设计以温敏凝胶作为颗粒酶B质粒 (pGZMB) 和盐酸多柔比星 (DOX·HCl) 的共载载体以期实现基因和化疗药物联合治疗.选择支链型聚乙烯亚胺 (bPEI) 作为pGZMB的载体, 自组装形成bPEI/pGZMB纳米粒, 通过琼脂糖凝胶电泳和粒径电位结果研究形成bPEI/pGZMB纳米粒的最优质量比并对最优处方的外观形态、粒径分布、Zeta电位、转染能力进行考察.以胶凝温度为指标考察温敏凝胶基质普朗尼克F127与普朗尼克F68的用量及共载入bPEI/pGZMB纳米粒和DOX·HCl后对胶凝温度的影响, 结合胶凝时间和通针性结果优化共载bPEI/pGZMB纳米粒和DOX·HCl的F127/F68温敏凝胶 (DOX·HCl&bPEI/pGZMB-G) 处方, 并对其流变学、体外释放特性、凝胶材料的细胞毒性等进行评价.结果表明最优质量比90∶32制备的bPEI/pGZMB纳米粒形态圆整, 大小较为均一, 平均粒径为 (60.19±0.68) nm, 平均电位为 (8.86±1.08) m V, 且具有较高的转染效率.最优处方制备的DOX·HCl&bPEI/pGZMB-G在室温下为溶液状态, 当温度在37℃时可转变为凝胶状态, 流变学性质考察结果也说明DOX·HCl&bPEI/pGZMB-G具有良好的温度敏感特性并表现为假塑性流体特征;体外释放结果显示与溶液组相比温敏凝胶组具有一定的缓释特性;体外抗增殖实验证明了温敏凝胶材料细胞毒性较低, 安全性良好.以上结果表明以F127/F68为基质的温敏凝胶可作为DOX·HCl和pGZMB肿瘤治疗局部给药良好的共递送载体.

目的:考察不同型号的普朗尼克(pluronic)对人乳腺癌细胞(MCF-7)及对多西他赛耐药的人乳腺癌细胞(MCF-7/DTX)毒性及摄取的影响,筛选出最优型号,以供后续制备普朗尼克载多西他赛胶束.方法:选取L61、P85、P105、P123、F68、F127共6种型号普朗尼克,采用CCK-8法测定其对MCF-7及MCF-7/DTX的细胞毒性,高效液相色谱(HPLC)法测定两种细胞对多西他赛的摄取量.结果:F68、F127对MCF-7及MCF-7/DTX的毒性较弱,F127的肿瘤细胞毒性最弱;而L61、P85、P105、P123对两种细胞的毒性相对较强,且L61的肿瘤细胞毒性最强.在浓度为50～1000μg·ml-1的范围内,普朗尼克的肿瘤细胞毒性与其浓度成正相关,浓度越高,毒性越强.在24～72 h内,同一浓度的普朗尼克,作用时间越长,毒性越强,细胞毒性与作用时间也成正相关.6种型号普朗尼克均可促进MCF-7对多西他赛的摄取,仅有P85、P105、P123可促进MCF-7/DTX的摄取,而L61、F68、F127对耐药细胞摄取量基本无促进作用,其中P123促进两种肿瘤细胞摄取多西他赛的能力最强.结论:HLB值小的普朗尼克,肿瘤细胞毒性更强.随着浓度升高,作用时间增长,其毒性增强.P85、P105、P123可促进耐药细胞对多西他赛的摄取.

将普朗尼克F127和F68联合应用作为凝胶基质制备载氯诺昔康的原位凝胶剂,并对其体内外释药相关性进行研究.以胶凝温度、胶凝时间和通针性为评价指标,采用冷溶法制备氯诺昔康原位凝胶剂.首先,通过单因素考察筛选空白原位凝胶和载药原位凝胶的最佳处方,并对其理化性质进行表征;然后,采用动态膜透析法测定氯诺昔康原位凝胶剂的体外释药性,以大鼠为研究对象,皮下注射给药研究氯诺昔康原位凝胶剂的体内释药性;最后,采用体外释放曲线与体内吸收曲线各时间点分别相关的方法评价其体内外相关性.结果表明最佳处方的原位凝胶剂含20％的F127、2.3％的F68,且为假塑性流体,胶凝温度为36℃,胶凝时间为(252±1.53)s,通针性好;12 h体外累积释放百分率为82.33％,与氯诺昔康溶液相比具有明显缓释效果;大鼠皮下注射给药后,由体内血药浓度-时间曲线可知,与溶液相比,氯诺昔康原位凝胶剂在皮下滞留量较多;采用Loo-Riegelman法计算体内吸收百分数,评价原位凝胶剂的体外释放与体内吸收的相关性,相关系数为r =0.964 1.说明氯诺昔康F127原位凝胶剂制备工艺简单,大鼠皮下注射给药体内外相关性良好.

