目的:对普通登革热(DF)和重症登革热(SD)患者病程中不同时间点的细胞因子水平进行差异比较，筛选能作为SD早期预警指征的细胞因子，探讨免疫应答强度与SD发病的关系。方法:应用Luminex技术检测2014年6—12月在广州医科大学附属市八医院住院的120例登革热确诊患者(77例DF和43例SD患者)在急性期、退热期和恢复期的血浆中19种细胞因子和细胞黏附分子的水平，操作步骤按照试剂盒说明书严格进行；在前期实验的基础上选定的19种细胞因子包括：TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10、IL-15、IL-17A、IFN-α2、IP-10、MCP-1、RANTES、GRO-α、PDGF-AA、PDGF-AB/BB、MIF、VEGF、sVCAM-1、sICAM-1、sFas及sFasL。应用荧光PCR法检测病毒载量并与细胞因子水平进行相关性分析。结果:TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10、IL-15、IFN-α2、IP-10、MCP-1和sVCAM-1水平在登革热患者中升高，而RANTES、GRO-α和PDGF水平降低；IL-17A、MIF、VEGF、sICAM-1、sFas及sFasL水平无变化。TNF-α、IL-6、IFN-α2、IP-10和sVCAM-1水平在发病早期(第2~5天)的SD患者中显著高于DF患者，差异有统计学意义；在发病第6~10天，TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10、IL-15、PDGF、RANTES、IFN-α2、IP-10和sVCAM-1水平在DF和SD患者之间差异有统计学意义。相关性分析结果显示：病毒载量与IL-15水平呈中等程度相关，与其他细胞因子水平仅弱相关或无相关。结论:TNF-α、IL-6、IFN-α2、IP-10和sVCAM-1可作为SD早期预警指征；多种细胞因子水平改变与SD发病相关。

目的:观察原发性胆汁性胆管炎（PBC）患者中IL-38的水平，评估IL-38对PBC患者调节性T细胞（Tregs）向辅助性T细胞（Th）17转分化的调控作用。方法:入组46例PBC患者和24名健康对照者，ELISA测定血清IL-38、IL-35、IL-17水平，流式细胞术检测PMBCs中CD4 +CD25 +CD127 dim/-Tregs和CD4 +IL-17A +Th17细胞比例，实时定量PCR法测定转录因子叉头盒蛋白P3（FoxP3）和维甲酸相关孤核受体γt（RORγt）mRNA表达。纯化的Tregs使用重组IL-38刺激后与自体PBMCs共培养，通过测定细胞增殖和上清细胞因子表达评估Tregs功能。将Tregs向Th17细胞极化培养，并加入重组IL-38刺激，通过检测CCR4、CCR6表达以及IL-17分泌、RORγt mRNA评估IL-38对Tregs向Th17表型转分化的影响。组间比较采用独立样本 t检验或Mann-Whitney U检验。 结果:PBC组血清IL-38水平低于健康对照组，差异有统计学意义[68.0（48.5，96.7）pg/ml与89.6（58.0，265.5）pg/ml， Z=3.25， P=0.037]。PBC组Tregs比例[（6.9±1.3）%与（11.3±3.5）%， t=7.64， P<0.001]、FoxP3 mRNA表达（1.0±0.3与1.9±0.7， t=7.74， P<0.001）、血清IL-35水平[25.9（16.1，37.3）pg/ml与31.0（24.8，52.3）pg/ml， Z=2.02， P=0.047]低于对照组，PBC组Th17细胞比例[（5.5±1.4）%与（3.8±1.0）%， t=5.43， P<0.001]、RORγt mRNA表达（1.4±0.6与1.0±0.4， t=2.72， P=0.008）、血清IL-17水平[202.0（121.6，311.6）pg/ml与104.5（79.8，155.5）pg/ml， Z=4.43， P<0.001]高于对照组。纯化Tregs与自体PBMCs共培养后，PBC组细胞增殖高于对照组[（6.5±1.4）×10 5个与（5.3±1.1）×10 5个， t=2.49， P=0.020]，PBC组上清中IL-35和IL-10分泌水平低于对照组（ P<0.05），但干扰素-γ分泌水平高于对照组（ P=0.011）。PBC组Tregs向Th17细胞极化培养后，CCR4和CCR6平均荧光强度（MFI）、RORγt mRNA和IL-17分泌水平均高于对照组（ P<0.05），但2组间差异无统计学意义。IL-38刺激可增强PBC组和对照组Tregs抑制活性，表现为细胞增殖减弱，IL-35和IL-10分泌增加（ P<0.05）。IL-38刺激仅抑制PBC组Tregs向Th17表型转分化，表现为CCR4 MFI、CCR6 MFI和IL-17分泌降低 P<0.05），但IL-38并未影响对照组Tregs向Th17表型转分化。 结论:IL-38在PBC疾病过程中发挥免疫保护和抑制炎症应答功能，抑制Tregs向Th17细胞转分化。

