细胞增殖(A值)，蛋白免疫印迹法(Western blot)检测髓核细胞增殖细胞核抗原(PCNA)、collagen Ⅰ、collagen Ⅱ蛋白表达，双荧光素酶报告实验验证circ_0036763与miR-583靶向关系。将27只小鼠分为假手术组、IDD组、补肾活血方组，除假手术组外均建立IDD模型。建模成功后，假手术组、IDD灌胃生理盐水，补肾活血方组灌胃1.5 g/ml补肾活血方，连续灌胃3周。采用qRT-PCR检测各组小鼠髓核细胞circ_0036763、miR-583表达水平，MTT检测细胞增殖，Western blot检测PCNA、collagen Ⅰ、collagen Ⅱ蛋白表达。结果:IDD髓核细胞中circ_0036763表达水平降低，miR-583表达水平升高(均 P<0.05)；过表达circ_0036763可促进髓核细胞增殖和胞外基质合成(均 P<0.05)；circ_0036763靶向调控miR-583，上调miR-583可逆转过表达circ_0036763对IDD髓核细胞增殖和胞外基质合成能力。与假手术组相比，IDD组collagen Ⅰ蛋白表达、miR-583表达水平增加(均 P<0.05)，细胞A值、PCNA及collagen Ⅱ蛋白表达、circ_0036763表达水平降低(均 P<0.05)；与IDD组相比，补肾活血方组collagen Ⅰ蛋白表达、miR-583表达水平降低(均 P<0.05)，细胞A值、PCNA及collagen Ⅱ蛋白表达、circ_0036763表达水增加(均 P<0.05)。 结论:补肾活血方可能通过调控circ_0036763/miR-583轴诱导髓核细胞增殖和胞外基质合成。

目的:探讨凉血活血方对脓毒症急性肾损伤（AKI）小鼠肠道菌群、肠道屏障及肾组织NOD样受体蛋白3/天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1/焦孔素D（NLRP3/caspase-1/GSDMD）细胞焦亡信号通路的影响。方法:将30只雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组（Sham组）、脓毒症组（CLP组）、脓毒症+凉血活血方组（CLP+LXHX组），每组10只。通过盲肠结扎穿孔术（CLP）建立脓毒症AKI小鼠模型；Sham组仅进行开腹处理。制模前2 h，CLP+LXHX组给予凉血活血方水煎剂（6 g/kg）灌胃治疗；Sham组及CLP组给予等体积生理盐水灌胃。制模后24 h，麻醉处死小鼠，取结肠和肾组织及结肠内新鲜粪便。光镜下观察小鼠肾组织和结肠组织的病理变化；采用实时聚合酶链反应（RT-PCR）检测小鼠肾脏组织炎症因子白细胞介素（IL-1β和IL-18）的mRNA表达；采用蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）检测小鼠肾组织中NLRP3、caspase-1和GSDMD的蛋白表达；采用16S rDNA高通量测序检测小鼠肠道菌群的变化。结果:与Sham组比较，CLP组肾脏组织炎症细胞浸润增加，肾脏空泡化，肾脏组织中IL-1β和IL-18的mRNA表达及NLRP3、caspase-1和GSDMD的蛋白表达均明显升高；结肠组织病理损伤显著，肠道菌群的物种丰富度显著降低，肠球菌和埃希菌-志贺菌的相对丰度显著增加，回肠杆菌属、拟普雷沃菌属、毛螺菌属、克雷伯菌属和副萨特菌属的相对丰度显著升高。与CLP组比较，凉血活血方可以显著减轻脓毒症小鼠肾脏组织和结肠组织病理损伤，并降低病理评分（分：肾脏组织为1.75±0.43比3.50±0.50，结肠组织为1.25±0.43比4.50±0.50，均 P<0.05），改善肠道菌群组成，降低肠球菌和埃希菌-志贺菌的相对丰度，并显著增加乳酸杆菌和阿克曼菌属的相对丰度，显著降低肾脏组织中IL-1β和IL-18的mRNA表达〔IL-1β mRNA（2 -ΔΔCt）：1.59±0.05比4.61±0.88，IL-18 mRNA（2 -ΔΔCt）：1.69±0.17比2.86±0.63，均 P<0.05〕及NLRP3、caspase-1和GSDMD的蛋白表达（NLRP3/GAPDH：0.71±0.04比0.89±0.01，caspase-1/GAPDH：1.04±0.04比1.48±0.04，GSDMD/GAPDH：0.90±0.01比1.41±0.02，均 P<0.05）。 结论:凉血活血方对脓毒症所致AKI具有明显的保护作用，其作用机制可能通过调节肠道菌群改善肠道屏障，从而抑制肾脏组织中NLRP3/caspase-1/GSDMD信号通路的活化，降低焦亡相关炎症因子的表达。