目的 制备盐酸尼卡地平(Nic)β晶型,实现与原研产品晶形一致;探讨固体分散体技术对Nic溶解度的改善效果.方法 采用丙酮重结晶法制备Nic原料药并进行化学纯度、熔点和晶型检测;以PVP K30、PEG6000、普朗尼克F68为载体材料,制备Nic固体分散体,考察载体材料用量及其对溶解度的影响,采用示差扫描量热、X射线粉末衍射、傅里叶变换红外光谱进行物相鉴别和作用机制探讨.结果 制得的Nic原料药,熔点为169.2～171.2℃,化学纯度＞99.3％,特征衍射峰与文献报道完全一致.3种载体均可与Nic通过分子间相互作用形成固体分散体,药物由晶态转变为无定型态,当Nic/载体为1∶3时,溶解度由11 mg·mL-1提高至160mg·mL-1.结论 成功制备了与原研一致的β晶型Nic,采用固体分散体技术,Nic溶解度可显著改善,为后续渗透泵控释制剂研发提供了良好的中间载体.

目的:考察药用辅料普朗尼克F68对地西泮在大鼠小肠吸收过程的影响.方法:采用大鼠在体单向肠灌流模型,使用HPLC法测定肠灌流液中地西泮浓度.计算不含普朗尼克F68药物组及含不同浓度普朗尼克F68药物组、含P-糖蛋白抑制药物组(维拉帕米)地西泮的吸收速率常数Ka与药物渗透系数Pef.结果:1.00μg·ml-1、0.50μg·ml-1的普朗尼克F68及维拉帕米均显著影响地西泮的Ka、Pef,并且随着普朗尼克F68浓度的增加,地西泮的Ka、Pef相应增加.30μg·ml-1的普朗尼克F68对地西泮无显著性影响.结论:0.50μg·ml-1和1.00μg·ml-1的普朗尼克F68药物组及维拉帕米组均显著增加地西泮在大鼠小肠的吸收,可能与其抑制P-糖蛋白有关.

目的 研究蛇葡萄素在大鼠肝微粒体的代谢规律及药用辅料对其代谢的影响.方法 建立UPLC-MS/MS方法学体系,通过检测代谢反应体系的蛇葡萄素剩余浓度进行体外代谢反应条件的筛选和代谢规律的评价.结果 反应体系的孵育时间、肝微粒体浓度及蛇葡萄素浓度均对代谢产生影响,大鼠肝细胞色素P450亚酶CYP3A、CYP1A1/2和CYP2E1对蛇葡萄素代谢起主要作用.药用辅料对蛇葡萄素代谢的抑制作用呈剂量依赖性,其中聚氧乙烯氢化蓖麻油40、吐温80、聚维酮K30、羟丙基β环糊精、普朗尼克F68以混合竞争模式显著抑制蛇葡萄素的代谢.结论 这些药用辅料有望通过抑制代谢作用来提高蛇葡萄素的口服生物利用度.

目的 以普朗尼克F68(F68)、普朗尼克F127(F127)、甘草酸(glycyrrhizinicacid,GL)、维生素E聚乙二醇琥珀酸酯(TPGS)为稳定剂制备槲皮素纳米晶(quercetin nanocrystals,QT-NCs),探讨不同稳定剂种类对QT-NCs注射药动学及组织分布的影响.方法 采用HPLC法测定大鼠血浆和组织中的槲皮素质量浓度,并用DAS2.0软件计算其药动学参数,进行比较.结果 药动学结果显示,AUC0～t呈如下顺序:QT-NCs/GL[(464.87±100.51)mg·L/h]＞QT-NCs/TPGS[(339.82±73.82)mg·L/h]＞QT-NCs/F68[(293.00±44.72)mg·L/h]＞QT-NCs/F127[(245.01±28.72)mg·L/h].组织分布研究结果显示,不同稳定剂修饰的QT-NCs具有不同的组织分布行为,肝脏的AUC0～t顺序与血浆AUC0～t一致.此外,QT-NCs/GL在肝、脾、肺的分布最高(P＜0.01).结论 稳定剂种类可以影响QT-NCs的注射药动学及组织分布.

目的 制备一种载有瘦素(leptin,LP)及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)微球的具有温度响应性质的水凝胶并对其理化性质及生物相容性进行表征.方法 利用乳化交联法,制备负载LP与VEGF的海藻酸钠(sodium alginate,SA)微球.将不同比例的普朗尼克(Pluronics,P)水凝胶与载药微球共混,制备了具有温敏性质的负载LP及VEGF微球的水凝胶.对载药微球的载药率、包封率和微观形貌进行表征,研究了不同质量分数(10％、12％、14％、16％)的P F127及不同质量分数(2％、4％、6％、8％)的P F68对复合水凝胶相变温度、相变时间的影响,研究了载药微球复合水凝胶的微观结构、相变温度、相变时间、缓释能力;评价了载药微球水凝胶的生物相容性.结果 成功制备了载有LP/VEGF的海藻酸钠微球,包封率分别为48.01％和49.58％;当P F127质量分数为16％,P F68质量分数为2％时,在保证充分的相变时间下,相变温度最接近于室温下皮肤温度;体外释放实验结果表明,在0～0.5 d LP/VEGF-SA-P复合水凝胶出现释放高峰,在0.5～16 d呈平稳释放;细胞毒性检测结果表明,LP/VEGF-SA-P复合水凝胶不具有细胞毒性;细胞迁移能力检测结果表明,LP/VEGF-SA-P复合水凝胶具有良好的促进L929细胞迁移的作用.结论 负载LP及VEGF微球的温敏水凝胶具有良好的生物相容性及促进细胞迁移的作用.