目的:观察息肉样脉络膜血管病变（PCV）患眼玻璃体腔注射抗VEGF药物治疗后的脉络膜特征变化，初步评估其对PCV抗VEGF药物治疗应答的预测作用。方法:回顾性临床研究。2015年1月至2020年5月于南京医科大学附属眼科医院检查确诊的PCV患者63例63只眼纳入研究。其中，男性39例39只眼，女性24例24只眼；平均年龄（62.53±6.05）岁；均为单眼发病。患眼均行玻璃体腔注射雷珠单抗治疗，治疗后应答不佳者再行光动力疗法（PDT）联合抗VEGF药物治疗。63只眼中，治疗后无应答或应答不佳38只眼，应答良好25只眼，并据此分为应答不佳组、应答良好组。采用德国Herdelberg公司共焦激光同步血管造影系统（HRA+OCT）增强深度扫描技术测量黄斑中心凹脉络膜厚度（SFCT ）、脉络膜大血管层厚度（LCVT）。依据ICGA检查结果对脉络膜高通透性（CVH）进行判定。CVH：中晚期（吲哚青绿注射后10~15 min）后极部脉络膜可见边缘模糊的多灶性强荧光。对比观察两组患眼治疗前以及应答良好组治疗后6个月、应答不佳组联合PDT治疗后6个月患眼SFCT、LVCT变化。治疗前后SFCT、LCVT比较行 t检验。 结果:治疗前，63只眼中，伴有CVH表现38只眼（60.3% ），其中应答良好组、应答不佳组患眼分别为5 （20.0%，5/25）、33 （86.8%，33/38）只眼。应答良好组、应答不佳组患眼SFCT、LCVT分别为（244.16±23.74）、（152.76±22.70）μm和（367.34±35.21）、（271.84±35.42）μm。两组患眼治疗前SFCT、LVCT比较，差异均有统计学意义（ t=7.24、6.87 ， P=0.01、0.01 ）。治疗后6个月，应答良好组患眼SFCT、LVCT分别为（241.04±32.56）、（150.44±23.45）μm；与治疗前比较，差异无统计学意义（ t=5.35、8.64， P=0.08、0.07 ）。应答不佳组患眼联合PDT治疗后6个月，SFCT、LCVT分别为（311.63±25.36）、（220.11±41.30）μm；与治疗前比较，差异有统计学意义（ t=6.84、9.23 ， P=0.02、0.01 ）。治疗后，所有患眼CVH表现无明显改变，但应答不佳组患眼联合PDT治疗后，多灶性强荧光明显减弱。 结论:PCV厚脉络膜多以脉络膜大血管异常增厚为主；具有厚脉络膜和CVH表现的患眼单纯抗VEGF药物治疗应答不佳，联合PDT治疗可能更适用于该类患者。