目的:探讨痛泻要方对腹泻型肠易激综合征模型大鼠内脏敏感性的影响及其作用机制。方法:将30只雄性1日龄SD大鼠按随机数字表法分为正常组(10只)和造模组(20只)。采用母婴分离+束缚应激构建腹泻型肠易激综合征大鼠模型。造模成功后，将造模组随机分为模型组和痛泻要方组，每组10只。痛泻要方组大鼠灌胃痛泻要方4.92 g/ml，正常组、模型组灌胃等体积生理盐水，按2 ml/100 g大鼠体重灌胃，1次/d，连续灌胃14 d。采用电子恒压器测定结直肠扩张刺激下腹外斜肌肌电反应，评价内脏敏感性，采用HE染色观察大鼠结肠组织形态，ELISA法检测大鼠结肠中5-羟色胺(5-hydroxytryptamine, 5-HT)水平，qPCR法检测结肠组织中5-羟色胺转运体(serotonin transporter, SERT) mRNA水平，Western blot检测大鼠结肠和下丘脑SERT蛋白表达。结果:与模型组比较，痛泻要方组在球囊扩张压力为60、80 mmHg时，肌电图积分变化率[(179.51±18.26)%比(226.42±25.78)%；(242.13±15.42)%比(306.02±51.51)%]降低( P<0.05或 P<0.01)，结肠5-HT[(8.85±0.53)ng/mg比(12.25±1.95)ng/mg]水平降低( P<0.01)，结肠SERT mRNA[(0.85±0.12)比(0.38±0.02)]、蛋白[(0.53±0.11)比(0.36±0.17)]表达升高( P<0.05或 P<0.01)，下丘脑SERT蛋白[(0.88±0.12)比(0.36±0.13)]表达升高( P<0.05)。 结论:痛泻要方可调节腹泻型肠易激综合征模型大鼠5-HT及SERT表达，从而降低内脏高敏感。

目的:观察清通方联合达格列净对糖尿病小鼠肾功能的影响。方法:选取24只10周龄糖尿病模型（db/db）小鼠，采用随机数字表法分为4组，每组6只。分别为db/db小鼠组（对照组）、db/db小鼠+达格列净组（西药组）、db/db小鼠+达格列净+清通方组（中西药联合组）、db/db小鼠+清通方组（中药组）。比较治疗前后各组小鼠尿肌酐、尿白蛋白/肌酐（ACR）的变化及治疗后各组小鼠的血肌酐和尿素氮水平。结果:治疗后，中西药联合组小鼠的血肌酐水平与对照组相比有下降趋势，与西药组和中药组相比均明显降低，差异有统计学意义（ P<0.01）；各组间血尿素氮水平差异无统计学意义（ P>0.05）。治疗后，中西药联合组小鼠尿肌酐水平明显高于其他3组，差异有统计学意义（ P<0.05或 P<0.01）。治疗前、后各组小鼠尿ACR水平比较差异无统计学意义（ P>0.05）。 结论:清通方联合达格列净可明显增加db/db小鼠尿肌酐的排出，降低血肌酐水平，改善肾功能。

目的:考察滋肾丸方对糖尿病脑病小鼠胆汁酸代谢的影响，探讨其改善糖尿病脑病的作用机制。方法:选用雄性C57BL/6J小鼠，采用高脂饲料喂养联合单次腹腔注射链脲佐菌素（120 mg/kg）复制T2DM小鼠模型，在高血糖持续刺激8周后采用Morris水迷宫实验筛选糖尿病脑病模型小鼠，并将造模成功小鼠按随机数字表法分为模型组和滋肾丸方组，每组12只，另设12只为对照组。滋肾丸方组小鼠灌胃滋肾丸方粗提取物9.36 g/kg，对照组和模型组灌胃等体积蒸馏水，1次/d，持续8周。采用Morris水迷宫实验检测小鼠认知功能，采用甲酚紫染色检测海马区颗粒神经元数量，采用液质联用技术检测血清及粪便胆汁酸含量，采用荧光定量PCR实验检测肝脏胆汁酸合成酶胆固醇7α-羟化酶（CYP7a1）、甾醇-27-羟化酶（CYP27a1）、法尼醇X受体（FXR）、成纤维生长因子15（FGF15）、成纤维生长因子受体4（FGFR4），回肠顶端钠依赖性胆汁酸转运蛋白（ABST）mRNA水平。结果:与模型组比较，滋肾丸方组小鼠逃避潜伏期缩短（ P<0.05或 P<0.01），首次到达平台时间减少（ P<0.01），穿越平台次数增加（ P<0.01），海马区神经细胞损伤减轻；滋肾丸方组小鼠血清及粪便总胆汁酸含量降低（ P<0.05或 P<0.01）；肝脏中CYP7a1、CYP27a1 mRNA水平增加（ P<0.01），FXR、FGF15 mRNA水平降低（ P<0.01）；回肠ABST mRNA水平降低（ P<0.01）。 结论:滋肾丸方可能调控胆汁酸代谢，抑制FRX-FGF15/FGFR4信号和ABST表达从而促进新胆汁酸合成和结合型胆汁酸重吸收，进而发挥改善糖尿病脑病小鼠认知功能的作用。

目的:研究海珠益肝加味方对自身免疫性肝炎(AIH)小鼠辅助性T淋巴细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)细胞失衡与维甲酸相关孤核受体γ(ROR-γt)、特异性叉头状转录因子3(FoxP3)的影响.方法:将32 只小鼠随机分为正常组、模型组、海珠益肝加味方组、醋酸泼尼松组,每组8 只.除正常组外其他组采用刀豆蛋白A(ConA)尾静脉注射制备AIH小鼠模型,造模后采集各组小鼠血液及肝组织.HE染色观察各组肝组织病理表现;采用流式细胞术检测各组Th17 和Treg细胞比例.Western Blot检测各组小鼠肝组织中IL-10、IL-17、TGF-β1、FoxP3、ROR-γt蛋白表达水平.结果:与空白组比较,模型组Th17 细胞比例、Th17/Treg均显著上升(P＜0.01),Treg细胞比例显著下降(P＜0.01);与模型组比较,海珠益肝加味方组及醋酸泼尼松组Th17 细胞比例、Th17/Treg均显著降低(P＜0.01),Treg细胞比例显著上升(P＜0.01).与空白组比较,模型组IL-10、FoxP3 蛋白表达下降,IL-17、TGF-β1、ROR-γt蛋白表达上升(P＜0.01).与模型组相比,海珠益肝加味方及醋酸泼尼松组IL-10、FoxP3 表达显著上升,IL-17、TGF-β1、RORγt蛋白表达均显著下降(P＜0.01).结论:海珠益肝加味方可以有效改善Th17/Treg失衡,其机制可能与调节特异性转录因子FoxP3、ROR-γt的表达相关.