目的:了解新设计的6组CpG分子在动物体内对新型冠状病毒（SARS-CoV-2）重组亚单位疫苗免疫效果的提升作用，以初步筛选出有潜力的新型CpG佐剂。方法:通过序列检索比对，确定人鼠同源的CpG基序，以不同的组合方式设计出6条不同的CpG寡聚脱氧核苷酸（CpG-ODN）序列，并人工合成相应6种CpG，分别与SARS-CoV-2重组亚单位疫苗联用，已上市的佐剂CpG1018作为阳性对照。以间隔2周的方式免疫BALB/c小鼠2次，免疫后每周取眼眶血检测IgG1和IgG2a指标。2针免疫后21 d处死小鼠，取眼球血检测结合抗体抑制率；取脾脏淋巴细胞进行酶联免疫斑点试验检测。结果:初次免疫后14 d，CpG6组小鼠血清IgG2a和IgG1水平分别为3.63±0.27和3.44±1.03，显著高于CpG1018组的2.06±1.30和2.06±0.39。加强免疫后14 d，CpG6组小鼠血清IgG2a水平为6.52±0.21，高于CpG1018组的6.33±0.40。在针对原型株的结合抗体抑制率指标上，初次免疫14 d、加强免疫21 d后，各组间差异存在统计学意义（ F=13.66、12.58、19.38和19.38， P均<0.001）。初次免疫14 d后，稀释10倍血清中CpG6组小鼠血清抑制率为（64.67±20.41）%，高于CpG1018组[（27.84±20.23）%]，差异有统计学意义（ t=2.70, P=0.031）；加强免疫21 d后，稀释1 000倍的血清中CpG6组小鼠血清抑制率针对原型株[（89.71±4.83）%]和Delta株[（79.04±6.32）%]的抑制率水平均显著高于CpG1018组[（70.84±17.20）%和（52.61±14.22）%] ，差异有统计学意义（ t=2.36, P=0.046； t=3.80, P=0.005）。酶联免疫斑点实验结果显示，CpG1018组针对SARS-CoV-2原性株敏感和Delta突变株敏感的特异性IFN-γ分泌细胞数与CpG6组相比，差异均无统计学意义（ t=0.76， P=0.469； t=0.78， P=0.459）；在特异性IL-2分泌细胞数上，两组差异亦无统计学意义（ t=0.70， P=0.503； t=0.90， P=0.395）。 结论:CpG6与SARS-CoV-2重组亚单位疫苗联用，能在疫苗初次免疫后更快速地在小鼠体内产生体液免疫应答，且加强免疫后体液免疫和细胞免疫效果均不弱于已上市的CpG1018佐剂。CpG6有望成为潜在的备选佐剂与疫苗联用。

目的:了解HIV感染者全程接种乙型肝炎（乙肝）疫苗的无/弱应答情况，探讨无/弱应答影响因素，为制定特殊人群乙肝防制策略及措施提供依据。方法:在HIV感染者0-1-6月和0-1-2-6月20 μg、0-1-2-6月60 μg乙肝疫苗免疫接种随机对照试验研究基础上，以完成全程接种后1个月随访者为研究对象，定量检测其抗-HBs，收集其一般人口学特征、疾病史、HIV感染和治疗情况等，采用 χ2检验、 t检验、非条件logistic回归和交互作用进行统计学分析。 结果:研究对象的0-1-6月和0-1-2-6月20 μg、0-1-2-6月60 μg组乙肝疫苗无/弱应答率分别为34.65%（35/101）、24.49%（24/98）和10.99%（10/91）（ P<0.001）。控制混杂因素后，按照0-1-2-6月60 μg方案接种乙肝疫苗者发生无/弱应答的风险是0-1-6月20 μg者的0.22倍（95% CI：0.10~0.50）；男性（ OR=3.65，95% CI：1.88~7.07）和无乙肝疫苗接种史（ OR=2.64，95% CI：1.10~6.32）HIV感染者乙肝疫苗无/弱应答的发生风险高，免疫方案与性别（ OR=2.49，95% CI：1.24~5.00）之间存在相乘交互作用。 结论:HIV感染者0-1-2-6月60 μg接种者的乙肝疫苗无/弱应答率明显低于0-1-6月和0-1-2-6月20 μg接种者，性别、接种方案及乙肝疫苗接种史是无/弱应答的影响因素，免疫方案与性别之间存在相乘交互作用，男性接种20 μg乙肝疫苗的无/弱应答风险更高。

目的:探讨HBsAg阳性母亲新生儿干扰素基因刺激因子（STING）天然免疫信号通路对婴儿乙型肝炎（乙肝）疫苗无/弱应答的影响。方法:选取2019年11月至2022年6月在太原市第三人民医院分娩的HBsAg阳性母亲及其新生儿/婴儿作为研究对象，采用问卷调查和病历查阅的方式收集其流行病学资料和临床资料，运用流式细胞术检测新生儿脐血中STING天然免疫信号通路关键分子蛋白（STING、pIRF3）以及疫苗应答相关免疫细胞（DC、T、B和浆细胞）。对全程规范接种乙肝疫苗后1~2个月的婴儿进行随访，通过化学发光微粒子免疫分析法检测随访婴儿血清抗-HBs。结合非条件logistic回归模型、列线图和贝叶斯网络模型探讨STING天然免疫信号通路和相关因素在婴儿乙肝疫苗无/弱应答中的作用与贡献大小，以及各因素间相互关系。结果:共调查195对HBsAg阳性母亲及其婴儿，婴儿乙肝疫苗无/弱应答率为12.31%（24/195）。母亲HBV DNA高载量、新生儿STING蛋白低表达、pIRF3蛋白低表达和浆细胞低表达是婴儿乙肝疫苗无/弱应答的危险因素（ OR值分别为4.70、3.46、3.18和2.20，均 P<0.05），以上因素构建的列线图具有良好的预测效能（曲线下面积=0.81，95% CI：0.63~0.83）。贝叶斯网络模型结果显示，母亲HBV DNA高载量时，新生儿STING蛋白低表达的条件概率较高（62.50%），其pIRF3蛋白低表达的条件概率较高（58.54%），DC、T、B和浆细胞低表达的条件概率均较高（53.16%、60.20%、68.42%和57.14%）。 结论:母亲HBV DNA可能通过抑制其新生儿STING天然免疫信号通路及疫苗应答相关免疫细胞导致婴儿乙肝疫苗无/弱应答。

目的:探讨慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染者疾病自然进程中病毒学标志物与宿主抗HBV免疫所致肝脏病理损伤的关系及动态变化。方法:回顾性选取2016年1月到2022年6月于浙江省台州医院接受肝穿刺活检的238例成人慢性HBV感染者。收集患者的年龄、性别、血小板、丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、白蛋白、HBV DNA、qHBsAg、HBeAg等一般临床资料，以及患者的肝组织炎症活动度和纤维化分级等肝脏病理诊断指标。按HBeAg状态对患者进行分组，并分别按不同肝脏炎症活动度、不同HBV DNA载量对患者行亚组分组，统计学分析比较各组的HBV病毒学标志物水平的组间差异，及其与患者肝脏炎症损伤指标如ALT、AST及肝组织炎症活动度间的相关性。结果:HBeAg阳性患者中有中度及以上肝脏炎症活动度（G≥2）患者的病毒学标志物水平均显著低于轻（无）炎症活动度（G<2）者（HBV DNA： t = 3.102， P = 0.002；qHBsAg: Z = -4.859， P < 0.001；HBeAg： Z = -4.386， P < 0.001）；而在HBeAg阴性患者中则呈现相反的趋势，G≥2亚组的HBV DNA水平、qHBsAg显著高于G<2亚组（HBV DNA： t = -5.269， P < 0.001；qHBsAg: Z = -2.951， P = 0.003）。对应地，HBV DNA水平、qHBsAg在HBeAg阳性患者中与肝脏炎症活动度及肝脏炎症损伤指标AST呈弱到中等强度的负相关（HBV DNA与炎症活动度： r = -0.300， P = 0.001；qHBsAg与炎症活动度： r = -0.432, P < 0.001; qHBsAg与AST： r = -0.233， P = 0.008）；而在HBeAg阴性患者中则与肝脏炎症活动度及ALT、AST呈弱到中等强度的正相关（HBV DNA与炎症活动度： r = 0.439， P < 0.001; HBV DNA与ALT： r = 0.502, P < 0.001；HBV DNA与AST： r = 0.582， P < 0.001），其中qHBsAg仅与患者的肝脏炎症活动度呈弱的正相关（ r = 0.285， P = 0.003）。进一步对HBeAg阳性患者按HBV DNA是否> 2×10 6 IU/ml进行亚组分析发现，HBV DNA>2×10 6 IU/ml亚组的患者其HBV病毒学标志物与肝脏炎症活动度及ALT、AST间呈弱到中等强度的负相关（HBV DNA与炎症活动度： r = -0.276， P = 0.009; HBV DNA与AST： r = -0.262, P = 0.014; qHBsAg与炎症活动度： r = -0.448, P < 0.001; qHBsAg与ALT： r = -0.223， P = 0.037; qHBsAg与AST： r = -0.455， P < 0.001; HBeAg与炎症活动度： r = -0.433， P < 0.001；HBeAg与ALT： r = -0.257， P = 0.016; HBeAg与AST： r = -0.369， P < 0.001）；但上述"负相关"在HBeAg仍为阳性且HBV DNA≤2×10 6 IU/ml的患者中消失。不仅如此，HBV DNA与ALT、HBeAg与AST更分别呈中等强度的正相关（HBV DNA与ALT： r = 0.305， P = 0.049 7; HBeAg与AST: r = 0.321, P = 0.038）。 结论:在慢性HBV感染的疾病进程中，在HBeAg阳性且HBV DNA>2×10 6 IU/ml时，患者的抗HBV免疫应答可通过清除感染肝细胞来有效地抑制HBV的复制，而当HBV DNA载量低于该界值时，患者的抗HBV免疫性应答更多地造成了肝组织炎症损伤。