目的:观察保肾通络方对糖尿病肾病(DN)小鼠肾小管间质纤维化及上皮细胞间充质转分化(EMT)的影响.方法:选用KK-Ay小鼠作为DN模型小鼠,随机分为模型组、保肾通络方组及缬沙坦组,正常对照组小鼠选用C57 BL/6J 小鼠.保肾通络方组小鼠给予保肾通络方灌胃治疗,缬沙坦组小鼠给予缬沙坦灌胃治疗,模型组、正常对照组小鼠给予剂量相同的蒸馏水灌胃治疗;灌胃给药 12 周后检测各组血清肌酐、尿素氮水平,HE、PAS、Masson染色观察肾组织病理改变,同时进行细胞外基质蛋白Collagen Ⅰ、FN及肾小管 EMT标志蛋白α-SMA、E-cadherin表达检测.结果:模型组小鼠血清肌酐、尿素氮水平较正常对照组明显升高(均P<0.05),保肾通络方组及缬沙坦组小鼠血清肌酐、尿素氮水平较模型组明显降低(均P<0.05).与正常对照组相比,模型组小鼠肾小管出现明显的间质纤维化及上皮细胞脱落、空泡变性,而保肾通络方组及缬沙坦组小鼠上述病理改变均明显减轻.模型组小鼠肾小管Collagen Ⅰ、FN蛋白及mRNA表达较正常对照组明显上调(均P<0.05),保肾通络方组及缬沙坦组小鼠肾小管Collagen Ⅰ、FN蛋白及 mRNA表达较模型组明显下调(均P<0.05).与正常对照组相比,模型组小鼠肾小管上皮细胞α-SMA蛋白及 mRNA表达明显上调,E-cadherin蛋白及 mRNA表达明显下调(均P<0.05);与模型组相比,保肾通络方组及缬沙坦组小鼠α-SMA 蛋白及 mRNA 表达明显下调,E-cadherin蛋白及 mRNA 表达明显上调(均P<0.05).结论:保肾通络方能够改善DN小鼠肾小管间质纤维化,减轻肾小管 EMT.

目的:观察使用应时方组调节机体阴阳周期对于心肾不交型失眠的疗效.方法:将60 例患者随机分为试验组和对照组,各30 例.试验组辰时(早8 点)服用补中益气汤加减,酉时(晚6 点)和亥时(晚10 时)服用天王补心丹加减治疗;对照组每日服用天王补心丹加减,早、中、晚分3 次服.比较两组治疗前后以及随访2 周的匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)、疲劳量表(FS-14)、中医证候积分和血清皮质醇(cortisol,CORT)水平.结果:治疗后,试验组有效率为90.00%,对照组为72.41%(P<0.05).治疗后,试验组在入睡时间、睡眠时间、睡眠效率、日间功能方面的改善情况优于于对照组(P<0.05);随访时,试验组在睡眠时间、日间功能方面改善优于对照组(P<0.05).治疗后及随访时试验组FS-14 评分、中医证候积分评分均优于对照组(P<0.05).治疗后,两组血清CORT水平均明显下降,且试验组在治疗后血清CORT水平更低.结论:从调节机体阴阳角度,结合方组天王补心丹加补中益气汤的形式用药对心肾不交型失眠患者的临床疗效优于单纯使用天王补心丹治疗,其机制可能与调节下丘脑-垂体-肾上腺轴的负反馈机制,降低血清CORT水平,从而抑制下丘脑-垂体-肾上腺轴过度活化有关.

目的 探讨何氏育麟方含药血清对卵巢储备功能减退(DOR)大鼠卵巢颗粒细胞线粒体功能及凋亡的影响.方法 分离并培养DOR大鼠卵巢颗粒细胞,设置对照组1、模型组1[环磷酰胺(CTX)含药血清]、阳性组1(CTX含药血清+补佳乐含药血清)、育麟方组 1(CTX含药血清+育麟方含药血清)和对照组 2(LY294002)、模型组 2(LY294002+CTX含药血清)、阳性组2(LY294002+CTX含药血清+补佳乐含药血清)、育麟方组2(LY294002+CTX含药血清+育麟方含药血清).应用流式细胞术、荧光探针、RT-qPCR、Western blot技术分别检测细胞活力、细胞周期及凋亡率、线粒体膜电位,以及 ATP 水平,PI3K、Akt mRNA 表达,PI3K、p-Akt/Akt、PIP2、PIP3、Cyt C、Bax、Bcl-2蛋白表达.结果 与模型组比较,育麟方组颗粒细胞活力及线粒体膜电位、ATP 水平升高(P＜0.01),凋亡率降低(P＜0.01),PI3K、Akt mRNA表达及p-Akt/Akt、PIP2、PIP3 表达升高(P＜0.05,P＜0.01),同时伴随下游促凋亡蛋白Cyt C、Bax表达降低(P＜0.05,P＜0.01)及抑凋亡蛋白Bcl-2表达升高(P＜0.01).结论 育麟方可能通过调控线粒体依赖性PI3K/Akt信号通路改善DOR大鼠卵巢颗粒细胞线粒体功能,抑制颗粒细胞凋亡.