目的 鉴定远志Polygala tenuifolia bZIP基因,为远志抗逆性改良及次生代谢调控研究提供参考.方法 基于远志三代全长转录组数据库,采用生物信息学方法对远志bZIP基因家族成员进行鉴定和分析,并利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术分析其在不同组织及处理中的表达特性.结果 共鉴定得到27个含有特征性保守结构域的PtbZIP基因,编码蛋白质的氨基酸数量为143 aa(PtbZIP24)～846aa(PtbZIP9),相对分子质量范围为16201.52～92 932.30,等电点(pI)介于4.59～9.69,其中25个家族成员为不稳定蛋白,所有家族成员均为亲水性蛋白.蛋白二级结构主要由a螺旋和无规卷曲构成,均无信号肽,存在多种互作现象.进化树分析将27个PtbZIP蛋白分为A、B、C、D、F、G、I、S8个亚组,其中G亚组含有PtbZIP家族成员数量最多(共有8个),占总数的29.63％,没有PtbZIP基因被归类到E和K组.PtbZIP家族基因的密码子偏好性较弱,适应性较弱.表达模式分析显示,PtbZIP4/15在叶中的表达量最高,茎和根次之;PtbZIP8/24在茎中的表达量最高,叶和根次之;PtbZIP1/17的表达量为根＞叶＞茎;其余21个的表达模式均为根＞茎＞叶.qPCR结果表明,PtbZIP26基因受脱落酸、壳聚糖的诱导,且能显著应答干旱和盐胁迫.结论 鉴定了远志bZIP家族基因及其分子特征,为进一步研究PtbZIP基因在调控远志发育及次生代谢物合成方面的生物学功能奠定基础.

目的 探讨肿瘤浸润性B细胞对程序性死亡受体(配体)1[programmed death(ligand)1,PD-(L)1]抑制剂治疗效果的影响,阐明B细胞影响免疫治疗的潜在机制.方法 通过使用公共数据库中的黑色素瘤患者免疫治疗队列,分析B细胞与无进展生存时间(progression-free survival,PFS)以及免疫治疗响应的关系;使用TC-1和B16-OVA肿瘤细胞对6～8周龄雌性C57BL/6小鼠的皮下及肝脏进行荷瘤,构建肿瘤模型.比较B细胞清除对PD-(L)1抗体治疗效果的影响;对第15天的TC-1肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)进行流式细胞术检测,明确T细胞的数目、功能及表型变化;通过流式细胞术及实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qPCR)检测B细胞表面分子以及细胞因子.结果 基于ICBatlas公共数据库中的ERP105482数据分析,肿瘤中CD19高表达的黑色素瘤患者PFS较低表达者更长(753 d vs 95 d,HR=0.3,95％CI:0.13～0.65,P=0.003).B细胞在免疫治疗应答的患者中显著富集(P=0.01).在小鼠TC-1肝脏荷瘤模型中,PD-(L)1抗体治疗后肿瘤质量明显减小(P<0.01),而B细胞的清除削弱了治疗效果.B细胞通过促进T细胞浸润和功能来增强PD-(L)1抗体治疗,且治疗后B细胞亚群发生变化,表现为PD-1低表达亚群增加(P<0.01).结论 PD-(L)1抗体治疗后,B细胞亚群中PD-1表达的下降可能是B细胞促进PD-(L)1抗体治疗效果的潜在机制.

胰腺癌是消化道常见的恶性肿瘤之一,由于发病隐匿,早期多无症状,诊断困难.胰腺癌诊断主要借助影像学及血清标志物检查,手术治疗为其主要的治疗手段.但由于被发现时多为疾病晚期,错过手术最佳时机,因此预后极差,生存期较短.有研究表明微小RNA(miRNA,miR)在多种肿瘤的发生发展中起关键作用,其中miR-107表达于胰腺癌组织及血液中,与胰腺癌的发生侵袭有关,且有相关数据库表明miRNA能够靶向调控B/T淋巴细胞弱化因子(BTLA).BTLA与其配体结合传递共抑制信号,在机体抗肿瘤免疫应答中发挥负性调节作用,并与肿瘤的免疫逃逸机制相关,可能成为肿瘤生物治疗潜在的靶点.本文将通过对miR-107与BTLA进行介绍,预测它们可能是胰腺癌的治疗靶点,有望成为胰腺癌诊断及预后标志物.